Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

DETERMINACIN DE
CONSTITUYENTES
QUMICOS Y
PARMETROS FSICOS
CUANTITATIVOS
GENERALES DE LA FLOR
BLANCA (Iresine
weberbaueri) EN
EXTRACCIN ETANLICA
MIRANDA, D. PEREZ, J. SUSANIBAR, S. VILLAR, K.
Laboratorio de Farmacognosia. Departamento Acadmico de
Farmacologa, Bromatologa y Toxicologa. Facultad de
Farmacia y Bioqumica. Universidad Nacional Mayor de San
Marcos
ARTCULO CIENTFICO
2015 - I

FFyB. UNMSM. 2015

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

DETERMINACIN DE CONSTITUYENTES QUMICOS Y

PARMETROS FSICOS CUANTITATIVOS GENERALES DE LA
FLOR BLANCA (Iresine weberbaueri) EN EXTRACCIN
ETANLICA
DETERMINATION OF CHEMICAL CONSTITUENTS AND QUANTITATIVE GENERAL PHYSICAL
PARAMETERS OF THE FLOR BLANCA (Iresine weberbaueri) IN ALCOHOLIC EXTRACTION

Daniel Miranda, Jimy Perez, Sheyla Susanibar, Kaysser Villar.

Laboratorio de Farmacognosia. Departamento Acadmico de Farmacologa, Bromatologa y Toxicologa.
Facultad de Farmacia y Bioqumica. Universidad Nacional Mayor de San Marcos

RESUMEN

ABSTRACT

Se determinaron los constituyentes qumicos y

parmetros fsicos cuantitativos generales de
un extracto etanlico de flor blanca (Iresine
weberbaueri). Se obtuvo un extracto etanlico,
el cual se filtr para su anlisis de parmetros
fsicos cuantitativos y determinacin de
constituyentes qumicos. Se determin el ndice
de refraccin, poder rotatorio, pH y se realiz
una cromatografa en capa fina. Los
metabolitos secundarios se determinaron
mediante
reacciones
de
coloracin
y
precipitacin siguiendo el protocolo de tamizaje
fitoqumico conocido. Con los resultados se
evaluaron
las
posibles
aplicaciones
farmacolgicas de la especie, comparando con
las propiedades de la familia y gnero,
concluyendo que es necesario realizar otro
estudio ms a fondo sobre las propiedades
farmacolgicas de la Iresine weberbaueri.
Palabras clave: Iresine weberbaueri, extracto
etanlico, fitoqumica, flavonoides.

The chemical constituents and general

quantitative physical parameters of an ethanol
extract of white flower (Iresine weberbaueri)
were determined. An ethanol extract, which was
filtered for later analysis and quantitative
physical parameters determining chemical
constituents, was obtained. The refractive index
was determined, optical rotation, pH and
chromatography it followed by thin layer. The
secondary metabolites of the species were
determined by color and precipitation reactions
following the protocol known phytochemical
screening. With the results of the chemical
composition of the species, potential drug
applications that can be used, compared with
the properties of the family and gender,
concluding that another study is needed further
on the pharmacological properties they were
evaluated the Iresine weberbaueri.
Keywords: Iresine weberbaueri, ethanol
extract, phytochemical, flavonoids.

INTRODUCCIN

gran variedad de especies han sido reportadas

por la aplicabilidad que tienen en la medicina
tradicional y por el potencial farmacolgico que
poseen. Esta actividad es atribuida a una gran
cantidad
de
compuestos
qumicos
denominados metabolitos secundarios.2 Para la
deteccin preliminar de los diferentes
constituyentes qumicos en las plantas, se ha
desarrollado una serie de mtodos, basados
en la extraccin de estos con solventes
apropiados y en la aplicacin de pruebas de
coloracin y precipitacin.3

Se calcula que el Per posee unas 25 000

especies de plantas conocidas, de las cuales
cerca de 5354 especies vegetales son
endmicas, y de stas 1400 especies son
usadas por sus propiedades medicinales y
estas muchas se usan con solo uno
conocimiento tradicional muy pocas tienen una
descripcin fisicoqumica que respalde su
actividad.1
En la actualidad hay un gran inters por el
estudio de muchas familias vegetales, donde

