558 Hoja Tecnica Es

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B0215705 B0215706

GC Agar Base
Uso Instrucciones
Se utiliza como base nutritiva para la preparacin de los medios de - Preparacin de GC Agar Base doble concentracin:
cultivo: Thayer-Martin Medio (original y modificado) y Chocolate Suspender 8,2 g del polvo en 100 ml de agua purificada. Si a partir
Agar, permitiendo as la recuperacin de microorganismos exigen- del medio deshidratado se desea preparar Thayer Medio Modifica-
tes en sus requerimientos culturales, como por ejemplo Neisseria do, es necesario agregar 1 g de agar y 0,3 g de glucosa. Mezclar
gonorrhoeae y Neisseria meningitidis. suavemente. Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin
para asegurar la disolucin completa del medio. Distribuir en reci-
Fundamento pientes apropiados.
Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla
en partes iguales de peptona de carne y peptona de casena) es - Preparacin de solucin de hemoglobina 2%:
la fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el Suspender 2 g de hemoglobina en polvo en 100 ml de agua puri-
almidn adsorbe sustancias txicas indeseables para el desarrollo ficada de la siguiente manera: mezclar 2 g de hemoglobina con 2
de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman un siste- o 3 ml de agua purificada caliente hasta la formacin de una pasta
ma buffer y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El uniforme. Agregar gradualmente y agitando agua purificada hasta
agar es el agente solidificante. completar los 100 ml, quedando as una solucin homognea. Dis-
Este medio de cultivo puede ser utilizado como base y ser suple- tribuir en recipientes apropiados.
mentado con otros nutrientes o con antimicrobianos, logrndose
un medio mas enriquecido o selectivo segn el aditivo. En recipientes separados, esterilizar el GC Agar Base y la hemoglo-
Si se le agrega solucin de hemoglobina 2% y suplemento es- bina al 2% en autoclave a 121 C durante 15 minutos.
tril de enriquecimiento Britalex con solvente, se prepara el Agar Enfriar las soluciones estriles a 45-50C.
Chocolate Enriquecido, en el cual pueden desarrollar especies de
estreptococos, Haemophilus spp. y Neisserias. Luego, segn el medio de cultivo que se desee preparar, proceder
Si se desea un medio selectivo para la recuperacin de Neisseria de la siguiente manera:
gonorrhoeae y Neisseria meningitidis, se debe agregar adems la
mezcla antimicrobiana VCNT constituda por vancomicina, colistina, - Para preparar Chocolate Agar Enriquecido:
nistatina y trimetoprima que inhibe el desarrollo de microorganis- Agregar por cada 100 ml de GC Agar Base doble concentracin:
mos Gram positivos y Gram negativos (an el swarming de Proteus 100 ml de solucin de hemoglobina 2% y 2 ml de suplemento Bri-
spp.), y candidas. No tiene efecto inhibitorio en el desarrollo de talex con solvente (B0360021) reconstituido con 2.1 ml de solven-
Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis. te estril. Agitar suavemente y distribuir en placas de Petri estriles.

Contenido y composicin - Para preparar Thayer Martin Medio Modificado:


Cdigo B0215705: envase x 100 g. Agregar por cada 100 ml de GC Agar Base doble concentracin:
Cdigo B0215706: envase x 500 g. 100 ml de solucin de hemoglobina 2% ( ), 2 ml de su-
plemento Britalex con solvente (B0360021) reconstituido con 2,1
FRMULA (en gramos por litro) ml de solvente estril y 2 ml de suplemento V.C.N.T. con solvente
Pluripeptona....................................................................................................................15.0. (B0360521) reconstitudo con 2,1 ml de solvente estril. Agitar
Almidn ....................................................................................................................................... 1.0. suavemente y distribuir en placas de Petri estriles.
Fosfato dipotsico...................................................................................................... 4.0.
Fosfato monopotsico.......................................................................................... 1.0. Caractersticas del producto
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogneo, libre
Agar................................................................................................................................................15.0. deslizamiento.
pH final: 7.2 0.2 Medio de cultivo preparado: color mbar claro

HOJA 1 DE 2
GC Agar Base

Suplementado con hemoglobina: color marrn oscuro. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio sin inocular Sin cambios
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 C. Materiales necesarios no provistos
Medio de cultivo preparado a 2-8 C. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales segn requeri-
Procedimiento miento.
Siembra
Directa, estriando sobre la superficie del medio de cultivo. Precauciones
- Solamente para uso diagnstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
Incubacin - No utilizar el producto si al recibirlo su envase est abierto o da-
El tiempo, la temperatura, y la atmsfera de incubacin, dependern ado.
del microorganismo que se quiera recuperar. - No utilizar el producto si existen signos de contaminacin o dete-
En general se recomienda: Bacterias de fcil crecimiento: en aero- rioro, as como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
biosis, a 35-37 C durante 18 a 24 horas. - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atms- - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
fera con 5-10 % de CO2, a 35-37 C durante 24-48 horas. nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
Interpretacin de los resultados - Las caractersticas del producto pueden alterarse si no se conser-
Observar las caractersticas de las colonias. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo segn reglamentaciones vigentes.
Control de Calidad
Referencias
Chocolate Agar Enriquecido: GC Agar Base suplementado - Thayer J.D., and Martin J.E. 1966. Improved medium selective for
con Hemoglobina 2% y Britalex: cultivation of Neisseria gonorrhoeae and Neisseria meningitidis.
Public Health Rep. 81(6), 559.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO - Martin, J.E., Armstrong J.H., and Smith, P.B. 1974. New system for
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Satisfactorio cultivation of Neisseria gonorrhoeae. Appl. Microbiol. 27 (1), 802.
Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Satisfactorio - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Satisfactorio maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 Satisfactorio more, Md.
Haemophilus influenzae ATCC 49247 Satisfactorio - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
Thayer Martin Medio Modificado: GC Agar Base suplementa- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
do con Hemoglobina 2%, Britalex y VCNT : clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
De acuerdo al protocolo del CDC el control de calidad del medio Washington, D.C.
Thayer Martin para productores de medios de cultivo el ensayo que - Forbes, Sahm and Weissfeld. Bailey & Scotts diagnostic microbio-
efecta Laboratorios Britania, es el siguiente: logy, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
02/2010 - REV .00

MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Indicaciones al consumidor


Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 Satisfactorio Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 Inhibicin total o parcial Conservar el producto segn las indicaciones del rtulo.
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibicin total o parcial
Candida albicans ATCC 10231 Inhibicin total o parcial
Proteus mirabilis ATCC 43071 Inhibicin total o parcial

SMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNSTICO CDIGO N ELABORADOR ESTRIL N DE LOTE N FECHA DE LMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACINES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041

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