Enzimas
Enzimas
Enzimas
Catalase 1
Enzimas
§ Os enzimas estão presentes nas células e tecidos e têm
como função aumentar a velocidade das reações
químicas em que participam.
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A anidrase carbónica catalisa a seguinte reação:
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Os enzimas diferem dos
catalisadores químicos por:
• Possuírem velocidades de reação superiores
A velocidade é várias ordens de magnitude superior à
catálise química
• Catalisarem em condições moderadas
Catalisam a temperaturas corporais (aproximadamente 37
ºC) , à pressão atmosférica e a pH neutro (alguns enzimas
catalisam em meios ácidos ou básicos).
• Serem reguláveis
A atividade catalítica pode ser regulada.
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Enzimas
Por vezes os enzimas necessitam de cofatores para a sua ação.
APOENZIMA (POLIPÉPTIDO)
HOLOENZIMA
IÕES METÁLICOS
Ligação covalente
GRUPO
COFACTOR PROSTÉTICO
COENZIMAS
Moléculas orgânicas
ou metaloorgânicas
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Sistema internacional de
classificação (IUBMB)
§ Os enzimas dividem-se em classes e subclasses com
base no tipo de reação que catalisam
§ Os enzimas são designados de acordo com a reação
que catalisam: o nome contém os substratos em
primeiro lugar, seguido pelo tipo de reação e
terminando no sufixo -ase
§ Existem nomes que não seguem esta nomenclatura
(pepsina, tripsina)
ATP + D-glucose ADP + D-glucose-6-fosfato
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CLASSES DE ENZIMAS
2. Transferases AB + C A + BC
4. Liases A B+C
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Exemplos de subclasses de
oxidoreductases
• Desidrogenases dador + NAD+ à dador oxidado + NADH + H+
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Exemplos de subclasses de
transferases
• Aminotransferases NH2A + B à A + NH2B
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Exemplos de subclasses de hidrolases
• Peptidases aa - aa + H2O à aa + aa
• Ribonucleases Nt - Nt + H2O à Nt + Nt
• Aminoácido –aa
Nucleótido -Nt
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Exemplos de subclasses de liases
• Descarboxilases RCOOH à RCH + CO2
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Exemplos de subclasses de isomerases
• Racemases L-estereoisomero à D-estereoisomero
• Mutases
• X-grupo-R à Y-grupo-R (2-metilR à 3-metilR
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Passos da reação enzimática
§ Ligação do enzima e do substrato, formando um complexo ES
§ Catálise (formação do produto)
§ Libertação do produto ou produtos e retorno do enzima à sua
conformação inicial
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Hexocinase
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Unidades de atividade enzimática
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Cinética Enzimática
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A velocidade de uma reação pode ser calculada pela
variação da concentração dos produtos ou dos
reagentes por unidade de tempo, em condições ótimas
de temperatura e pH
AàB
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Leis diferenciais de velocidade
As velocidades das reações estão relacionadas com as
concentrações dos reagentes através das leis
diferenciais de velocidade
Ordens da reacção
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A velocidade da reação enzimática
pode variar com:
§ A concentração dos substratos
§ A concentração do enzima
§ A temperatura
§ O pH
§ A presença de moléculas ativadoras ou inibidoras da reação
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Efeito da concentração do enzima
v0 = k [E]
V max [S]
V=
Km + [S]
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O Km é característico de uma reação entre um dado
enzima e um dado substrato.
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Se um enzima atua sobre mais do que um substrato, a
relação entre os valores de KM pode ser utilizada como
uma medida da afinidade relativa do enzima para cada
um dos diferentes substratos.
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Efeito da temperatura
A diminuição da temperatura
Provoca diminuição da velocidade mas não desnaturação do
enzima.
§ Sobre a reação
– O H+ pode intervir diretamente como substrato ou produto,
pelo que a alteração do pH pode afetar o equilíbrio e a
velocidade da reação.
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§ Sobre o enzima
O H+ vai alterar o estado de ionização dos resíduos de
aminoácidos que constituem o enzima, o que conduz a
alterações nas conformações dos enzimas e à modificação das
suas estruturas.
• Dissociação em subunidades
• Alteração do centro ativo (com ganho ou perda de
atividade)
• Perda de estruturas terciárias e/ou secundárias
• Em casos extremos, desnaturação do enzima.
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Em consequência, a maioria dos enzimas possui uma faixa
estreita de pH onde possui atividade catalítica, com um pH
ótimo de atividade
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Inibidores enzimáticos
Inibidores são moléculas ou iões que se associam ao enzima
influenciando a ligação ao substrato.
Irreversíveis
Ligam-se covalentemente ao enzima modificando o centro ativo.
Pode ocorrer por:
Reversíveis
Ligam-se através de ligações não covalentes podendo dissociar-
se facilmente.
Inibidores competitivos, não competitivos, incompetitivos ou
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mistos.
Inibição por ligação covalente ao centro ativo
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Inibição por análogos do estado de transição
São compostos inativos que após modificação pelo enzima,
no processo normal de catálise, se tornam inibidores
formando um complexo estável com o enzima.
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Exemplos metais pesados
• Mercúrio Hg
O mercúrio liga-se a grupos sulfidrilo.
• Chumbo Pb
Para além de se ligar a grupos sulfidrilo, pode substituir
outros metais no enzima que funcionam normalmente
como cofatores (por exemplo o Ca2+) inativando-a.
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Inibições reversíveis
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FORMA LINEAR DA EQUAÇÃO DE MICHAELIS-
MENTEN (LINEWEAVER – BURK)
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Inibição competitiva
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Inibição não competitivo
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Inibidores Mistos
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Moduladores alostéricos
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Lactato desidrogenase
A lactato desidrogenase (LDH) é um enzima intracelular
citoplasmático com funções na via glicolítica.
É um enzima tetramérico e apresenta cinco isoenzimas originas da
combinação das quatro subunidades: LDH1 (HHHH), LDH2
(HHHM), LDH3 (HHMM), LDH4 (HMMM) e LDH5 (MMMM).
A subunidade H encontra-se em maiores concentrações no coração e
a M no músculo esquelético.
A LDH é um importante indicador de enfarte de miocárdio
aumentando nas 12 a 24 horas seguintes. Neste caso a LDH1
apresenta valores superiores à LDH2