01

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

METODOLOGA
Material botnico: Conformado por las flores de
la especie Iresine weberbaueri (Flor blanca), el
cual fue secado en una estufa y, luego, molido
en un molino de discos artesanal, de forma
manual. (Figura 1)
Obtencin del extracto: Se pesaron 50 mg del
polvo (Iresine weberbaueri) y se aadieron 750
mL de etanol. El extracto fue conservado
durante todo el estudio en un frasco mbar a
temperatura ambiente. (Figura 2)
Para los anlisis respectivos, el extracto fue
concentrado en Bao Mara a 80C y, cuando
fue necesario, fue diluido con agua destilada.

La determinacin del pH se determin con

papel indicador (tiras reactivas), el poder
rotatorio con un polarmetro y el ndice de
refraccin con un refractmetro. Para la
determinacin del peso especfico se realiz la
metodologa del picnmetro.
La cromatografa se realiz en capa fina, una
fase mvil (sistema de solventes) B:A:W
(butanol, cido actico y agua) y como
reveladores se us la luz ultravioleta y el
tricloruro de aluminio.
Para el anlisis e identificacin de metabolitos
secundarios se sigui el protocolo de tamizaje
fitoqumico descrito en la Tabla 1.

Tabla 1. Protocolo de tamizaje fitoqumico. Compuestos qumicos, pruebas qumicas y resultados

positivos correspondientes para la identificacin de metabolitos secundarios.
COMPUESTO
QUMICO

PRUEBA QUMICA

RESULTADO
POSITIVO

V gotas MP. + Rvo. de Molish+ H2SO4

ANILLO VIOLETA

V gotas MP. + Rvo. de Antrona + H2SO4

VERDE - ROJO

COMPUESTOS
FENLICOS

V gotas MP. + FeCl3

VERDE O AZUL

TANINOS

V gotas MP. + Rvo. gelatina

PRECIPITADO
BLANCO

AMINOCIDOS LIBRES
YGRUPOS AMINOS

V gotas MP. + Rvo. Ninhidrina

COLOR
VIOLCEO

FLAVONOIDES

V gotas MP. + Mg metalico + HCl

ROJO

TRITERPENOS Y
ESTEROIDES

V gotas MP + cloroformo + anhidrido actico + H2SO4

VERDE

CARBOHIDRATOS

V gotas MP. + Rvo. Dragendorf + 0.5 HCl 10%

ALCALOIDES
V gotas MP. + Rvo. Mayer + 0.5 HCl 10%

PRECIPITADO
NARANJA
PRECIPITADO
BLANCO

SAPONINAS

V gotas MP. + dos volmenes de H2O

ESPUMA

GLICSIDOS

V gotas MP + Rvo. Vainilina

VERDE

Fig. 1 Material botnico: Flores de

Iresine weberbaueri (Flor blanca)

Fig. 2 Extracto etanlico de Iresine

weberbaueri en frasco mbar

02

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

RESULTADOS
Los
resultados
para
los
parmetros
fisicoqumicos se detallan en la Tabla 2. En el
anlisis del poder rotario se presentaron
dificultades, puesto que nuestro extracto estuvo
muy concentrado en principio, y luego de la
dilucin con agua destilada, no present el
mismo comportamiento.

El
anlisis
cromatogrfico
respondi
positivamente para el anlisis de flavonoides
(Figura 3)
Los resultados para la identificacin de
metabolitos secundarios se exponen en la
Tabla 3 y se evidencian en las Figuras 4, 5, 6,
7, 8 y 9. Se apreciaron las distintas reacciones
de coloracin y precipitacin.

