CONCLUSIONES DE LA PRACTICA INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

La cromatografía es la separación de una mezcla de 2 o más componentes ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERIA

por distribución en 2 fases (móvil y estacionaria); también se utiliza como QUIMICA E INDUSTRIAS EXTRACTIVAS
medio de identificación de sustancias. El tipo de cromatografía dependerá QUIMICA ORGANICA Y POLIMEROS
de la naturaleza de la fase móvil y estacionaria. La polaridad de eluyente
determinara la efectividad de éste como disolvente en la cromatografía de Química de Hidrocarburos
capa fina. Para la cromatografía aplicada en pureza de sustancias, el Práctica 2 Cromatografía en placa fina
número de manchas notables en la cromato placa será el número de
componentes presentes en la sustancia, por lo tanto, la sustancia pura
Química Orgánica Grupo:
Alumna: García Rivera Miriam Vianey
y 2IM33
presentará 1 sola mancha. De igual manera, el No. de manchas apreciadas Polímeros
Profa: Murillo Villagrán Apolonia
sobre la cromato placa deberá ser igual al No. de componentes si el
eluyente es el correcto. Si las manchas de la cromato placa aparecen cerca INTRODUCCIÓN:
del punto de aplicación será debido a que son más polares con respecto al Los métodos cromatográficos son considerados muy eficaces en la
eluyente, y si aparecen más cercanas a la frontera del eluyente quiere separación de mezclas y purificación de sustancias.
decir que son menos polares con respecto al eluyente. Para las
El estudio de los métodos cromatográficos es muy amplio e imposible de
cromatografías realizadas se esperaría un Rf de 0,5 exactamente ya que
cubrir en su totalidad en pocas sesiones del laboratorio. Por lo tanto,
eso nos diría que se está trabajando con un eluyente ideal, pero mientras
únicamente se experimentarán las cromatografías en placa fina y columna
se tengan valores de 0,4 a 0,6 se puede decir que se está trabajando con por ser las más comúnmente empleadas.
un eluyente correcto.
La cromatografía en capa fina (CCF) es una técnica cromatográfica que
OBSERVACIONES utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta placa cromatográfica
Parte de las investigaciones aquí mostradas fueron sacadas del manual de consiste en una fase estacionaria polar (comúnmente se utiliza sílica gel)
práctica. En esta práctica se empleó la técnica de cromatografía en capa adherida a una superficie sólida. La fase estacionaria es una capa
fina para comprobar la utilidad que tiene esta técnica para determinar uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser
concentraciones, polaridad de los eluyentes, criterios de pureza de las de vidrio, aluminio u otro soporte.
muestras e identificación de sustancias. La técnica de cromatografía en Está técnica deriva de los trabajos del farmacéutico alemán Egon
capa fina es una técnica meramente analítica, ideal para identificación de Stahl (1924-1986), que la presentó en 1956.
compuestos y determinación de su pureza. Para llevar a cabo la
cromatografía en capa fina es necesario conocer los eluyentes, el tipo de
adsorbente a utilizar y los tipos de reveladores.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Harry W. Lewis & Christopher J. Moody (13 de junio de

1989). Experimental Organic Chemistry: Principles and Practice (illustrate
edition). WileyBlackwell. pp. 159-173. ISBN 978-0-632-02017-1.
2. A.I. Vogel; A.R. Tatchell; B.S. Furnis; A.J. Hannaford; P.W.G. Smith. Vogel's
Textbook of Practical Organic Chemistry (5ª edition). ISBN 0-582-46236-3.
 Desarrollo de la cromatografía CUESTIONARIO

