UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TRABAJO DE TITULACIN SOMETIDO A CONSIDERACIN

DEL H. CONSEJO DIRECTIVO DE LA FACULTAD DE
CIENCIAS AGROPECUARIAS PARA OPTAR POR EL TTULO
DE:

MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

DIAGNSTICO DE CORONAVIRUS CANINO MEDIANTE

LA PRUEBA DE ELISA, EN EL CANTN EL GUABO.

JOHN EMILIANO BERREZUETA REYES

2014

i
 CERTIFICACIN

Este trabajo de titulacin ha sido aceptada en la forma presente por el Tribunal de titulacin
nominado por el H. Consejo Directivo de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la
Universidad Tcnica de Machala, como requisito parcial para optar por el ttulo de:

MDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

_____________________________

Dr. David Masache Narvez

Director

______________________________

Dr. Francisco Rendn Quijije

Miembro

______________________________

Dr. Luis Hurtado Flores Mg. Sc.

Miembro

ii
 DEDICATORIA

El esfuerzo y dedicacin plasmado en el presente trabajo se lo dedico a mis padres, Alejandro

Berrezueta y Margarita Reyes, a mis hermanas Reveca y Mercedes por el apoyo incondicional
que siempre me brindaron durante mis estudios y la realizacin de esta investigacin.

iii
La responsabilidad por las investigaciones,
resultados, discusiones y conclusiones del presente
trabajo son exclusivamente del autor:

____________________________________

JOHN EMILIANO BERREZUETA REYES

iv
 UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

ACTA DE CESIN DE DERECHOS DE TESIS DE GRADO Y TRABAJOS

DE TITULACIN
Consigno con el presente escrito de la cesin de los Derechos de Tesis de Grado/Trabajo de
Titulacin, de conformidad con las siguientes clusulas:

PRIMERA
Por sus propios derechos y en calidad de Director de Tesis el Dr. David Masache, y el tesista
John Emiliano Berrezueta Reyes, por sus propios derechos, en calidad de Autor de Tesis.

SEGUNDA
El tesista, John Emiliano Berrezueta Reyes, realiz la Tesis de Grado titulada
DIAGNSTICO DE CORONAVIRUS CANINO MEDIANTE LA PRUEBA DE
ELISA, EN EL CANTN EL GUABO, para optar por el ttulo de MDICO
VETERINARIO Y ZOOTECNISTA, en la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la
Universidad Tcnica de Machala, bajo la direccin del Docente Dr. David Masache. Es
poltica de la Universidad que la Tesis de Grado se aplique y materialice en beneficio de la
colectividad.

Los comparecientes Dr. David Masache como Director de Tesis y el tesista John Emiliano
Berrezueta Reyes, como autor de la misma, por medio del presente instrumento, tienen a bien
ceder en forma gratuita sus derechos en la Tesis de Grado titulada DIAGNSTICO DE
CORONAVIRUS CANINO MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA, EN EL CANTN
EL GUABO, a favor de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Tcnica de
Machala y conceden autorizacin para que la Universidad pueda utilizar esta Tesis en su favor
y/o de la colectividad, sin reserva alguna.

APROBACIN

Las partes declaran que reconocen expresamente todo lo estipulado en la presente Cesin de
Derechos Machala 15 de noviembre del 2013.

DIRECTOR DE TESIS AUTOR

Dr. David Masache Narvez John Berrezueta Reyes
 AGRADECIMIENTO

Al culminar el presente trabajo investigativo, deseo expresar mi sentimiento de gratitud a

todos quienes hicieron posible de una u otra manera la culminacin del mismo, y
especialmente a:

Dios, por darme la sabidura, fortaleza y salud para superarme cada da.

A mis padres y hermanos, por haberme dado su apoyo moral y econmico.

A la Universidad Tcnica de Machala, especialmente a la Facultad de Ciencias

Agropecuarias.

Al Dr. David Masache Narvez, Director de mi Tesis de Grado por su gran aporte acadmico
a mi estudio superior.

A los Drs. Francisco Rendn Quijije, Luis Hurtado Flores, miembros del tribunal de grado y
muy buenos colaboradores.

vi
 NDICE DE CONTENIDO

Tema Pgina

1. INTRODUCCIN 1

2. REVISIN DE LITERATURA 3
2.1. Definicin 3
2.2. Etiologa 3
2.3. Hospedadores 4
2.4. Formas de transmisin 4
2.5. Epidemiologa y patogenia 4
2.6. Caractersticas clnicas y patolgicas 5
2.7. Diagnstico 6
2.8. Diagnstico diferencial 9
2.9. Tratamiento 9
2.10. Prevencin y vacunacin 10
3. MATERIALES Y MTODOS 11
3.1. Materiales 11
3.1.1 Ubicacin 11
3.1.2. Tipo de investigacin 12
3.1.3. Poblacin 12
3.1.4. Muestra 12
3.1.5. Equipos y materiales 13
3.1.5.1 Muestra 13
3.1.6. Variables 13
3.1.7. Medicin de las variables 13
3.2. Mtodos 14
3.2.1. Mtodo de campo 14

vii
 3.2.2. Mtodo de laboratorio 14
3.2.3. Materiales de la prueba 15
3.2.4. Procedimiento del test 15
3.2.5. Interpretacin de los resultados del test 16
3.2.6. Anlisis estadstico 17
4. RESULTADOS Y DISCUSIN 19
4.1. Porcentaje de Coronavirus canino 19
4.2. Relacin de la enfermedad de acuerdo a la edad 19
4.3. Relacin de la enfermedad de acuerdo al sexo 20
4.4. Relacin de la enfermedad de acuerdo a la raza 21
4.5. La enfermedad en las parroquias rurales y urbanas 21
5. CONCLUSIONES 23
6. RECOMENDACIONES 25
7. RESUMEN 27
8. SUMMARY 29
9. BIBLIOGRAFA 31
10. ANEXOS 33
10.1. Registro diario de los animales muestreados en el cantn El Guabo,
durante la investigacin. 34
10.2. Fotografas tomadas durante la realizacin de las pruebas 37