Tabla 2. Parmetros fisicoqumicos del extracto etanlico de las flores de Iresine weberbaueri.
45

pH
PODER ROTATORIO
NDICE DE
REFRACCIN

Posiblemente DEXTRGIRO
1.369 (26.9 C) / Cantidad de slidos = 23.5
PVACIO = 18.95 g

PESO ESPECFICO

PAGUA = 29.70 g
PMP = 28.05 g

Fig. 3 Placa cromatogrfica del extracto etanlico de Iresine weberbaueri.

Se evidencia la presencia de flavonoides
Tabla 3. Resultados del tamizaje fitoqumico realizado al extracto etanlico de Iresine weberbaueri.
COMP. QUMICO
CARBOHIDRATOS
COMP. FENLICOS
TANINOS
AMINOCIDOS LIBRES Y GRUPOS AMINO
FLAVONOIDES
TRITERPENOS Y ESTEROIDES
ALCALOIDES
SAPONINAS
GLICSIDOS

ENSAYO

RESULTADO

MOLISH
ANTRONA
FeCl3
GELATINA
NINHIDRINA
SHINODA
LIEBERMAN - BURCHARDT
DRAGENDORFF
MAYER
H2O
VAINILINA

++
++
++
+
++
++
+
++
+
+

03

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

Fig. 4 (De izquierda a derecha) Reaccin de Molish, Reaccin de Antrona, Reaccin de FeCl3,
Reaccin de Gelatina, Reaccin de Ninhidrina, Reaccin de Shinoda, Reaccin de Liebermann
Burchardt, Reaccin de Dragendorff, Reaccin de Mayer, Reaccin con H2O, Reaccin de Vainilina.

Fig. 5 A) Reaccin de Molish: reaccin positiva, se observa una coloracin parda luego de la
formacin del anillo superior violeta. B) Reaccin de Antrona: reaccin positiva, se observa una
coloracin verde plida. Se comprueba la presencia de carbohidratos.

04

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

Fig. 6 A) Reaccin de FeCl3: reaccin positiva, se observa una coloracin azulada. Presencia de
compuestos fenlicos B) Reaccin de Gelatina: trazas, se observa una pequea opalescencia
blanca. Posible presencia de taninos.

Fig. 7 A) Reaccin de Ninhidrina: reaccin positiva, se observa una coloracin prpura. Presencia
de aminocidos libres y grupos amino B) Reaccin de Shinoda: reaccin positiva, se observa una
coloracin rojiza. Se comprueba la presencia de flavonoides.

05

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

FFyB. UNMSM. 2015

Fig. 8 A) Reaccin de Libermann-Burchardt: trazas, se observa una coloracin verdosa. Posible

presencia de triterpenos y esteroides B) Reaccin de Dragendorff: reaccin positiva, se observa
una coloracin rojiza por el precipitado naranja. Presencia de alcaloides

Fig. 9 A) Reaccin de Mayer: trazas, se observa una opalescencia blanquecina. Presencia de

alcaloides B) Reaccin con H2O: reaccin negativa, no hubo formacin de espuma. Posible
ausencia de saponinas. C) Reaccin de Vainilina: trazas, se observa una coloracin verdosa tenue.
Presencia de glicsidos.

