TRANSPORTURILE TRANSMEMBRANARE

TRANSPORTURI TRANSMEMBRANARE I. Transporturi permisive

I.A. Transporturi pasive:
a. Difuziunea simpl b. Solveni c. Proteine transportoare d. Canale ionice

I. B. Transporturi active:
a. ATP-aza Na+/K+ dependent b. Cotrnsport - simport/cotransport

II. Transporturi prin vezicule

II. A. Endocitoza
a. Pinocitoza a1. cu vezicule netede a2. cu vezicule acoperite a3. potocitoza a4. macropinocitoza b. Fagocitoza

II. B. Exocitoza II. C. Transcitoza

I. TRANSPORTURI PERMISIVE
Nu implic modificri morfologice ale membranei plasmatice Se desfoar fr intervenia citoscheletului Sunt implicate molecule nonpolare cu greutate molecular mic sau molecule a cror trecere depinde de prezena proteinelor intramembranare specializate n transportul specific al substanelor Transporturi pasive, fr consum de energie Transporturi active, cu consum de energie furnizat de hidroliza ATP-ului

I. A. Transporturi pasive
Sunt transporturi transmembranare care se pot realiza prin difuziune simpl, prin modificri hidrofobe ale membranei i transporturi ce se efectueaz prin intermediul transportorilor (proteine transportoare, permeaza, canale ionice)

a. DIFUZIUNEA SIMPL
Talia moleculei Absena polaritii Absena ncrcturii Raportul solubilitate n lipide/solubilitate n ap Gradientul de concentraie Solubilitate

b. TRANSPORTUL PASIV PRIN SOLVENI Modificri de permeabilitate ale membranei plasmatice Permeabilitatea unei membrane pentru ap i pentru substanele hidrosolubile (membran cu dublu strat lipidic hidrofob) nu se poate explica dect prin regruparea temporar (o miime de secund) a proteinelor transmembranare n uniti de transport denumite pori

c. PROTEINELE TRANSPORTOARE
Proteinele transportoare vehiculeaz o soluie unic a mediului extracelular (unde ea este prea crescut) spre un mediu intracelular (unde concentraia sa este mai mic) Un astfel de transport poate fi blocat prin inhibiia specific a fixrii de ligand Acest blocaj depinde: - de inhibitorii competitivi care se fixeaz de permeaz la nivelul locului de fixare al moleculei ce urma s fie transportat - de inhibitorii non-competitivi care se fixeaz n afara locului de fixare al moleculei de transportat, modificnd structura permeazei Viteza de transport crete la maximum (Vmax) n momentul n care se produce saturarea transportului (cnd toate locurile de fixare sunt ocupate) Vmax caracterizeaz un transportor specific

GLUT (GLUCOSE TRANSPORTERS) Permeaze care transport glucoza La mamifere transportul glucozei este asigurat n funcie de tipul celular GLUT1 n peretele eritrocitelor GLUT 2 n celule hepatice GLUT 3 din creier GLUT 4 din muchi i celule adipoase.

ACVAPORINELE (AQP)
Permeaze care asigur transportul transmembranar al moleculelor de ap ntr-o manier specific Transport selectiv apa care trece liber prin ele, n timp ce ionii sau protonii nu o pot face AQP 0 - care prezint o permeabilitate sczut pentru ap AQP 1 - o permeaz de 28 kDa distribuit la nivelul rinichiului i al hematiei AQP 2 - localizat n membrana apical a tubilor renali colectori -AQP 3 - situat n partea bazo-lateral a celulelor epiteliului tubilor renali colectori -AQP 4 - n creier, plmni, rinichi. n sistemul nervos central intervine n reabsorbia lichidului cefalorahidian -AQP 5 care intervine n reglarea neurohormonal a secreiei salivare i lacrimale

d. CANALELE IONICE
Proteinele transmembranare, cu treceri multiple care transport ioni specific i selectiv Proteine membranare ce formeaz un por sau un canal hidrofil Diametrul care asigur selectivitatea ionic variaz ntr-un singur punct Periferia canalului este mrginit de lanuri hidrofile de acizi aminai n timp ce dublul strat lipidic este n contact cu lanuri hidrofobe aminate Canalele ionice voltaj-dependente (canale Na+, K+, Ca++, Cl-) Canalele ionice ligand-dependente Canalele ionice dependente de nucleotidele ciclice (CNG-dependente) - n special de GMPc (guanozin monofosfat ciclic)

