INFORME Microbologia
INFORME Microbologia
INFORME Microbologia
INTRODUCCI
Las bacterias presentan una amplia variedad de formas. Algunas, como la bacteria
Objetivos especficos:
Tincin simple con colorantes bsicos:
Identificar
las
bacterias
mediante
las
diferentes
formas,
tamaos
REVISIN BIBLIOGRAFICA
CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE LAS BACTERIAS
FUENTE:http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria_Gram_negativa
MATERIALES Y MTODOS
A. TINCIN SIMPLE CON COLORANTES BSICOS
a. Materiales .
i. Laminas fijadas de microorganismos
ii. Aceite de inmersin
iii. Colorantes bsicos
iv. Azul de metileno
v. Cristal violeta
vi. Carbolfucsina
vii. Papel secante
viii. Pizeta de agua
ix. Soporte para tincin
PROCEDIMIENTO
Agregue 5 o 6 gotas de
cada colorante dejando que
acten por un tiempo de :
30 segundos para el azul
de metileno; 10 segundos
para el cristal violeta; y 5
segundos para a
carbolfucsina.
Una vez cumplido el
tiempo para los
colorantes, lave cada
lamina con la pizetta de
agua.
Enjuague con
agua.
Cubra la pelcula
tenida con lugol y
deje que actue
por 30 a 60
segundos.
Enjuague con
agua
Enjuague con
agua.
Aplique el
colorante de
contraste
safranina por 30
segundos.
Decolore con
alcohol cetona.
Para una pelcula
delgada, la
exposicin al
colorante por 10
20 segundos es
suficiente.
PROCEDIMIENTO
Agregue un agota de
nigrosina y extineda
la mezcla con ayuda
de otra lamina hasta
obtener una delgada
pelcula.
Seque la lamina al
aire o dentro de
papel secante
Examine al
microscopio
compuesto bajo el
objetivo de inmersin
PROCEDIMIENTO
Agregue a la
preparacin verde
malaquita hasta
cubrirla totalmente y
dejarlo por 5
minutos.
Lavar con agua
suavemente.
Examine al
microscopio
compuesto bajo un
objetivo de
inmersin
Elabore los esqumas
correspondientes.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Segn: Brooks GF. Butel JS y Morse SA. Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick
y Adelberg. 17Edicin. El Manual Moderno, Mxico D.F. 2002.
La tincin de Gram es usada para catalogar bacterias sobre la base de sus
formas, morfologas celulares y reaccin Gram (color). A nivel del laboratorio es
til como test para un rpido anlisis presuntivo de agentes infecciosos, tanto
en muestras como en cultivos en crecimiento. Las bacterias se tien Gram
positivas, Gram negativas o no se tien debido a sus diferencias en la
constitucin de su pared y diseo celular.
Tal como lo comprobamos en la prctica, despus de realizar correctamente
los procedimientos se pudo observar a travs del microscopio que la muestra
de yogurt natural es Gram positiva, ya que al ser observado a travs del
microscopio se puede percibir un color azul.
C. TINCIN DIFERENCIAL CIDO RESISTENTE
DISCUCIONES:
Segn la INAL (Instituto Nacional de Alimentos) 2004: Este tipo de
procedimiento se utiliza para poner en evidencia algunas estructuras
subcelulares. Esta tcnica utiliza ms de un colorante en forma secuencial. Lo
cual usamos dos colorantes como: verde malaquita y safranina.
Segn Jwest, Melnick y Adelberg: las bacterias acido alcohol resistente son las
que retiene la carbolfucsina incluso al ser tratadas con cido clorhdrico en
alcohol , estas bacterias se observan rojas mientras que otros tomas el color de
la contra tincin.
TINCION DIFERENCIAL
GRAM
TINCIN DIFERENCIAL
CIDO RESISTENTE
En la tincin gram se
usan
tres
colorantes
(safranina, cristal violeta y
lugol)
utiliza ms de un
colorante en forma
secuencial. Lo cual
usamos
dos
colorantes
como:
verde
malaquita
y
safranina.
BIBLIOGRAFIA
Pedro Garca Martos, Fernando Paredes Salido, Mara Teresa Fernndez
del Barrio - 1994
Evelyn Rodrguez Cavallini - 2005
Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case - 2007 - Vista previa
- Ms ediciones
http://www.monografias.com/trabajos15/tinciones/tinciones.shtml#ixzz2h
YyFxAfj
http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria_Gram_negativa
CONCLUSIONES
Ing.Mg. Vilma J. Reyes de la Cruz
se puede
el colorante
azul de metileno; se pudo observa a traves del microcopio que las bacterias del
yugurt tienen forma redonda y forman grupos de dos,lo que significa que son
diplococos
CUESTIONARIO
CUESTIONARIO DE LA TINSION SIMPLE
1. Cules son las asociaciones ms frecuentes en bacterias?
Tincin directa simple: Utiliza un solo colorante, el cual debe ser bsico para
que la clula bacteriana se tia. Permite mostrar la morfologa general de una
si el Ph no es el apropiado.
Los colorantes pueden ser cidos, bsicos o neutros.
Temperatura suficiente.
Gram positivas:
Lactobacillus pueden ser anaerobias facultativos o microaerfilas.
Clostridium altera con frecuencia alimentos que han sido sometidos a calentamiento.
Los clostridios productores de cido butrico pueden crecer a bajas temperaturas y
ocasionan deterioro en algunos quesos.
Las bacterias presentan un color naranja brillante sobre un fondo verdoso u oscuro.
TINCION DE RODAMINA-AURAMINA.
Los fluorocromos auramina y rodamina tienen la propiedad de fijarse a las paredes
celulares de las micobacterias, que aparecern de color amarillo o naranja brillante
sobre un fondo verdoso. Se utiliza, adems un colorante de contraste (permanganato
potsico) que tiene como funcin evitar la fluorescencia inespecfica.
TECNICA.
Como reactivos reemplean: solucin colorante rodamina-auramina, solucin de
colorante, colorante de contraste. El procedimiento es el siguiente:
minutos
se lava con agua destilada
se cubre la preparacin con solucin decolorante (alcohol clorhdrico)
dejndose actuar durante dos o tres minutos.