Recepción de Muestras en El Laboratorio Memoria Laboral Terminada
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Las causas por las que se rechazará una petición y/o una muestra son:
2 - Espécimen mal identificado. Las muestras que se considerarán mal identificadas son
aquellas en las que:
>Sexo y edad.
Hay otros criterios de rechazo que no siempre se podrán identificar antes de la entrada al
sistema informático del laboratorio (SIL). Estos otros motivos de rechazo se comunicarán
en el informe de resultados, y son los siguientes:
1 - Muestra hemolizada:
Aquella muestra de plasma o suero en la que se ha producido la ruptura de hematíes
permitiendo la salida del contenido celular. La hemolisis” in vitro” se produce por una
extracción dificultosa o brusca, por uso de una aguja muy grande o muy pequeña, por una
brusca expansión de la sangre dentro del tubo, por una mala centrifugación, o por un
transporte incorrecto.
Hay determinaciones cuyos resultados se alteran cuando existe este problema bien por
interferencias metodológicas, bien por incorporación de sustancias que existen en el interior
de glóbulos rojos.1
2 - Muestra lipémica:
Aquella muestra de suero o plasma con alto contenido en grasa. Presenta un aspecto
blanquecino y puede deberse a una extracción de una muestra de un paciente con
alimentación parenteral o tras una ingesta copiosa. Hay determinaciones cuyos resultados
se alteran cuando existe este problema.1
3 - Muestra coagulada:
Aquella muestra que presenta coágulos parciales o total coagulación, y que se extrajo en
tubo con anticoagulante. Puede deberse a una extracción lenta, a una mezcla incorrecta del
anticoagulante con la muestra o a un defecto del propio anticoagulante.
Aquella muestra a la que no se pueden realizar todas las determinaciones solicitadas por
volumen insuficiente. No entrará en esta categoría la muestra que se agote por una
repetición o por un mal procesamiento en el laboratorio. También muestras que precisen un
volumen concreto para mantener la proporción con el anticoagulante y que incumplan este
requisito.1
5 - Muestra incorrecta:
Aquella muestra que estando bien extraída o recogida no se envía en las condiciones de
transporte indicadas, o se estropea durante el transporte: no se envía refrigerada o
congelada, se descongela, se derrama, se rompe durante el transporte, llega fuera de hora,
etc.1
Una vez que el personal técnico del laboratorio identifica que una muestra/solicitud se
encuentra dentro de uno de estos criterios, registrará la incidencia y se cumplimentará el
impreso de comunicación de incidencias de fase pre-analítica, que se remitirá al solicitante
para comunicarle el rechazo de la muestra y el motivo, así como una propuesta de acción
correctora: extracción de nueva muestra, citar de nuevo al paciente, etc.1
Manipulación de especímenes:
• Centrifugar los tubos primarios durante 10 minutos a 3500 r.p.m., tapados para evitar
evaporaciones de las muestras y aerosoles contaminantes. No se debe abrir la tapa de la
centrifuga hasta que no esté completamente parada.
c) Conservación
d) Refrigeración
Suero, plasma y muestras para análisis bacteriológico a analizar después de 4 h.
e) Congelación
Suero o plasma que se vaya analizar en un periodo mayor a 12 horas (solo aplica para
algunos parámetros).2
Por estos motivos se tiende a utilizar sistemas informáticos de gestión de laboratorio con
software cada vez más rápido y fiable. En el laboratorio que se ha diseñado todos los
registros serán realizados por los técnicos de laboratorio, o Diplomados de enfermería, y
revisados por un químico. Existirán dos modos de introducción de registros:
Electrónico: mediante una aplicación informática que integrará la petición efectuada por el
clínico desde su consulta al sistema informativo del laboratorio.
Manual: es el sistema tradicional con volante de papel e introducción manual de los datos
al sistema informático. Es más lento, implica trascripción de datos, y requiere más
personal.3
Se identificará cada muestra por folio y nombre del paciente (proceso de etiquetado), e
inmediatamente se elaborará una petición con los datos que han quedados recogidos en la
hoja de extracción donde figuran como fundamentales: el nombre del paciente, médico que
solicita el análisis, sexo, edad, ingesta y tratamiento del paciente, así como la localización y
teléfono del mismo. En el citado petitorio se marcan los perfiles y/o pruebas de laboratorio
a analizar.
2.1.1 Introducción:
. La bioquímica es la ciencia que estudia los componentes químicos de los seres vivos,
especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de otras
pequeñas moléculas presentes en las células. Moléculas que componen las células y los
tejidos, que catalizan las reacciones químicas de la digestión, la fotosíntesis y la inmunidad,
entre otras. Su estudio en el laboratorio se basa en la determinación de la concentración de
un analito (por ejemplo la glucosa, o la urea), en una muestra de origen biológico (sangre,
orina, etc.). 4
Al diseñar el proceso analítico se ha tenido muy en cuenta que esta rama es la que soportará
mayor volumen de procesado de muestras. De ahí que tengan mayores requerimientos en
cuanto a superficies, instalaciones y equipos.4 Para esta área en especial en el laboratorio de
análisis clínicos LABPAC utilizamos el analizador A15, que cumple con los requerimientos
del área, ya que es un instrumento muy completo y eficaz.