I. B. TRANSPORTURI ACTIVE
Transporturi transmembranare care se efectueaz contra gradientului de concentraie i depind de o permeaz Se realizeaz cu consum de energie furnizat de hidroliza ATP-ului, printr-o ATP-az Se pot cupla cu un transport pasiv cum ar fi n cazul sistemului de cotransport

a. Pompa de sodiu i potasiu ATP-aza Na/K dependent

Transport activ de sodiu si de potasiu ce se desfoar continuu n toate celulele Pompa de sodiu, o Na+/K+ adenozintrifofataz (Na+/K+- ATP-az) este o protein, un 2 2-tetramer cu o greutate molecular de 270 kDa

a. Pompa de sodiu i potasiu ATP-aza Na/K dependent

Subunitatea mare (95 kDa) conine un loc de fixare i de hidrolizare a ATP-ului (situat pe faa intracelular) i un loc de fixare pentru substane steroide cardiotonice (faa extern) Subunitatea mic (40 kDa) este legat de gruprile hidrocarbonate Aceast molecul extrage 3 ioni de Na+ din celul, n timp ce favorizeaz ptrunderea n celul a 2 ioni de K+

a. Pompa de sodiu i potasiu ATP-aza Na/K dependent FUNCII

Homeostazia sodiului i potasiului din citosol n raport cu plasma sangvin Particip la meninerea compoziiei ionice celulare n raport cu sngele Contribuie la meninerea n celul a ionilor osmotic activi Creeaz un potenial electric ntre suprafaa extern i cea intern a membranei (potenial electric diamembranar) Permite funcionarea canalelor voltaj dependente Particip la funcionarea simportului Na+- glucoz

b. SISTEMUL DE COTRANSPORT
Asocierea unui transport activ cuplat la un transport pasiv. Energia, n acest tip de transport, este furnizat prin disiparea unui gradient ionic Cnd transportul pasiv cuplat cu unul activ se face n acelai sens - simport Transportul simultan a 2 substane n sens opus, una spre citoplasm, alta spre mediul extracelular - antiport

II. TRANSPORT PRIN VEZICULE SAU VACUOLE

Acest tip de transport implic intervenia citoscheletului Se desfoar ntr-o structur delimitat de o membran de origine plasmatic (vezicul de pinocitoz sau endocitoz, vacuol de fagocitoz)

II.A. ENDOCITOZA
Termen general care cuprinde pinocitoza i fagocitoza Ansamblul de mecanisme responsabil de introducerea n interiorul celulei a unor substane sau microorganisme de origine extracelular Invaginarea membranei plasmatice rezultat prin micri de mic amplitudine ale membranei plasmatice, duce la formarea unor vacuole sau vezicule coninnd materialul cules

a. PINOCITOZA
Exist 4 tipuri distincte de pinocitoz n funcie de talia veziculelor, de natura nveliului i de modul cum se desfoar fenomenul: a.1. pinocitoza cu vezicule netede a.2. pinocitoza indus de un receptor a. 3. potocitoza a. 4. macropinocitoza

a.1. PINOCITOZA CU VEZICULE NETEDE

Membrana plasmatic se invagineaz i formeaz o vezicul de 150 nm diametru, parial deschis spre mediul extracelular Substana lichid ptrunde n vezicul care se nchide la nivelul colului, prin gtuire (strangulare) Aceste vezicule netede, neacoperite, caracterizeaz endocitoza nespecific. Ele asigur un transport n vrac Veziculele i vars coninutul n celul, apoi fuzioneaz i formeaz un endozom. Ele pot de asemenea s traverseze celula (trascitoz)

a.2. PINOCITOZA CU VEZICULE ACOPERITE

Un tip de endocitoz nalt specializat, corespunde formrii unei vezicule n manta (vezicule epoase, acantozomi, reacoperite, etc.) datorit unui proces de invaginare al unui domeniu al membranei de clatrin coninnd receptori adaptin dependeni Aceste vezicule sunt selective Acest aspect este dat de reeaua format de clatrin-adaptin, care formeaz hexagoane sau pentagoane la suprafaa veziculei Receptorii adaptin- dependeni sunt receptori specifici ai substanei ce urmeaz s ajung n vezicule

