B0216705 B0216706

T.C.B.S. Medio
Uso Agar................................................................................................................................................15.0.
Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, pH final: 8.6 ± 0.2
Vibrio parahemolyticus y otras especies de Vibrio a partir de heces,
aguas y alimentos.
También es conocido con el nombre “Agar Tiosulfato Citrato Bilis Instrucciones
Sacarosa”, o como “Agar Selectivo para Vibrios”. Suspender 89 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
Fundamento para disolución total. Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Preparado según la fórmula desarrollada por Kobayashi, es el me- No esterilizar en autoclave.
dio de cultivo nutritivo selectivo y diferencial más adecuado para el
aislamiento de las especies de Vibrio. Características del producto
El extracto de levadura, la peptona de carne y la tripteína apor- Medio de cultivo deshidratado: color tostado claro, homogéneo, li-
tan los nutrientes para el desarrollo microbiano. La bilis de buey, bre deslizamiento.
el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora Medio de cultivo preparado: color verde azulado.
acompañante, favoreciendo el crecimiento de Vibrio spp. El cloruro
de sodio mantiene el balance osmótico y debido a su alta concen- Almacenamiento
tración también contribuye a la selectividad del medio. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
La sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el azul de Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
bromotimol y azul de timol son los indicadores de pH que en un
ambiente alcalino le otorgan al medio de cultivo el color verde- Procedimiento
azulado y viran al color amarillo en medio ácido (por utilización de la Siembra
sacarosa). El tiosulfato de sodio es la fuente de azufre y junto con Estriar la superficie del medio de cultivo.
el citrato ferrico permiten la detección de la producción de ácido Según el tipo de muestra a procesar puede realizarse la inoculación
sulfhídrico por formación de un compuesto color negro. El agar es directa en T.C.B.S. Medio, o puede ser necesario el enriquecimiento
el agente solidificante. previo en Agua Peptonada Alcalina ( ).
Se recomienda que las muestras de materia fecal, aguas y alimen-
Contenido y composición tos en los que se quieran recuperar especies de Vibrio, sean pre-
Código B0216705: envase x 100 g. viamente enriquecidas en Agua Peptonada Alcalina durante 5 a 8
Código B0216706: envase x 500 g. horas a 35-37 ºC y luego subcultivadas en T.C.B.S. Medio.
En el caso de muestras clínicas provenientes de infecciones extra-
FÓRMULA (en gramos por litro) intestinales generalmente no es necesario realizar enriquecimiento
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0. previo en Agua Peptonada Alcalina.
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0.
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. Incubación
Citrato de sodio............................................................................................................10.0. En aerobiosis, a 35-37°C durante 18-24 horas.
Tiosulfato de sodio.................................................................................................10.0.
Bilis de buey.......................................................................................................................... 8.0. Interpretación de los resultados
Sacarosa.................................................................................................................................20.0. Observar las características de las colonias.
Cloruro de sodio.......................................................................................................10.0. Microorganismos fermentadores de sacarosa: colonias amari-
Citrato férrico................................................................................................................. 1.0. llas.
Azul de bromotimol...............................................................................................0.04. Microorganismos no fermentadores de sacarosa: colonias del
Azul de timol....................................................................................................................0.04. color del medio, con centro verde.

HOJA 1 DE 2
T.C.B.S. Medio

Control de Calidad Precauciones

- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Microorganismos CRECIMIENTO Características sivo.
de las colonias - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Vibrio cholerae Satisfactorio Amarillas de 2-3 mm de ñado.
diámetro, de borde traslúcido - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Vibrio Satisfactorio Centro verde, borde traslúcido rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
parahaemolyticus - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Aeromonas Inhibido --- to.
hydrophila - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Escherichia coli Inhibido --- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 25922 establecidas por el laboratorio.
Proteus mirabilis Inhibición total Centro verde y bordes - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 43071 o parcial traslucidos va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio sin inocular Sin cambios Referencias
- Kobayashi, T., Enomoto, S., Sakazaki, R., and Kuwahara. S. 1963.
Limitaciones A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS (modified
- Realizar identificación bioquímica a las colonias presuntivas de Nakanishi´s agar). Jap. J. Bacteriol. 18: 387.
Vibrio spp. - Mac Faddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Se recomienda no realizar la prueba de la oxidasa a las colonias maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
de T.C.B.S. Medio porque pueden obtenerse resultados falsos ne- more, Md.
gativos. - August, M.J., et al. 1990. Cumitech 3A; Quality Control and Quality
- Es conveniente sembrar la muestra en paralelo con un medio de Assurance Practices in Clinical Microbiology, Coordinating ed., A.S.
cultivo nutritivo no selectivo ya que algunas cepas de Vibrio pueden Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
no desarrollar satisfactoriamente en T.C.B.S. Medio. - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
- Algunas cepas de Vibrio cholerae pueden fermentar lentamente biological Examination., Standard Methods for the Examination of
la sacarosa y observarse de color verdoso a las 24 horas de incu- Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
bación. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Algunas cepas de Proteus y Enterococos pueden crecer y obser- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
varse como colonias pequeñas. Washington, D.C.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor

Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2

IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.

LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041