MICROSCOPIO Y SU MANEJO

TÉCNICAS DE PREPARACIONES DE MUESTRAS

PRÁCTICA #1
Carolina Ruiz Cuello, Marcela Nieves Sánchez, Kelly Toro Valencia, Samir Gómez González,
Daniel Cardona Hernández, José Díaz Martínez
Docente: Gabriel Montes Fuentes
Microbiología
Universidad de Córdoba
Facultad de Ingenierías
Ingeniería Ambiental
2022
RESUMEN
En este laboratorio se busca reconocer y aprender a utilizar correctamente el microscopio en el
laboratorio, tanto sus partes ópticas y mecánicas, adquiriendo destreza en el manejo de este,
conociendo las diferentes técnicas comúnmente usadas. En este caso se tomaron muestras de
corcho, polvillo de ala de mariposa y la epidermis de una cebolla. Las cuales se observaron en los
diferentes lentes del microscopio.
Palabras claves: reconocer, aprender, microscopio, epidermis, destreza.
1. OBJETIVOS 2. INTRODUCCIÓN:
• Identificar y reconocer el uso adecuado Los microscopios empleados en microscopia
de cada de las partes del microscopio común son de tipo óptico o compuesto y el
óptico compuesto (ópticas y mecánicas). estereoscópico o de disección; se disponen de
• Operar el microscopio correctamente. una gran variedad de modelos en su
• Realizar preparaciones microscópicas construcción; básicamente, los microscopios
temporales ópticos se caracterizan por tener un tubo que

• Adquirir destreza en la preparación de lleva dos sistemas de lentes: el ocular en el

cortes histológicos frescos sencillos extremo superior y el objetivo en el extremo

• Reconocer distintas estructuras celulares inferior; la imagen se forma por el objetivo y