06

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

DISCUSIN
Para la obtencin de nuestro extracto, el
solvente usado fue etanol el cual presenta una
constante dielctrica de 24, en comparacin
con el trabajo tesis doctoral (Guevara, 2011)
se utiliz para la extraccin, etanol, n-hexano,
diclorometano.4 Esta extraccin se realiz
debido a que muchos grupos flavonoides
presentan diferente grado de solubilidad en
distintos solventes, esto se debe bsicamente
a la constante dielctrica del solvente de
modo que la fuerza atractiva entre iones de
distinto carga y la repulsiva de misma carga
no es la prevista por la ley de columb.5 Basado
en esto ocurre una mejor interaccin de
sustancia y solvente, y por lo tanto, una mayor
extraccin lo cual se evidencia en un extracto
ms concentrado y de un color diferente a la
nuestra. Tras obtener el extracto y una vez
realizado la marcha fitoqumica en la tesis
doctoral (Guevara, 2011), se report mayora
atraccin al usar diclorometano.
De muestra concentrada se utiliz una parte
para medir en el polarmetro el cual se basa en
el siguiente fundamento. Se argumenta en la
parte ptica, est dada por el hecho de que
solo parte de la luz que incide de soluciones
translucidas se proyecta en un prisma de
medicin es transmitido debido a esto se
produce una divisin en 2 zonas una clara y
otra oscura.6 Teniendo conocimiento de este
fundamento la medicin coloreada de nuestra
muestra va directamente contra los principios
de medicin
que rige el fundamento de
nuestra muestra al ser coloreado, absorbe luz
evitando la refraccin en el prisma
proporcionado una mala lectura.
Las especies de la familia Amaranthaceae, a la
cual pertenece nuestra especie, poseen
saponinas.7 En nuestro tamizaje fitoqumico se
obtuvieron resultados favorables usando el
alcohol etlico dando positivo en todas las
reacciones a las cual fue sometido, a
excepcin de la reaccin para la identificacin
de saponinas; sin embargo fue positivo para la
reaccin de Libermann-Burchardt. Por la
porcin esteroide que poseen las saponinas
esteroides, este ensayo puede confirmar su
presencia, pero debe tenerse en cuenta que al

FFyB. UNMSM. 2015

igual que en el caso de los esteroles -y los
esteroides en general- solamente dan un
resultado positivo los que tengan grupos
dienos conjugados reales o potenciales. Sin
embargo
otras
saponinas
como
las
triterpenoides tambin dan positiva la prueba.
As mismo se puede analizar la presencia de
saponinas mediante el ensayo de hemlisis,
que es mucho ms confiable que el de la
espuma. Cuando la muestra contiene taninos,
deben eliminarse antes de realizar la prueba
ya que la interfieren.8 9
La cromatografa en capa fina realizada
comprob la presencia de flavonoides, esto
por el sistema de solventes usados (B:A:W) y
el revelador de tricloruro de aluminio. Para la
determinacin de flavonoides en extractos
crudos de plantas o en fracciones son
especialmente utilizadas la cromatografa de
papel (CP) y la cromatografa de capa fina
(CCF). Por otro lado, son indispensables para
la separacin de flavonoides la CP preparativa,
la CCF, la cromatografa de columna (CC) y
especialmente la cromatografa lquida de alta
resolucin (HPLC).10 Se indica tambin que
mediante la tcnica cromatogrfica empleada
se pueden identificar compuestos fenlicos en
general y alcaloides, usando como revelador el
reactivo de Dragendorff.11
La presencia de flavonoides y dems
metabolitos secundarios en esta especie son
una puerta abierta a realizar una investigacin
ms a fondo sobre sus propiedades
teraputicas. Los flavonoides han demostrado
poseer
efectos
antimutagnicos
y
anticarcinognicos.
Diversos
datos
experimentales han demostrado la accin
antiproliferativa y anti- carcinognica, as como
el papel de agente quimiopreventivo de los
flavonoides.12 Los compuestos polifenlicos
(flavonoides y derivados poliprenilados del
benzoilfloroglucinol)
parecen
ser
los
responsables de las acciones analgsicas,
antiinflamatorias y sobre el sistema nervioso
central encontradas para la especie Hypericum
grandifolium Choisy.13 Estudios presentados
ponen en evidencia que los flavonoides
pueden comportarse como antioxidantes y
prooxidantes, e influyen en ello factores como:
las condiciones del ensayo, la concentracin

07

Artculo Cientfico: Iresine weberbaueri

efectiva que se alcance en el sitio donde la
ERO es formada; la estabilidad del radical del
flavonoide formado al donar un tomo de
hidrgeno al radical atacante; la lipofilicidad
para ser captados por la membrana y el pH del
medio. Por esto, a pesar de que usualmente
se asegura que los flavonoides estn libres de
toxicidad y efectos secundarios, lo que permite
sus amplios usos teraputicos, son necesarias
otras investigaciones que profundicen en este
sentido tomando en cuenta que las estrategias
de mercado, seguidas por los fabricantes de
concentrados de flavonoides, consisten en
exagerar sus efectos no txicos, la mayora de
los cuales no estn sustentados por ensayos
clnicos regulados, y recomiendan dosis que
pueden sobrepasar a las adquiridas a travs
de una tpica dieta vegetariana, conduciendo a
la generacin de ERO y dao posterior al
ADN.14

FFyB. UNMSM. 2015

3.

