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18 26(1): 18-25, 2007 Konigsberg Fainstein 18

M

Nrf2: LA HISTORIA DE UN NUEVO FACTOR DE

TRANSCRIPCIÓN QUE RESPONDE A ESTRÉS
OXIDATIVO*
Mina Königsberg Fainstein

RESUMEN ABSTRACT
El factor de transcripción Nrf2 regula la expresión The transcription factor Nrf2 regulates the inducible
inducible de numerosos genes de enzimas destoxificantes expression of numerous detoxifying and antioxidant
y antioxidantes, mediante su unión a una secuencia es- genes. It binds to a specific DNA sequence known
pecífica del ADN conocida como ARE (de sus siglas as ARE (Antioxidant Response Element), that can
en inglés: "Antioxidant Response Element"), que pue- be activated by several electrophils and oxidant
de ser activada por diversos compuestos oxidantes y/o compounds of diverse chemical nature. Nrf2
electrófilos de naturaleza química muy diversa. La ac- activation is constitutively repressed by its binding
tividad del factor Nrf2 se encuentra constitutivamente with a citosolic protein known as Keap1 and to the
reprimida debido a su unión con una proteína citoskeleton. This interaction promotes the
citoplásmica llamada Keap1 y al citoesqueleto. Dicha permanent Nrf2 degradation by the proteosome,
unión fomenta la permanente degradación de Nrf2 por implying that the primary control of Nrf2 function
el proteosoma, por lo que el control primario de su fun-
lies on its subcellular distribution rather on its de
ción radica principalmente en su distribución
novo synthesis. It has been suggested that the Nrf2-
subcelular, más que en la síntesis de novo. Se ha suge-
Keap1 system contributes to protection against
rido que el sistema Nrf2-Keap1 contribuye a la protec-
ción contra varias patologías como el cáncer, la toxici- various pathologies, like cancer, liver toxicity and
dad hepática y la inflamación entre otras. inflammation.

PALABRAS CLAVE: Estrés oxidativo, elemento de res- KEY WORDS: Oxidative stress, antioxidant response
puesta antioxidante, Keap1, electrófilos, radicales libres. element, Keap1, electrophils, free radicals.

INTRODUCCIÓN medida al desarrollo de diversas en- muchas especies oxidantes, en par-

Los seres vivos se encuentran nor- fermedades entre las que destaca el ticular las de oxígeno y nitrógeno
malmente expuestos a un sinnúme- cáncer. Por tanto, la capacidad de (ERO y ERN respectivamente), jue-
ro de agresiones originadas por toda adaptación al estrés generado por el gan papeles importantes en diversas
clase de estímulos como las infec- medio ambiente, es un requisito in- vías metabólicas y de señalización,
ciones microbianas y virales, los dispensable para la supervivencia por lo que la presencia de estas es-
xenobióticos, las toxinas provenien- celular y de los organismos a cual- pecies es necesaria para el buen
tes de la dieta y la hipoxia. La ma- quier nivel. Ello hace imperativo que funcionamiento de las células. De
yoría de los cuales inducen la for- se desarrollen ajustes para conten- modo que para hablar de daño por
mación de moléculas oxidantes y der contra las moléculas oxidantes especies oxidantes, habrá que con-
electrófilas que tienen la capacidad y las células lo logran desplegando siderar el concepto de estrés
de dañar a las biomoléculas del or- un complejo sistema antioxidante. oxidativo propuesto Helmut Sies en
ganismo lo que contribuye en gran Sin embargo, hay que aclarar que 1985 (1). Sies sugirió que debe exis-