viii
 NDICE DE FIGURAS

Tema__________________________________________________ ___Pgina

Figura 1. Mapa satelital del cantn El Guabo 12

Figura 2. Prueba rpida de CPC/CCV Ag de Anigen 16

Figura 3. Procedimiento de la prueba 16

Figura 4. Interpretacin de los resultados 17

Figura 5. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados

de acuerdo a la edad 20

Figura 6. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados

de acuerdo al sexo 20

Figura 7. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados

de acuerdo a la raza 21

Figura 8. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados

de acuerdo a la procedencia 21

Figura 9. Mapa del cantn El Guabo con la distribucin epidemiolgica

de Coronavirus canino de acuerdo al lugar de procedencia de los

animales positivos 22

ix
 NDICE DE CUADROS

Tema______________________________________________________Pgina

Cuadro 1. Porcentaje de Coronavirus canino en el cantn El Guabo,

durante el ao 2013 19

x
 1. INTRODUCCIN

El Coronavirus canino es una enfermedad que puede atacar a todo tipo de perro y a toda edad,
aunque en los cachorros es ms comn, es una enfermedad infecciosa viral, puede ser
contagiosa si se encuentra en un grado avanzado, tiene un periodo de incubacin es de 24 a 36
horas, y si es detectada a tiempo es curable, sin dejar secuelas de ningn tipo tras la
recuperacin.

Los sntomas de Coronavirus canino son: anorexia, aumento de la temperatura a 40 C,

presencia de diarrea con sangre, usualmente con mal olor, adems de vmito, deshidratacin y
dolor abdominal. Estos sntomas pueden ser similares a los de la Parvovirosis, pero en este
caso la gastroenteritis es menos severa y a veces las diarreas son menos frecuentes, o
ausentes, puede demorar ms das la presencia de la diarrea sanguinolenta.

El tratamiento de la Coronavirus canino, es a base de antibiticos, adems de una terapia de

fluidos, estimulantes del apetito, vitamina B, antiemticos, antidiarreicos, protectores de la
mucosa intestinal y antivirales. Y un buen cuidado por parte del amo. La prevencin de
Coronavirus canino, se basa en una buena sanidad con el perro, sus alimentos y el plato en
donde come.

La presente investigacin se realiz en el cantn El Guabo, en este sector no hay antecedentes

de estudios sobre la presencia de Coronavirus canino. El diagnstico presuntivo solo se da a
travs de la exploracin clnica y la presencia de los signos clnicos.

Los objetivos planteados para esta investigacin fueron los siguientes:

Diagnosticar Coronavirus canino mediante la prueba de Elisa en el cantn El Guabo.

Determinar el porcentaje de Coronavirus canino segn edad, sexo, raza y procedencia
de los animales positivos.

1
 Elaborar un mapa epidemiolgico de Coronavirus canino.

2
 2. REVISIN DE LITERATURA

2.1. DEFINICIN

Domnguez (2004) menciona que la enteritis causada por el coronavirus canino (CVC) es una
enfermedad altamente contagiosa, de diseminacin rpida, ms severa en cachorros jvenes,
sin embargo los perros de cualquier edad, sexo y raza son susceptibles.

El virus se puede excretar en las heces por 2 semanas o ms y es transmitido principalmente

por la va feco-oral. Los signos clnicos de la infeccin por CVC pueden variar mucho,
haciendo difcil la diferenciacin de CVC de otras causas infecciosas de enteritis.
Adicionalmente, hay una forma asintomtica de la enfermedad en la que los perros parecen
clnicamente normales, aunque ocurre dao al intestino delgado y excrecin del virus en las
heces, diseminando la enfermedad a cualquier cachorro o perro adulto susceptible
(Domnguez, 2004).

Los signos clnicos incluyen: inicio sbito de diarrea, que puede estar o no precedida de
vmito, anorexia, letargo con o sin fiebre. Al principio del curso de la enfermedad, es
importante considerar la infeccin por parvovirus canino (PVC) como diagnstico diferencial,
aunque los signos de CVC son generalmente menos severos que los de PVC. Adems el CVC
tiende a ser autolimitante con recuperacin en 8-10 das, siempre y cuando no haya factores
secundarios concomitantes como parsitos, bacterias u otros virus (Domnguez, 2004).

2.2. ETIOLOGA

Alvarado (2005) se refiere a que el Coronavirus canino es un virus RNA de cadena helicoidal
sencilla que pertenece a la familia Coronaviridae. Su tamao vara entre 60 y 220 nm.

3
El CVC es miembro de la familia Coronaviridae, que pertenece a la orden Nidovirales.
Diversos coronavirus de esta familia infectan a una gran cantidad de especies, incluidos seres
humanos, vacas, cerdos, caballos, aves de corral, ratas y ratones. A la fecha, se aislaron varias
cepas de CVC a partir de brotes de enfermedad diarreica en perros (Alvarado, 2005).

El genoma viral est formado por una cadena de ARN de hebra simple; la replicacin ocurre
en el citoplasma celular del husped. Los coronavirus son bastante resistentes y pueden seguir
siendo infecciosos durante perodos ms largos al aire libre a temperaturas bajo cero. Pierden
la infectividad en la materia fecal aproximadamente a las 40 horas a temperatura ambiente
(20C) y a las 60 horas cuando estn refrigerados (4C). La mayora de los detergentes y
desinfectantes comerciales pueden inactivarlos (Greene, 2008).

2.3. HOSPEDADORES

El Coronavirus canino es especfico de los perros, tanto salvajes como domsticos (Couto y
King 2005).

Este virus ataca de forma ms severa en cachorros, sin embargo los perros de cualquier edad,
sexo y raza son susceptibles (Domnguez, 2004).