4.

5.
6.
7.

CONCLUSIONES
La especie Iresine weberbaueri presenta una
gran cantidad de metabolitos secundarios,
entre ellos, los flavonoides y alcaloides, lo que
la convierte en una especie de alto potencial
teraputico; sin embargo, es necesario
establecer un estudio a fondo sobre sus
propiedades teraputicas y cuantificacin de
metabolitos secundarios, pues una alta
dosificacin de estos pueden resultar muy
txicos al ser humano.
La familia Amaranthaceae, en general,
presenta saponinas en su estructura, por lo
que es necesario desarrollar las otras tcnicas
de identificacin de saponinas a la Iresine
weberbaueri.

8.

AGRADECIMIENTOS

12.

Al Laboratorio de Farmacognosia de la FFyB

de la UNMSM, a sus grandiosas y benemritas
docentes y al asistente, por su paciencia y
colaboracin en el desarrollo del estudio.

13.

9.

10.

11.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1.

2.

Blanca len, Amaranthaceae endmicas

del Per, Rev. peru biol , 2006. 13(2): 1825
Cuca, E., Coy, E., and Macas, V. Anlisis
fitoqumico
preliminar
y
actividad

14.

antioxidante,
antiinflamatoria
y
antiproliferativa del extracto etanlico de
corteza de Zanthoxylum fagara (L.) Sarg.
(Rutaceae). Rev Cubana Plant Med. 2011,
16 (1): 43-53.
Nikolai Sharapin.
Fundamentos de
tecnologa de productos fitoteraputicos.
Convenio Andrs Bello, 2000
Guevara, M. Determinacin de actividad
regeneradora en eritema solar de un gel
cosmtico a base de extracto de di-cloro
metano. Facultad de Farmacia y
Bioqumica. UNMSM. Lima; 2011.
Gutirrez, E. Qumica. Madrid: Editorial
Revert S.A.; 1995. p. 189-190.
Aicinbure, A. Manual refractmetro
auxibal, Zuzi. Navarra; 2009. p. 6-8.
Lpez, R. Silva, R. Ruiz, S. Aislamiento de
esteroles, bases de amonio y saponinas
de Amaranthus muricatus (Moquin) Gillies
ex
Hicken
(Amaranthaceae).
Acta
Farmacutica Bonaerense. 2003; 22(2):
101-104
Martnez, A. Saponinas esteroides.
Medelln: Universidad de Antioqua; 2001.
6-7
Hernndez, R. Lugo, E. Daz, L.
Villanueva, S. Extraccin y cuantificacin
indirecta de las saponinas de Agave
lechuguilla Torrey. E-Gnosis. 2005; 3(11):
1-9
Cartaya, O. Reynaldo, I. Flavonoides:
Caractersticas qumicas y aplicaciones.
Cultivos tropicales. 2001; 22(2): 5-14
Bonilla, P. Pareja, B. Flavonoides de
Ephedra americana (pinco-pinco), accin
biolgica sobre el sistema inmunolgico
(IgE). Ciencia e Investigacin. 2001; 4(1):
57-77
Martnez-Flores, S. Gonzlez-Gallego, J.
Culebras, J. Tun, M. Los flavonoides:
propiedades y acciones antioxidantes.
Nutr. Hosp. 2002; 17(6): 271-278
Bonkanka, C. Evolucin farmacolgica de
terpenos y flavonoides de origen vegetal.
Tesis Doctoral. Universidad de la Laguna.
2007
Prez, G. Los flavonoides: antioxidantes o
prooxidantes. Rev. Cub. Invest. Biomed.
2003; 22(1): 48-57

08