*Recibido: 6 de febrero de 2007 Aceptado: 6 de marzo de 2007

Departamento de Ciencias de la Salud, División de Ciencias Biológicas y de la Salud, Universidad Autónoma Metropolitana,
Iztapalapa. México D.F. Tel: 5804-4732; Fax: 5804-4727. Correo E: [email protected]
REB 26(1): 18-25, 2007 Un factor de transcripción que responde a estrés oxidativo 19

tir un balance entre las especies ga un papel importante en la sínte- activación quedó indeterminado por
oxidantes y las antioxidantes para que sis del GSH; la ferritina que partici- algún tiempo.
la célula se encuentre en homeostasis pa en el almacenamiento de fierro; Inicialmente se propuso a AP1
y que el estado de estrés oxidativo, la hemo oxigenasa 1 que cataliza el (formada por el heterodímero Jun/
que eventualmente conlleva al daño primer paso (al mismo tiempo paso Fos), como el factor de transcripción
celular, se presenta solo cuando exis- limitante) en el catabolismo de los responsable de la inducción, puesto
te un aumento de los oxidantes o una grupos hemo; etc. En total se han re- que al analizar la secuencia
disminución de los antioxidantes. portado más de 100 genes involucrados nucleotídica de ARE en el gen hu-
De lo anterior se desprende el en la respuesta antioxidante. Por lo mano de NQO1, se encontró una
hecho de que las células hayan de- que, las vías de transducción de se- secuencia similar al elemento de
sarrollado programas dinámicos para ñales que registran y activan dichas respuesta para AP1. Así mismo, el ele-
contender contra el estrés causado respuestas se han convertido en una mento de respuesta para AP1 se
por las moléculas oxidantes y trascendente área de estudio. arregla en repeticiones inversas, que
electrófilas, constituyendo el primer Entre los factores de transcrip- se separan por 3 pares de bases se-
grado de protección contra los ción que se activan por ERO y ERN guidas por una caja GC, lo cual co-
xenobióticos. Al respecto se han destacan el factor nuclear κ B (NF incide con los reportes de otros pro-
descrito mecanismos que promueven κB), la proteína activadora 1 (AP1) motores para diversos genes. Por
la reducción de las ERO y ERN o y los factores relacionados al factor todo esto, AP1 parecía ser un can-
bien estimulan su detoxificación en nuclear eritroide-2 (NF-E2) conoci- didato natural para la activación
dos fases iniciales. En la fase I, en la dos como Nrfs (del inglés: Nuclear transcripcional de los genes que codi-
cual participan enzimas que metabolizan Factor Erythroid 2-related factor). fican para las enzimas antioxidantes
carcinógenos y xenobióticos (princi- Los Nrfs son factores recientemen- y de respuesta a xenobióticos. Sin
palmente enzimas de la familia de los te descubiertos y poco conocidos, embargo, el análisis mutacional reveló
citocromos P450), y llevan a cabo por lo que esta revisión estará enfo- que ARE es una región amplificadora
reacciones de oxido reducción que cada a describir su regulación y ac- o "enhancer" tipo cis, con una secuen-
introducen o exponen grupos funcio- tivación, en particular la de Nrf2, ya cia definida como 5'-TGACnnnGCA-
nales en dichas moléculas (2). Por que su mecanismo de acción es dis- 3', con poca afinidad por Jun/Fos. Ello
otro lado, las reacciones de fase II, tinto de la vía empleada por NFκB. demostró que ARE es un elemento de
son las que contienden con las ac- respuesta independiente del elemento
ciones que ocurrieron durante la EL ELEMENTO DE RESPUESTA de respuesta de AP1, y que para el
fase I, reducen la electrofilicidad de ANTIOXIDANTE ARE caso de NQO1 y otros genes rela-
los metabolitos carcinógenos y La inducción coordinada de los cionados con la respuesta de fase
xenobióticos modificados mediante genes para las proteínas de fase II II, es el elemento ARE y no el de
su conjugación enzimática con protege a las células contra el daño AP1 el responsable de la inducción.
ligandos endógenos, como pueden generado por el estrés oxidativo. El
ser el glutatión (GSH) y el ácido análisis genómico de las secuencias EL FACTOR Nrf2
glucurónico (3). de sus promotores ha revelado que El origen del factor Nrf2 está rela-
Algunas de las enzimas que parti- coinciden en una secuencia especí- cionado con los estudios de la pro-
cipan en la fase II son la flavoproteína fica de unión llamada ARE (por sus teína NF-E2, que en el de ratón con-
NADPH:quinona oxidorreductasa 1 siglas en inglés Antioxidant Response tiene 373 aminoácidos y una aparen-
(NQO1) que reduce a las quinonas Element), que puede ser activada te masa molecular de 45 kDa, por lo
con dos electrones promoviendo su por diversos compuestos oxidantes que a veces se le ha denominado
detoxificación; la glutatión S- y/o electrófilos de naturaleza quími- p45. NF-E2 se expresa únicamente
transferasa (GST) que conjuga ca diversa (ej. aceptores de Michael, en células del tipo eritroide o
electrófilos hidrofóbicos y ERO y difenoles, quinonas, arsenicales megacariocitos. Se une a un sitio de
ERN con GSH; las UDP-glucuronosil trivalentes, metales pesados, etc) (3, reconocimiento parecido al de
transferasas que catalizan la conjuga- 4). El hecho de que la activación de AP1(GCTGAGTCA) y regula la
ción del ácido glucurónico con ARE se lleve a cabo por moléculas expresión de genes de globina tejido
xenobióticos y drogas para su excre- tan distintas, determinó la poca pro- específicos. NF-E2 funciona como
ción; la hidrolasa epóxica que inac- babilidad de que su mecanismo de heterodímero junto con las proteínas
tiva a los epóxidos; la γ-glutamil activación fuera del tipo ligando-re- Maf pequeñas (muscle aponeurotic
cisteina sintetasa (γ-GCS) que jue- ceptor, por lo que el mecanismo de fibrosarcoma).
20 Konigsberg Fainstein M

