FOTOMETRÍA VISIBLE

Juana Valentina Granada Henao, Juliana Londoño Buitrago

Química Industrial Escuela de Química, Universidad Tecnológica de Pereira, Pereira, Colombia

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INTRODUCCIÓN
Se define la fotometría como técnica óptica de la absorción de radiación que va a permitir relacionar la
cantidad de luz absorbida con la concentración del analito que interesa conocer. La radiación
electromagnética es una onda que se caracteriza por su longitud de onda, frecuencia ν amplitud y abarca
desde 390 nm a 750 nm, esto quiere decir que será la zona visible del espectro.
De todas las características de la luz, la absorbancia es la que interesa en las medidas fotométricas. Una
sustancia que se desee medir su concentración y que tiene un color particular absorberá su color
complementario y reflejará su mismo color.
La absorbancia está relacionada con la concentración de la sustancia que se quiere medir por la ley de
Lambert-Beer:

𝐴 = 𝜀∗𝑙∗ 𝑐
Donde
c =concentración
l =el paso óptico
ε =la absortividad molar.
La Ley de Lambert-Beer establece que hay una relación lineal entre la absorción de luz a través de una
sustancia y la concentración de dicha sustancia.
Para poder aplicar la ley es necesario seleccionar previamente una longitud de onda puesto que tanto A
como α varían con ella.
Se puede concluir que la cantidad de luz absorbida dependerá del tipo de sustancia por la que atraviesa la
radiación, la distancia que recorre y la concentración de la sustancia.
El Fotómetro permite medir la cantidad de luz absorbida y relacionarlo con la concentración de la sustancia.

Color Violeta Azul Verde Amarillo Naranja Rojo

Rango de λ en
nm 400-450 450-500 500-550 550-600 600-650 650-700
Tabla 1. Colores y rango de longitudes de onda correspondientes.
METODOLOGÍA
El presente laboratorio se llevó a cabo teniendo en cuenta los conceptos teóricos de calibración e
identificación de un fotómetro, celdas equivalentes y determinaciones fotométricas. Corroborando lo
anterior en la parte practica en el laboratorio donde:
Teniendo como referencia el cloruro de cobalto se realizó la verificación de calibración del equipo
apoyándonos en un barrido desde λ 360- 740 nm.
A partir de una muestra solida de acero se pudo llegar a la preparación de los blancos fotométricos tanto de
la muestra como del estándar y gracias a él, poder ajustar el cero de A.
Para la preparación de patrones se tuvo en cuenta la cantidad en ml de la solución coloreada que se debían
tomar para alcanzar las concentraciones de 1.5- 2.5-5.0-10.0-15.0 ppm. Y partiendo de ellas llevar a cabo
el procedimiento para el proceso de las celdas equivalentes.

MATERIALES
 1 Espectrofotómetro.
 Varias celdas (Vidrio, plástico) para el espectrofotómetro.
 2 beaker de 100 mL.
 1 beaker de 250 mL.
 10 matraces aforados de 25 mL.
 1 matraz aforado de 50 mL.
 1 matraz aforado de 100 mL.
 1 matraz aforado de 250 mL.
 1 pipeta volumétrica de 5 mL.
 1 pipeta volumétrica de 10 mL.
 1 pipeta graduada de 10 mL.
 1 probeta de 50 mL.
 1 bureta de 25 mL graduación 1/20 mL
 1 vidrio de reloj 100 mm de diámetro.
 1 frasco lavador.
 1 espátula acanalada

RESULTADOS
4.1.2 Reconocimiento de los componentes del espectrofotómetro
4.1.2.1 Espectro fotómetro V-1200
Componentes:
 Interruptor de Encendido/Apagado.
 Pantalla digital.
 Tapa del compartimiento de muestras.
 Teclado.
 Impresora interna opcional.
 Puerta del compartimiento de la lámpara.
 5.2 Cuantificación de muestra
Verificación de calibración del equipo con cloruro de cobalto (CoCl2)

λ 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740
%T 94,7 90,3 80,4 67,4 40,3 16,9 9,6 5,7 4,9 12,3 35,6 65,7 25,6 80,0 81,8 84,4 88,0 91,5 93,9 95,2
A 0,023 0,045 0,094 0,172 0,395 0,772 1,018 1,243 1,307 0,909 0,448 0,182 0,592 0,097 0,088 0,073 0,550 0,039 0,027 0,021
Tabla 2. Respuesta del espectrofotómetro en función de λ.