El control del instrumento se realiza on-line en tiempo real desde un ordenador PC externo
dedicado. El analizador lleva a cabo el análisis, paciente a paciente y permite la
introducción continua de muestras. Los resultados son mostrados inmediatamente después
de realizar cada medida. Un brazo manipulador cartesiano de tres ejes, lleva a cabo la
preparación de las reacciones. La dosificación se realiza mediante una bomba dosificadora
de pistón cerámico a través de una punta desmontable termostatizada con control Fuzzy
Logic. El analizador puede llevar a cabo una preparación cada 15 segundos. Una estación
de lavado garantiza que la punta se mantenga perfectamente limpia durante todo el proceso.
Las reacciones tienen lugar dentro de un rotor termostatizado a 370 C, en el que
directamente se realizan las lecturas de absorbancia mediante un sistema óptico integrado.6
Debido a su diseño tan practico, la interfaz de usuarios ágil, simple y muy gráfica,
separando claramente las tareas diarias de rutina y las tareas menos frecuentes. Todos los
datos y resultados se almacenan de forma segura. En el podemos programar un número
indefinido de procedimientos de medida (técnicas), perfiles de técnicas y racks de reactivos,
dependiendo solamente de la capacidad del disco duro del ordenador. El analizador nos
permite trabajar con 5 tipos de muestras: suero, orina, líquido cefalorraquídeo sangre total y
plasma. Para cada uno de ellos es posible adaptar cada procedimiento de medida.6
3.- Observar que encienda el LED (indicador frontal derecho) y esperar un beep del
analizador.
4.- En ese momento entrar al software de A15 (icono MORADO con una “A”), dar doble
clic.
5.- Checar el nivel de las soluciones (liquido de sistema / solución de lavado), verificar que
el contenedor de residuos este vacío.
8.- Terminando W-Up, dar clic en N-Rotor para contabilizar en ceros los pocillos
utilizados.
3.- Seleccionar las pruebas que se correrán. Para seleccionar varias pruebas se deja
presionando el botón “Ctrl” control.
4.- Una vez seleccionada las pruebas se pasan del otro lado con la flecha que se encuentra
en medio de los dos cuadros.
5.- Se palomean los controles. Si ese día se calibra, nos vamos a la pestaña de blancos y
calibradores y se palomean.
6.- Nos regresamos a la pestaña de controles y se posicionan desde ahí en la parte superior.
Programación de pacientes:
1.- Dar clic en el tubo de ensayo o en el menú, “sesión de trabajo” y submenú “nueva
muestra”.
3.- Seleccionar las pruebas que se le correrán a ese paciente. Para seleccionar varias
pruebas se deja presionando el botón “Ctrl” control.
4.- Una vez seleccionada las pruebas se pasan del otro lado con la flecha que se encuentra
en medio de los dos cuadros.
NOTA: -Para borrar un paciente, solo se selecciona con un clic el paciente, y se da clic en
el borrador.
-Para cambiar el nombre a un paciente ya dado de alta, nos posicionamos sobre le nombre y
le damos un clic en el botón derecho y ya nos permitirá cambiar el nombre.
5.- Una vez terminada la lista de pacientes, nos vamos a la pestaña de controles y
seleccionamos todos los controles correspondientes.
6.- Posicionamos desde la pestaña de pacientes. Mandamos a posicionar con el icono que se
encuentra en el extremo inferior derecho.
-Si se manda posicionar a partir de la pestaña de pacientes; manda a posicionar todos los
pacientes, blanco, calibradores y controles que se hayan posicionado.
1.-Para las muestras, seleccionar “rack de muestra” y se seleccionar el icono que está en la
parte inferior izquierda, de “automuestras” (tubo de ensayo).
2.-Colocar físicamente los reactivos y muestras en el orden que se muestra en esta pantalla.
Para ver el orden de los reactivos y muestras dar clic en las bandejas del número 1 al 4
según sea el caso.
5.- Nos manda a nuestra pantalla principal (monitor). Se activa el icono “Start” el cual
debemos seleccionar para que el analizador comience a procesar nuestras muestras.
Resultados actuales:
1.-Para ver los resultados dar clic en el menú “estado actual” y submenú “resultados” o
dando clic en el icono de la hojita azul. En la pantalla aparece un cuadro con tres pestañas;
Pacientes, Técnicas y Calculadas.