NTR BTB IVR DGR CTR

Keap1

Unión C257 C613

S104 C288 NES
CuI3
C151 C273
C297

K44,K50, K52,K53,K56,K64,K68
S40

Motivo DLG Motivo ETGE

K KKKK KK
C506
NES
NLS
Nrf2
Neh2 Neh4 Neh5 Neh6 Neh1 Neh3

CNC-bZip

Figura 1. Dominios de interacción entre Keap1 y Nrf2.

Nrf2. El dominio Neh2 que se ha propuesto como sitio de unión a Keap1 mediante los motivos ETGE y DLG. Cabe aclarar que el motivo DLG
se encuentra en la región hidrofóbica, las letras D, L y G son los símbolos de una letra de los aminoácidos ác. aspártico, leucina y glicina
respectivamente; mientras que el motivo ETGE está formado a su vez por los aminoácidos ác. glutámico, treonina, glicina y ác. glutámico.
En el dominio Neh2 también se encuentran siete residuos de lisina (K) que son importantes para su ubiquitinación y degradación (K44,K50,
K52,K53,K56,K64,K68).
Keap1. El dominio DRG provee el sitio de unión a Nrf2 y a actina, mientras que IVR contiene a los residuos de cisteína ( C) capaces de oxidarse
y registrar el estado oxidativo de la célula (C151, C257, C273, C288, C297). Cul3 es la ligasa E3 que sirve de adaptador para unirse al
proteosoma.
.