Según los datos de la tabla anterior, el pico de la muestra de cloruro de cobalto está en la longitud de onda
de 520 nm.
Se procedió a realizar el barrido espectral de la muestra en el espectrofotómetro V-1200, el cual arrojo la
siguiente gráfica:

Curva espectral Cloruro de Cobalto

1.400

1.200

1.000
Absorbamcia

0.800

0.600

0.400

0.200

0.000
360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740
Longitud de Onda (nm)

Figura 1. Espectro de cloruro de cobalto

De acuerdo con el espectro mostrado en la literatura para comparar la muestra y las gráficas anteriores
se pudo observar que la curva espectral tiene una ligera dispersión, pero aun así cumple con los
parámetros de los picos y los mínimos.

Se procedió a preparar los patrones con una solución de cloruro de cobalto, realizando previamente los
siguientes cálculos:
- Para 1.5 mg/L
1.5 𝑚𝑔
0.050 𝐿 ∗ = 0.0375 𝑚𝑔
𝐿
10−3 𝑚𝑙
𝑉 = 0.0375 𝑚𝑔 ∗ = 0.25 𝑚𝑙
150𝑚𝑔
- Para 2.5 mg/L
2.5 𝑚𝑔
0.050 𝐿 ∗ = 0.125 𝑚𝑔
𝐿
10−3 𝑚𝑙
𝑉 = 0.125 𝑚𝑔 = 0.83 𝑚𝑙
150 𝑚𝑔
- Para 5.0 mg/L
5.0 𝑚𝑔
0.050 𝐿 ∗ = 0.25 𝑚𝑔
𝐿
10−3 𝑚𝑙
𝑉 = 0.25 𝑚𝑔 ∗ = 1.6 𝑚𝑙
150 𝑚𝑔
- Para 10.0 mg/L
10 𝑚𝑔
0.050 𝐿 ∗ = 0.5 𝑚𝑔
𝐿
10−3 𝑚𝑙
𝑉 = 10 𝑚𝑔 ∗ = 6.66𝑚𝑙
150 𝑚𝑔
- Para 15.0 mg/ L
15 𝑚𝑔
0.050𝐿 ∗ = 0.75 𝑚𝑔
𝐿
10−3 𝑚𝑙
𝑉 = 15 𝑚𝑔 ∗ = 1 𝑚𝑙
150 𝑚𝑔

Patrón No. 0 1 2 3 4 5 Xmuestra Xestándar

Concentración
(mg/L) 0 1,5 2,5 5 10 15 -
%T 100 95 91,3 82,8 70 59,6 65,3
A 0 0,022 0,04 0,082 0,155 0,225 0,185
Tabla 3. Valores de %T y A medidos para muestras patrón.

Se midieron las absorbancias de los patrones para construir la curva de calibración:

 Curva de calibración λ =526nm
0.25
y = 0.0151x + 0.002
0.2 R² = 0.9988
Absorbancia
0.15

0.1

0.05

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Concentración (mg/L)

Figura 2. Curva de calibración para patrones

𝑦 = 0.0151𝑥 + 0.002
En donde:
y = Absorbancia
x = Concentración (mol/L) o (M)
0.0151 = Pendiente de la recta
0.002 = Intercepto con el eje Y
El intercepto con el eje Y lo ideal sería cero (0.0) pero da un (0.002) lo cual indica un grado de des-
calibración del instrumento demasiado bajo.