2.-Para checar los resultados de los pacientes seleccionar la pestaña de pacientes, para los
controles y calibradores en la pestaña de técnicas.
3.-Una vez terminada la lista de trabajo, se pueden ver los controles en las gráficas. Esto lo
vemos en el menú de “históricos” y submenú “control de calidad”.
4.-Para repetir un resultado seda clic en el cuadrito blanco que se encuentra al inicio de
cada línea de resultado, y se presiona el icono que aparece en la parte superior derecha con
una flechita azul formando un semicírculo que significa “repetir muestras seleccionadas”.
5.-Nos vamos a la pantalla “monitor” y se presiona “continuar” para que el equipo realice
las repeticiones.
Cierre de analizador:
1.- Resetear (borrar) la sesión de trabajo en la pantalla “monitor” en el icono del sol.
2.- Retirar el rotor de reacciones y lavarlo con agua corriente, después colocarlo durante 30
minutos en solución de lavado (del equipo A-15) y enjuagarlo en solución salina.
Glucosa:
Características diagnosticas:
La hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a fármacos,
venenos, errores congénitos del metabolismo o gastrectomía previa. El diagnóstico clínico
no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe
integrar los datos clínicos y del laboratorio.9
Reactivos:
Fosfatos 100 mmol/L. fenol 5 mmol/L glucosa oxidasa > 10 U/mL, peroxidoasa > 1U/mL,
4-aminoantipirina 0.4 mmol/L, pH 7.5. El reactivo y el patrón son estables hasta la fecha
de caducidad indicada en la etiqueta, siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la
temperatura adecuada (2-80 C) y se evite la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Suero y plasma: 8
Urea:
Características diagnósticas:
La uremia postrenal es causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario: nefrolitiasis
tumor o hipertrofia prostática. La utilidad de la urea de la urea como indicador de la
función renal está limitada por la variabilidad de su concentración plasmática como
consecuencia de factores no renales.11
Reactivos:
-Reactivo A: Tris 100 mmol/L, 2-oxoglutarato 5.6 mmol/L, ureasa >140 U/mL, glutamato
deshidrogenasa >140 U/mL, etilenglicol 220 g/L, sodio azidasa 0.95 g/L, pH 8.0.
Para que el reactivo esté listo para su uso, vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del
reactivo A. Agitar suavemente y si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la
proporción: 4 mL de reactivo A + 1 mL de reactivo B. El reactivo trabajo (reactivo en uso)
es estable 2 meses a 2-80 C.
Nota: Reactivos nocivos para la salud en caso de ingestión. Los reactivos y el patrón son
estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre y cuando se conserven
bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite la contaminación durante el
uso.
Muestras:
Suero, plasma u orina recogidos mediante procedimientos estándar. Diluir la orina 1/50
con agua destilada antes del ensayo.
Procedimiento:
Valores de referencia:
-Suero y plasma: 15-39 mg/dL BUN= 2.5-6.5 mmol/L urea. En el periodo neonatal las
concentraciones son inferiores mientras que en personas mayores de 60 años se encuentran
valores superiores a los adultos. Las concentraciones también tienden a ser ligeramente
superiores en hombre que en mujeres.8
-Orina: 26-43 g/24 hrs urea= 12-20 g/24hrs BUN= 428-714 mmol/24 hrs urea.8
Creatinina:
Características diagnosticas:
Reactivos:
-Reactivo A: Hidróxido sódico 0.4 mol/L, detergente. Irritante (xi) irrita los ojos y la piel.
NOTA: Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta, siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-
300C) y se evite la contaminación durante el uso. Se deben mezclar volúmenes iguales de
reactivo A y reactivo B. Homogeneizar.
Muestras:
Suero, plasma y orina, recogidos mediante procedimientos estándar. Diluir la orina fresca
1/50 con agua destilada antes de medir. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA,
oxalato o fluoruro, no interfieren.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Suero y plasma: 13
Ácido úrico:
Características diagnosticas:
En el hombre el ácido úrico es el principal producto del catabolismo de las bases puricas,
las cuales se obtienen en parte de la dieta y en parte de la síntesis in vivo.
Concentraciones elevadas de ácido úrico en suero u orina pueden ser atribuibles a una
sobreproducción de urato (síntesis incrementada de purinas) o una eliminación defectuosa
de urato.
El ácido úrico presente en la muestra origina, según las reacciones acopladas descritas a
continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.14
Reactivos:
Fosfatos 100 mmol/L, detergente 1.5 g/L, diclorofenolsulfonato 4 mmol/L, uricasa > 0.12
U/mL ascorbato oxidasa > 5 U/mL, peroxidasa > 1 U/mL, 4-aminoantipirina 0.5 mmol/L,
pH 7.8.
El reactivo y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Suero, plasma y orina, recogidos mediante procedimientos estándar. Diluir la orina 1/10
con agua destilada antes de medir. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o
fluoruro, no interfieren.
