Presentación I PDF

Ingeniería de
Bioprocesos
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Ingeniería de Bioprocesos
Introducción a los Bioprocesos
El objetivo del área de bioproceso es lograr cada vez mayores
productividades y rendimientos. No obstante, en las últimas décadas las
necesidades de diseño de bioprocesos requieren de nuevos factores
que involucren algún componente biológico con el manejo sustentable
de las materias primas y desechos, como la obtención de antibióticos,
vacunas, aminoácidos, biocombustible y en particular el manejo de
biorremediación y el tratamiento de efluentes líquidos y gaseosos
contaminados y la biolixiviación
HJP 2
Bioprocesos
Es todo proceso industrial que involucra la manipulación de
organismos vivos o sus componentes celulares para proveer
bienes o servicios.
Bienes:
(antibioticos, hormonas,
fermentos, vacunas, acidos
organicos, amino acidos,
biocombustibles, biomasa,
etc.)
Servicios:
(biorremediacion,
biolixiviacion, tratamiento de
efluentes).
HJP 3
Bioprocesos
HJP 4
Biotransformaciones
Moléculas Sencillas
Son los procesos mediante los cuales determinados SUSTRATOS
BIOPROCESO (nutrientes) son transformados por acci6n biologica (microorganismos,
celulas, tejidos) en BIOMASA y diversos PRODUCTOS
Biocatalizador
Glucosa + amonio + sales + oxigeno BIOMASA + PRODUCTOS + calor

Moléculas sencillas Moléculas complejas
Fuentes de carbono y energia, fuente de Antibi6ticos, drogas, vacunas, efluente
Nitr6geno y sales tratado, vitaminas, acidos organicos,
aminoacidos, proteinas, hormonas,
Son los procesos en los que sustratos naturales o sinteticos

BIOTRANSFORMACIÓN
son MODIFICADOS por medio de una Actividad Enzimática
Enzimas,
células
inmovilizadas
Sustrato + agua Sustrato modificado

Moléculas complejas Moléculas sencillas
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Almidon Glucosa Fructosa
Caracteristica
Uso de un catalizador
Pueden ser, enzima, microorganismos, células vegetales,
células animales, células insecto, hongos filamentosos, algas
plantas animales.
Uso de un Biorreactor:
La reacción ocurre en forma controlada
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Esquema de un proceso Biotecnológico
HJP 7
Aspectos básicos: Proceso Biotecnológico
Downstream
Process Processing
Upstream
Processing
Elección del reactor

Elección del sistema de
operación: Bacth, Recuperación del
Elección del
Alimentado, Sistema producto por medio de
microorganismo
continuo, etc. operaciones unitarias
Formulación Estequiometria y Físico y químico)
Preparación del medio cinética Acondicionamiento
Esterilización Instrumentación y y estabilización del
Preparación del inoculo control producto
Elección del Formulación del
HJP
microorganismo producto 8
El Microorganismo Productor
Tenemos varias posibilidades
Partir del microorganismos productor (Wild Type)

Microrganismos modificados genéticamente para tal fin.
Recurrir a sistemas de expresión heterologa
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Microorganismos Productores Wild Type
Ventajas
Generalmente suele ser el mejor productor.
(seleccionado por la naturaleza)
La manipulación genética es mínima o nula, esto nos ahora
tiempo y dinero
Posibles desventajas
Puede que no cumpla con las normas GRAS (Generally
recognized as safe)
Su utilización pueden presentar dificultades al momento del
escalado y etapas danw stream. Ej hongos filamentosos.
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Ac. orgánicos Alcoholes
HJP 11
Antibióticos Enzimas
HJP 12
Sistemas de Expresión Heteróloga

Son utilizados para la producción de proteínas
recombinantes
Ventajas
Sistemas preparados para una finalidad determinada
Amplia variedad de hospedadores
Gran variedad de herramientas moleculares disponibles
(vectores, marcadores de selección, etc.)
Desventajas
No siempre el producto final posee las mismas
características que el deseado.
HJP 13
Elección del sistema de expresión:
Productividad (es difícil determinar a priori pero se un buen tip es comenzar

con una búsqueda de bibliografía)
Complejidad estructural
Modificaciones las traducciones
Bioactividad de la proteína de interés

