Scribd Logo
Upload

Welcome to Scribd!

  • 2K views

    殺菌法

    Uploaded by

    uta
    microbiology

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd

    殺菌法

    Uploaded by

    uta
    2K views5 pages
    microbiology

    Copyright

    © © All Rights Reserved

    Available Formats

    DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd

    Did you find this document useful?

    Is this content inappropriate?

    microbiology

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
    Download as docx, pdf, or txt
    2K views5 pages

    殺菌法

    Uploaded by

    uta
    microbiology

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
    Download as docx, pdf, or txt
    of 5

    物理因子與化學因子對微生物的作用

    牙三甲 第五組 105000017 王奐鈞


    一、 目的
    1. 微生物與人類的關係密不可分，有時人類想盡辦法來促進微生物的生長與繁殖(如食
    品發酵及抗生素的製造)；有時為了防止微生物致病而希望控制他們的生長或將其消
    滅
    2. 檢驗物理方法(UV 光)以及化學方法(消毒水或結晶紫)的殺菌能力
    二、 原理
    1. 物理因素
    A. 紫外線殺菌機制:
    i. 造成基因突變
    ii. 產生過氧化物等自由基
    iii. 使碳水化合物分解成酸
    iv. 了解紫外光殺菌能力因菌種，波長，劑量等決定
    2. 化學因素
    A. 介面活性劑殺菌機制:
    i. 嵌入細菌細胞膜，破壞模完整性
    B. 陽離子殺菌劑(安期消毒水(antiseptol)):
    i. 為四級胺化合物
    ii. 可使蛋白質變性
    C. 鹼性染劑(如結晶紫，孔雀綠):
    i. 可與細胞內大分子結合，阻礙核酸或蛋白質合成，進而殺死細菌
    ii. 結晶紫可抑制細菌細胞壁合成，故對革蘭氏陽性菌特別有效

    三、 實驗步驟
    1. 紫外線對細菌的影響
    A. 於兩培養基上分別標示菌種(E，S)，開蓋與否及作用時間(5，10，30 分鐘)
    B. 將測試細菌接種於培養基上
    C. 將培養基至於紫外光下，實驗組打開蓋子，對照組保持關閉
    D. 照射完立刻至於培養箱中培養
    2. 結晶紫對細菌的影響:
    A. 準備三個含有不同結晶紫濃度的培養基
    B. 以接種環接種細菌於各個培養基中
    C. 至於培養箱隔夜培養
    3. 安期消毒水對細菌的影響:
    A. 準備兩個培養基，各自劃分成 4 等分
    B. 取安期消毒液兩管，每管置入一種菌
    C. 等候 5 分 30 分鐘後分別取菌塗抹於培養基上隔夜培養

    四、 結果
    1. 紫外線實驗(如下圖):
    項 (開蓋)紫外線(5 分鐘) (開蓋)紫外線(30 分鐘) (關蓋)紫外線(5 分鐘)
    目
    結 左(S):可見稀疏菌落 左(S):幾乎看不見菌落 左(S):可見濃密菌落
    果 右(E):可見稀疏菌落 右(E):可見少片菌落 右(E):可見濃密菌落

    照
    片

    判 紫外線照射越久殺菌效果越明顯
    斷 培養基上蓋能阻絕紫外線，降低其殺菌效果
    2. 消毒液實驗
    項目 0.2% 2%
    結果 左(S):兩格幾乎沒有菌落 左(S): 兩格幾乎沒有菌落
    右(E):5 分鐘格上有明顯菌 右(E): 5 分鐘格上有明顯菌
    落，30 分鐘格則幾乎沒有 落，30 分鐘格則幾乎沒有
    菌落 菌落
    照片

    判斷 1.安期消毒水對兩菌種的效果均顯著
    2.或許是取菌不足，導致金黃葡萄球菌數量都不太明顯
    3. 結晶紫實驗
    項 1% 0.1% 0.01%
    目
    結 左(E):明顯菌落 左(E):明顯菌落(但比左圖 左(E)菌落不太明顯
    果 右(S):幾乎無菌落 淺) 右(S)些許菌落
    右(S):菌落不太明顯
    照
    片