El ácido úrico en orina es estable 4 días a temperatura ambiente si se ajusta al pH a >8 con
NaOH. No refrigerar.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Suero y plasma: 8
Orina: 8
Colesterol total:
Características diagnosticas:
El colesterol es un lípido esteroide de alto peso molecular que contiene una estructura
cliclopentanofenantreno. El colesterol de la dieta se absorbe parcialmente y también se
sintetiza en el hígado y otros tejidos. El colesterol se transporta en el plasma en las
lipoproteínas. Se excreta a la bilis como tal o tras su transformación en ácidos biliares.8
Tanto el colesterol libre como el esterificado presente en la muestra originan, según las
reacciones acopladas descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por
espectrofotometría. 15
Reactivos:
-Reactivo A: Pipes 35 mmol/L, colato sódico 0.5 mmol/L, fenol 28 mmol/L, colesterol
esterasa > 0.2 U/mL, colesterol oxidasa >0.1 U/mL, 4-aminoantipirina 0.5 mmol/L, pH 7.0.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Los siguientes valores discriminantes universales han sido establecidos por el US National
Cholesterol Education Program y también aceptados en otros países para la evaluación del
riesgo de las arterias coronarias.16
Colesterol-HDL:
Características diagnosticas:
Las HDL (lipoproteínas de alta densidad) participan en l captación del colesterol de los
tejidos y en su transporte hacia el hígado en donde se eliminan en forma de ácidos biliares.
El colesterol de las lipoproteínas de baja densidad (LDL), las de muy baja densidad
(VLDL) y los quilomicrones es Hidrolizado por el colesterol oxidasa mediante una reacción
enzimática acelerada no formadora de color. El detergente presente en le reactivo B
solubiliza el colesterol de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se cuantifica
espectrofotométricamente mediante las reacciones acopladas descritas a continuación.17
Reactivos:
-Reactivo A: 1 x 60 mL. Buffer Good, colesterol oxidasa <1 U/mL, peroxidasa <1 U/mL,
N, N-bis (4-sulfobutil) -m-toluidina (DSBmT) 1 mmol/L.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Características diagnosticas:
Los triglicéridos son esteres de glicerol y ácidos grasos que provienen de la dieta o son
sintetizados principalmente en el hígado. Los triglicéridos se transportan en el plasma en las
lipoproteínas y son utilizados por el tejido adiposo. Su principal función es suministrar
energía a la célula.11
Los triglicéridos presentes en la muestra originan, según las reacciones acopladas descritas
a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.18
Reactivos:
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso. El reactivo abierto y conservado en el compartimiento
refrigerado del analizador es estable 2 meses.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Los siguientes valores discriminantes universales han sido establecidos por el US National
Cholesterol Education Program y también aceptados en otros países para la evaluación del
riesgo de las arterias coronarias.16
Magnesio:
Características diagnosticas:
Reactivos:
Reactivo A: 5x 16 mL. Carbonato de sodio 0.1 mol/L, EGTA 0.1 mmol/L, trietanolamina
0.1 mol/L, cianuro de potasio 7.7 mmol/L, acido de sodio 0.95 g/L.
Reactivo B: 2x 10 mL, Glicina 25 mmol/L, azul de xilidilo 0.5 mmol/L, cloroacetamida 2.6
g/L.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Suero, plasma u orina recogidas mediante procedimientos estándar. Las muestras no deben
presentar hemolisis ni lipemia. El magnesio en suero o plasma es estable 10 días a 2-80C.
Utilizar heparina como anticoagulante.
Recoger la orina de 24 horas con 10 mL de ácido clorhídrico al 10% (v/v). Estable una
semana a 2-80C. Centrifugar o filtrar y diluir 1/5 con agua destilada antes de medir.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Calcio:
Características diagnosticas:
Una hipercalcemia puede ser debida a intoxicación por vitamina D, aumento de la retención
renal, osteoporosis, sarcosidosis, hiperparatiroidismo, mieloma múltiple, hipercalcemia
idiopática infantil y carcinoma metastásico del hueso.20
Reactivos:
Muestras:
Recoger la orina de 24 horas con 10 mL de ácido nítrico al 50%. Estable 10 días a 2-80C.
Centrifugar o filtrar y diluirla 1/2 antes de medir.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Fosforo:
Características diagnosticas:
Reactivos:
Reactivo A: 3x 40 mL. Ácido sulfúrico 0.36 mol/L, cloruro de sodio 154 mmol/L.
Reactivo B: 1x 50 mL. Ácido sulfúrico 0.36 mol/L, cloruro de sodio 154 mmol/L,
heptamolibdato de amonio 3.5 mmol/L. Conservar de 15- 300 C
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-300 C) y se
evite la contaminación durante el uso.