CLATRINA
Clatrina (180 kDa) - complex proteic format din 3 lanuri lungi polipeptidice i din 3 lanuri polipeptidice scurte, formnd un trepied (triskelion) Moleculele de clatrin au proprietatea de a se agrega spontan n mediul apos Ele nu se asociaz direct cu membrana veziculei La nceput se asambleaz cu heterodimere de adaptin (-adaptin), apoi se autoasambleaz complexele adaptin/triskelion (polipeptide de asamblare), fr consum de energie Se ajunge la formarea final a unui co format din 8 hexagoane i 12 pentagoane Moleculele de -adaptin intervin ca intermediare ntre membrana plasmatic i mantaua de clatrin

a.2. PINOCITOZA INDUS DE RECEPTOR TRANSPORTUL COLESTEROLULUI

Colesterolul este insolubil n lichidele din organism Ingerat prin alimente sau sintetizat de ficat, el nu poate circula n organism dect legat de un transportor denumit LDL (low density lipoprotein). Faa extern a LDL se compune dintr-un strat de fosfolipide i de colesterol, ele coninnd de asemenea o apoB-protein. Aceast sfer transport 1500 molecule de colesterol esterificat.

a.2. PINOCITOZA INDUS DE RECEPTOR TRANSPORTUL COLESTEROLULUI

Membrana plasmatic posed receptori specifici ai LDL. Apo B-proteina se fixeaz pe receptorii LDL ai membranei care se regrupeaz apoi n depresiuni sau puuri acoperite. Dup endocitoz particulele de LDL i pierd nveliul prin activarea moleculelor HSP. Ele se transform n endozomi precoce: veziculele de transport le livreraz endozomilor tardivi care fuzioneaz cu lizozomii. Catabolismul apo B-proteinei elibereaz acizi animai, n timp ce esterii de colesterol dau colesterol i acizi grai.

a.3. POTOCITOZA
Este o modalitate de endocitoz produs prin fixarea unui ligand de receptorii membranei, ducnd la formarea de caveole care rmn ataate de membran sau se deplaseaz spre aparatul Golgi. Caveolele apar ca microdomenii ale membranei plasmatice, bogate n lipide, n special n colesterol. Au un diametru mediu ntre 50-80 nm, mai mic dect al veziculelor netede, au un nveli granular dispus n spiral, compus din caveolin / VIP 21 (vezicular integral membrane proteine) legat de un nveli striat situat pe suprafaa citoplasmatic a membranei caveolelor

a.4. MACROPINOCITOZA
Este endocitoza moleculelor n soluie, care duce la formarea de macropinosomi, vacuole care nu sunt mbrcate de clatrine i care au un diametru cuprins ntre 0,5 i 200 m. Formarea lor (ca rspuns la factori de cretere i la ageni chimici carcinogeni) este nsoit uneori de formarea unor prelungiri ondulante temporare, care n momentul macropinocitozei nconjur soluiile extracelulare Refractar la fuziunea cu endozomii, macropinosomii, structuri dinamice, iau uneori o form tubulovezicular i fuzioneaz unii cu alii

b. FAGOCITOZA
Constituie ansamblul de fenomene care duc la formarea de fagozomi, vacuole de talie mare (vizibile n microscopia optic) coninnd particule solide (de exemplu bacterii) sau resturi celulare de talie mare Este un proces activ cu consum de energie eliberat prin hidroliza ATP Celulele fagocitare: n acest mecanism de aprare al organismului intervin celule specializate, fagocitare cum sunt granulocitele i macrofagele

b. FAGOCITOZA - ETAPE
b. 1. Opsonizaia b. 2. Chimiotactismul b. 3. Contactul b. 4. Aderena b. 5. Faza reologic