2.4. FORMAS DE TRANSMISIN

La ruta natural de transmisin es fecal-oral. Las heces son la mayor fuente de infeccin ya que
los perros infectados excretan el virus a travs de la materia por 6 a 9 das pudiendo llegar a
hacerlo por tiempos an ms prolongados (Greene, 2008)

2.5. EPIDEMIOLOGA Y PATOGENIA

Aunque los cachorros desarrollan en mayor medida las manifestaciones clnicas frente a la
infeccin por este virus todos los perros de diversas edades, sexo y raza son susceptibles al
mismo. La coronavirosis es una enfermedad que se presenta con mayor frecuencia durante los
meses fros (junio a noviembre) debido a que el virus es ms estable en el medio extracelular

4
a bajas temperaturas. Sin embargo la enteritis causada por el CCV es bastante contagiosa y de
rpida diseminacin (Negro, 2009).

Si bien el CCV est asociado con una enfermedad leve o subclnica con bajo ndice de
mortalidad; la severidad se ve aumentada en infecciones duales cuando se presenta junto con
el Parvovirus canino (CPV-2), en donde la muerte del animal es comn. El CCV ha sido
aislado de necropsias de perros en donde este virus aparece como potenciador de la infeccin
causada por CPV-2 (Negro, 2009)

2.6. CARACTERSTICAS CLNICAS Y PATOLGICAS

El perodo de incubacin es corto: uno a cuatro das en el campo y 24 a 48 hs en condiciones

experimentales. Se observan vmitos y diarrea de 1 a 3 das posinfeccin. Cuando aparecen
estos signos clnicos el virus se disemina rpidamente. Su aislamiento a partir de las heces de
perros infectados suele hacerse entre los 3 y 14 das aproximadamente despus de la
infeccin. Poseen un marcado tropismo por las clulas epiteliales del tracto respiratorio y
entrico. Durante la enteritis, el virus ataca a las clulas maduras del epitelio causando que las
mismas se fusionen y se atrofien (Negro, 2009).

Es difcil diferenciar CCV de otras causas infecciosas de enteritis. Se piensa que la infeccin
por CCV suele ser menos espectacular que la causada por CPV-2. Los signos clnicos pueden
variar aunque en general los animales infectados presentan diarrea al inicio con vmitos. De
manera caracterstica las heces son de color anaranjado, de muy mal olor y rara vez
sanguinolentas. La prdida de apetito, el letargo son caractersticas comunes. A diferencia de
la infeccin causada por CPV-2, la fiebre no es constante ni la leucopenia es un dato distintivo
(Negro, 2009).

En casos graves, la diarrea puede tornarse acuosa y presentar deshidratacin y desequilibrios

electrolticos. Casi todos los perros afectados se recuperan de manera espontnea despus de 8
a 10 das posinfeccin. Aunque la enfermedad puede prolongarse si se presentan infecciones
secundarias causadas por parsitos, bacterias u otros virus (Negro, 2009).

5
2.7. DIAGNSTICO

Es difcil establecer un diagnstico definitivo de la enfermedad causada por CCV. Es

importante descartar otras causas de vmito y diarrea tal como infeccin causada por CPV-2,
enterobacterias, parsitos, venenos y causas no infecciosas de diarrea. El diagnstico clnico
requiere de la confirmacin del laboratorio. La microscopa electrnica a partir de heces
frescas puede utilizarse como mtodo diagnstico, sin embargo si la carga viral es baja es
probable que ocurran falsos negativos (Negro, 2009).

El virus puede ser aislado de muestras clnicas pero usualmente no se utiliza como mtodo de
diagnstico ya que requiere de varios das entre su aislamiento y posterior confirmacin. Se
han desarrollado tcnicas de RT-PCR con el fin de detectar CCV en especmenes fecales. La
tcnicas serolgicas como ensayos de neutralizacin del virus y deteccin de anticuerpos por
el mtodo de ELISA estn disponibles, pero los ttulos solo confirman la exposicin al virus
(Negro, 2009).

Las principales pruebas de diagnstico de laboratorio que existen para Coronavirus canino
son las siguientes:

Deteccin del antgeno vrico

Inmunofluorescencia Directa (IFD)

Es una tcnica de gran utilidad para confirmar el diagnstico post mortem a partir de cortes
histolgicos en congelacin e improntas de intestino delgado, o bien para aplicarse con el
mismo fin a cultivos celulares infectados. Las muestras de necropsia deben recogerse lo ms
rpido posible, debido a la autolisis que sufren las vellosidades intestinales despus de la
muerte (Martin, 1993).

Microscopa electrnica

El microscopio electrnico se puede utilizar para detectar el virus en heces (las muestras se
pueden refrigerar, pero no congelar), pero si ste est presente en cantidades pequeas,
pueden ocurrir falsos negativos (Domnguez, 2004).

6
Es frecuente tambin observar falsos positivos en el microscopio electrnico porque hay
muchas partculas con cintas similares en muestras fecales. Por ello, se deben interpretar los
resultados de microscopa electrnica con cuidado, ya que es necesaria cierta experiencia para
evitar confusiones (Domnguez, 2004).

Aislamiento en cultivo celular

Las muestras ms indicadas para el diagnstico in vivo son las heces. En los casos post
mortem, deber recogerse el contenido intestinal junto con raspados de mucosa de la zona
del leon. Preferentemente, las muestras deben tomarse entre el primero y el segundo da tras
el comienzo de la diarrea. El motivo de ello reside en el corto perodo de multiplicacin del
CCV, aunque la eliminacin vrica puede persistir durante ms de dos semanas (Martin,
1993).

ELISA

Con un desarrollo mas reciente que las anteriores, esta tcnica es idnea para el proceso de un
gran nmero de muestras por su rapidez de ejecucin y su mayor capacidad de automatizado
(Martin, 1993).

