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http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20No%201.%20ESTU
DIO%20Y%20MANEJO%20DEL%20MICROSCOPIO.pdf
MANEJO DEL MICROSCOPIO


MANEJO DEL MICROSCOPIO

OBJETIVOS:
1. Conocer y manejar adecuadamente las partes del microscopio
2. Aprender a enfocar correctamente en el microscopio
3. Conocer los cuidados del microscopio
4. Aprender a preparar una muestra adecuadamente para la observacin al
microscopio

INTRODUCCION
El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el
microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:
MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y objetivos)
para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para
su observacin sern aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas, debern de ser
monoculares.
MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene por
reflexin de la luz que incide sobre la muestra, posee un inversor que permite
observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de conjunto, debido a
su gran campo; por ejemplo: se puede observar una mosca completa, mientras que
en microscopio compuesto, slo sera posible
ver las alas y stas por ser muy transparentes. La visin estereoscpica o sensacin
de relieve se obtiene cuando cada ojo recibe una imagen por separado captada por
cada sistema ptico prcticamente cada ocular constituye un microscopio
compuesto independiente.
Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos considerar que
bsicamente estn constituidos por 3 sistemas:
a) Sistema mecnico;
b) Sistema de iluminacin;
c) Sistema ptico.

a) SISTEMA MECANICO
Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la fuerza de
luz.
Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos macromtricos y
micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el microscopio.
Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el orden de
centmetros.
Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de milmetros.
Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al condensador y al
diafragma
Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos.
Revlver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X)


b) SISTEMA DE ILUMINACION
CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que puede subir o
bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos provenientes de la fuente
luminosa situada en la base del microscopio a fin de iluminar el campo visual.
Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una abertura
regulable por medio de una placa lateral que va a controlar la cantidad de luz que
saldr hacia el condensador.
Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es generalmente una
lmpara integrada a la base.

c)SISTEMA OPTICO
Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta en
diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e Inversin
(100 X).
NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque para su
utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y la preparacin.
La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X en aceite
de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra.
Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est localizada en la
parte superior del tubo del microscopio.
NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente, significa
que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente
ocular, para as obtener el aumento total alcanzado por el juego de lentes.

REGLAS GENERALES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO
1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano
izquierda la base.
2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del
microscopio.
3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.
4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin
de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se
disminuir la intensidad luminosa.
5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco.
6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.
7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de
menor aumento.
8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos.
9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.
10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o
con un papel higinico.
11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos.


OBTENCION DE UN BUEN ENFOQUE:

MICROSCOPIO COMPUESTO:

l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio.
2. Utilizar el objetivo de menor aumento.
3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macromtrico, observando
lateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos.
4. Observar a travs de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio
hasta observar la preparacin enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopio
mientras se est observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el
portaobjetos y ocasionar desperfectos.
5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micromtrico.
6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.7. Si se utiliza
el objeto de inmersin (100 X) colocar sobre la preparacin una gota de aceite de
inmersin y baja el tubo del microscopio hasta que la lente del objetivo toque a la
gota, observa y ajusta cuidadosamente despus de su uso limpiar el objetivo con
un tejido suave (papel seda).
http://benitobios.blogspot.com/2007/08/manejo-del-microscopio.html











3.9 Observar por el ocul ar y veri fi car que l a i magen permanece enfocada y sol o
es necesari o mover el tornillo micromtrico en la mayora de los casos aumentar la intensidad de la
luz NOTA: El microscopio tienela propiedad de ser parfocar por lo que al enfocar uno de los objetivos,
los dems quedan en foco3.10 Iluminar el microscopio varias veces y enfocar tantas preparaciones
como sea posible3.11 Observar primero las letras, despus del colorante seco y luego las preparaciones
de microorganismosproporcionadas por el
profesor 3 . 1 2 D e s p u s d e r e t i r a r l a p r e p a r a c i n , l i mp i a r e l a c e i t e q u e
q u e d a e n e l o b j e t i v o c o n u n p a u e l o desechabl e, separando sus dos hoj as y
usando l as partes i nteri ores que no suel tan pel usa, no uti l i zar algodn por que deja
fragmentos que ensucian las lentes3.13 Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumento
alineado con el tubo y lo mas cercano posible ala platina
GUIA DE OBSERVACION

Procedimiento:

Identificar las partes del microscopio compuesto

Enfocar, iluminar y observar las preparaciones proporcionadas; hacer esquemas.

A partir de la muestra del agua del lago realizar preparaciones en fresco y observar a 10x a 40x

Tratar de localizar protozoarios y algas microscpicas y esquematizar.