El desarrollo de los cromatogramas en capa fina se realiza ¿Cómo se elige el eluyente para cromatografía en capa fina? Se busca un eluyente
normalmente por el método ascendente, esto es, al permitir que un en base a la sustancia a identificar o purificar, tomando en cuenta la polaridad de ella, si
se tiene una sustancia polar se elegirá un eluyente polar para que este la pueda correr
eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la acción de
con facilidad.
la capilaridad. La cromatografía se realiza en una cubeta. Para ¿Por qué se dice que la cromatografía en capa fina es un criterio parcial y no
conseguir la máxima saturación posible de la atmósfera de la total de identificación?
cámara, las paredes se impregnan del eluyente. Debido a que se llega a tener casos en los que dos muestras corren a la misma velocidad
Generalmente el eluyente se introduce en la cámara una hora antes y distancia, estas siendo diferentes, por ende, no se podrían identificar correctamente
del desarrollo, para permitir la saturación de la atmósfera. El por ello es un criterio no total de identificación.
El valor del Rf ¿Depende del eluyente?
tiempo de desarrollo, por lo general, no llega a los 30 minutos. El
Si porque el valor de Rf es calculado con la distancia que el eluyente corre
tiempo de una cromatografía cualitativa suele ser de un par de la sustancia.
minutos, mientras que el tiempo de una cromatografía preparativa ¿Qué significa que una sustancia tenga: Rf menor a 0.5, mayor a 0.5 e
puede llegar a un par de horas. igual a0.5?
Las placas pueden desarrollarse durante un tiempo prefijado, o Rf < 0.5 el eluyente es de muy baja polaridad para la separación, Rf = 0.5 el eluyente es
hasta que se alcance una línea dibujada a una distancia fija desde el el adecuado para la separación y Rf > 0.5 el eluyente es de muy alta polaridad para la
separación.
origen. Esto se hace para estandarizar los valores de RF.
¿Se usó soporte? ¿Cuál es la función de la cámara? No es necesario el
Frecuentemente esta distancia es de 10 cm, ya que parece ser la más uso de soporte en esta cromatografía. La cámara aporta tanto a la fase
conveniente para medir valores de RF. Después del desarrollo, las estacionaria como a la móvil condiciones climatológicas y ambientales
placas pueden secarse rápidamente con una corriente de aire con el fin de que se desarrolle sin problema alguno el proceso de
caliente. separación.
La mejor posición de desarrollo para un componente es el punto ¿Cuál es la composición química de la fase estacionaria y de la móvil?
La fase móvil se compone de etanol, un compuesto alcohólico conformado
medio entre el origen y el frente del eluyente, ya que permite
por dos carbonos simples con un radical OH. La fase estacionaria (papel)
separar las impurezas que se desplazan con mayor y menor se compone de celulosa, un biopolímero compuesto de moléculas de β-
velocidad. El frente del eluyente nunca debe llegar a tocar el borde glucosa.
de la placa. ¿Cómo definirías el frente y el origen? Son los intervalos donde la
medición del recorrido de cada sustancia puede ser cuantificada sin
salirse de los bordes del papel, con la diferencia de que el origen sirve
como punto de partida para determinarlas.
¿Por qué crees que no se utilizan los puntos en los extremos? Porque
si realizamos la medición a partir de ellos, podemos obtener datos con
dimensiones erróneas y afectaría al cálculo de los parámetros que
necesiten esos datos.
¿Por qué deben ser manejados con guantes? Porque las manos
secretan ácidos grasos, sudor o contienen impurezas que pueden alterar
la composición del papel al tocarlo directamente, afectando al corrimiento
de la tinta ya sea retardando o inhibiendo la separación.
 USOS Y APLICACIONES DE LA PRACTICA DESARROLLO EXPERIMENTAL
Preparación de las placas finas o cromatoplacas:
La cromatografía de capa fina es un método muy útil, rápido y
 Para preparar las cromatoplacas, tomar dos portaobjetos juntos y
barato que se puede utilizar principalmente para: sumergirlos en una mezcla previamente preparada con: silica gel en
• Identificación de alguna sustancia conocida en una mezcla por su CHCl3, en una solución sobresaturada, hasta la adquisición de unas
consistencias adecuadas para que se deje al portaobjetos en una
comparación con un patrón de la sustancia pura.
forma uniforme.
• Medir el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en  Se sumerge el portaobjetos a las mezclas absorbentes.