Muestras:
Recoger la orina de 24 horas con 10mL de ácido clorhídrico al 10% (v/v). Estable 10 días
de 2-300C. Centrifugar o filtrar y diluir 1/10 con agua destilada antes de medir.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Las concentraciones en plasma son unos 0.25 mg/dL (0.08 mmol/L) más bajas que en el
suero.
Hierro:
Características diagnosticas:
La concentración sérica del hierro resulta afectada por numerosas condiciones fisiológicas
o patológicas. La variabilidad intermediaria es bastante elevada en personas sanas. Las
principales alteraciones del metabolismo del hierro son la deficiencia de hierro y la
sobrecarga de hierro, no obstante pueden también encontrarse alteraciones del hierro en
diversas enfermedades.8
La medición de hierro sérico no debe ser utilizada como prueba para la identificación de
una deficiencia de hierro.8
El ion férrico presente en la muestra y unido a la transferrina es liberado por acción del
guanidinio y reducido a ferroso por el ácido ascórbico
El ion ferroso forma un complejo coloreado con la ferrozina que se cuantifica por
espectrofotometría.21
Reactivos:
Reactivo A: 5 x40 mL. Cloruro de guanidinio 1.0 mol/L, tampón acetato 0.4 mol/L, pH 4.0.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 40 µg/dL
Reactivo (A) 240 µg/dL 240 µg/dL
Reactivo (B) 60 µg/dL 60 µg/dL
3.- El analizador pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 0 C y se
lleva a cabo la reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un
sistema óptico integrado.
Valores de referencia:
-Suero y plasma:8
Proteínas totales:
Características diagnosticas:
La proteína presente en la muestra reacciona con los iones (cobre II) en medio alcalino,
originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría. 22
Reactivos:
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-300 C) y se
evite la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Suero, Adultos:
Albúmina:
Características diagnosticas:
Reactivos:
Reactivo A: Tampón acetato 100 mmol/L, verde de bromocresol 0.27 mmol/L, detergente
pH 4.1.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
-Suero:8
Características diagnosticas:
Reactivos:
Reactivo A: Glicilglicina 206.25 mmol/L, hidróxido sódico 103 mmol/L, pH 7.9. Irrita los
ojos y la piel.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del reactivo A. Agitar
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de
reactivo A + 1 mL de reactivo B. Estable 2 meses a 2-80C.
Muestras:
Suero recogido mediante procedimientos estándar. La gamma-glutamil transferasa en suero
es estable 5 días a 2-80C.
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 100 µL
Reactivo (trabajo) 1.0 mL 1.0 mL
3.- El analizador pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 0 C y se
lleva a cabo la reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un
sistema óptico integrado.
Valores de referencia:8
Temperatura de
Hombres Mujeres
reacción
250C <22 U/L <15 U/L
300C <35 U/L <24 U/L
370C <55 U/L <38 U/L
Características diagnosticas:
Reactivos:
-Reactivo A: tris 121 mmol/L, L-aspartato 362 mol/L, malato deshidrogenasa <460 U/L,
lactato deshidrogenasa < 660 U/L, hidróxido sódico 255 mmol/L, pH 7.8. Provoca
irritación cutánea.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 50 µL
Reactivo (trabajo) 1.0 mL 1.0 mL 3.- El analizador
pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 C y se lleva a cabo la
0
reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un sistema óptico
integrado.
Valores de referencia:
Características diagnosticas:
Reactivos:
-Reactivo A: Tris 150 mmol/L, L-alanina 750 mol/L, lactato deshidrogenasa < 1350 U/L,
pH 7.3.
-Reactivo B: NADH 1.9 mmol/L, 2-oxoglutarato 75 mmol/L. hidróxido sódico 148
mmol/L, acido de sodio 9.5 g/L. Nocivo en caso de ingestión.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del reactivo A. Agitar
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de
reactivo A + 1 mL de reactivo B. Estable 2 meses a 2-80C.
Muestras:
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 50 µL
Reactivo (trabajo) 1.0 mL 1.0 mL
3.- El analizador pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 0 C y se
lleva a cabo la reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un
sistema óptico integrado.
Valores de referencia:
Características diagnosticas:
La lactato deshidrogenasa se encuentra presentes en todas las células del, organismo
aunque sus mayores concentraciones hallan en el hígado, corazón riñón, músculo
esquelético, y eritrocitos. 8
Reactivos:
Reactivo A: 1x 40 mL. Tris 100 mmol/L, piruvato 2.75 mmol/L, cloruro de sodio 222
mmol/L, pH 7.2.
Reactivo B: NADH 1.55 mmol/L, acido de sodio 9,5 g/L. nocivo en caso de ingestión.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del reactivo A. Agitar
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de
reactivo A + 1 mL de reactivo B. Estable 2 meses a 2-80C.