PCR transcriptasa inversa

Domnguez (2004) expresa que la PCR transcriptasa inversa (Reaccin en Cadena a la

Polimerasa) tambin se utiliza para el diagnstico de infeccin por CCV. La prueba mostr
alta sensibilidad y especificidad. Esta prueba conduce al diagnstico del CCV ms
rpidamente que los mtodos convencionales y podra ser utilizada para el diagnstico del
CCV en muestras fecales cuando el virus est inactivo o cuando el nmero de viriones es
bajo.

7
Deteccin de anticuerpos

Seroneutralizacin

En general, el nivel de anticuerpos neutralizantes frente al CCV es bajo, al carcter

eminentemente localizado de la infeccin. Se ha sugerido que esta prueba es la ms especfica
para cuantificar la respuesta serolgica frente al CCV (Martn, 1993).

Inmunofluorescencia indirecta (IFI)

No es un mtodo muy utilizado, a causa de su baja sensibilidad. La tcnica consiste en el

empleo, como sustrato antignico, de cultivos celulares infectados con una dosis de CCV
prefijada. Una vez aadida la muestra en estudio y revelada la reaccin con un suero
antiespecie conjugado con fluorescena, la presencia de fluorescencia indicar un resultado
positivo (Martn, 1993).

ELISA indirecto

Actualmente, existen una serie de kits inmunoenzimticos para la determinacin de

anticuerpos frente al CCV, disponibles comercialmente y de fcil manejo. Las placas
empleadas suelen estar tapizadas con CCV purificado. Para el revelado de la reaccin se
utiliza un suero antiespecie conjugado con peroxidasa. En diversos estudios comparativos, se
ha descrito que la sensibilidad de este mtodo para virus canino es superior a la de otras
tcnicas ms convencionales como la seroneutralizacin (Martn, 1993).

En la provincia de El Oro se han realizado tres investigaciones de CCV, la primera en la

ciudad de Machala, realizada por Gonzaga en el ao 2008, en la que obtuvo un porcentaje del
13%. La segunda en la ciudad de Pasaje, realizada por Guartazaca en el ao 2010, en la que
tuvo el 7% de casos positivos, y la tercera y ltima investigacin de CCV la realiz Aguirre
en el 2010 en Huaquillas, en la que resultaron positivos el 17%, en todas estas investigaciones
se utilizaron 100 muestras de animales sospechosos a la enfermedad.

8
2.8. DIAGNSTICO DIFERENCIAL

Martin (1993) expresa que el diagnstico diferencial de los cuadros de gastroenteritis canina
de origen infeccioso requiere un anlisis de laboratorio completo. Las pruebas deben
encaminarse hacia la deteccin de cualquiera de los posibles agentes etiolgicos, ya que desde
el punto de vista clnico estas enfermedades son indiferenciables. As, principalmente se
debieran considerar en el diagnstico diferencial los siguientes procesos que cursan con
diarrea: infecciones virales como el parvovirus, rotavirus, moquillo canino y herpervirus
canino, algunas parasitosis inducidas por protozoos o nematodos, infecciones bacterianas
como pueden ser las producidas por Campylobacter sp. Entre otras. Tambin hay que
considerar ingesta de toxina, cuerpos extraos o enfermedades metablicas.

En el caso de las infecciones vricas, los brotes se caracterizan por su aparicin brusca, su
curso corto y la rpida recuperacin de los animales. La morbilidad suele ser elevada (incluso
del 100% entre cachorros de 2 a 5 meses) y suele existir mortalidad. En procesos causados por
bacterias o parsitos, la aparicin de las manifestaciones clnicas es ms lenta y el curso de la
enfermedad tiende a cronificarse, dando lugar a un deterioro progresivo de la salud del
animal. La morbilidad no es tan elevada como en el caso anterior y en general no existe
mortalidad (Martin, 1993).

2.9. TRATAMIENTO

Hasta el momento no existen drogas antivirales especficas contra este virus y por
consiguiente la profilaxis a travs de la vacunacin es fundamental para la prevencin de la
enfermedad causada por CCV. Aunque es rara la mortalidad relacionada con esta enfermedad
diarreica, en cachorros la prdida de electrlitos y de agua junto con la deshidratacin pueden
ser motivos de que ocurra. Es importante conservar el equilibrio de lquidos y electrolitos. El
tratamiento con antimicrobianos de amplio espectro puede utilizarse para prevenir o tratar
infecciones bacterianas secundarias (Negro, 2009).

9
2.10. PREVENCIN Y VACUNACIN

Las medidas de prevencin son bsicamente higinicas. Evitar el hacinamiento, las malas
condiciones sanitarias y el estrs durante el entrenamiento, as como otras causas de estrs es
fundamental para evitar la infeccin por este virus. El CCV es inactivado por la mayora de
los agentes germicidas efectivos; la desinfeccin de perreras y equipos con solucin de
hipoclorito al 3% es muy efectiva (Negro, 2009).

La inmunizacin por vacunacin es la forma de prevenir la infeccin contra este virus. Las
vacunas a virus vivos (en EEUU) tuvieron una alta tasa de reacciones adversas sobre todo
cuando se aplicaban en combinacin con la vacuna del moquillo y del CPV-2. Por esta razn
fueron retiradas del mercado rpidamente y hoy da est permitido solamente el uso de
vacunas inactivadas. Por consiguiente la vacunacin y la higiene son componentes
fundamentales para prevenir esta enfermedad (Negro, 2009).

En este contexto se recomienda el siguiente esquema de vacunacin:

Primovacunacin

Primera dosis entre las 6 a 8 semanas de edad. Segunda dosis entre las 10 a 12 semanas de
edad. Tercera dosis entre las 14 a 16 semanas de edad. La revacunacin anual es aconsejable
de por vida. Es recomendable vacunar a las hembras antes de que las mismas entren en celo
(Negro, 2009).

10
 3. MATERIALES Y MTODOS

3.1. MATERIALES

3.1.1. UBICACIN

La presente investigacin se realiz en el cantn El Guabo, ubicada en el noroeste de la

provincia de El Oro. Sus lmites son:

Norte; con la Provincia del Guayas.