el cromatograma, es señal de que existen varios componentes en la  Se saca el portaobjetos y se dejan secar por separado.
muestra.  Se aplican las muestras con los microaplicadores (microtubo) y se
dejan secar.
• Obtener una medida semicuantitativa de algún componente. Pichando Preparación de la cámara cromatográfica:
la misma cantidad en la placa cromatográfica, cuanto mayor sea la mancha  Se coloca el disolvente en las cámaras, en cantidades suficientes y
obtenida en el cromatograma, la concentración de esa sustancia será necesarias para que el nivel del disolvente quede por debajo de la
mayor. aplicación en la muestra.
 Se sumergen las placas en el disolvente de la cámara.
COSTO Y BENEFICIO  Se miden los orígenes del disolvente y manchas originales (sobre las
Se realizo un gasto de $25, el beneficio fue obtenido a través de la cámaras) para hacer la medición de las distancias para obtener el Rf.
obtención del conocimiento en base a estos temas.  Se deja correr el disolvente hasta una altura de unos 0.3cm antes de la
superficie cubierta por la silica gel, teniendo cuidado de que la cámara
o frascos se encuentren tapados.
Determinación de los Rf de los compuestos  Sacar las placas y dejarlas secar.
empleados:  La muestra problema de 3 componentes (3 colorantes) se separó con
𝐴 5.0𝑐𝑚 3 disolventes problemas.
𝑅𝑓𝑎 = = = 0.9523  En base a la separación de los componentes problemas se observó la
𝑓𝑠 5.25𝑐𝑚 secuencia de colores en base a cada uno de los disolventes.
𝐵 3.9𝑐𝑚  La placa no requirió revelado, por los componentes coloridos.
𝑅𝑓𝑏 = = = 0.7428
𝑓𝑠 5.25𝑐𝑚
𝐶 2.8𝑐𝑚
𝑅𝑓𝑐 = = = 0.5333
𝑓𝑠 5.25𝑐𝑚
𝐷 1.4𝑐𝑚
𝑅𝑓𝑑 = = = 0.2666
𝑓𝑠 5.25𝑐𝑚
𝐸 0.0𝑐𝑚
𝑅𝑓𝑒 = = = 0.0000
𝑓𝑠 5.25𝑐𝑚
 Revelado de las placas: METAS:
El revelado de las placas se puede efectuar de varias formas:  Generar conocimiento sobre la cromatografía en todos sus
1- Aplicando luz ultra violeta. Este método es el más sencillo de aspectos.
revelar, únicamente se requiere contar con una pequeña
lámpara de luz ultravioleta adaptada de tal forma, que la  Generar conocimientos acerca de las distintas partes que
encenderla, ilumine solamente hacia la placa. Las manchas componen la cromatografía en capa fina.
reveladas se pueden marcar con una punta fina de lápiz.
2- Con yodo metálico. En este caso las placas con las muestras se
introducen en la cámara que contiene el yodo y se dejan  Tener un correcto conocimiento acerca de las diferencias entre
transcurrir unos minutos hasta que se hagan visibles las la cromatografía en capa fina y preparativa.
manchas de los compuestos en el estudio.
3- Vainillina en solución acida. Para revela con este método se
emplea un pequeño rociador, el cual contiene una solución de
 Obtener el conocimiento adecuado sobre los tipos de disolvente
más comúnmente utilizados por este método.
0.5g de vainillina disuelta en una mezcla fría compuesta por
80% de H2SO4 concentrado y 20% de etanol. Se observa que al
poco tiempo de finalizar el rocío de las placas comienzan a  Saber identificar el tipo de polaridad obtenida en la muestra
revelarse manchas de color violáceo. mediante la cromatografía.
4- Con ácido sulfúrico a 50%. En este cado el ácido se aplica de la
misma forma que el anterior y al finalizar dicha aplicación se  Saber identificar los tipos de cromatografía, principalmente
coloca la placa sobre un plato caliente y a los pocos minutos se cromatografía de adsorción y partición.
deben observar las manchas reveladas.
 Obtener el conocimiento correcto del manejo de sustancias
Es necesario aclarar que la aplicación de estas sustancias como
reveladoras debe realizarse en la campana de extracción y con las placas
coloridas e incoloras.
debidamente protegidas.
 Saber identificar el proceso de purificación mediante placas
Interpretación de resultados: preparativas.
Una vez reveladas las placas y determinados los Rf de interés se 
comparan entre si y de esta comparación cualitativa se puede  Saber el uso del Rf y la determinación del mismo.
inferir que:
 Generar conocimiento sobre el uso y manejo adecuado de la
 La sustancia de referencia es pura porque muestra una sola
cromatografía en capa fina, así como los factores que influyen en
mancha.
la misma.
 Las muestras problemas que son impuras revelan más de una
mancha y pueden dar idea del método de purificación a
emplear.
 Tipos de absorbentes más comúnmente utilizados en
la cromatografía:

ALCANCES: Oxido de silicio de 0.2nm. de espesor adherida en placas de

aluminio de 20 x 20cm.
 Utilizar distintas fuentes bibliográficas para la obtención de
información correcta y verifica. Oxido de silicio de 0.25nm. de espesor adherida en placas de
aluminio de 5 x 20cm.
 Realizar investigaciones tanto en libros, revistas, periódicos e Oxido de aluminio adherido en placas de plástico de 20 x 20cm.
internet.

 Poder identificar de una manera correcta, clara y adecuada la

polaridad en una sustancia mediante este método.

 Hacer uso del disolvente a emplear adecuadamente, cumpliendo

todas las medidas de higiene y seguridad.

 Tener un correcto entendimiento entre las diferencias de ambas

cromatografías, siendo las dos principales: fina y preparativa.

 Saber el uso correcto, cuando se realiza este método tanto con

sustancias coloridas e incoloras.

 Realizar una correcta medición en la muestra de la capa fina,

para así mismo realizar un correcto cálculo del Rf.

 Saber identificar las distintas características y factores de la

cromatografía en caspa fina.
 Polaridad de los solventes:
Polaridad Compuesto P.F. ºC P. en a 1 Constante OBJETIVOS:
atm. dieléctrica
25 ºC
1 Pentano -130 36 1.8  Definir el concepto de cromatografía y aplicarlo en la
2 Ciclohexano 7 81 2.0 purificación de compuestos.
3 Dioxano 12 101 2.2  Indicar en qué consiste la cromatografía de adsorción y la de
4 Benceno 6 80 2.3 partición.
5 Éter etílico -116 35 40  Explicar el concepto de polaridad en cromatografía
6 Cloroformo -64 61 5.0  Establecer la relación y la diferencia que existe entre la
Cloruro de
cromatografía en placa fina y la preparativa.
7 metileno -97 41 9.0
 Seleccionar el disolvente o mezcla de ellos para efectuar el
8 Acetona -95 56 21.0 desarrollo de la cromatografía.
9 Etanol -117 78 24.0  Emplear adecuadamente el sistema revelador en caso de
10 Metanol -98 65 33.0 trabajar con sustancias incoloras.
11 Agua 0 100 79.0  Desarrollar cromatografía en placa fina de sustancias
coloridas e incoloras.
 Purificar compuestos orgánicos mediante placas
preparativas.
 Determinar el Rf de las sustancias separadas.
 Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus
características y los factores que en ella intervienen.
 Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo
a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que
existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y
la de los eluyentes utilizados.
 Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina como
criterio de pureza e identificación de sustancias.
 CONCLUSIONES DE LA PRACTICA INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Al realizar esta práctica podemos concluir que la cromatografía es una ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERIA
buena técnica para la separación de especies químicas estrechamente QUIMICA E INDUSTRIAS EXTRACTIVAS
relacionadas en mezclas complejas, siendo por ello uno de los principales
QUIMICA ORGANICA Y POLIMEROS
métodos de separación, ya que tiene numerosas ventajas, aparte de ser
rápida, sencilla y barata, tiene también la ventaja de utilizar poca cantidad
de muestra. En la cromatografía en columna la fase estacionaria se Química de Hidrocarburos
compone normalmente de un gel de sílice o alúmina pulverizado que se Práctica 3 Cromatografía en columna
introduce en un tubo de vidrio y este se rellena con un disolvente (fase Química Orgánica Grupo:
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y 2IM33
móvil). Mientras que la cromatografía en capa fina se basa en la
preparación de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido sobre Polímeros
Profa: Murillo Villagrán Apolonia
una placa de vidrio u otro soporte. Para poder observar con mejores
INTRODUCCIÓN:
resultados la separación de los componentes de la sustancia orgánica la
mezcla fue importante experimentar con disolventes polares y no polares La cromatografía en columna es quizás el método más general,
donde en base a los resultados obtenidos se pudo observar que debido a
utilizado para la separación, a la vez que, para la purificación, de
los componentes encontrados en esta sustancia los mejores disolventes
que se pueden utilizar son los no polares, ya que ellos son capaces de diferentes compuestos orgánicos que se encuentren en estado
disolver fácilmente las moléculas con las mismas características y un gran sólido o líquido.
número de compuestos orgánicos. Se obtuvieron valores diferentes en los
valores de Rf de los compuestos de la mezcla, lo cual indica que no En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir,
estamos hablando de los mismos, si no que la muestra está compuesta el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la
distintas sustancias diferentes. cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al
exterior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el
OBSERVACIONES eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla orgánica que nos
En algunas ocasiones resulta molesto cuidar que la columna no se seque. Esto interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase
es en casos en que se use una columna muy delgada, o que el absorbente estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema.
quede muy alto y por lo tanto, el volumen disponible para el disolvente sea
pequeño. En estos casos, la dificultad se puede eliminar, si sobre la columna
se coloca un embudo de separación con el eluyente que se debe agregar. EL
embudo tendrá su llave abierta, pero estará tapado en la parte superior, de
tal forma que el eluyente solamente saldrá cuando la cola del embudo deje
de estar sumergido en el líquido de la columna.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