A partir de la muestra de pulque, realizar una preparacin en fresco y observar a 40x y 100x a inmersin.

Diluir una gota de yakult en 9 gotas de agua y realizar la preparacin en fresco. Observar lactobacilos.
RESULTADOS:1) Partes delMicroscopio:
1 . o c u l a r 2 . r e v l v e r 3 . o b j e t i v o 4 . m e c a n i
s m o de enfoque5 . t o r n i l l o d e enfoque
fino6 . p l a t i n a 7 . e s p e j o 8 . c o n d e n s a d o r
10


ANLISIS DE RESULTADOS:

Primero en el laboratorio se identificaron cada una de las partes que componan al microscopio
utilizadoen laboratorio, para su uso correcto.

Una vez i denti fi cadas l as partes, se prosi gui a col ocar muestras previ amente
preparadas para suobservacin en el microscopio; para esto se tuvo que enfocar primero las
imgenes en el microscopio,i ni ci ando por el menor aumento (en este caso l os aumentos
eran de 5x, 10x, 40x y 100x) y haci a el objetivo con mayor aumento. Se observaron las muestras y
se dibujaron.

Se observ en el agua del lago algunos protozoarios que se movan constantemente (5x), en el 10x,
seobservaron protozoari os y una eugl ena que se mov a constantemente sobre s mi sma.
En el 40x, seobserv un paramesi um, l os protozoari os y al gunas al gas ms c erca, se
observaba su pared cel ul ar mu y d e f i ni da y a l g un o s f l a g el o s . E n el 1 00 x , s e
o b s er v a r on mej o r l a s a l g a s ma r i na s , y c o mo l o s protozoarios se movan en s mismos
circularmente, se observaba su pared celular y en el paramesiumse l ogr observar mej or su pared
cel ul ar, l os fl agel os y como se hab a comi do al gunos protozoari os y otras bacterias; esta
especie a comparacin de las dems observadas, fue la de tamao ms grande.

En el pulque se lograron observar cocos (solos), diplococos, cocos en cadena, protozoarios y bacilos
deleumococo.

Por ltimo en el yakult se observaron los lactobacilos, aunque nos costo mucho trabajo encontrarlos
yaque an con el aumento de 100x , fueron demasiado pequeas las especies.
CUESTIONARIO:
1)
Qu es el movi mi ento browni ano
?
El movi mi ento que l l eva a cabo una part cul a muy pequea que est inmersa en un fluido, se
llama movimiento browniano. Este movimiento se caracteriza por ser continuo y muy irregular. La
trayectoria que sigue la partcula es en zigzag.
2)
Cmo funciona el microscopio de campo oscuro?