Manipulaci6n del sistema de expresión
Bioseguridad del sistema de expresión
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Sistemas de Expresión
Condición Hospedador Bacteria Levadura Insecto Mamífero
HJP 15

Escherichia Coli
Ventajas
Alta tasa de crecimiento
Amplio conocimiento de su genetica y fisiologia
 Fácil manipulación genética: gran variedad de vectores y cepas
disponibles, alta eficiencia de transformación, etc)
 Fácil de cultivar
 Bajo costo de cultivo
 Alta acumulaci6n de proteínas recombinantes (30% del total
celular).
 Recuperación relativamente sencilla
Desventajas
 No es GRAS
 Contaminacion con endotoxinas
 Proteinas intracelular con formacion de
cuerpos de inclusion
 No posee modificaciones postranducionales
HJP 16

Escherichia Coli
Desventajas
No todos los genes se expresan eficientemente debido a:
 Características de la secuencia nucleotidica del gen endógeno.
 Estabilidad y eficiencia traducción del RNAm
 Diferencias de uso de determinados codones de
Deficiencia en el folding proteico, capacidad limitada de formación de
puentes S-S.
Toxicidad de la proteína recombinante
No es GRAS
Contaminación con endotoxinas
Proteínas intracelular con formación de cuerpos de inclusión
Generalmente se requiere un replegamiento de la proteína
No posee modificaciones post-tradicionales
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Levaduras: (S. Cerevisiae, K Lactis y P. Pastoris)
Ventajas
Unicelular eucariota, fácil crecimiento y manipulación
Capacidad para realizar modificaciones (glicosilacion, acetilación,
fosforilacion, eliminación del Met-1, procesamiento proteolitìco de
precursores)
Fácilmente escalable
Bajo o nulo nivel de endotoxinas
Proteinas extracelulares e intracelulares
Desventajas
Baja eficiencia de transformacion
Hiperglicosilaci6n (S. cerevisiae principalmente)
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ACTIVIDADES PARA LA SIGUIENTE AULA
1.- Identificar tipo de biorreactores y sus distintas aplicaciones como parámetros a

considerar en el proceso:
a.- Para tipos de Biocatalizadores, enzimas, células
2.- Realizar un resumen del articulo que se envía a su carpeta, identificar la metodología que
utiliza, tipo de reacción realizado, parámetros de control utilizados, ensayos de validación de
los resultados.
DIRECCION DE ARTICULO:
Aarthy, M., Saravanan, P., Gowthaman, M. K., Rose, C., & Kamini, N. R. (2014).
Enzymatic transesterification for production of biodiesel using yeast lipases: An overview.
Chemical Engineering Research and Design, 92(8), 1591–1601.
doi:10.1016/j.cherd.2014.04.008.
ABS: Se adjunta articulo en su carpeta.
HJP 19

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Glucosa + amonio + sales + oxigeno BIOMASA + PRODUCTOS + calor

Son los procesos en los que sustratos naturales o sinteticos

Sustrato + agua Sustrato modificado

Esquema de un proceso Biotecnológico

Elección del reactor

Partir del microorganismos productor (Wild Type)

Microorganismos Productores Wild Type

Sistemas de Expresión Heteróloga

Elección del sistema de expresión:

Productividad (es difícil determinar a priori pero se un buen tip es comenzar

Bioactividad de la proteína de interés

Sistemas de Expresión Heteróloga

Sistemas de Expresión Heteróloga

Sistemas de Expresión Heteróloga

Sistemas de Expresión Heteróloga

1.- Identificar tipo de biorreactores y sus distintas aplicaciones como parámetros a

a.- Para tipos de Biocatalizadores, enzimas, células

ABS: Se adjunta articulo en su carpeta.

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