Al intentar aislar al factor de La primera evidencia del papel agentes carcinogénicos y de protec-
transcripción de la región de control de Nrf2 en la protección contra el ción contra el estrés oxidativo, en
del locus del gene de ß-globina, estrés oxidativo proviene del estu- particular los genes de fase II como
usando secuencias repetidas de NF- dio de Venugopal y Jaiswal en 1996 NQO1, GCL, GST, HO-1, antes
E2/AP1 como sitio de reconocimien- (7), en el que se demostró que la mencionados (8). Estudios más re-
to en levaduras, se encontraron 2 sobreexpresión del cDNA de Nrf1 y cientes han demostrado que Nrf2
proteínas muy similares a NF-E2, las Nrf2 aumentaba la expresión e in- también contribuye a la actividad de
cuales fueron denominadas como ducción de NQO1 en respuesta a proteosoma 26S, todo lo cual con-
Nrf1 (66 kDa)(5) y Nrf2 (68 antioxidantes y xenobióticos. Ade- firma la crítica participación de Nrf1
kDa)(6), y posteriormente se encon- más los autores reportaron que Nrf1 y Nrf2 en la protección contra el
tró un tercer factor, Nrf3. y Nrf2 regulaban positivamente a estrés oxidativo y los xenobióticos.
Las Nrfs pertenecen a una fami- ARE, mientras que c-Fos y Fra1 lo
lia de proteínas básicas con un ca- hacían de manera negativa. EL PAPEL DE Keap1
racterístico "zipper" o cierre de El papel de Nrf2 se confirmó En contraste con NF-E2, Nrf2 se
leucinas (bZip) en la región C-ter- cuando se obtuvieron los primeros expresa de manera constitutiva en la
minal. La región básica corriente ratones génicamente modificados y mayoría de las células, de modo que
arriba de bZip es la responsable de carentes de este factor (Nrf2 -/-). su actividad se mantiene estricta-
la unión al ADN. Mientras que la Los ratones Nrf2 -/- tuvieron un de- mente regulada. En otras palabras,
región acídica al parecer se requie- sarrollo aparentemente normal, por la célula debe conservar un deter-
re para la activación transcripcional. lo que se descartó que Nrf2 fuera minado estado redox para permane-
Así mismo poseen una región esencial para la eritropoyesis cer en homeostasis, un cambio en
homóloga a la proteína "cap´n´collar" murina, el crecimiento o el desarro- dicho estado puede modificar la ac-
(CNC) de Drosophila, altamente llo. No obstante, estos ratones no tividad de diversas enzimas y facto-
conservada entre las Nrfs, cuya fun- podían inducir la expresión de los genes res de transcripción. Por lo que Nrf2
ción aún se desconoce (Fig.1). responsables de la detoxificación de no se encuentra libre y activo todo
REB 26(1): 18-25, 2007 Un factor de transcripción que responde a estrés oxidativo 21