Sur; con los cantones de Machala y Pasaje.
Este; con el cantn Ponce Enrquez - Provincia del Azuay y cantn Pasaje.
Oeste; con el Ocano Pacfico, Golfo de Guayaquil.

Y posee una:

Superficie; 604,1 km2

Altitud; 9 msnm.
Temperatura promedio; 24 a 29 grados centgrados.

Sus coordenadas son:

Coordenadas UTM:
UTM Este X 684796
UTM Norte Y 4751227

11
 Figura 1. Mapa Satelital de la ciudad de El Guabo

3.1.2. TIPO DE INVESTIGACIN

La presente investigacin es de tipo descriptivo. El nmero de animales investigados fue de

100 perros sospechosos de Coronavirus canino, por lo que el tipo de muestra es intencional o
por conveniencia. Se eligi este tipo de muestra por el elevado costo que representa la
adquisicin de los Test reactivos que se utilizaron.

3.1.3. POBLACIN

La poblacin canina aproximada en la ciudad de El Guabo es de 7295 perros, este aproximado

se lo obtuvo dividiendo la poblacin humana que es de 52067 individuos para 7, este dato de
proporcionalidad es manejado por el Departamento de Epidemiologa de la Direccin
Provincial de Salud de El Oro.

3.1.4. MUESTRA

Los animales seleccionados para el estudio fueron los que tenan los sntomas clsicos de la
enfermedad, la misma que se la diagnostic utilizando las heces de los canes sospechosos,
stas se obtuvieron en las diferentes zonas de la ciudad, considerando el sexo, raza, edad y el
lugar de procedencia.

12
3.1.5. EQUIPOS Y MATERIALES

Para el desarrollo de esta investigacin se utilizaron los siguientes materiales:

100 Kits de pruebas rpidas de (CPC/CCV Ag de Anigen)

Mandil
100 pares de guantes
Hojas de registro
Lpiz
Cmara fotogrfica

3.1.5.1. Muestra

Heces caninas (100 muestras)

3.1.6. VARIABLES

Las variables que se tomaron en cuenta para la realizacin de este trabajo investigativo son las
siguientes:

Positividad a Coronavirus Canino por:

Edad.
Sexo.
Raza.
Procedencia.

3.1.7. MEDICIN DE LAS VARIABLES

Positividad: variable cualitativa que considera la respuesta serolgica a la prueba de ELISA y

se midi como positiva o negativa.

Edad: variable cuantitativa expresada en meses de vida del animal desde el nacimiento hasta
la realizacin de la prueba de ELISA. Se midi de la siguiente manera:

13
 Cero a seis meses de edad.
Seis a doce meses de edad.
Doce meses en adelante.

Sexo: variable cualitativa que considera el gnero del animal y se midi como hembra o
macho.

Raza: variable cualitativa que considera la clase del animal y se midi como mestizo u otras
razas.

Procedencia: variable cualitativa que considera el lugar de origen del animal a nivel
parroquial del cantn.

Las parroquias urbanas y rurales del cantn El Guabo son las siguientes:

El Guabo (cabecera cantonal)

Barbones
La Iberia
Tendales
Ro Bonito

3.2. MTODOS

3.2.1. MTODO DE CAMPO

La toma de las muestras se realiz en todas las parroquias que pertenecen al cantn El Guabo,
visitando hogares donde tengan perros que presenten signos clnicos de problemas
gastrointestinales. Se procedi a registrarlos y al final se obtuvo un total de 100 muestras.

3.2.2. MTODO DE LABORATORIO

El mtodo que se utiliz para el diagnstico de Coronavirus canino fue la prueba rpida de
CPC/CCV Ag de Anigen. Es un inmunoensayo cromatogrfico que sirve para la deteccin
simultnea de antgenos de Parvovirus y Coronavirus en heces caninas. En esta prueba
aparecen las letras T y C como lneas de la prueba y de control, respectivamente, en la

14
superficie del dispositivo. Ambas lneas no son visibles en ventana del resultado antes de
aplicar alguna muestra.

Los anticuerpos de Parvovirus y Coronavirus canino especialmente seleccionados se utilizan

en esta prueba como materiales de captura y deteccin, los mismos que permiten a esta prueba
rpida identificar el antgeno de Parvovirus y Coronavirus canino en heces con un alto grado
de exactitud.

3.2.3. MATERIALES DE LA PRUEBA

Prueba rpida de CPC/CCV Ag de Anigen.

Tubos que contienen el diluyente para el anlisis.
Hisopos para la recoleccin de la muestra.
Cuentagotas.

3.2.4. PROCEDIMIENTO PARA EL TEST

Se recogi las muestras de las heces caninas con el hisopo.

El hisopo se coloc en el tubo con 1ml de diluyente del anlisis y homogenizar.
Se retir el dispositivo de la prueba de su envoltura y se lo coloc en una superficie
plana y seca.
Con el cuentagotas, se tom la mezcla de la muestra con el diluyente.
Se colocaron 4 gotas de la muestra en la ventana del dispositivo.
Cuando la prueba comenz a trabajar, se observaron movimientos de color prpura en
la ventana del resultado en el centro del dispositivo. Cuando la migracin no apareca
dentro de un minuto, se agregaba una gota ms de la muestra.
La lectura de los resultados se realiz en 5 a 10 minutos.

15
 Figura 2. Prueba rpida de CPC/CCV Ag de Anigen

Figura 3. Procedimiento de la prueba.

3.2.5. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS DEL TEST

Cuando el test funciona de manera correcta aparece una banda de color a la izquierda de las
ventanas de resultados, la que se denomina banda de control. La seccin derecha de la ventana
de resultados indica el resultado del test. Si otra banda de color aparece en la ventana del test
este tendr un resultado positivo y si no aparece la segunda banda el resultado es negativo.

Se debe repetir la prueba si en la ventana no apareci ninguna de las bandas, o si aparece solo
la banda de la derecha.