a nivel de microscopio óptico. se magnifica por el ocular. Los microscopios

equipados con un solo ocular se llaman
monoculares; aquellos con dos oculares,
binoculares; dependiendo de su tipo, un En este sentido, son empleados en variadas
microscopio puede estar equipado con varios áreas de conocimientos, como la biología, la
objetivos intercambiables, los más comunes medicina, la arqueología, etc.
son 2.5x(lupa), 10x, 40x y 100x ((2001). El microscopio fue inventado en 1590 por un
Tomado de: Instrucciones de manejo. fabricante de lentes llamado Zaccharias
Axiostar plus. Microscopio de luz Janssen. En 1655, Robert Hooke ideó el
transmitida y Fl.) primer microscopio compuesto, en el cual se
A continuación, se observarán diferentes empleaban dos sistemas de lentes para
muestras las cuales nos ayudaran a tener una mejorar la capacidad de aumento visual. La
buena destreza en el manejo del microscopio, invención del microscopio electrónico en el
aprendiendo a utilizar los diferentes lentes, la siglo XX, por su parte, supuso la capacidad
cantidad de luz necesaria para una mayor de aumentar 100.000 veces la imagen de un
visibilidad y analizando las características de objeto.
cada uno de estas muestras, así mismo se Desde la invención del microscopio se han
pudieron observar las diferentes formas de producido importantes avances en la ciencia
las células y su tamaño. y la medicina. Fue fundamental, por ejemplo,
3. MARCO TEÓRICO para el descubrimiento de las células, los
Es una herramienta que permite observar protozoarios, las bacterias, los
elementos que no pueden observarse o son espermatozoides, los glóbulos rojos, etc.
invisibles a simple vista, a través de lentes, Este instrumento óptico consta de dos partes,
visores y rayos de luz, que acercan o una mecánica que tiene la finalidad de
agrandan la imagen en escalas convenientes sostener la preparación a examinar y soportar
para su examinación y análisis. todo el sistema óptico del microscopio. Y una
Etimológicamente el término Microscopio, parte óptica que considera los dos sistemas de
es la unión de dos conceptos,” Micro” que lentes convergentes centrados sobre un eje
significa pequeño y “Scopio” que significa óptico común, denominado ocular y objetivo.
observar, es decir, hace referencia a la También esta parte integra un sistema de
observación pequeña o en menor grado. iluminación que facilita la observación
Los microscopios nos permiten obtener microscópica.
imágenes aumentadas de los objetos, para El microscopio óptico posee dos tipos de
poder detallarlos, estudiarlos y analizarlos. lentes. Una de las lentes es el ocular que se
ubica en el lugar donde el observador que pasará la luz del sistema de
aproxima su ojo. La otra lente es el objetivo iluminación. Posee dos pinzas que sirven
y es la que se aproxima al objeto que se va a para retener el portaobjetos sobre la
observar. Cuenta con tres objetivos montados platina y un sistema de cremallera que
sobre un disco que se denomina revólver. permite mover la preparación. Puede
El aumento: cada objetivo y ocular tiene un estar fija o unida al brazo por una
número. Dicho número indica cuantas veces cremallera para permitir el enfoque.
la lente aumenta el tamaño del objeto. Por • Pie: es la parte inferior del microscopio
ejemplo, el ocular que tiene el número 10, que permite que se mantenga de pie.
aumenta 10 veces el tamaño. Del mismo • Ocular: lente situada cerca del ojo del
modo, en los objetivos, los números 4x, 10x, observador. Capta y amplia la imagen
40x indican el aumento del objetivo. formada en los objetivos.
PARTES DE UN MICROSCOPIO: • Objetivos: lente situada en el revólver.
• Tornillo macrométrico: es un tornillo de Amplia la imagen, es un elemento vital