3. Harry W. Lewis & Christopher J. Moody (13 de junio de

1989). Experimental Organic Chemistry: Principles and Practice (illustrate
edition). WileyBlackwell. pp. 159-173. ISBN 978-0-632-02017-1.
4. A.I. Vogel; A.R. Tatchell; B.S. Furnis; A.J. Hannaford; P.W.G. Smith. Vogel's
Textbook of Practical Organic Chemistry (5ª edition). ISBN 0-582-46236-3
 Desarrollo de la cromatografía CUESTIONARIO

Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil poco ¿Cuál es la principal utilidad de la cromatografía en columna? La
importancia de esta técnica radica en: Podemos separar mezclas, por
a poco saldrán de la columna cromatográfica, y se recogen en
adsorción, partición y separación iónica. Además, esta técnica se realiza
fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las en forma descendente
que se retienen poco o nada en el absorbente, serán las primeras en ¿Qué fenómenos físicos intervienen en una columna cromatografía
salir de la columna. En cambio, las sustancias más polares, quedan que utiliza silica gel como fase fija? • Adsorción • Desorción • Dilución
retenidas por más tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario • Solubilidad
el uso de diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su ¿Cuáles son las principales diferencias entre el HPCL y una columna
cromatografía simple? • La cromatografía HPLC es más eficiente y de
polaridad para que sean arrastradas por estos. El tiempo que se
resolución que la de columna simple. • En la cromatografía de columna
necesita para hacer fluir un compuesto por la columna, se conoce simple se pude separar mezclas por adsorción, reparto, intercambió
con el nombre de tiempo de retención. iónico. • En cromatografía HPLC se pude usar distintos tipos de relleno de
la columna: • Adsorbentes de distinto grado de polaridad materiales no
Este tiempo varía, siendo característico de cada compuesto en una polares, resinas de intercambio iónicos soportes de selección por tamaño
condición cromatográfica determinada, que varían según el molecular y otros materiales especiales.
absorbente usado, el disolvente, la presión, el diámetro que tenga la ¿Cuál es el principal factor que hace que la HPLC sea mucho más
columna utilizada, etc. eficiente que una columna cromatografía simple? La eficiencia de la
columna cromatografía HPLC se debe a que la fase estacionaria está
El absorbente mayormente utilizado para las cromatografías en formada por partículas esféricas muy pequeñas y de tamaño uniforma.
columna, es el gel de sílice. A veces, en sustitución del gel de sílice, Así, se usan a menudo micro esferas con un tamaño de 5 a 10 micrones.
cuando éste es incompatible con la mezcla a cromatografiar, se Estamos operando una columna cromatografía usando como absorbente
silica gel y casi todos los compuestos se han eluido, excepto un compuesto
utilizan la alúmina o el florisil (silicato magnésico). La
que no es eluido con este solvente
cromatografía en columna puede realizarse por gravedad o a media ¿Qué cambios introducirá para poder eluirlo? Si el solvente elegido no
presión. Cuando se realiza a media presión, se conecta la cabeza de consigue eluir todas las sustancias de la mezcla es recomendable agregar
la columna a un compresor o a una línea de aire comprimido. 2 ó 3 gotas de solventes de distinta polaridad, que resultan ser más
eficientes que solventes puros.
La medida de las partículas de gel de sílice para realizar las ¿Como se puede trabajar con sustancias incoloras en una columna
cromatografías a media presión debe ser más pequeñas que en el cromatografía, sino es posible localizar las sustancias dentro de la
caso de la cromatografía por gravedad. Si en la cromatografía por columna? Podemos realizar el análisis del eluato por cromatografía en
