GUIA 5. Enzimas
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PRÁCTICA N°5
ACTIVIDAD ENZIMATICA
1. OBJETIVOS
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
Las enzimas son catalizadores biológicos que aceleran las reacciones metabólicas de los
seres vivos. Existe al menos una enzima diferente por reacción catalizada, lo que
representa miles de enzimas en un mismo organismo. Las hay extracelulares e
intracelulares.
La estructura terciaria es primordial para la catálisis. Permite la formación del sitio activo
ya que aproxima los aminoácidos que lo constituyen. Esta conformación juega a la vez un
rol importante en la protección del sitio activo, y se adapta con exactitud al substrato.
La reacción enzimática in vivo o in Vitro puede inhibirse utilizando inhibidores que pueden
ser o no ser análogos estructurales de los verdaderos substratos de la enzima.
De acuerdo a la complejidad de los complejos que forman en presencia de la enzima y/o
del substrato, y de la modificación cinética que generen, los inhibidores son calificados
como competitivos, incompetitivos, no competitivos o mixtos. En presencia de una enzima
Universidad de la Amazonia
Facultad de Ciencias Básicas
BIOQUIMICA
Programa de Química
INGENIERIA DE ALIMENTOS
(E) y su sustrato (S), un inhibidor (I) puede formar complejos binarios complejos EI o
ternarios (ESI). Solo el complejo (ES) es productivo.
3. TRABAJO PREVIO
4.2 Reactivos
Cada grupo debe llevar a la práctica los siguientes tipos de muestras: zanahoria, papa,
manzana, levadura y rábano.
Cantidad Reactivo Descripción
5 mL Agua oxigenada Puro
5 mL Fehling A -----
5 mL Fehling B ------
5 mL Metabisulfito de sodio 1%
5 mL Lugol ----
8 mL Solución de almidón Solución al 5 %
4 mL HCl Concentrado
3 grs Sacarosa Sólido
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5. DESARROLLO EXPERIMENTAL
Corte dos trozos de zanahoria y dos trozos de papa, introduzca cada muestra en un tubo
de ensayo, ponga 3 ml de agua destilada y ponga a hervir un tubo con zanahoria y otro
tubo con papa en un baño maría durante 15 minutos, pasado este tiempo deje enfriar el
tubo, retire el agua y adicione 10 gotas de peróxido de hidrógeno (H2O) a cada tubo,
observe y registre lo observado en la siguiente tabla:
Deje los tubos en reposo durante 30 minutos y adicione a los tubos 1,3 y 5; 0,5 mls
reactivo de Fehling A y 0,5 mls de Fehling B y a los tubos 2,4 y 6 lugol. Reporte las
observaciones en la siguiente tabla:
Sobre una caja de Petri ponga 2 trozos de manzana y rábano sin hervir, y sobre otra
ponga 2 trozos de cada uno pero hervidos. Enseguida, sumerja 2 trozos de manzana y
rábano sin hervir en un tubo de ensayo con solución de metabisulfito sódico. Haga lo
mismo con 2 trozos de manzana y rábano hervidos.
6. RESULTADOS
7. PREGUNTAS
7.1 ¿Qué tiene que ver la desnaturalización de las proteínas con esta práctica?
7.2 ¿En qué pruebas se puede evidenciar la desnaturalización de las enzimas?
7.3 Mediante un diagrama explique cómo actúa la glucosidasa de las levaduras sobre la
sacarosa.
7.4 ¿Químicamente qué es el metabisulfito de sodio y que efecto tiene sobre las polifenol
oxidasas?
7.5 ¿Qué aplicaciones industriales tiene este compuesto?
8. REFERENCIAS