el tiempo, sino únicamente cuando les dos se consideran como domi- el citosol y se ha reportado que
se generan condiciones de estrés nios canónicos. El primero de ellos Keap1 se asocia al mismo tiempo
oxidativo. es el dominio BTB/POZ (Bric-a- con el citoesqueleto. Al parecer
Aun cuando ha sido relativamente brac, tramtrack, broad-complex/ Keap1 forma un multi-complejo es-
sencillo encontrar niveles constitu- poxovirus zinc finger) que es un tructural en el cual comparte sus lá-
tivos del ARNm para Nrf2, ha re- motivo evolutivamente muy conser- minas-β tanto con Nrf2 con los fi-
sultado difícil detectar a la proteína vado para interacciones proteína- lamentos de actina. Todas estas ob-
madura, sugiriendo su rápida degra- proteína y se encuentra presente en servaciones indican que el complejo
dación dentro de la célula. La vida proteínas que unen actina y en fac- Keap1-Nrf2 se forma y se retiene
media de Nrf2 es muy corta y se ha tores de transcripción con dedos de en el citosol mediante interacciones
estimado en un tiempo menor de 20 zinc. Además se sabe que forma con el citoesqueleto. Estudios in vitro
minutos en macrófagos y en varias lí- complejos con otros dominios BTB usando Keap1 murina recombinante
neas celulares. El uso de inhibidores (Fig. 1). y el dominio Neh2 indicaron que el
del proteosoma indica que la degra- El otro dominio conservado se complejo Keap1-Nrf2 se forma en
dación de Nrf2 ocurre mediante la conoce como Kelch y su nombre una proporción de 2:1. Posteriormen-
vía de ubiquitinación y reconocimien- proviene de su semejanza con la pro- te se observó que Keap1 se encuen-
to del proteosoma (9). Todo parece teína reguladora Kelch de Drosophila tra como homodímero y de esta ma-
indicar que la célula sintetiza y de- donde se identificó por primera vez. nera es como se une a un Nrf2, me-
grada a Nrf2 de manera sistemáti- Este motivo aparece repetido seis diante dos sitios de reconocimiento
ca, por lo que el control primario de veces tanto en Kelch como en con diferente afinidad en el dominio
su función radica principalmente en Keap1, por lo que es común encon- Neh2 (los motivos DLG, baja afini-
su distribución subcelular, más que trar a Keap1 dentro de la clasifica- dad, y ETGE, alta afinidad, conoci-
en la síntesis de novo (10). ción de la superfamilia de proteínas dos como enlace tipo pestillo y bisa-
Se ha reportado que las Nrfs tie- con repeticiones de dominios Kelch. gra respectivamente). El reconoci-
nen seis dominios conservados aso- La repetición de motivos es la que miento por los dos sitios tiene im-
ciados a su regulación negativa, los da lugar a la estructura de hélice-β, portancia fisiológica, ya que se ha
cuales han sido denominados como y es a través de este dominio que se demostrado que la deleción del mo-
Neh (Nrf2, ECH [chicken Nrf2] une con el dominio Neh2 de Nrf2. tivo DLG (con una afinidad dos ór-
homologous domain) (Fig. 1). En El dominio Kelch es a veces nom- denes de magnitud menor que
Nrf2, estos dominios están localiza- brado también como dominio de re- ETGE) obstaculiza la ubiquitinación
dos en la región N-terminal, y se ha peticiones de doble glicina (DGR) (9- dependiente de Keap1 y la degrada-
encontrado que al eliminar al domi- 11). ción por el proteosoma (10, 12)
nio Neh2 la actividad del factor se Los otros tres dominios de Keap1 (Fig. 2 A).
incrementa, proponiendo a dicho son: la región N-terminal (NTR), la
dominio como el sitio de interacción región C-terminal (CTR) y la región REGULACIÓN DE Nrf2
para unirse al represor en la célula. de intervención (IVR), la cual se dis- Varias vías de transducción de se-
Un detallado análisis de la actividad tingue por su alto número de resi- ñales, como por ejemplo la respues-
de Nrf2 usando dos sistemas de duos de cisteína. De hecho, se sabe ta anti-inflamatoria o contra la
hibridización en levadura, llevaron a que en la proteína Keap1 murina hipoxia, utilizan mecanismos
la identificación de la proteína existen 25 residuos de cisteína, represores o degradadores de sus
Keap1 (Kelch-like ECH- associated mientras que la humana contiene 27. factores de transcripción. Tal es el
protein 1) (Fig. 1), quien suprime Se ha propuesto que nueve de esos caso del factor nuclear NF-κB que
hasta en un 80% la translocación residuos tiene la capacidad de reac- media la expresión de citocinas,
nuclear de Nrf2 y por lo tanto la cionar puesto que están ubicados quimiocinas, moléculas de adhesión
actividad transcripcional de Nrf2. cerca de aminoácidos básicos, lo e inflamación. NF-κB se encuentra
Esta interacción ha sido confirmada cual disminuye su pKa y aumenta su unido a su inhibidor (IκB); este a su
in vitro y en sistemas celulares de reactividad. vez necesita fosforilarse (por IKK)
mamíferos. Estudios posteriores han demos- para ser degradado vía el proteosoma y
La proteína Keap1 murina está trado que la sola interacción de liberar a NF-κB. Otro ejemplo es el
formada por 624 aminoácidos con Keap1 (por medio del dominio del factor inducible de hipoxia (HIF-
una masa molecular de 69 kDa, y Kelch) con Nrf2 (vía Neh2) es in- 1α), que se requiere para transcri-
consta de cinco dominios, de los cua- suficiente para mantener a Nrf2 en bir genes necesarios para la adapta
22 Konigsberg Fainstein M

ción a la hipoxia a corto y largo plazo, C u I3

como genes para angiogénesis, A
eritropoyesis, etc. Durante la normoxia
HIF-1α es constantemente destruido
por el sistema del proteosoma y la de- B TB B TB
gradación por esta vía depende de
C is C is
la hidroxilación diferencial en cier- C is
C is
tas prolinas y asparaginas conserva- IV R u b iq u itin a c ió n IV R C is
C is
das.
U BQ
En estos dos modelos, tanto HIF- U BQU B Q
UBQ
1α como IκB, requieren de modifi- U BQ

caciones post-transcripcionales para Keap1 DGR UBQ

UBQ
K e a lc h
UBQ
ser reconocidos por el proteosoma, UBQ
UBQ
en particular por la ligasa E3. Di- K KKKK KK
chas modificaciones son el resulta- Neh2
N rf2
do de estímulos externos, que cuan-
do son correctamente reconocidos M o tiv o D L G M o tivo E TG E
por la célula, desencadenan una cas-
cada de eventos que conllevan a la Degradación vía proteosoma
D e g ra d a c ió n v ía p ro te o so m a
hidroxilación (HIF-1α) o a la fosforilación
(IκB). En el caso de la respuesta
inflamatoria, se induce la fosforilación Oxidantes
y degradación de IκB, únicamente y/o Electrófilos
durante el tiempo en el cual se re- B C uI3
suelve el evento inflamatorio. Por el
contrario, la señal para la degrada-
ción de HIF-1α es permanente y el
acontecimiento que detiene la degra- BTB BTB
dación y permite su activación es la
O x-Cis Cis-O x
caída de los niveles de oxígeno de la
O x-Cis Cis-O x
célula. Esto se debe a que durante IVR IVR
O x-Cis C is-O x
este momento el oxígeno sería insu-
ficiente para poder hidroxilar los re-
siduos de prolina y asparagina, por
lo que la molécula ya no sería reco- Keap1 DG R DG R
nocida por el proteosoma.
A diferencia de estos ejemplos,
es interesante notar que la degrada- Disociación del
ción de Nrf2 es un evento constitu- K KK KK KK complejo Nrf2-Keap1
tivo que no requiere ninguna modifi- Nrf2 DLG
ETG E N eh 2
cación post-transcripcional del
Ser
sustrato y se ha sugerido que esto
puede deberse a que Keap1 funcio- Translocación PKC
na como un adaptador de sustratos al núcleo O /E
al proteosoma.
En cuanto al mecanismo de de- Figura 2. Modelo de la activación de Nrf2. (Modificada de la referencia 9).
A. La homodimerización de Keap1 facilita la interacción de Cul3 con los dominios BTB e IVR,
gradación de proteínas por el lo cual induce la ubiquitinación de los residuos de lisina de Nrf2 y promueve su degradación
proteosoma, hay que comentar que vía el proteosoma.
su selectividad y especificidad es- B. La presencia de agentes oxidantes y/o electrófilos oxida los sulfhidrilos de las cisteínas en el
dominio IVR de Keap1, promoviendo la disociación del complejo Nrf2-Keap1. Los oxidantes
tán dadas por una proteína modifi- y/o electrófilos también inducen la fosforilación del residuo de serina 40 de Nrf2, y todos
cadora de 76 aminoácidos llamada estos eventos culminan en la eventual translocación de Nrf2 al núcleo.

.
REB 26(1): 18-25, 2007 Un factor de transcripción que responde a estrés oxidativo 23