Muestras:
El suero o plasma debe separarse de los elementos celulares lo antes posible. No utilizar
muestra hemolizadas. La lactato deshidrogenasa en suero o plasma es estable 2 días a
temperatura ambiente y 24 horas a 2-80C, utilizar heparina como anticoagulante.
Procedimiento:
Valores de referencia:26
Adultos
Temperatura de reacción
U/L µkat/L
25 C0
105-210 1.70-3.5
300C 140-280 2.3-4.70
370C 207-414 3.40-6.80
Bilirrubina total:
Características diagnosticas:
Reactivos:
Reactivo AT: 5 x 40 mL. Ácido sulfanilico 29mmol/L, ácido clorhídrico 0.2 mol/L,
cetramida 50 mmol/L. provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-300 C) y se
evite la contaminación durante el uso.
Muestras:
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 10 mg/dl
Reactivo (A) 240mg/dl 240 mg/dl
Reactivo B 60mg/dl 60 mg/dl
3.- El analizador pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 0 C y se
lleva a cabo la reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un
sistema óptico integrado.
Valores de referencia:
Adultos: 8
Características diagnosticas:
Reactivos:
-Reactivo A: 5 x 40 mL. HEDTA 2.0 mmol/L, cloruro de sodio 152 mmol/L. Puede
provocar una reacción alérgica en la piel.
-Reactivo B1: 5x 9 mL. Ácido sulfanilico 29 mmol/L, ácido clorhídrico 130 mmol/L.
Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.
-Reactivo B2: 1x 6.5 mL. Nitrito de sodio 25 mmol/L.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-300 C) y se
evite la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: reactivo A (listo para su uso). Añadir 1 ml de reactivo B2 en el frasco del
reactivo B1. Agitar suavemente. Estable 30 días a 2-80C.
Muestras:
Procedimiento:
Blanco Muestra
Muestra --- 10 mg/dl
Reactivo (A) 240 mg/dl 240 mg/dl
Reactivo (B) 60 mg/dl 60 mg/dl
3.- El analizador pipetea el reactivo y la muestra en el rotor en donde se incuba a 37 0 C y se
lleva a cabo la reacción, para después realizar las lecturas de absorbancia mediante un
sistema óptico integrado.
Valores de referencia:
-Adultos: 8
α-Amilasa:
Características diagnosticas:
Reactivos:
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del reactivo A. Agitar
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de
reactivo A + 1 mL de reactivo B. Estable 20 días a 2-80C.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
Lipasa:
Características diagnosticas:
Las lipasas hidrolizan los esteres de glicerol con ácidos grasos d cadenas largas. Aunque
existen glándulas y mucosas que secretan esta enzima nicamente la lipasa pancreática tiene
interés diagnóstico. Así la medicación de concentración de lipasa tiene utilidad para
investigar trastornos pancreáticos, la concentración de lipasa sérica aumenta como
consecuencia de una pancreatitis aguda. En general tanto la amilasa como a lipasa sigue el
mismo curso aunque la elevación de lipasa persiste durante más tiempo. Las elevaciones de
la concentración de lipasa también pueden ser debidas a una obstrucción del conducto
pancreático por un cálculo o bien por un carcinoma, en enfermedades renales aguda o
crónica, y como consecuencia de tratamiento con opiáceos.11
Reactivos:
Reactivo A: 1x 50 ml. Tampón tris 40 mmol/L, colipasa ≥1 mg/L, deoxicolato ≥ 1.8
mmol/L, taurodesoxicolato ≥ 7.0 mmol/L, pH 8.3.
Patrón de lipasa: reconstruir el liofilizado con 1.00 ml de agua destilada. Estable 7 días a 2-
80C o bien 3 meses a -18 0C.
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (2-80 C) y se evite
la contaminación durante el uso.
Muestras:
Suero o plasma con heparina de sodio, amonio o litio recogido mediante procedimientos
estándar. La lipasa en la muestra es estable 7 días a 2-80C.
Procedimiento:
Valores de referencia:
Fosfatasa alcalina:
Características diagnosticas:
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza en medio alcalino la transferencia del grupo fosfato del
4-nitofenilfosfato al 2-amino-3-metil-1-propanol (AMP), liberando 4-nitrofenol. La
concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación de 4-nitrofenol,
medido a 405 nm. 30
Reactivos:
Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta,
siempre y cuando se conserven bien cerrados, a la temperatura adecuada (15-300 C) y se
evite la contaminación durante el uso.
Reactivo trabajo: vaciar el contenido del reactivo B en el frasco del reactivo A. Agitar
suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de
reactivo A + 1 mL de reactivo B. Estable 2 meses a 2-80C.
