S. Aureus en Queso
S. Aureus en Queso
S. Aureus en Queso
Presentado a: Dra. Karen Martnez AUTORES: RAQUEL CABALLERO, LUISA CACERES, ANDRES QUIROZ. San Jos de Ccuta, norte de Santander -Colombia. 1 de Octubre del 2013. RESUMEN Staphylococcus aureus es una especie bacteriana integrada por formas cocceas de 0,8-1,0 m de dimetro, que se dividen en ms de un plano, por lo que se agrupan irregularmente en racimos. Son inmviles y carecen de esporas. Son Gram positivas. Es una especie muy sensible a la accin del calor y de los desinfectantes. Su presencia o la de sus toxinas en los alimentos es signo evidente de falta de higiene. La presente practica tuvo como objetivo principal el diagnostico de Staphylococcus aureus y Mohos y levaduras mediante las tcnicas placa profunda, petrifilm y Numero Ms Probable. La prctica consisti en cultivar diferentes diluciones de muestras: al Queso se le realizaron diluciones hasta 10-3, y se les practico anlisis para la deteccin de S.aureus, Mohos y levaduras por tcnica de siembra en superficie que se cultivaron en Agar Baird Parker y por mtodo en placa profunda en el Agar Sabouraud y nmero ms probable que se cultivaron en Caldo Lauryl Sulfato y llev una posterior incubacin a 37 C durante 24 horas y se realiza confirmacin con fluorescencia para confirmacin de E.coli. Para la determinacin de los resultados de mohos y levaduras debemos dejar las cajas sembradas a una temperatura de 25C (Temperatura ambiente) por un tiempo de entre 5 a 7 das. Los resultados para el Queso de hoja en la determinacin S. aureus por la tcnica de siembra en superficie fue <10 Ufc/gr, por tcnica de Petrifilm 20 Ufc /gr, por recuento en placa fue de 3350 Ufc/gr y NMP fue de 210 Ufc/gr. Se concluyo que la muestra de Queso en el mtodo de NMP arroj un resultado certero y definitivo que se establece que en la muestra hay aproximadamente 210 Ufc/gr mostrando as tambin que la muestra tiene Coliformes totales y Coliformes fecales concluyendo con la ayuda de una lmpara ultravioleta la cual nos arroj fluorescencia lo que indica que no sobrepasa los parmetros establecidos por INVIMA.
PALABRAS CLAVE: Aromticas, Coliformes fecales, NMP (Nmero ms probable), Staphylococcus aureus, Mohos, Levaduras, Siembra en superficie.
Las condiciones necesarias para que un hongo crezca en superficie son: existencia de esporas, base nutriente, humedad y temperatura entre 4C y 38 C. En la prctica, los hongos filamentosos y las levaduras tambin se diferencian en el laboratorio en dos grupos segn el aspecto macroscpico de sus colonias: las levaduras forman colonias hmedas, cremosas, opacas o pastosas, y los hongos filamentosos producen colonias algodonosas, lanosas o pulverulentas. (Romejo, 2005)
MATERIALES Y METODOS Alimentos elaborados (Queso de Hoja, Frascos con Agua Peptona, pipetas, Cajas de petri, tubos de ensayo, pipeteador, mechero, termmetro, balanza, caldo lauryl sulfato, Placas Petrifilm STX, Agar Sabouraud, Agar Baird Parker.
Muestra N 5 Queso
Se pesaron 10 gr del Queso de Hoja y se le adicionaron a un frasco de 90 ml de Agua peptona al 1% dejando reposar por un minuto, de esta manera se obtuvo la dilucin 10-1. De la dilucin obtenida se tom 1 ml y se agreg a un tubo con 9 ml de agua peptona al 1% obtiendose la dilucin 10-2, y de esta ltima dilucin se tom nuevamente 1 ml y se obtuvo la dilucin 10-3.
Luego de esto se tom 1 ml de las diluciones 10-2 y 10-3, que fueron aadidas a las cajas de petri y enseguida se les agrego el Agar Sabouraud, teniendo en cuenta que debe estar a una temperatura entre 45-50C, se dej solidificar y por consiguiente se llev a incubacin a 25 C por 7
se tom 0.1 ml de las dilucin 10-1, que fueron aadidos a la cajas de petri con Agar Baid Parker, para realizar la siembra con el asa de Hocky, y por consiguiente se llev a incubacin a 37 C por 24 horas. En seguida se tom 3 ml de la dilucin 10-3 y se diluyo en los caldos lauryl sulfato con concentracin sencilla (De 1ml a cada uno), de esta misma manera se toma 3 ml de la dilucin 10-2 y se diluyo en los caldos lauryl sulfato siguientes con concentracin sencilla (De 1ml a cada uno) y para finalizar se toman 3 ml de la dilucin 10-1 y se diluyo en los caldos lauryl sulfato con Control y seguridad Alimentaria. 2013uno). Para concentracin doble (De 1ml a cada finalizar se inocula 1ml sobre el Petrifilm STX, se esparce y se lleva a incubar a 37 C por 24 horas
2 17 5
NMP
3 2 2
210 Ufc/gr
DISCUSION En las siembras realizadas por los mtodos de siembra en superficie, petrifilm, y NMP, el crecimiento observado no supero los parmetros mnimos permitidos por el INVIMA, demostrando que este queso se encuentra en ptimas condiciones para el consumo humano. Por otro lado en los resultados arrojados por el mtodo de recuento en placa para determinacin de S. aureus el nmero de colonias que crecieron fue superior al mximo permitido por el INVIMA, el cual es de 3000ufc/gr. Teniendo en cuenta que en los otros mtodos los resultados obtenidos nos
muestran que el alimento representa riesgo para el consumo de las personas, pero que en el recuento en placa si supera los parmetros permitidos, podramos pensar en una contaminacin por manipulacin adecuada del alimento estudiado. CONCLUSIONES Teniendo en cuenta que la mayora de los mtodos empleados, arrojaron resultados que cumplen con la norma INVIMA de parmetros microbiolgicos, se deduce que el alimento estudiado es apto para el consumo humano. Se logro identificar la presencia de S. aureus en muestra de queso de hoja.
BIBLIOGRAFIA
Alonso Nore Lina Ximena, Poveda Sanchez Jeimy Alexandra, Estudio Comparativo en Tcnicas de Recuento rpido y las Placas Petrifilm para el anlisis de Alimentos, http: //www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis230.pdf, 2008
Levaduras en alimentos,
http://www.ispch.cl/lab_amb/doc/microbiologia_alimentos/PRT-031.pdf,2008