FAGOCITOZA - ETAPE
b.1. Opsonizaia: imediat dup ptrunderea n organism bacteriile sunt acoperite de anticorpi (IgG, IgA, IgM) b. 2. Chimiotactismul: macrofagele i granulocitele migreaz spre locul ocupat de bacterii, atrase de o substan chimic, cu o vitez de 0,7 - 1 m/min b. 3. Contactul: macrofagele formeaz pseudopode care intr n contact cu bacteria b. 4. Aderena: proteinele de adeziune CAM asigur aderena macrofagelor la bacterie. Membrana plasmatic a macrofagului posed receptori specifici FcR (receptori ai fragmentului de complement) pentru Fc (fragment de complement) ai imunoglobulinelor care acoper bacteria. Formarea de complexe FcR/Fc activeaz canalele ionice asociate receptorilor. O cantitate important de ioni sodici ptrund n citoplasm, provoac o cdere a potenialului de membran, activeaz fagocitoza, micrile celulare, formarea de H2O2 i de substane antibacteriene n lizozomi i induc faza reologic.

FAGOCITOZA - ETAPE
b. 5. Faza reologic n cazul fagocitozei reprezint momentul cnd cortexul celular trimite pseudopode care se anastomozeaz unele cu altele i nconjur bacteria din toate prile Ele delimiteaz o vacuol (fagozom) ocupat de bacterie, marginile libere ale pseudopodelor intr n contact i apoi fuzioneaz strns ca o nchiztoare ermetic (clair - Zipper Interaction) Fagozomul se transform ulterior n fagolizozom prin fuziunea cu un lizozom Extensia i micarea pseudopodelor depind de actin n cursul fagocitozei pseudopodele conin importante cantiti de actin i proteine legate de aceasta Intrarea masiv de sodiu n momentul fazei de aderen, provoac o und de depolarizare care elibereaz calciul coninut n RE Ionii de calciu sunt responsabili de formarea actomiozinei i deci de contracia fascicolelor de actin

II.B. EXOCITOZA
n cursul exocitozei celula excret diferii produi Membranele veziculelor de secreie fuzioneaz cu membrana plasmatic i i elibereaz coninutul n mediul extracelular Este de semnalat existena unei exocitoze prin nmugurire sau apocrin, relativ rar, cnd produii de excretai sunt nconjurai de o parte din membrana plasmatic Acest lucru se ntlnete la secreia glandei mamare sau la anumii virui nencapsulai care ies din celul printr-o pictur de secreie Produii de excreie sunt transportai de ctre vezicule Toate celulele eucariote, cu excepia hematiilor, conin vezicule care conin produi elaborai de reticulul endoplasmic

II.B. EXOCITOZA

Veziculele de transport conduc aceti produi la aparatul Golgi, unde au loc transformri structurale ale acestora Pensarea cisternelor trans formeaz vezicule ce vor transporta la rndul lor moleculele modificate, de la aparatul Golgi pn la membrana plasmatic. Exocitoza compenseaz cantitativ endocitoza. Moleculele membranei veziculelor de exocitoz se integreaz n membrana plasmatic, n timp ce coninutul vezicular este excretat: - n snge (secreie endocrin hormonal, secreie de nutriie) - n lichidul interstiial n care se gsesc celulele excretoare (secreie endocrin de nutriie pentru alte celule) - n cavitile organismului (secreie exocrin a celulelor secretoare ale glandelor salivare). Excreia celular mbrac dou forme. Este vorba fie de un fenomen continuu (excreie constitutiv), fie de un fenomen discontinuu (excreie provocat i controlat).

II.C. TRANSCITOZA
Grupeaz ansamblul de fenomene care permit unei substane sau unei particule (bacteriene sau nu) s traverseze citoplasma unei celule i s treac astfel dintr-o regiune intracelular ntr-una extracelular (intereseaz veziculele netede provenind din endocitoza nespecific). Trancitoza depinde de citoschelet, de microfilamentele de actin, care joac rolul de motor, n timp ce microtubulii indic direcia pe care urmeaz s o ia endozomul.

II.C. TRANSCITOZA
Izolarea unei populaii de vezicule de transcitoz n sens bazolateral apical, a permis fabricarea unui marker, unui anticorp, care recunoate o component specific a transportorilor veziculari transcitotici i anume o protein de 108 kDa Proteinele TAP (trancytosis associated proteins) sunt localizate n membrana veziculelor de transcitoz i intervin n fuziunea cu membrana int

TRANSPORTURILE TRANSMEMBRANARE