16
 Figura 4. Interpretacin de los resultados.

3.2.6. ANLISIS ESTADSTICO

Cuando se obtuvieron los datos correspondientes a las variables planteadas, se procedi a

realizar los cuadros estadsticos descriptivos, para mostrar cuyos resultados en figuras.

Los clculos correspondientes se realizaron mediante la siguiente frmula:

Esta frmula se aplic para cada uno de los parmetros establecidos.

17
18
 4. RESULTADOS Y DISCUSIN

4.1. PORCENTAJE DE Coronavirus canino

En el siguiente cuadro se presenta el porcentaje de Coronavirus canino obtenido durante la

investigacin.

Cuadro 1. Porcentaje de Coronavirus canino en el cantn El Guabo, durante el ao

2013.

Animales
%
Investigados Positivos
100 32 32

El porcentaje obtenido en este trabajo investigativo es superior al aportado por Guartazaca en

el 2010, quien en su investigacin realizada en la ciudad de Pasaje obtuvo un porcentaje del
7% de positivos a la enfermedad de Coronavirus canino, de igual manera si lo comparamos
con un estudio realizado por Gonzaga en el 2008 en la ciudad de Machala, el cual obtuvo un
13% de casos positivos. Cabe mencionar que Aguirre en el 2011 en la ciudad de Huaquillas
encontr un 17% de positividad a la enfermedad.

4.2. RELACIN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO A LA EDAD

En la siguiente figura podemos apreciar los valores correspondientes al porcentaje de

Coronavirus canino de acuerdo a la edad.

19
Figura 5. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados de acuerdo a la edad.

Casos positivos

46,03

13,64

0
0 a 6 meses 6 a 12 meses mas de 12 meses

El mayor nmero de animales evaluados, 63 en total, se encuentran entre los 0 y 6 mese de

edad, con un porcentaje del 46,03% de casos positivos y en menor nmero de estudiados (22
perros) estn entre los 6 y 12 meses con un porcentaje del 13,64% de positividad a la
enfermedad. Los animales mayores a 12 meses (15), no presentaron ningn caso positivo.

4.3. RELACIN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO AL SEXO.

Figura 6. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados de acuerdo al sexo.

Positivos

38,71
28,99

Hembra
Macho

20
En la figura 6 se puede observar que el 38,71% que representa a 20, de los 69 animales
machos muestreados son positivos, y en las hembras el 28,99% que representa a 12 de las 31
examinadas dieron positivo.

4.4. RELACIN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO A LA RAZA

Figura 7. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados de acuerdo a la raza.

25,61 61,11

Mestizo
Otros
Positivos

De 82 mestizos 21 dieron positivo a la prueba, y de 18 de raza 11 fueron positivos. Se puede

observar que los canes de raza son ms sensibles a padecer la enfermedad en comparacin con
los mestizos, de acuerdo al nmero de positivos y animales investigados.

4.5. LA ENFERMEDAD EN LAS PARROQUIAS RURALES Y

URBANAS.

Figura 8. Porcentaje de Coronavirus canino en los animales investigados de acuerdo a la

procedencia.

33,33
20,83 35,29 36,84
36,36

El Guabo
Barbones
La Iberia
Tendales
Rio Bonito
Positivos

21
Para determinar la procedencia de los animales positivos se tom en cuenta las 5 parroquias
que conforman el cantn de El Guabo, las mismas que son: El Guabo (cabecera cantonal),
Barbones, La Iberia, Tendales y Ro Bonito, cabe sealar que la muestra se la tom tratando
que sea de forma equitativa entre las parroquias. El mayor porcentaje de casos positivos se
present en Tendales con el 36,84% (de 19 animales investigados), seguido de Ro Bonito con
el 36,36% (22 investigados), a continuacin La Iberia con el 35,29% (17 investigados), de ah
Barbones con el 33,33% (18 investigados) y por ltimo El Guabo con el 20,83% (24
investigados).

Es importante sealar que en todas las parroquias se presentaron casos positivos a

Coronavirus canino y que esta investigacin se realiz con animales que no son tratados
regularmente por un veterinario, y que en algunos casos no posean ningn tipo de vacuna ni
desparasitante.

En la siguiente figura se observa el mapa del cantn de El Guabo divido en sus 5 parroquias
rurales, con la distribucin epidemiolgica de la enfermedad de Coronavirus canino de
acuerdo al lugar de procedencia de los animales positivos.

Figura 9. Mapa del cantn El Guabo con la distribucin epidemiolgica de Coronavirus

canino de acuerdo al lugar de procedencia de los animales positivos.

22
 5. CONCLUSIONES

1. El 32% de animales positivos demuestran una prevalencia mayor a la de Huaquillas

(17%), Machala (13%), y Pasaje (7%).
2. La mayor cantidad de casos positivos se present en los cachorros de 0 a 6 meses.
3. Todas las parroquias del cantn El Guabo presentaron casos positivos de Coronavirus
canino.
4. Los animales ms susceptibles son los que no tienen ningn tipo de tratamiento.
5. La parroquia con mayor nmero de casos positivos fue Ro Bonito.

23
24
 6. RECOMENDACIONES

1. Por ser una enfermedad contagiosa entre los canes, se recomienda establecer un
calendario de vacunacin riguroso.
2. La sanidad y la correcta alimentacin del perro ayudar a prevenir sta y muchas otras
enfermedades.
3. Al paciente que se le diagnostique positivo a Coronavirus canino se lo debe aislar de
los sanos, si fuese el caso.
4. A quien se dedique a la cra de canes para comercializarlos, debe tener el
asesoramiento de un Mdico Veterinario responsable.