gravedad utilizásemos un gel de sílice con un tamaño de partículas capa fina o sobre papel, por lo que se hace necesario el uso de un revelador
para la localización de las sustancias.
más pequeñas, no se produciría elución, pues se impediría el flujo ¿Que es un colector de fracciones y cuál es su principal utilidad? Es
del disolvente. un instrumento que se usa para el análisis del eluato al final de la
cromatografía. El colector de fracciones nos permite un alto grado de
Pero en cambio, si aplicamos presión, entonces debido a la fuerza si automatización de nuestro sistema de separación cromatografía,
se produciría la elución por el disolvente. aumentando la precisión, el rendimiento, así como la comodidad de
funcionamiento.
 USOS Y APLICACIONES DE LA PRACTICA DESARROLLO EXPERIMENTAL
Preparación de la columna:
 Separaciones de componentes de plantas medicinales:
 Separación de componentes de una síntesis orgánica.  Seleccionar la columna de acuerdo con la cantidad de muestra
 Separación de colorantes. por separar
 Separación e identificación de hioscina y de morfina.  Pesar la cantidad de absorbente en una relación 1:20 con
respecto a la cantidad de muestra.
 Separación de acido acético, alcohol cetilico y metil-etil cetona.
 Empacar la columna colocando en su parte inferior una capa
 Separación e identificación de los compuestos intermedios de
de algodón o lana de vidrio, a continuación, se agrega el gel de
una síntesis orgánica, por ejemplo, en la síntesis del naftaleno, sílice mezclado con hexano.
identificación de ácido ftalico, anhidrido ftalico, benceno.  Dejar reposar unos minutos con el objeto de que el absorbente
 En la producción sintética de acetaminofen, identificacion de la logre su acomodo compacto en la columna y dejar salir el
imina de la N-acetilbenzoquinona. eluyente hasta una altura mínima entre este y el nivel de la
 Identificación de levo-alfa-ácido aminoadipico, durante la silica gel para favorecer al efecto de sifón.
biosintesis de penicilina.  Proteger la superficie del absorbente con una pequeña capa de
 Identificación de 8-nitroisoquinolina, durante la síntesis de Na2SO4.
Ciprofloxacina, un antibiótico. Preparación y aplicación de la muestra:
COSTO Y BENEFICIO  Disolver 7g de la muestra problema en la mínima cantidad
Se realizo un gasto de $25, el beneficio fue obtenido a través de la posible de un disolvente no polar, en caso de que resulte
obtención del conocimiento en base a estos temas. insoluble, agregar un pequeño volumen de uno más polar, con
el objeto de poder manejar la muestra.
 Aplicar una cromatografía en placa fina para conocer el estado
inicial de la muestra problema.
 Verter la muestra a la columna, teniendo cuidado de no
deformar la superficie inicial del empaque.
 Desarrollo de la columna:
 Adicionar los disolventes en orden creciente hasta que se
observe la aparición de varias zonas coloridas en caso de que
la muestra sea colorida. En caso de tener muestras incoloras METAS:
se controla por cromatografía en placa fina  Generar un conocimiento adecuado sobre las 3 técnicas
 Recolectar el volumen que sale de la columna en pequeños cromatográficas.
frascos o matraces Erlenmeyer de 10ml.
 Evaporar el disolvente a baño maría en la campana de  Obtener conocimiento sobre el desarrollo de la cromatografía
extracción en columna ya sea con un efluyente o varios.
 Aplicar una cromatografía en placa fina a las fracciones
recuperadas de la cromatografía en columna.  Saber el uso adecuado de contrallación en una columna.
 Recuperar en un solo recipiente las fracciones que resultan
iguales a la referencia.  Identificar de manera clara y concisa las características y los
distintos factores que influyen en la misma.