La microscopia del campo oscuro se consiguesi tuando una pantal l a ci rcul ar opaca en l a entrada
del condensador de ABBE, de manera que seo s c u r e z c a l a pa r t e c en t r a l , o b i en,
e mp l ea ndo t i po s e s p ec i a l e s d e c ond en s a d or e s ( p a r a b oi de o cardioide), la
preparacin se ilumina con un haz de luz suficientemente fino, bajo un ngulo agudo, def o r ma qu e
n o i n c i da e n l a l en t e f r on t a l d e l obj e t i v o . ej . S e mu e s t r a c o mo e l h a z d e l uz
i l u mi na obl i cuamente al espci men y al cance el obj eti vo, el campo aparecer
uni formemente oscuro y cada partcula se vera como un punto luminoso por efecto de difusin de
la luz que incide sobre ella
En qu c ons i s t e el mi cr os c opi o de c ont r as t e de f as es ?
mi c r os c opi o pt i c o que , por l a s modificaciones de la fase de luz, debidas a la
diferencia del ndice de refraccin, permite distinguir lasestructuras de objetos incoloros o poco
contrastados
4)Pri nci pal es aportaciones a l a ci encia gracias al microscopi o:
Algunos descubrimientos en la historia de la microscopa ptica1 61 1 Ke pl er s ugi r i
l a ma ne r a de c ons t r ui r un mi c r os c opi o c ompues t o1 655Hooke ut i l i z un
mi c r os c opi o c ompues t o pa r a de s c r i bi r una s pe que a s c e l di l l as e n los cortes
de corcho a las que denomin "clulas".1 67 4Lee uwe nhoe k i nf or m s obr e s u
de s c ubr i mi e nt o de pr ot oz oos . Nue v e aos ms t a r de observ por primera vez
bacterias.1 833Br own publ i c s us obs e r va c i ones mi c r os c pi c a s de l as
or qu dea s , y des c r i bi claramente el ncleo celular.1 838Sc hl ei den y Sc hwa nn
pr opus i e r on l a t eor a c e l ul a r , af i r ma ndo que l a c l ul a nuc l e ada es la unidad
estructural y funcional de las plantas y los animales.1 857Kol l i ke r des c r i bi l as
mi t oc ondr i a s de l a s c l ul as mus c ul a r es . 1 87 6Abb a nal i z l os e f e c t os de
l a di f r a c c i n en l a f or mac i n de l a i ma gen e n e l microscopio y mostr la manera
de optimizar el diseo de los microscopios.1 87 9Fl emmi ng de s c r i bi c on gr an
c l a r i dad e l c ompor t ami e nt o de l os c r omos oma s dur a nt e la mitosis de las
clulas animales1 881 Re t z i us de s c r i bi muc hos t ej i dos ani mal es c on una
pr e c i s i n que a n no ha s i do superada por ningn especialista en microscopa ptica.
En las dos dcadassiguientes, tanto l como Cajal y otros histlogos, disearon mtodos de
tincin y establecieron las bases de la anatoma microscpica.1 882Koc h ut i l i z
c ol or ant e s de a ni l i na par a t ei r mi c r oor ga ni s mos e i dent i f i c l as
ba c t e r i a s que causan la tuberculosis y el clera. En las dos dcadas siguientes,
otrosbacterilogos, como Klebs y Pasteur, identificaron los agentes causantes de otrasmuchas
enfermedades examinando al microscopio preparaciones teidas.1 886Ze i s s hi z o
una s er i e de l e nt e s , s i gui endo l a s l ey e s de Abb , que pe r mi t i er on a
l os especialistas en microscopa la resolucin de estructuras situadas en los lmitestericos de la
luz visible.1 898Gol gi obs e r v por pr i me r a ve z el a par at o l l a mado " de
Gol gi " , i mpr e gna ndo c l ul a s con nitrato de plata.1 924Lac as s agne y s us
c ol a bor a dor es des ar r ol l a r on l a pr i me r a t c ni c a aut or r adi ogr f i c a para
localizar el polonio radiactivo en las muestras biolgicas.1 930Le bede f f di s e y
c ons t r uy el pr i me r mi c r os c opi o de c ont r a s t e i nt e r f e r e nc i al . En 1932,
Zernicke invent el microscopio de contraste de fases. Estos dos adelantos permitieron observar
por primera vez clulas clulas vivas no teidas en detalle.1 941 Coons ut i l i z
a nt i c ue r pos ac opl ados a c ol or a nt e s f l uor e s c e nt e s pa r a det ec t a r antgenos
celulares.1 952Noma r s ki i de y pa t e nt e l s i s t ema de c ont r a s t e
i nt er f er e nc i al pa r a el mi c r os c opi o ptico., que an lleva su nombre.1 981 Al l e n e
I nou pe r f ec c i ona r on l a mi c r os c op a pt i c a de c ont r a s t e v i deo -
a mpl i f i c a da . N.T. Generalmente se considera que el primer microscopio compuesto fue
construido por losholandeses H. Jansen y Z. Jansen en 1590.
CONCLUSIONES:
Por medi o de esta prctica se identificaron cada una de l as partes del
microscopio, para despus l ograr unabuena i l umi nac i n y enf oque del
mi smo al r eal i zar al gunas pr uebas par a es t e f i n c on al gunas
muest r as preparadas y otras preparadas por nosotros mismos para observar algunos
microorganismos y lograr enfocarloscorrectamente, para su posterior estudio.Es t a es una
pr c t i c a i ndi s pens abl e y muy i mpor t ant e ya que
uno de l os el ement os i ndi s pens abl es enmi c r obi ol og a es el mi c r os c opi o,
debi do a que en es t a mat er i a s u pr i nc i pal obj et i v o de es t udi o s on l os
12


organismos microscpi cos, para l os que se requi ere este aparato y si no se sabe
uti li zar correctamente, sermuy difcil lograr una buena prctica en laboratorio.
REFERENCIAS:

http://personales.mundivia.es/mggalvez/micro2.htm

Tabla

Alberts, Bruce,
Biologa Molecular de la Clula
(2da. Edicin, Ediciones Omega, Barcelona, 1994)

Atlas, R.M. (1990) Microbiologa, fundamentos y aplicaciones. CECSA: Mxico*Manual de
microbiologa general:

Departamento de Microscopia de Carl Zeiss (1980) La microscopia desde el principio. Mxico

Madigan, M. T.; Martinko, J.M. Y Parker, J. (1997) Block. Biologa de los microorganismos. 8
ed. PrenticeHall. Iberia, Espaa






















OBJETIVOS:
1. Conocer y manejar adecuadamente las partes del microscopio
2. Aprender a enfocar correctamente en el microscopio
3. Conocer los cuidados del microscopio
4. Aprender a preparar una muestra adecuadamente para la observacin al
microscopio

INTRODUCCION
El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el
microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:
MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y objetivos)
para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para
su observacin sern aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas, debern de ser
monoculares.
MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene por
reflexin de la luz que incide sobre la muestra, posee un inversor que permite
observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de conjunto, debido a
su gran campo; por ejemplo: se puede observar una mosca completa, mientras que
en microscopio compuesto, slo sera posible ver las alas y stas por ser muy
transparentes. La visin estereoscpica o sensacin de relieve se obtiene cuando
cada ojo recibe una imagen por separado captada por cada sistema ptico
prcticamente cada ocular constituye un microscopio compuesto independiente.
Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos considerar que
bsicamente estn constituidos por 3 sistemas:
a) Sistema mecnico;
b) Sistema de iluminacin;
c) Sistema ptico.

a) SISTEMA MECANICO
Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la fuerza de
luz.
Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos macromtricos y
micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el microscopio.
Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el orden de
centmetros.
Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de milmetros.
Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al condensador y al
diafragma
Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos.
Revolver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X)

b) SISTEMA DE ILUMINACION
CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que puede subir o
bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos provenientes de la fuente
luminosa situada en la base del microscopio a fin de iluminar el campo visual.
Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una abertura
regulable por medio de una placa lateral que va a controlar la cantidad de luz que
saldr hacia el condensador.
Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es generalmente una
lmpara integrada a la base.
c) SISTEMA OPTICO
Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta en
diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e Inversin
(100 X).
NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque para su
utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y la preparacin.
La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X en aceite
de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra.
Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est localizada en la
parte superior del tubo del microscopio.
NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente, significa
que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente
ocular, para as obtener el aumento total alcanzado por el juego de lentes.

REGLAS GENERALES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO
1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano
izquierda la base.
2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del
microscopio.
3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.
4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin
de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se
disminuir la intensidad luminosa.
5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco.
6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.
7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de
menor aumento.
8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos.
9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.
10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o
con un papel higinico.
11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos.

OBTENCION DE UN BUEN ENFOQUE:

MICROSCOPIO COMPUESTO:

l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio.
2. Utilizar el objetivo de menor aumento.
3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macromtrico, observando
lateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos.
4. Observar a travs de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio
hasta observar la preparacin enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopio
mientras se est observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el
portaobjetos y ocasionar desperfectos.
5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micromtrico.
6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.

MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO:

1. Sobre la platina del microscopio estereoscpico se coloca el vidrio de reloj con la
muestra a observar.
2. Se observa con los lentes oculares y se baja lentamente el tubo del microscopio
hasta ver la imagen clara.

MATERIAL:
Alumno:
un trozo de corcho (de botella de vino)
una navaja de rasurar nueva
una pequea letra recortada "e"
un insecto
una flor (gladiola)
un lpiz graso (marcador)
Escuela:
2 portaobjetos
2 cubreobjetos
un microscopio compuesto
un microscopio estereoscpico
un vidrio de reloj

DESARROLLO:

Todas las observaciones que se lleven a efecto sern con los objetivos seco dbil y
seco fuerte, y se deber realizar los dibujos correspondientes calculando el
aumento logrado en cada observacin.
1. Observar una lnea de lpiz graso trazado sobre un portaobjetos.
2. Realiza un corte fino de corcho (lo suficientemente delgado para que deje pasar
la luz), colcalo en un portaobjetos, ponle el cubreobjetos y observa.
3. Observa la imagen invertida de una letra recortada.
4. Con la navaja realiza un corte fino del tallo de la gladiola, coloca en el porta
objetos cubre con el cubreobjetos y observa.
5. Coloca en un vidrio de reloj un insecto, y sobre la platina del microscopio
estereoscpico para hacer la observacin.

CUESTIONARIO:

1. Qu lentes componen los dos sistemas de lentes del microscopio compuesto?
2. Qu funcin desempea el condensador y el diafragma?
3. Qu nombre reciben y que aumentos tienen los objetivos del microscopio?
4. Qu diferencia hay entre una preparacin en fresco y una en frote?
5. Mencionar las diferencias entre los microscopios estereoscpico y el compuest