𝑨 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟓𝟏 𝑪 + 𝟎. 𝟎𝟎𝟐
Expresión 1. Expresa la absorbancia en función de la concentración

Despejando de la ecuación:
𝑨 − 𝟎. 𝟎𝟎𝟐
𝑪=
𝟎. 𝟎𝟏𝟓𝟏
Expresión 2. concentración en función de la absorbancia

Reemplazando la Absorbancia obtenida en la ecuación tenemos:

0.185 − 0.002
𝑪 𝒅𝒆 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 𝒅𝒆 𝒂𝒄𝒆𝒓𝒐 = = 12.12 𝑝𝑝𝑚
0.0151

Por medio de la curva de calibración se determinó que la concentración de la muestra de acero es de 12.12
ppm.
La anterior concentración correspondería a los 50 mL de solución que se obtuvieron de la muestra de
acero
12,12 𝑚𝑔 1 𝑔 𝑀𝑛
∗ ∗ 50𝑚𝐿 = 6,06𝑥10−4 𝑔 𝑑𝑒 𝑀𝑛
1000 𝑚𝑙 𝑠𝑙𝑛 1000 𝑚𝑔 𝑀𝑛
Ahora tenemos la masa de Mn que había en la muestra de acero que pesamos al inicio (0.2298 g).
Podemos calcular el % de masa de Mn en la muestra de acero así:

𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝑴𝒏 6,06𝑥10−3
∗ 𝟏𝟎𝟎 = ∗ 100 = 0,264% 𝑑𝑒 𝑀𝑛 𝑒𝑛 𝑎𝑐𝑒𝑟𝑜
𝑴𝒂𝒔𝒂 𝒅𝒆 𝑨𝒄𝒆𝒓𝒐 0,2298
De las fuentes bibliográficas tenemos que él % de acero estándar es del 0,3% por lo que:
|0,264 − 0,3|
% 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = ∗ 100 = 12,10 %
0,3
 Sensibilidad:
Pendiente de la recta 𝑦 = 0.0151 𝑋 + 0.002

𝑺 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟓𝟏

 Desviación del blanco:

∑(𝑿𝒊 − 𝝁)𝟐
𝑺𝑩 = √
𝒏−𝟏

𝑺𝑩 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟐𝟒

 Límite de detección (LD):

Tomando una absorbancia de 0.022
𝟑𝑺𝑩
𝑳𝑫 =
𝑺
𝒎𝒈
𝑳𝑫 = 𝟎, 𝟒𝟕𝟔𝟖
𝑳
 Límite de cuantificación (LC):

𝑳𝑪 = 𝑳𝑫 ∗ 𝟏𝟎 = 𝟎, 𝟒𝟕𝟔𝟖 ∗ 𝟏𝟎 = 𝟒𝟕, 𝟔𝟎 𝒑𝒑𝒎

Celdas de Equivalencia

1 2 3 4
%T 100 99,3 100 100
A 0 0,003 0 0
ANÁLISIS DE RESULTADOS
De acuerdo con los resultados obtenidos se puede observar que se hizo un buen procedimiento ya que se
obtuvo como resultado un 0,264% de Manganeso en el acero comercial utilizado y comparado con la teoría
(0,3%) obtenemos un porcentaje de error de 12,10%.

CONCLUSIONES
- Cuando se desea hacer un análisis a una sustancia mediante el método de fotometría visible, se debe
conocer la longitud de onda en la que la sustancia presenta su máximo de absorción, debido a que esto nos
da una idea acerca de la sustancia, pues estos máximos son característicos para cada especie, y además nos
permite resultados óptimos.
- Para obtener buenos resultados al aplicar la técnica fotométrica, es necesario utilizar los adecuados
materiales volumétricos para la preparación de los patrones y de las muestras necesarias para la aplicación.
-Es importante hacer la equivalencia de celdas ya que esto puede agregar un error al análisis fotométrico
que se está llevando a cabo.

BIBLIOGRAFÍA
- Federmán Castro E, Análisis instrumental l, manual de prácticas de laboratorio, Cámara
colombiana del libro, Colombia 2014.
- Luisa F. Echeverri L. – Flor Ángela Henao – Francy J. Ramirez. Elaboración de nueve guías
complementarias para la ejecución de prácticas de aplicación analítica en la asignatura de
Laboratorio de Análisis Instrumental I. Trabajo de grado para optar el título de Tecnólogo
Químico. Universidad Tecnológica de Pereira.