 Utilizar de manera adecuada la purificación de una sustancia

contamina con un colorante.

 Identificar cada uno de sus componentes durante la

realización.

 Generar conocimiento de las tácticas de separación de las

sustancias en la columna de cromatografía.

 Realizar la separación por columna siguiendo siempre las

normas de higiene y seguridad.

 Generar conocimiento de las características y diferencias que

existen entre la cromatografía en capa fina y columna así como
los distintos factores que influyen en cada uno.
 Tipos de absorbentes más comúnmente utilizados en
la cromatografía:
Oxido de silicio de 0.2nm. de espesor adherida en placas de
aluminio de 20 x 20cm.
ALCANCES:
Oxido de silicio de 0.25nm. de espesor adherida en placas de
 Utilizar de manera adecuada distintas fuentes bibliográficas aluminio de 5 x 20cm.
con el fin de obtener el conocimiento de la cromatografía en
columna de una manera correcta y concisa. Oxido de aluminio adherido en placas de plástico de 20 x 20cm.

 Tener un correcto uso en la columna ya sea con uno o varios

efluyentes.

 Saber identificar e interpretar los distintos factores que

influyen en la realización de cromatografía en columna.

 Identificar de manera adecuada durante la realización de la

misma, las diferencias si como características que existen en
la capa fina y columna.

 Hacer uso correcto de la purificación de sustancias durante

el proceso y realización de la práctica.

 Hacer un uso adecuado del control de la separación de

mezclas durante el mismo proceso.

 Identificar de manera correcta cada característica resultante

de la cromatografía en columna.
 Polaridad de los solventes:
Polaridad Compuesto P.F. ºC P. en a 1 Constante
atm. dieléctrica
25 ºC OBJETIVOS:
1 Pentano -130 36 1.8
2 Ciclohexano 7 81 2.0  Describir las técnicas cromatográficas de: elución, análisis
frontal y desplazamiento, tomando como ejemplo la
3 Dioxano 12 101 2.2
cromatografía en columna.
4 Benceno 6 80 2.3
5 Éter etílico -116 35 40
 Desarrollar la cromatografía en columna empleando un solo
6 Cloroformo -64 61 5.0
eluyente o mezcla de varios.
Cloruro de
7 metileno -97 41 9.0
 Purificar por columna el naranja ll y controlar su separación por
8 Acetona -95 56 21.0 cromatografía en placa fina.
9 Etanol -117 78 24.0
10 Metanol -98 65 33.0  Conocer la cromatografía en columna como técnica de
11 Agua 0 100 79.0 separación de mezclas de sustancias, sus características y los
factores que en ella intervienen.

 Utilizar la cromatografía en columna para la purificación de una

sustancia contaminada con un colorante.

 Controlar con cromatografía en capa fina el proceso de

separación de mezclas por cromatografía en columna.

 Identificar los componentes en una columna para la realización

de la cromatografía.

 Diferencias las características y los factores que influyen en la

misma.