    判 1.結晶紫對革蘭氏陽性菌有明顯殺菌能力
    斷 2.本組實驗 0.01%培養基中幾乎沒有觀察到菌落，推測可能是取菌操作上有問
    題

    五、 討論:
    1. Escherichia coli 和 Staphylococcus aureus 是否可作為高壓滅菌器效果檢查的
    指示菌，其原因為?
    答: 否，因為這兩種細菌都不會產生孢子，無法抵抗艱困的環境，因此看不到這兩
    種細菌不代表其他微生物就被清除了，故不能作為高壓滅菌效果檢查的細菌，應該
    以會產生孢子的菌種做為指示菌較適合，通常選用嗜熱性脂肪桿菌(Geobacillus
    stearothermophilus)。這些指示菌對於溫度、壓力有較強的抗性，是最不容易死
    掉的微生物，因此如果此細菌無法存活，則可確定沒有其他任何細菌可存活，以確
    知整體的滅菌條件是否符合滅菌標準。
    2. UV 對細菌的繁殖體及孢子的殺菌作用，是否有明顯的差異性?
    答: A. 繁殖體：UV 會穿透微生物的細胞膜與細胞核，細胞中的核酸、嘧啶、嘌呤與蛋
    白質將強烈吸收該波段能量而產生化學變化，改變遺傳的傳遞及突變的速率，並且會產生雙
    線嘧啶聚合物，此一產物能吸收紫外線和相鄰能階的能量，干擾嘌呤和嘧啶的配對、使 DNA
    複製受阻，進而導致微生物的死亡，且照射時間越久死亡數會越多。
    B. 孢子：耐高溫、乾燥、毒性化學物質，UV 無法穿透孢子進行滅菌作用，所以孢
    子可以幫助細菌度過營養缺乏或者條件不良的環境。
    3. 試由實驗結果推測出個化學試劑對何種細菌最有抑制效果，其原因為何？
    答:由實驗結果可得出,安琪消毒水對兩種細菌的抑制力都很顯著。結晶紫對金黃色葡萄
    球菌(Staphylococcusaureus)的抑制力較其對大腸桿菌(E.coli)的抑制力強，可推測出結晶
    紫對革蘭氏陽性菌較有抑制效果。是因為結晶紫會與細胞壁(peptidoglycan)中的成分結合
    成 complex，而革蘭氏陰性菌在細胞壁外有一層外膜可以當作保護屏障，儘管細胞壁較薄仍
    可抵抗化學試劑；然而革蘭氏陽性菌缺乏外膜保護，細胞壁易受破壞，所以較容易受化學試
    劑抑制。
    4. 試舉出一些影響殺菌劑殺菌作用的因素？
    答: A 濃度，如醇類在 60~90%才有抑菌效果。
    B 消毒劑量：包括消毒強度和時間兩方面。
    C 溫度：高溫可使細菌無法存活。除熱力消毒完全依靠溫度做用來殺滅微生物外，
    其他消毒方法易受溫度變化影響。
    D 相對溼度：環境中相對濕度對氣體消毒和燻蒸消毒的影響十分明顯，濕度過高或
    過低都會對消毒有影響，甚至導致消毒失敗。需要適度的溼度才能提高消毒的效果。
    E 酸鹼度：利用酸鹼度的變化，使生物體內酵素活性改變。甚至可直接影響某些消
    毒方法的效果。
    F 微生物汙染的種類和數量：生物種類不同，對其消毒的效果自然不同。另外微生物
    數量的多寡亦影響消毒結果，所以在消毒前要考慮到微生物汙染的種類和數量。
    G 穿透作用：物品被消毒時，殺菌因子須直接作用到微生物本身才能起殺菌作用，同
    消毒因素的穿透力不同。
    H 拮抗物質：對於化學消毒方法，要注意拮抗物質的中和與干擾。如酸性或鹼性的消
    毒劑會被鹼性或酸性的物質所中和，減弱其消毒作用。

    You might also like