enfoque, mueve la platina o el tubo hacia que permite ver a través de los oculares.
arriba y hacia abajo. Permite • Espejo: si la fuente de la luz es
desplazamientos amplios para un enfoque independiente del microscopio óptico,
inicial. este debe tener un espejo que dirija los
• Tornillo micrométrico: tornillo de rayos hacia el eje óptico y en forma
enfoque, mueve la platina o el tubo hacia paralela a el: ese espejo puede moverse
arriba o hacia abajo. Permite para orientarlo de la manera más
desplazamientos muy cortos, para el conveniente. El espejo tiene dos caras,
enfoque más preciso. una plana y una cóncava.
• Revólver: contiene los sistemas de lentes • Diafragma: regula la cantidad de luz que
objetivos. Permite, al girar, cambiar los llega al condensador.
objetivos. La esfera se suele llamar • Tubo: el tubo tiene una forma cilíndrica
cabezal y contiene los sistemas de lentes y en su extremidad superior se colocan
oculares (monoculares o binoculares). los oculares. Puede tratarse de un tubo
• Platina: Lugar donde se deposita la monocular (con un ocular), binocular
preparación que se quiere observar. Tiene (con dos) o trinocular (con dos oculares y
en su centro una abertura circular por la un dispositivo para adaptar la cámara).
 Los objetivos están enroscados en un (mediante el revólver) y ajustando el
sistema de revólver que permite colocar enfoque con el tornillo micrométrico.
uno u otro en el eje óptico. TÉCNICAS COMÚNMENTE USADAS
EN MICROSCOPÍA ÓPTICA:
¿CÓMO UTILIZAR EL 1. Frotis o extendido: consiste en esparcir el
MICROSCOPIO? material generalmente líquido o
▪ Lo primero es preparar lo que queremos semilíquido de modo que quede
mirar a través del microscopio. A esto se distribuido uniformemente en una
le llama montar la preparación. Para delgada capa. Para ello se utiliza un asa u
montar la preparación debemos colocar la otro portaobjetos de borde muy parejo
muestra encima de un cristal que se desliza sobre el primero desde un
(portaobjetos) y poner encima otro cristal extremo al opuesto.
(cubreobjetos). 2. Aplastamiento o “squash”: se coloca el
▪ Encendemos la luz del microscopio y material previamente ablandado entre
comprobamos que la luz esté prendida a porta y cubre y se presiona con fuerza
través del ocular. aplastando. Se puede observar
▪ Colocamos la preparación sobre la platina directamente o previa fijación y
y movemos el revólver para poner sobre coloración.
ella el objetivo de menor aumento. 3. Cortes: El procedimiento depende si se
Enfocamos la muestra: trata de preparados permanentes o
▪ Giramos el tornillo macrométrico hasta temporales.
que el objetivo esté lo más cerca posible Los cortes temporales se realizan en tejidos
de la preparación. animales y vegetales empleando navaja,
▪ Mirando por el ocular, giramos el tornillo bisturí u hoja de afeitar de la siguiente
para ir separando el objetivo de la manera:
preparación hasta ver una imagen los más ➢ Se hace un corte en el material para
enfocada posible. producir una superficie lisa.
▪ Movemos el tornillo micrométrico para ➢ Se aplica el filo del bisturí sobre la
conseguir una imagen más enfocada. superficie y se impulsa con suavidad,
▪ Podemos observar la muestra con más lenta y uniformemente. Las secciones
aumentos, cambiando el objetivo deben ser tangenciales, transversales o
 radiales, para lograr una clara ➢ Las secciones logradas de recogen con el
representación de la estructura de un bisturí, se toman en un extremo y se
tejido basado en la observación depositan con una gota de agua en el
microscópica. centro del portaobjetos cubriéndolo con
➢ Elementos muy jugosos deben ser fijados un cubre.
previamente con alcohol de mediana
concentración.
4. DATOS OBTENIDOS