ubiquitina (UBQ) que se pega a las la transformación estructural en dimerizar con las proteínas Maf pe-
proteínas que se van a degradar. Las Keap1 y la liberación de Nrf2. Aun- queñas (MafG, MafK y MafF), con
proteínas ubiquitinadas (o poli- que se ha sugerido a la cisteína 183 las Maf grandes (c-Maf) o con otras
ubiquitinadas) son reconocidas por como un posible candidato, o bien las proteínas bZIP como c-Fos, Fra1,
un complejo de proteasas conocido cisteínas 273 y 288. En general se p45-NF-E2, Bach1 y Bach2.
como proteosoma 26S que desdobla han propuesto 7 residuos de cisteína Existen una gran cantidad de es-
y digiere a las proteínas. El proceso cuyos tioles se oxidan o se modifica tudios que tratan de esclarecer la
de poli-ubiquitinación y reconoci- covalentemente permitiendo la diso- contribución de las proteínas Maf
miento requiere de la participación ciación del complejo Nrf2-Keap1. pequeñas a la regulación de genes
de varias enzimas: las E1 para la ARE, sin embargo, a la fecha no se
activación de la UBQ, las E2 para OTRAS FORMAS DE REGULA- han encontrado diferencias funcio-
la conjugación de la UBQ y las E3 CIÓN DE Nrf2 nales entre las 3 proteínas Maf pe-
para su unión. Además de la oxidación directa o la queñas. Se ha llegado a la conclu-
Existen una gran cantidad de modificación covalente de los gru- sión de que las proteínas CNC como
ligasas E3 en los organismos pos tioles en Keap1, la actividad de Nrf2, requieren asociarse a las pe-
eucariotes y destaca la familia de la proteína Nrf2 puede ser modula- queñas Maf de manera obligatoria
ligasas denominadas "Cullin-based" da por modificaciones post- para lograr unirse al sitio promotor
(Cul) que juegan un papel importan- traduccionales, como pueden ser específico de ARE. Una interpreta-
te como andamios o adaptadores. Se fosforilaciones en serinas y treoninas ción de este hecho es que las pe-
ha demostrado que Keap1 es un por diversas cinasas como queñas Maf podrían contribuir tanto
adaptador que une a Nrf2 con la fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K), a la activación transcripcional como
ligasa Cul-3 (13). De manera que en proteína cinasa C (PKC), la cinasa a la represión dependiendo de su
este caso la activación de Nrf2 y su del N-terminal de c-Jun (JNK) y la compañero en el heterodímero (pro-
translocación al núcleo dependen proteína cinasa regulada por señales teínas CNC o Bach). No obstante,
directamente de su disociación de extracelulares (ERK). La fosforilación se ha documentado que las pequeñas
Keap1, que debe ser fomentada por por estas enzimas al parecer facilita Maf también forman homodímeros que
el estrés oxidativo (Fig. 2B). la disociación de Nrf2 de Keap1 y su actúan como competidores represi-
Por otro lado y de manera muy posterior translocación. También se vos de los heterodímeros CNC-pe-
interesante, se ha encontrado que ha encontrado que la proteína cinasa queñas Maf (15).
varios inductores de la vía mediada p38 de la familia de las proteínas En resumen, aunque al parecer
por ARE poseen la particularidad activadoras de mitógeno (MAP) la asociación con las pequeñas pro-
química de interactuar con grupos puede tanto activar como inhibir la teínas Maf es un evento importante,
sulfhidrilos, ya sea por oxidación o translocación nuclear de Nrf2 de- su funcionalidad in vivo aún no ha
por alquilación. Esto sugiere que los pendiendo el tipo celular del que se quedado bien entendida.
grupos sulfhidrilos reactivos dentro trate (14) (Fig. 3).
de estas proteínas podrían actuar Como respuesta al estrés LA INDUCCIÓN DE Nrf2 COMO
como sensores para la activación de oxidativo, la cascada de señalizacio- MOLÉCULA QUIMIOPROTEC-
la vía ARE. De modo que el alto nes mediada por PI3K produce la TORA
contenido de cisteínas en Keap1 lo despolimerización de los microfilamentos Todo el conocimiento generado a
señala como un candidato excelen- de actina, facilitando la translocación partir de la ciencia básica ha con-
te para identificar estos inductores. nuclear de Nrf2. Además, PI3K pue- vergido en una gran cantidad de es-
De esta manera, la proteína Keap1 de también fosforilar a la proteína fuerzos dirigidos a proporcionar nue-
tendría una función dual, por un lado β de unión al amplificador CCAAT vas estrategias para prevenir el cán-
ser un adaptador de la ligasa Cul-3 (C/EBP ), que a su vez se transloca cer. A la estrategia basada en la in-
para la degradación de Nrf2 y al al núcleo y se une a la secuencia tervención específica que incide so-
mismo tiempo un sensor de estrés CCAAT del elemento de respuesta bre las diferentes etapas que pro-
oxidativo (12). a xenobióticos (XRE) de manera mueven el cáncer se le ha denomi-
Aún no se ha determinado con paralela a la unión de Nrf2 al ele- nado quimioprevención. Puesto que
certeza cuales son las cisteínas que mento ARE, potenciando la respues- las enzimas de fase II que metabolizan
se modifican como respuesta a los ta celular (3). xenobióticos son las responsables de
inductores de estrés y electrófilos, Una vez que Nrf2 ha logrado la eliminación o inactivación de agentes
que son las responsables directas de translocarse al núcleo, puede carcinógenos y otros tóxicos, una
24 Konigsberg Fainstein M

Inductores de estrés
electrófilos

SH SH S S

Keap1 Keap1
Ro c1
N rf2 E2
UBQ
P
N rf2
Proteínas
cinasas citosol
P
N rf2 M af
O tras
núcleo Enzim as A ntio xid a n tes
D estoxifica ció n de ele c tró files
proteínas
M e ta b olism o del G SH
P A n ti-infla m a ción
N rf2 M af R econo cim ie nto de d añ o a A D N
A c tivid a d d e p ro te o som a
A RE
Figura 1. Efectos transcripcionales de Nrf2. Cuando Nrf2 se disocia de Keap1 y se transloca al núcleo forma heterodímeros con las pequeñas
proteínas Maf (Maf), lo cual facilita su interacción con las regiones ARE del ADN y la consecuente transcripción de genes antioxidantes y enzimas
de fase II.

aproximación racional de quimiopro- abeja) y la cúrcumina que es el prin- 15d-PGJ2 se une directamente a Keap1
tección sería estimular o facilitar la cipio activo del polvo de cúrcuma, formando un aducto covalente y acti-
detoxificación de xenobióticos al au- un ingrediente esencial del curry. vando de esta manera a Nrf2. El óxi-
mentar tanto la expresión como la ac- Por lo que últimamente se ha reco- do nítrico (NO) es otro inductor de
tividad de las enzimas anatioxidantes y mendado incluir una mayor cantidad Nrf2 y tiene una gran diversidad de
de fase II. de productos vegetales en la dieta y funciones relacionadas con la
De manera que se ha sugerido, que disminuir los productos animales con vasodilatación, la inflamación y la
algunos de los inductores específicos la perspectiva de mejorar las condi- apoptosis. La participación de
de Nrf2 podrían funcionar como bue- ciones de salud del organismo (16). inductores endógenos también se ha
nos agentes quimioprotectores contra sugerido en los fenómenos de recu-
ERO/ERN y agentes carcinogénicos. OTROS INDUCTORES DE Nrf2 peración de heridas en la piel (4).
Se han encontrado una gran cantidad Además de los inductores exógenos,
de compuestos, tanto sintéticos como también algunas sustancias endógenas CONCLUSIONES
provenientes de la dieta, que activan pueden servir como moléculas La relevancia del factor Nrf2 en la
de manera eficiente a Nrf2. Entre señalizadoras que activan a Nrf2. prevención de la toxicidad por
ellos están los inductores derivados de Entre ellas se encuentran las carcinógenos y xenobióticos ha sido
origen vegetal que incluyen a los prostaglandinas, en particular la 15- plenamente documentada. Ahora se
sulforafanos que se encuentran en el desoxi-Δ12,14-prostaglandina J2 (15d- reconoce que la activación de Nrf2
brócoli, el 6-metilsulfinilhexilo en el PGJ2), sintetizada a partir del ácido en un paso primordial en la inicia-
rábano japonés wasabi (Wasabia araquidónico por acción de la enzi- ción del la respuesta contra los di-
japónica), el ester fenetilo del ácido ma ciclooxigenasa (COX), y que se versos estímulos a los que están ex-
caféico (CAPE, un componente sabe que es un potente inductor de mo- puestas las células y la carencia de
fenólico del propolio de la miel de léculas de fase II. La prostaglandina este factor conlleva a diversas condi-
REB 26(1): 18-25, 2007 Un factor de transcripción que responde a estrés oxidativo 25

ciones patológicas entre las que des- que perder de vista que la activación ción de Nrf2 y su asociación con la
tacan la susceptibilidad a químicos constitutiva de Nrf2 debida a muta- proteína Keap1 en respuesta a los di-
carcinogénicos, la hepatotoxicidad ciones en Keap1 es una característi- versos estímulos, antes de intentar
aguda post-medicación, la ansiedad ca que se ha observado en células de cualquier tipo de manipulación
respiratoria después de la ingesta de cáncer de pulmón, sugiriendo que la terapeútica.
conservadores en los alimentos, el in- expresión inducida y constante de los
cremento de los aductos en el ADN genes activados por Nrf2 favorece la Agradecimientos. La autora quiere
por exposición a químicos, etc. supervivencia celular y la prevalencia agradecer al Dr. Luis Enrique Gómez
Se ha sugerido que el incrementar de células de cáncer. Quiroz por sus atinados comentarios
la actividad de Nrf2 pudiera llegar a Por lo tanto queda clara la impor- y sugerencias al manuscrito.
ser un método prometedor para com- tancia de analizar y comprender los
batir el cáncer. Sin embargo, no hay mecanismos de regulación y activa-

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