Muestras:
Procedimiento:
Valores de referencia:
2.2.1. Introducción:
La hematología es la rama de la ciencia que se encarga del estudio de los elementos formes
de la sangre y sus precursores, así como de los trastornos estructurales y bioquímicos de
estos elementos, que puedan conducir a una enfermedad. Es una ciencia que comprende el
estudio de la etiología, diagnóstico, tratamiento, pronóstico y prevención de las
enfermedades de la sangre y órganos hemolinfoproductores.31
La sangre es un fluido de color rojo y aspecto viscoso que es bombeado por el corazón a
través del sistema vascular para llegar a todos los tejidos y volver de nuevo al corazón. la
sangre consta de un líquido color amarillo denominado plasma y diferentes elementos
formes, que se encuentran suspensión.31
El plasma forma el 50-55 % de la sangre total y a su vez el agua forma el 90% del plasma
el 10% restante lo forman diferentes sustancias disueltas como proteínas, enzimas,
electrolitos o sustancias de desecho. Si eliminamos el fibrinógeno del plasma sanguíneo lo
denominamos suero.31
Método de detección:
Razón de la dilución:
-Sangre venosa:
Volumen de muestra: ----------55µL
Encender:
Lista de trabajo:
3. –Introduzca los datos del paciente utilizando el teclado y teclas numéricas de la pantalla.
Para cambiar los conceptos de entrada, utilice las teclas “retroceso (back) y siguiente
(next).
Resultados:
Cuando los resultados del paciente ya están listos el apartado de ID se colorea, lo cual
indica que ya están medios los parámetros.
1. –En la pantalla de “lista de trabajo” escoja el ID que usted desee exhibir en el resultado
de medición.
2. –Presione la tecla de “si” (yes) para borrar datos. Oprima la tecla “no” para no borra
datos.
2. –Oprima la tecla de “bórrense datos” (delete data). Aparece le mensaje “¿borro todos los
datos? (dete all data).
3. – Presione la tecla “si” (yes) para borrar datos. Oprima la tecla “no” para no borrar datos.
Apagar:
Para apagarlo totalmente, presione el interruptor de energía principal del panel trasero.
Verifique que la lámpara de energía principal en el panel delantero este apagada.
Biometría hemática:
La biometría hemática es uno de los estudios que con más frecuencia se solicita la
laboratorio, tanto en los pacientes ambulatorios como los pacientes hospitalizados; así
mismo es el primer examen al que nos enfrentamos en la valoración diagnostica de una
paciente. Aunque se considera un solo examen de laboratorio, valora tres estirpes celulares,
cada una con funciones diferentes entre sí, pero que comparten un origen común en la
célula ósea: eritrocitos, leucocitos y plaquetas.33A
Eritrocitos:
Los hematíes son las células sanguíneas de mayor nuero. Son producidos en la medula
ósea, de modo que cuando logran su madures son soltados al torrente sanguíneo a modo de
células enucleadas. Normalmente son células con forma de discos bicóncavos, con un
diámetro medio de 8 micras, de espesor 2 micras y 1 micra en el centro aproximadamente,
siendo el volumen medio de 83 micras cubicas.31
La forma del eritrocito cambia cuando atraviesa los capilares, gracias a que a su exceso de
membrana frente a la cantidad de materia que contiene es capaz de estirar la membrana
hasta el punto de no romperla, algo que claro ocurre en una célula normal. Su principal
función es trasportar la hemoglobina y así llevar el oxígeno desde los pulmones a los
diferentes tejidos del cuerpo.31
Los valores de referencia que manejamos en el laboratorio “Labpac” para este conteo
celular son: 4.2 – 6.2 k/µL (masculino) y 4.2 – 5.4 k/µL (femenino).
Hematocrito:
Es un examen que mide, que porcentaje del volumen de toda la sangre son glóbulos rojos.
Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño. 31
Valores de referencia:
-Anemia.
-Sangrado.
-Desnutrición.
-Sobrehidratación.
-Cardiopatías congénitas.
-Deshidratación.
-Eritrocitosis.
-fibrosis pulmonar.
-Policitemia vera.
Hemoglobina:
La hemoglobina es una proteína compleja que está formada por un grupo “hem” y por la
globina, que se encuentra en el citoplasma del glóbulo rojo, que llega a construir el 95%
del peso de los hematíes, esta proteína se confiere al hematíe sus características.31
Su función principal es recoger el oxígeno de los alveolos pulmonares y llevarlo hacia los
tejidos y a su vez recoger el CO2 producido y de nuevo llevarlo hacia los pulmones para ser
liberado y volver a captar el O2. El CO2 que no es trasportado por la Hb ira disuelto en el
plasma en forma de bicarbonato. 34A
Valores normales:
El VGM Mide el tamaño de los eritrocitos y se calcula por la relación entre el Hematocrito
y el recuento de eritrocitos, su valor se expresa en fentolitros (fl). Con este valor, las
anemias se clasifican en microcíticas (volumen corpuscular medio [VCM] disminuido) y
macrocíticas (VCM aumentado).31
Debido a que la valoración del tamaño de los hematíes es fundamental para el diagnóstico
de una anemia, el VCM es el más importante de todos los índices eritrocitarios, aun en los
caso en los que la cifra de hematíes sea normal, debe anotarse la cifra del VCM en el
informe hematológico, ya que la anemia declarada puede ir precedida de una anomalía en el
tamaño medio de los hematíes. 34A
Los valores normales en el laboratorio “Labpac” para el volumen corpuscular medio van de
78 a 98 fl.