25
26
 7. RESUMEN

El presente trabajo de investigacin se realiz en la ciudad de El Guabo, provincia de El Oro,

desde el 25 de marzo hasta el 10 de Julio del 2013. Se plantearon los siguientes objetivos: 1.
Diagnosticar Coronavirus canino en perros con sntomas gastroentricos de la ciudad de El
Guabo mediante la prueba de ELISA. 2. Determinar el porcentaje de Coronavirus canino
segn edad, sexo, raza y procedencia de los animales positivos. 3. Elaborar un mapa
epidemiolgico de Coronavirus canino de acuerdo al lugar de procedencia de los animales
positivos. Se investig una muestra de 100 perros sospechosos de Coronavirus canino. Los
animales se los obtuvo en todas las parroquias del cantn y de stos se tom la muestra de
heces para la prueba, se consider el sexo, edad, raza y lugar de procedencia. El mtodo para
el diagnstico de Coronavirus canino fue la prueba rpida de CPC/CCV Ag de Anigen. Se
obtuvo un porcentaje de Coronavirus canino de 32%.

Palabras clave: Diagnosticar, Coronavirus, sntomas, prueba, determinar, procedencia,

sospechosos, mtodo.

27
28
 8. SUMMARY

The present work of investigation is made in Guabo city, El Oro province, since March 25 th
until July 10th of 2013. Its given the following objectives: 1. Diagnostic Crownvirus Canine
in dogs with symptoms gastroenteries in the Guabo city through prueb of ELISA. 2. To
determine the porcentage of crownvirus canine, sueh as age, sex, race and procedence of
positive animals. 3. To work out a epidemiologic map of crownvirus canine to agree of origin
place to the positive animals. It researched a sample 100 suspet dogs with Crownvirus canine
the animals were found a lot of parishes of the city and they were took sample of heces for the
proof, it was considered the sex, age, race and precedence place the method of diagnostic of
crownvirus canine was fast proof CPC/CCV Ag of Anigen. Its achieved a percentage of
canine crownvirus of 32%.

Key words: diagnose, Coronavirus, symptoms, testing, determine, provenance, suspects,

method.

29
30
 9. BIBLIOGRAFA

ALVARADO, A. 2005. Coronavirus canino. Mxico. Recuperado el 8 de enero, 2013, del

sitio web: http://www.mx.geocities.com/arcdllum/vacunas.htm.

ANIGEN. PRODUCTOS PARA EL DIAGNSTICO DE ENFERMEDADES EN

PEQUEAS ESPECIES. 2011. Recuperado el 7 de enero, 2013, del sitio web:
http://anigenmexico.com/caninos/CPVCCVAg/

COUTO, G. y KING, C. Infeccin por Coronavirus canino. Recuperado el 9 de enero, 2013,

del sitio web: http:/espanol.petmd.com/dog/conditions/digestive/es_cdg_canine_coronavirus

DOMINGUEZ, J. 2004. Enteritis por Coronavirus Canino en la Clnica. Mxico. Recuperado

el 2 de enero, 2013, del sitio web: http://www.webveterinaria.com/merial/coronavirus.html

GETAMAPNET. EL GUABO. 2012. (Cantn Guabo)/ Provincia de El Oro. Recuperado el 5

de enero, 2013, del sitio web: http://es.getamap.net/mapas/ecuador/el_oro/_elguabo

GONZAGA, R. 2008. Diagnosticar Coronavirus canino en cachorros con gastroenteritis en la

ciudad de Machala. Tesis de titulacin. Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Facultad de Ciencias Agropecuarias. Universidad Tcnica de Machala. p 11.

31
GREENE, C. 2008. Enfermedades infecciosas del perro y el gato. Tercera Edicin. Volumen
I. Argentina. Inter-mdica Editorial. P 78-80.

GUARTAZACA, N. 2010. Presencia de Coronavirus en perros en la ciudad de Pasaje

mediante la prueba de Eliza. Tesis de titulacin. Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Facultad de Ciencias Agropecuarias. Universidad Tcnica de Machala. P. 12.

MEDICINA VETERINARIA. 2010. Coronavirus canino. Recuperado el 6 de enero, 2013, del

sitio web: http://www.veterinarioperu.com/2009/09/coronavirus-canino.html

MARTIN, M. 1993. Coronavirus canino: identificacin en Espaa. Desarrollo de tcnicas

para el diagnstico de inmunizacin. Tesis de titulacin. Facultad de Veterinaria. Universidad
Complutense de Madrid. P 25- 30

NEGRO, C. 2009. Coronavirus canino. Recuperado el 05 de enero, 2013, del sitio web:
http://www.santaelena.com.uy/uc_112_1.html

WIKIPEDIA. CANTN EL GUABO. 2012. Recuperado el 4 de enero, 2013, del sitio web:
http://es.wikipedia.org/wiki/Cant%C3%B3n_El_Guabo

WIKIPEDIA. CORONAVIRUS. 2013. Recuperado el 8 de enero, 2013, del sitio web:

http://es.wikipedia.org/wiki/Coronavirus

32
ANEXOS

33
10.1. ANEXO.- Registro diario de los animales muestreados en el cantn El Guabo, durante
la investigacin.

N Fecha Edad en Lugar de

caso muestreo meses Sexo Raza Procedencia Resultado
1 02-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
2 05-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
3 05-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
4 08-abr-13 0a6 H Mestizo El Guabo Positivo
5 10-abr-13 ms de 12 M Pastor Alemn El Guabo Negativo
6 12-abr-13 0a6 H Mestizo El Guabo Negativo
7 16-abr-13 6 a 12 H Mestizo El Guabo Negativo
8 16-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
9 17-abr-13 0a6 H Teckel El Guabo Positivo
10 18-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
11 20-abr-13 6 a 12 H Mestizo El Guabo Negativo
12 20-abr-13 0a6 M Frenchs poodle El Guabo Negativo
13 24-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
14 25-abr-13 0a6 H Mestizo El Guabo Negativo
15 26-abr-13 6 a 12 M Mestizo El Guabo Negativo
16 26-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Positivo
17 27-abr-13 ms de 12 M Mestizo El Guabo Negativo
18 28-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
19 29-abr-13 6 a 12 M Mestizo El Guabo Negativo
20 29-abr-13 0a6 H Frenchs poodle El Guabo Positivo
21 30-abr-13 0a6 M Mestizo El Guabo Positivo
22 01-may-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
23 03-may-13 ms de 12 M Pitbull El Guabo Negativo
24 03-may-13 0a6 M Mestizo El Guabo Negativo
25 08-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
26 09-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
27 11-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Positivo
28 13-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
29 13-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
30 15-may-13 0a6 H Frenchs poodle Barbones Negativo
31 16-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
32 17-may-13 0a6 M Teckel Barbones Positivo
33 17-may-13 ms de 12 M Mestizo Barbones Negativo
34 18-may-13 6 a 12 H Boxer Barbones Positivo
35 20-may-13 ms de 12 M Mestizo Barbones Negativo
36 20-may-13 0a6 H Mestizo Barbones Negativo
37 24-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Positivo
38 25-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Negativo
39 25-may-13 6 a 12 M Boxer Barbones Negativo

34
 N Fecha Edad en Lugar de
caso muestreo meses Sexo Raza Procedencia Resultado
40 26-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Positivo
41 26-may-13 0a6 M Mestizo Barbones Positivo
42 28-may-13 6 a 12 M Mestizo La Iberia Negativo
43 28-may-13 6 a 12 M Mestizo La Iberia Negativo
44 28-may-13 0a6 M Mestizo La Iberia Negativo
45 29-may-13 0a6 M Mestizo La Iberia Positivo
46 30-may-13 0a6 M Mestizo La Iberia Negativo
47 01-jun-13 ms de 12 M San Bernardo La Iberia Negativo
48 01-jun-13 0a6 H Mestizo La Iberia Positivo
49 02-jun-13 6 a 12 M Schnauzer La Iberia Positivo
50 04-jun-13 ms de 12 M Mestizo La Iberia Negativo
51 04-jun-13 0a6 M Mestizo La Iberia Negativo
52 05-jun-13 0a6 M Mestizo La Iberia Negativo
53 07-jun-13 6 a 12 M Mestizo La Iberia Negativo
54 09-jun-13 0a6 H Mestizo La Iberia Negativo
55 09-jun-13 0a6 M Mestizo La Iberia Positivo
56 09-jun-13 0a6 H Rottwailer La Iberia Positivo
57 10-jun-13 6 a 12 H Labrador La Iberia Negativo
58 10-jun-13 0a6 M Mestizo La Iberia Positivo
59 10-jun-13 6 a 12 M Mestizo Tendales Negativo
60 11-jun-13 6 a 12 H Mestizo Tendales Negativo
61 11-jun-13 ms de 12 H Mestizo Tendales Negativo
62 11-jun-13 0a6 M Mestizo Tendales Positivo
63 11-jun-13 ms de 12 M Mestizo Tendales Negativo
64 12-jun-13 0a6 H Teckel Tendales Positivo
65 12-jun-13 6 a 12 M Mestizo Tendales Negativo
66 12-jun-13 6 a 12 H Mestizo Tendales Negativo
67 14-jun-13 0a6 H Mestizo Tendales Positivo
68 14-jun-13 6 a 12 H Mestizo Tendales Negativo
69 15-jun-13 ms de 12 H Frenchs poodle Tendales Negativo
70 15-jun-13 0a6 M Mestizo Tendales Negativo
71 16-jun-13 6 a 12 M Mestizo Tendales Positivo
72 16-jun-13 6 a 12 H Mestizo Tendales Negativo
73 17-jun-13 0a6 H Mestizo Tendales Positivo
74 17-jun-13 0a6 M Mestizo Tendales Positivo
75 17-jun-13 ms de 12 M Mestizo Tendales Negativo
76 17-jun-13 6 a 12 M Mestizo Tendales Negativo
77 17-jun-13 0a6 H Frenchs poodle Tendales Positivo
78 20-jun-13 0a6 H Mestizo Rio Bonito Negativo
79 20-jun-13 ms de 12 M Mestizo Rio Bonito Negativo
80 21-jun-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Positivo
81 21-jun-13 0a6 H Mestizo Rio Bonito Negativo

35
 N Fecha Edad en Lugar de
caso muestreo meses Sexo Raza Procedencia Resultado
82 23-jun-13 0a6 M Pastor Alemn Rio Bonito Positivo
83 23-jun-13 ms de 12 H Mestizo Rio Bonito Negativo
84 23-jun-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
85 24-jun-13 6 a 12 M Mestizo Rio Bonito Negativo
86 26-jun-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
87 26-jun-13 ms de 12 M Mestizo Rio Bonito Negativo
88 28-jun-13 6 a 12 H Mestizo Rio Bonito Positivo
89 28-jun-13 0a6 H Mestizo Rio Bonito Negativo
90 29-jun-13 ms de 12 H Mestizo Rio Bonito Negativo
91 30-jun-13 0a6 M Frenchs poodle Rio Bonito Positivo
92 30-jun-13 0a6 H Mestizo Rio Bonito Positivo
93 02-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
94 02-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
95 03-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
96 07-jul-13 6 a 12 M Mestizo Rio Bonito Negativo
97 08-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Positivo
98 08-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Negativo
99 09-jul-13 0a6 M Boxer Rio Bonito Positivo
100 10-jul-13 0a6 M Mestizo Rio Bonito Positivo

36
10.2. ANEXO.- Fotografas tomadas durante la realizacin de las pruebas.

Materiales de la Prueba

Toma de la muestra de heces

37
 Mezcla de la muestra con el diluyente

Colocacin de la muestra en las ventanas de la prueba

38
Reaccin del Test

Resultado Negativo

39
 Resultado positivo a Coronavirus canino

Resultado positivo a Parvovirus canino y Coronavirus canino.

40
Frenchs Poodle mayor de 12 meses

Schnauzer de 6 a 12 meses

41