Muestra de polvillo de ala de mariposa

Muestra de corcho
 Muestra flor de bonche
Muestra de cebolla
5. MATERIALES Y MÉTODOS cuales fueron cebolla, polvo de mariposa,
MATERIALES: microscopio óptico corcho y polen de una flor.
compuesto, estereoscopio, caja de Petri, • Luego tomar cada una de las muestras y
pipetas de Pasteur, porta-objetos y cubre- empezar a realizar el montaje con cada
objetos, flores con polen, polvillo de ala de una de ellas, lo cual consiste en tomar un
mariposa, corcho, hoja de lirio, lana o portaobjetos, se coloca el producto, luego
algodón de diversos colores, insecto, cinta de se adiciona una gota de agua destilada
enmascarar, papel absorbente, cuchilla para finalmente colocar el cubreobjeto y
delgada, periódicos viejos, tijeras. colocarlo en el microscopio.
PROCEDIMIENTO: • En el cual se pudieron apreciar diferentes
• Lo primero a realizar fue tomar las tipos de aumentos gracias a los distintos
muestras otorgadas por el profesor, las tipos de objetivos que tiene el
microscopio.
6. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE 7. PREGUNTAS
RESULTADOS COMPLEMENTARIAS
1. ¿Las imágenes observadas al
Al inicio se de esta práctica se nos explicó las
microscopio son reales o virtuales?
funciones y partes de los microscopios, a lo
Explique. ¿Por qué realizamos una
largo se fueron analizando y usando
permeabilización de las células en las
diferentes muestras para analizarlas bajo el
técnicas empleadas para su observación?
lente del microscopio.
¿Este paso es siempre necesario?
La primera muestra que vimos fue la de un
Las imágenes observadas al microscopio son
corcho, estos en su forma natural se producen
virtuales porque el objetivo recoge la luz que
en la corteza de los árboles con el fin de
atravesó el objeto examinado y proyecta
proteger el interior, se vio una capa de células
una imagen real, invertida y aumentada
ya secas y recogidas mostrando lo
que se forma dentro del tubo y que es
degeneradas que estaban.
recogida por el ocular que es la segunda lente,
El siguiente objeto fue polvillo de ala de
la cual forma una imagen virtual, invertida y
mariposa, para este se agito el ala de la
aumentada del objeto examinado.
mariposa sobre el portaobjetos, al mirarla se
2. Compare las imágenes anteriormente
vieron estructuras que se asemejaban más a
observadas, ¿En qué se asemejan? ¿En
escamas puntiagudas que al nombre que
qué se diferencian?
tienen normalmente, las escamas se
En base a las imágenes observadas dentro del
desprenden ante un contacto forzoso dejando
laboratorio, se pudo observar una semejanza
células inertes atrás.
directa puesto a que todos lo observado hace
Por último, se analizó la epidermis de una
parte de un tejido, es decir, la muestra de
cebolla, esta presentaba una estructura
corcho, cebolla, pétalo de flor y polvillo de
hexagonal e interconectada, esto con el fin de
mariposa. La diferencia obtenida y observada
dar estructura y protección a la dermis del
es que cada muestra tiene una estructura
vegetal, suponemos que la estructura es la
diferente y por lo tanto cada una de las
pared celular y dentro se encontraba el núcleo
muestras tiene una observación diferente en
celular.
el microscopio ya que se observaron en claramente y detalladamente la muestra que
diferentes objetivos. esté contenida en el microscopio.
3. Cuando usted mueva la lámina hacia 6. Explique la diferencia entre un
delante, ¿En qué dirección se mueve la estereoscopio y un microscopio.
imagen? La diferencia principal es que en el
De manera invertida, es decir si la lámina se estereoscopio ofrece una visión de tres
mueve hacia delante, la dirección de la dimensiones mientras que el microscopio
imagen se mueve hacia abajo. ofrece una visión en dos dimensiones.
4. ¿Es la iluminación más o menos brillante También, otra diferencia es que el
con el objetivo de mayor aumento que estereoscopio está compuesto por dos lentes
con el objetivo de menor aumento? ¿Por y el microscopio puede ser binocular o
qué? monocular, etc.
La iluminación del microscopio es mayor con 7. Como es la imagen en el estereoscopio:
el objetivo de mayor aumento, debido a que ¿virtual o real, en posición derecha o
se está haciendo una observación de mejor invertida? Justifique.
calidad, lo que se debe hacer es configurar la La imagen es invertida, es decir, si la imagen
cantidad de luz y hacer un mejor enfoque para derecha está situada a la izquierda y
así tener un buen resultado de imagen. viceversa. La imagen es virtual ya que ofrece
5. Mencione que poderes pudo comprobar una visión tridimensional.
en cada una de las muestras observadas. 8. Escriba el nombre de cada una de las
Explique. partes del microscopio.
En cada una de las muestras observadas se
pudo comprobar el poder de que el
microscopio de una imagen no tan nítida y la
otra la pueda dar muy nítida, ya esto es
configuración del manejo del microscopio, se
debe configurar la nitidez para así observar
9. CONCLUSIONES
Gracias a la primera práctica, logramos indicados, logrando tener una imagen
adquirir grandes conocimientos acerca del aumentada de detalles demasiados pequeños
microscopio, aprendimos a reconocer cada que a simple vista son imposibles de
parte del microscopio y qué función tenía observar. Gracias a esta práctica reconocimos
cada una de ellas y a su vez la correcta la importancia del microscopio en la vida
manipulación de este equipo. cotidiana, la gran utilidad que se le da hoy en
Aprendimos a ubicar la muestra en el punto día, ya que sin este aparato sería imposible
correcto para proceder a ubicar los objetivos visualizar los microorganismos.

10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Significados; Significados. Tomado de:

• Paoletti, M. (2022). Microscopio. https://www.significados.com/microscop
Laboratorio de ciencias. Unicen.edu.ar. io/.
Tomado de: • Carolina Arango, Gabriel Montes. Guía 1
https://kitlab.exa.unicen.edu.ar/microsco microscopio y su manejo, técnicas de
pio.html. preparaciones de muestras. Universidad
• Significados. (2015, septiembre de Córdoba.
21). Significado de Microscopio.