CHCM:
Aunque la hemoglobina está presente sólo en el interior de los hematíes, éstos se lisan para
medir la concentración de hemoglobina y los resultados se expresan con relación al del de
sangre total. Para convertir este valor en concentración de hemoglobina dentro del hematíe,
(CHCN) se divide la cifra de hemoglobina por la del hematocrito, es decir, por el volumen
de sangre total que ocupan los hematíes. Los límites normales de la CHCM oscilan entre 27
y 35 g/dl de hematíes (expresados habitualmente, de forma simple, como 27-35%). 31
Reticulocitos:
–Porta-objetos.
Técnica:
1. –En un tubo de cristal limpio colocar 2 gotas de sangre, y una gota de colorante azul de
metileno.
2. –mesclar perfectamente.
La cifra normal de reticulocitos en la sangre periférica (SP) es de 0.5 a 2.0%, pero antes de
interpretar el valor de la cuenta conviene corregir la cifra mediante la siguiente fórmula:
Serie blanca:
Leucocitos:
Los leucocitos o glóbulos blancos, son las células nucleadas de la sangre circulante, esto
nos permite diferenciarlos con facilidad de las otras células presentes. Participan en la
defensa del organismo frente a las infecciones. 31
Se pueden clasificar atendiendo a diferentes criterios:
Reactivos:
–Colorante de Wright.
Técnica:
6. –Verlo al microscopio con objetivo 100x y aceite de inmersión. Realizar conteo tomando
en cuenta las características únicas de cada glóbulo blanco.
• Recuento diferencial de Schilling.
Las plaquetas, junto con los glóbulos rojos y el plasma, constituyen una proporción
importante en la sangre humana y animal. Microscópicamente, se ven como pequeños
óvalos espinas o púas, y sólo pueden ser vistos por este medio, ya que su tamaño promedio
es de unas cuatrocientas milésimas de pulgada (1 a 3,5 um).31
Las plaquetas son fragmentos de las células madre en la médula ósea, también conocidos
como los megacariocitos. Estimulados por la trombopoyetina hormonal, las plaquetas se
desprenden los megacariocitos y entran al torrente sanguíneo. Cuando el endotelio de los
vasos sanguíneos se daña, las plaquetas se adhieren al sub-endotelio e inician la hemostasia
primaria, la cual será defectuosa si el número o la función de las plaquetas son anormales.
Las plaquetas producidas en condiciones fisiológicas normales sobreviven en la circulación
durante siete a 10 días antes de terminar su corta vida en el bazo. 31, 33D
Por el contrario, un número más bajo de lo normal puede dar lugar a hemorragias
extensas y causar daños graves al paciente. La disminución del número de plaquetas se
denomina trombocitopenia y puede deberse a tres mecanismos: disminución de su
producción en la médula ósea, por ejemplo en la aplasia medular, o por reemplazo, como en
las leucemias agudas; su destrucción periférica, más a menudo por un fenómeno
autoinmune, o secundaria a su secuestro, como en el caso de crecimiento esplénico
secundario a cirrosis hepática. Sin embargo, en algunos casos, inducir a un número
plaquetario inferior puede ser posible, por ejemplo, si una persona tiene alta sensibilidad a
los movimientos o ha tenido una cirugía de corazón. El número de plaquetas se puede
bajar por una ingesta diaria de ácido acetilsalicílico u otras drogas que lo ayudan a
reducir. 31 Y 33D
2. –Colocar 100 micro litros de plasma del paciente y 100 micro litros de tromboplastina,
en una cubeta de plástico.
Tiempo de sangrado:
Reactivos: Ninguno
Tecnica:
1. –Seleccionar una zona del antebrazo en donde no haya alguna vena visible. Limpial con
alcohol esazona.
4. -
4. –Con una hoja de papel filtro, absorber toda la sangre que haya salido en ese momento y
después cada 30 segundos.
b) Área Inmunología
La inmunología clínica es el estudio de las enfermedades causadas por los desórdenes del
sistema inmunitario. También involucra enfermedades de otros sistemas, donde las
reacciones inmunológicas juegan un papel en los rasgos clínicos y patológicos. Las
enfermedades causadas por los desórdenes del sistema inmunológico se dividen en dos
amplias categorías:
1.-Serologia:
2.- Hormonas: