INFORME N°2. Carbohidratos

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Laboratorio de Bioquímica, Año 2022, Informe 2

PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS


Julián Alejandro Juspian, Esteban Lisandro Lasso
Facultad de ingeniería civil, programa ingeniería ambiental
([email protected], [email protected]).

RESUMEN
La prueba de Benedict es una reacción de oxidación, y ayuda al reconocimiento de azucares
reductores, se observa como un precipitado rojo ladrillo, por otro lado, el reactivo de Lugol reacciona
con almidón produciendo un color purpura. Las pruebas de reactivo de Benedict y Lugol del primer
procedimiento utilizando las muestras de sacarosa, almidón, sucralosa, glucosa, leche entera y
deslactosada, jugo natural de naranja, miel, papa y banano. y el segundo procedimiento la hidrolisis
de la sacarosa con reactivo de Benedict, se obtuvieron los resultados esperados. Pero para la
hidrolisis del almidón no, posiblemente la concentración del ácido no fue lo suficientemente alta
como para fracturar el polisacárido. Estas técnicas sirven para filtrar y encontrar más fácilmente los
carbohidratos (azucares) solo observando el cambio de color que toma las muestras.

Palabras clave: Reactivo de Benedict, reactivo de Lugol, azucares reductores, hidrolisis.

GENERAL TESTS FOR CARBOHYDRATES

ABSTRACT

Benedict's test is an oxidation reaction, and helps recognize reducing sugars as a brick red
precipitate, on the other hand, Lugol's reagent reacts with starch producing a purple color. The
Benedict and Lugol reagent tests of the first procedure using the samples of sucrose, starch,
sucralose, glucose, whole and lactose-free milk, natural orange juice, honey, potato and banana. and
the second procedure, the hydrolysis of sucrose with Benedict's reagent, the expected results were
obtained. But not for starch hydrolysis, possibly the concentration of the acid was not high enough to
fracture the polysaccharide. These techniques serve to filter and find carbohydrates (sugars) more
easily just by observing the color change that the samples take.

Keywords: Benedict's reagent, Lugol's reagent, reducing sugars, hydrolysis.

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Laboratorio de Bioquímica, Año 2022, Informe 2

1. INTRODUCCIÓN 2.2 Procedimiento experimental:

La prueba de Benedict es una reacción de oxidación, y


ayuda al reconocimiento de azucares reductores, es decir, 2.2.1 Prueba Benedict y Lugol
aquellos compuestos que presentan un OH- anomérico
libre, ejemplo: la glucosa, lactosa o maltosa.
 Prueba de Benedict
Esta reacción se puede reducir el Cu2+ que presenta un
Se agrega 1 mL (10 gotas con gotero) con cuatro gotas de
color azul en medio alcalino, el ion cúprico es capaz de
muestra, se mezcla y se coloca en agua en ebullición por
reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar a su
dos minutos.
forma Cu+, este ion se observa como un precipitado rojo
ladrillo correspondiente al oxido cuproso, que precipita de
la solución alcalina con un color rojo-naranja, y se  Prueba de Lugol
considera como evidencia de la existencia de un azúcar
reductor. (https://sites.google.com/site, s.f.) Se agrega dos gotas de lugol más 10 gotas de solución
muestra y se mezcla.
𝐶𝑢+2 → 𝐶𝑢+1
𝑖𝑜𝑛 𝑐𝑢𝑝𝑟𝑖𝑐𝑜 𝑖𝑜𝑛 𝑐𝑢𝑝𝑟𝑜𝑠𝑜 2.2.2 Hidrolisis de sacáridos
La prueba de yodo es una reacción química usada para
determinar la presencia o alteración de almidón u otros
polisacáridos una solución de yodo, disuelto en una Se toman 10 gotas de sacarosa más 10 gotas de HCl, se
solución de yoduro de potasio que reacciona con almidón mezcla, se calienta en un baño de agua maría por 10
produciendo un color purpura. minutos, en caliente se le adiciona el reactivo de Benedict
(https://sites.google.com/site, s.f.) y se calienta de nuevo.

Con estos conceptos claros se puede determinar si el 2.2.3 Hidrolisis de almidón


carbohidrato se oxida o se reduce o si es un polizacarido,
se hidroliza para reducirlos.  Solución en blanco

Se mezcla 5 gotas de Lugol y se observa su color, después


2. METODOLOGIA se calienta, se observa nuevamente su color, se procede
a enfriar y se observa si hay cambio.
2.1 Materiales y reactivos:
 Solución 2 y 3

Tipo Tipo En dos tubos de ensayo se agrega 5 gotas de HCl a cada


Pipeta graduada R. de uno más 2 ml de almidón 1%, el tubo 2 se calienta en baño
de 5 Ml Benedict María por tres minutos y el tubo 3 por quince minutos.
R. de
Gradilla lugol Las soluciones 1 y 2 se dividen en dos y se envasan en
tubos de ensayo, las mitades de la solución 1 se agregar
Frasco lavador HCl reactivo de Benedict y en otro el Lugol donde se observar
Materiales Termómetro sacarosa si hay cambios de color. De igual forma se realiza para las
Vaso de Reactivos mitades de la solución 2.
precipitado 100mL Glucosa
Vaso de
precipitado 250mL Almidón 3. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Tubos de ensayo Sacralosa

Material de papa, banano, miel (sobre y natural) jugo En la tabla 2 tenemos los datos de algunos carbohidratos
estudiantes de naranja, leche(deslactosada y entera) expuestos al reactivo de Benedict y Lugol estos se
comparan con el blanco que es una solución con dichos
Tabla 1. Materiales y Reactivos reactivos con agua.

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HCl, pudo ser el responsable de la no hidrolización del


almidón.

carbohidrato Benedict Lugol


blanco azul amarillo
Almidón +HCl
sacarosa azul amarillo
3min 15min
glucosa anaranjado amarillo
Lugol Lugol Benedict Lugol Benedict
almidón azul azul oscuro
violeta sin Azul sin Azul
sucralosa anaranjado amarillo final
azul cambio claro cambio claro
entera anaranjado blanco Tabla 4.Hidrolisis de almidón
leche
deslactosada amarillo blanco 4. CONCLUSIONES
jugo de naranja anaranjado amarillo
Estas técnicas sirven para filtrar y encontrar más
pura amarillo ------
miel fácilmente los carbohidratos (azucares), es posible solo
sobre anaranjado amarillo observando el color que toma las muestras.
banano N.A violeta oscuro
Se puede descomponer un polisacárido con un ácido
papa N.A violeta oscuro fuerte y después con los reactivos utilizados en esta
Tabla 2.Prueba de Benedict y Lugol práctica, saber si están formados por monosacáridos, tal
técnica es la hidrolisis de sacarosa y de almidón.
Es evidente que el Lugol solo es positivo para las muestras
que contengan almidón como la papa, el almidón 1% y el
banano, dado al cambio de color a azul o violeta oscuro. 5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Esto sucede ya que la fracción activa del almidón es la
amilosa, un polímero del azúcar α-D-glucosa, En Harris, D. L. (2003). Análisis químico cuantitativo 3°edicion . New
presencia de almidón, el yodo forma cadenas de York U.S.A.: REVERTÉ.
moléculas que se alojan a en el interior de la espiral de
https://sites.google.com/site. (s.f.). Obtenido de
amilosa y el color se torna azul oscuro. (Harris, 2003)
https://sites.google.com/site:
Los monosacáridos y el disacárido lactosa (leche entera) https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioqu
imica-i/prueba-del-almidon
son positivos para el reactivo de Benedict esto al cambio
de color amarillo o anaranjado
https://sites.google.com/site. (s.f.). Obtenido de
https://sites.google.com/site:
En la anterior tabla 2 la sacarosa dio como resultado
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioqu
negativo para el reactivo Benedict y Lugol. Pero ya que es
imica-i/carbohidratos/reaccion-de-benedict
un disacárido se puede fraccionar, para ello necesitamos
el HCl y obtendremos positivo para Benedict (ver tabla 3). Guía de laboratorio: Prueba generales para carbohidrato
Este cambio se da a que la sacarosa está compuesta por
los monosacáridos glucosa y fructosa. Recordemos que
para la prueba Benedict son positivos los monosacáridos.
6. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.

sacarosa + HCl Color 6.1 ¿Por qué la fructuosa da una prueba positiva con el
reactivo de Benedict el cual es específico para azucares
R. Benedict Anaranjado
reductores?
Tabla 3.Hidrolisis de sacarosa
Los azúcares reductores son aquellos que poseen su
En la tabla 4 se evidencia que no hubo resultados para
grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, la fructosa es
determinar que el almidón se fracciono con el reactivo
uno de ellos por tanto reacciona con Benedict.
Lugol, la muestra al final, no cambio de color y para el
reactivo de Benedict cambio a color azul concluyendo que 6.2 ¿Por qué el glucógeno y el almidón dan resultados
no hay azúcares reductores. La baja concentración de negativos para azucares reductores?

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el almidón no es un azúcar reductor debido a la ausencia


de hidrógeno en el oxígeno del círculo para permitir la
apertura del anillo.

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