Prácticas de Laboriatorio de Biología I

Colegio Preparatorio de Xalapa Diurno

Mtra. Arely Jaimes

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 REGLAMENTO DEL LABORATORIO
1.- El alumno deberá portar obligatoriamente bata de algodón blanca, manga larga, limpia y con su
nombre bordado (opcional), así como la práctica impresa para tener derecho al acceso del
laboratorio. Se prohíbe el uso de bata de poliéster o materiales plásticos.

2.- El cabello largo deberá ser recogido para evitar contacto accidental con flama o reactivos
peligrosos.

3.-Por ningún motivo se permitirá el acceso al laboratorio con comida, dulces, bebidas o sustancias
ajenas al desarrollo de la práctica.

4.-El alumno deberá leer la práctica correspondiente antes del desarrollo de la misma y traer los
materiales que les sean solicitados en cada caso.

5.- Los alumnos deberán permanecer en la mesa asignada por el profesor y seguir las indicaciones
de manera adecuada y oportuna. NO se deberá realizar experimentos sin la supervisión del
profesor.

6.-Se prestará especial atención a las medidas de seguridad establecidas. El profesor indicará al
inicio de curso la localización de extinguidores, regadera y materiales de seguridad diversos, así
como las acciones a seguir en caso de incidentes.

7.-No toques las sustancias directamente. Para sólidos usa la espátula y para líquidos el recipiente
adecuado. Utilizar guantes de látex.

8.-No corras ni juegues dentro del laboratorio. Podrías ocasionar algún accidente.

9.- Las prácticas deberán presentarse completas, limpias, sin tachaduras, con dibujos a color y con
cuestionarios resueltos para tener derecho a calificación. No se calificarán manuales dañados o
con dibujos o anotaciones ajenas a las prácticas.

10.- Los alumnos que cometan faltas disciplinarias en el curso de la práctica de laboratorio se
harán acreedores a las sanciones correspondientes. Se les negará el acceso a los alumnos
reincidentes o que se considere que ponen en riesgo la seguridad de sí mismo y de sus
compañeros.

11.- El material roto o dañado por el estudiante deberá ser repuesto en la siguiente sesión para
tener derecho a presentar la siguiente práctica y examen rápido.

12.-Al finalizar la práctica, los estudiantes deberán lavar el material utilizado, verificar que las llaves
de agua estén correctamente cerradas, levantar la basura, dejar su mesa limpia y ordenada así
como guardar el material en su lugar correspondiente.

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 Práctica 1
Uso y Manejo correcto del Microscropio
OBJETIVO:
El objetivo de la práctica, principalmente fue saber lo que es un microscopio, identificar sus partes,
conocer y distinguir los diversos tipos de microscopios, y ver a través de él, cortes a nivel celular, esto
con el fin de conocer una perspectiva microscópica de varios procesos que no podemos observar a
simple vista; también, de manera específica, entender e identificar los utensilios/instrumentos que se
encuentran en un laboratorio, conociendo así su cuidado y función de cada uno, obteniendo así,
conocimientos bastos sobre lo que es un laboratorio.

ANTECEDENTES:
¿Qué es el microscopio?
El microscopio de micro-, pequeño, y scopio, σκοπεω, observar, es un instrumento cuya función es
permitir observar la imagen de un objeto u organismo que son demasiado pequeños para ser vistos a
simple vista.
El microscopio está especialmente diseñado para el estudio de objetos tan pequeños que no pueden
ser observados a simple vista. Actúa como una extensión de nuestro sentido de la vista, dándonos la
oportunidad de conocer un mundo que permaneció invisible a los humanos Hasta antes de su
invención.
Todos los microscopios tienen una estructura con un brazo y una base. A esta estructura se unen las
demás partes. La plataforma donde se coloca lo que se quiere observar se denomina platina. En la base
de la mayoría de los microscopios hay una fuente de luz. Su lámpara posee un regulador de voltaje para
variar la intensidad de la luz. Casi todos los microscopios disponen
De algún sistema para reducir la intensidad de la luz.
Los botones de ajuste grueso (macrométrico) y ajuste fino (micrométrico) se encuentran situados de
forma concéntrica a los lados del microscopio; se emplean para enfocar los objetos que se observan.
El sistema óptico de un microscopio consta de objetivos, oculares y condensador.
El microscopio es un sistema de amplificación de dos niveles, en el cual el espécimen es amplificado
primeramente por un complejo sistema de lentes del objetivo y de nuevo por una segunda lente en el
ocular. La capacidad de amplificación total del instrumento es el producto de las amplificaciones
logradas por el objetivo y el ocular.

Uso del microscopio

Con frecuencia la Ciencia y la Técnica van de la mano, casi todos los avances científicos han sido el
resultado de nuevos avances técnicos, esto es particularmente ilustrativo en lo referente al uso del
microscopio. Al descubrimiento de la célula se llegó gracias a una serie de descubrimientos científicos
que estuvieron ligados a la mejora de la calidad de los microscopios. Uno de los pioneros en la
construcción de estos aparatos fue Anton van Leeuwenhoek.
¿Cómo es un microscopio?
El microscopio es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y nos permite observar aquello que,
en un principio, es invisible para el ojo humano. Fue utilizado por primera vez, como tal, por el holandés
Anton van Leeuwenhoek el año 1675. Tiene dos partes: una óptica, para observar, y otra mecánica, que
sostiene a la primera.
La parte óptica consta de :
 Ocular, lente situada cerca del ojo del observador.
 Objetivo, lente situada cerca del objeto que se quiere observar.
 Diafragma, dispositivo para graduar la entrada de luz.
 Condensador, dispositivo para concentrar la luz sobre el objeto.
 Foco de luz o espejo, para iluminar el objeto.
La parte mecánica del microscopio consta de:
 Columna , parte que sostiene el tubo óptico.
 Tubo óptico , donde se encuentra ubicado el ocular.
 Revólver , parte móvil que sostiene los objetivos.

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  Platina , que soporta el portaobjetos.
 Pié , sostiene todo el microscopio.
 Tornillo macro métrico, que permite desplazamientos rápidos de las lentes.
 Tornillo micro métrico, que permite desplazamientos suaves de las lentes.

¿Cómo se utiliza el microscopio?

El objeto que queremos observar se coloca en un vidrio transparente que llamamos portaobjetos, y lo
cubrimos con otro vidrio más fino que llamamos cubreobjetos.
Una vez conocido el funcionamiento de les partes del microscopio debes saber que el aumento que nos
ofrece un microscopio se obtiene con la combinación del objetivo y del ocular. Por ejemplo, si tenemos
un ocular de 15x y un objetivo de 40, el aumento obtenido es de:
40 x 15 = 600 aumentos.
El enfoque del objeto se realiza con el tornillo macrométrico, y después se afina con el tornillo
micrométrico, hasta conseguir una visión perfecta. Una vez enfocado el objeto, se pasa al objetivo
inmediatamente superior, hasta obtener el aumento deseado. Cada vez que cambies de objetivo cuida
de no tocar la preparación, el vidrio se puede romper.
La luminosidad para observar la muestra la puedes regular moviendo el diafragma hasta conseguir la
más adecuada para cada caso.
Como unidad de medida , en microscopia se utiliza la micra (µ). Su equivalencia es:
1µ = 1/1000 mm ; por tanto, 1 mm = 1000 µ

¿Cómo se prepara una observación microscópica?

Para observar perfectamente un objeto es necesario someterla a un proceso de preparación que
destaque aquellas partes que nos interesen. También, que conserve la muestra para observaciones
posteriores. Dos fases de este proceso son: la fijación y la tinción.
Con la fijación se consigue que la muestra que queremos observar no se mueva. Se suele utilizar
diferentes líquidos: alcohol etílico 70%, ácido acético…; también se utilizan altas temperaturas que
ayudan a deshidratar la muestra. El objeto, una vez fijado, debe lavarse en un medio apropiado como
alcohol o agua.
La tinción consiste en colorar la muestra que queremos observar para, así, destacar aquellas partes
que nos interesen observar. La gama de colorantes es muy variada, y cada uno resalta una parte
diferente del objeto. Los colorantes siguientes suelen utilizarse para resaltar las partes de la célula:
 – La estructura celular: azul de metileno, orceína acética.
 – El citoplasma celular: eosina, fucsina ácida, verde luz.
 – El núcleo celular: fucsina básica, verde metilo.

Tipos de microscopio
*Un microscopio compuesto, es un aparato óptico hecho para agrandar objetos, consiste en un
número de lentes formando la imagen por lentes o una combinación de lentes posicionados cerca del
objeto, proyectándolo hacia los lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el tipo de
microscopio más utilizado.

Microscopio Compuesto
*Un microscopio óptico, también llamado «microscopio liviano», es un tipo de microscopio compuesto
que utiliza una combinación de lentes agrandando las imágenes de pequeños objetos. Los microscopios
ópticos son antiguos y simples de utilizar y fabricar.

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 Microscopio Optico

*Un microscopio digital, tiene una cámara CCD adjunta y esta conectada a un LCD, o a una pantalla
de computadora. Un microscopio digital usualmente no tiene ocular para ver los objetos directamente. El
tipo triocular de los microscopios digitales tienen la posibilidad de montar una cámara, que será un
microscopio USB.

Microscopio Digital
*A microscopio fluorescente o «microscopio epi-fluorescente» es un tipo especial de microscopio
liviano, que en vez de tener un reflejo liviano y una absorción utiliza fluorescencia y fosforescencia para
ver las pruebas y sus propiedades.

Microscopio Fluorescente

*Un microscopio electrónico, es uno de los más avanzados e importantes tipos de microscopios con
la capacidad más alta de magnificación. En los microscopios de electrones los electrones son utilizados
para iluminar las partículas más pequeñas. El microscopio de electrón es una herramienta mucho más
poderosa en comparación a los comúnmente utilizados microscopios livianos.

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 Microscopio Electrónico

*Un microscopio estéreo, también llamado «microscopio de disección», utilice dos objetivos y dos
oculares que permiten ver un espécimen bajo ángulos por los ojos humanos formando una visión óptica
de tercera dimensión.

Microscopio Estereo

La mayoría de los microscopios livianos compuestos contienen las siguientes partes: lentes oculares,
brazo, base, iluminador, tablado, resolving nosepiece, lentes de objetivo y lentes condensadores.

Partes del microscopio

La cámara de microscopio es un aparato de video digital instalado en los microscopios livianos y
equipados con USB o un cable AV. Las cámaras de microscopio digitales son habitualmente buenas
con microscopios trioculares.

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 Uso correcto del microscopio:

El propósito de este apartado es enumerar las pautas y pasos a seguir para realizar una observación
microscópica de manera apropiada. Muchos errores y accidentes en la práctica microscopica se pueden
evitar leyendo las siguientes normas.

Manejo del microscopio óptico

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completa-
mente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en
esas condiciones.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10
aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el
objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de
corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con
el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un
enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente
con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por
completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el
paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran
dos tipos de percances: incrustarlo en la prepa- ración si se descuidan las precauciones anteriores y
mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de
inmersión.
6. Empleo del objetivo de inmersión:
1. Bajar totalmente la platina.
2. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite.
3. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y
el de x40.
4. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.
5. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión.
6. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la
gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la
lente.
7. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo
de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el
riesgo de accidente es muy grande.
8. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede vol-
ver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro
campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3.
9. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el ob-
jetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la
preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posi-
ción de observación.
10. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para ópti- ca.
Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.
Mantenimiento y precauciones
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de ob
servación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la
misma y dejarlo cubierto con su funda.

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 2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para
evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe
guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con
un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo
con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier
caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a
secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o
xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en
exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina,
revólver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación
para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por
el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo
con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al
acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.

Recuerda que debemos cuidar los microscopios

y mantenerlos en el mejor estado
aplicando las normas recomendadas.

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MATERIALES :
 Microscopio
 Muestras

Procedimiento:
1. Realizar observaciones de los materiales que hay en el laboratorio
2. Distinguir las partes del microscopio
3. Leer y seguir punto por punto, las normas del uso del microscopio (página 6)
4. Hacer observaciones microscópicas de las muestras
5. Poner las medidas con las cuales se observaron las muestras
6. Realizar actividades finales

Observaciones:

Resultados:

Actividades finales:
1. ¿Cuál es la función de cada parte del microscopio?
2. ¿Cuál es el objetivo de tener orden, cuidado y limpieza del microscopio?
 Oculares
 Tornillo de ajuste enfoque
 Tornillo de ajuste de altura
 Encendido
 Placa para material de observacion
3. Explica cuál es la utilidad de tener un correcto ajuste en el microscopio.
4. Discute a que se puede deber que se obtenga poca resolución y mal contraste de la imagen.
5. Explica como se obtiene el aumento al que se están haciendo las observaciones.
6. Discute por que dos personas diferentes pueden no ver con la misma nitidez la misma imagen.
7. Investiga sobre la historia y descubrimiento del microscopio.
8. Investiga a que se puede deber que los ojos del observador se cansan con largos ratos de
observación al microscopio.

Conclusiones:

Bibliografía:
Gray, P. (1964). Handbook of Basic Microtechnique. Mc Graw Hill Nook Co. New York. 302
pp.
____ (2001). Instrucciones de manejo. Axiostar plus. Microscopio de luz transmitida y Fl.
____ (2002). Stereomicoscopes. Stemi DV4. Operation Manual. Carl Zeiss Ligth
Microscopy. Gottingen, Germany