Informe 1 Tinción de Gram

Universidad San Francisco de Quito
Laboratorio de Microbiología de Alimentos
Laboratorio 1°:
Tinción de bacterias y manejo del microscopio
Integrantes:
Rebeca Ruiz (213673)
Gabriela Sandoval (211276)
Rafaela Contreras (210554)
Grupo N°6
Fecha de la práctica:
29/09/2022
Resultados:
Figura N°1: Tinción de bacterias

Discusión:
Los microorganismos son organismos vivos con tamaños muy reducidos, por esta razón
se los mide en micrómetro (µm) y son imperceptibles para el ojo humano. Para poder
observarlos es necesario el uso de un microscopio, ya sea óptico o electrónico, dependiendo el
microorganismo a ser analizado.
Generalmente, se utiliza el microscopio óptico, el cual es un "equipo que al combinar
dos sistemas de lentes (ocular y objetivos) permite aumentar la imagen de una muestra"
(Guzmán, 2015). Existen dos tipos de lentes objetivos, los secos que no necesitan ningún medio
líquido para observar la muestra, y el de inmersión, el cual es el 100X y usa un aceite para
completar su poder de aumento y resolución. El aceite de inmersión genera el medio óptimo
homogéneo al paso de la luz entre el portaobjeto y la lente frontal del objetivo, esto permite
que la imagen aumente en 1000 diámetros (Universidad Nacional de la Patagonia [UNP],

2017). En la microbiología es fundamental el uso del objetivo de inmersión debido a que este
proporciona la mayor amplificación, la cual es necesaria para observar a la mayoría de los
microorganismos con excepción de los virus. En la presente práctica se observó bacterias y
levaduras, los tamaños de estos microorganismos son de alrededor de 0,1 a 5 µm y 3 a 40 µm
respectivamente (Grupo Técnico de Microbiología de la RENALOA, 2014), lo que los hace
imperceptibles al ojo humano. Es por dicha razón que el empleo del lente de inmersión 100x
es esencial para analizar y estudiar una imagen nítida de los microorganismos.
El proceso con el que se tiñeron las diferentes muestras del laboratorio pertenece al
método de tinción Gram el cual es un tipo de tinción diferencial el cual requiere de cuatro
soluciones en las cuales están un colorante denominado cristal violeta, un mordiente como el
lugol, el cual es una sustancia que provoca más afinidad entre célula y tinte, un decolorante el
cual fue cetona y un segundo tinte de contraste que fue la safranina. (Tinción de Gram, n.d.)
con lo cual se logró diferenciar las diferentes bacterias.
Según lo observado en esta técnica, las bacterias se dividen en dos grupos de acuerdo a
sus características estructurales, en este caso se las clasificó en Gram positivas y Gram
negativas (Mandigan, T., M. Martinko, S. Bender., H. Buckley., A. Stahl, 2015, p. 29). Estas
se diferenciaron por su coloración, las bacterias Gram positivas se tornaron de color morado,
mientras que las Gram negativas de color rosado. Las características de la pared celular de cada
muestra son las que le dan las propiedades a cada microorganismo. La pared celular de las
bacterias Gram negativas está constituida por una capa fina de péptidoglicano y una membrana
celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa
constituida por péptidoglicano, pero no cuentan con membrana celular externa (Corrales, L.,
& Caycedo, L. 2020). Esto es lo que determinó las características de tinción de cada muestra.
La principal limitante que hay que tener en cuenta en la tinción Gram es que no todas
las bacterias se tiñen por esta técnica, debido a que no todas tienen pared celular, como, por
ejemplo, los micro plasmas. Las microbacterias son otro tipo de microorganismos, las cuales
tienen su pared celular con una composición química diferente por lo que requieren de otro tipo
de tinción especifica (Corrales, L., & Caycedo, L. 2020).
Con estas especificaciones de la tinción de Gram y el debido uso del microscopio, se
analizó las diferentes muestras del laboratorio, donde se observó que la placa 1 (a) al realizarla
el debido proceso de la tinción de Gram, se tornó de color rosa dándose a notar que fueron
bacilos Gram negativos los cuales tiene una forma alargada, mientras que en la placa 3 (c) las
bacterias se tornaron de color violeta/morado debido a que fueron bacilos Gram positivas con
la misma forma que los Gram negativos. En cuento a la placa 2 (b) se observó una coloración
violeta/morado dando como resultado la presencia de levaduras ya que estas no son bacterias
por ende no tiene peptidoglicano y no son Gram. (Lab Tests Online-ES, 2022) y estos poseen
una forma circular, siempre están unidos y son grandes. En la placa 4 (d) se observó bacterias
de coloración violeta con forma circular pero más pequeñas y juntas en forma de racimo por lo
que se determinó coco Gram positivas al igual que la placa 6 (f) siendo esta la muestra del
cultivo “X” correspondiente al grupo N°6, mientras que en la placa 5 (e) se observó todo lo
contrario, es decir, bacterias de color rosado y no tan circulares por lo que se definió como coco
Gram negativas.
Bibliografía:
Corrales Ramírez, L. C., & Caycedo Lozano, L. (2020). Principios fisicoquímicos de los
colorantes utilizados en microbiología Principios fisicoquímicos de los colorantes.
Nova, 18(33). https://doi.org/10.22490/24629448.370
Grupo Técnico de Microbiología de la RENALOA. (2014). Microorganismos indicadores.
Gobierno de Argentina.
http://www.anmat.gov.ar/renaloa/docs/analisis_microbiologico_de_los_alimentos_vol
_iii.pdf
Guzmán M. (2015). Remoción de la aberración cromática lateral en imágenes de microscopía
óptica de campo claro. Repositorio Institucional de IPICYT.
https://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/bitstream/1010/815/3/TDIPICYTG8R4
2015.pdf
Mandigan T, Martinko M, Bender S, Buckley H, Stahl A. (2015). Biología de los
microorganismos. Quinceava Edición, Madrid, Editorial, Addison-Wesley.
Tinción de Gram – Microbiología. (s.f.). Recuperado de:
https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35696/tincion_de_gram.pdf
Tinción de Gram | Lab Tests Online-ES. (2022). Labtestsonline.es. Obtenido de:
https://labtestsonline.es/tests/tincion-de-
gram#:~:text=La%20tinci%C3%B3n%20de%20Gram%20suele,han%20crecido%20e
n%20el%20cultivo.
Universidad Nacional de la Patagonia [UNP]. (2017). Microscopía/Microscopía Ambiental.
Facultad de Ciencias Naturales y Ciencias de la Salud.

http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microambiental/wp-content/uploads/2018/03/TP-2-
Microoscopia.pdf

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Figura N°1: Tinción de bacterias

observarlos es necesario el uso de un microscopio, ya sea óptico o electrónico, dependiendo el

microorganismo a ser analizado.

Generalmente, se utiliza el microscopio óptico, el cual es un "equipo que al combinar

completar su poder de aumento y resolución. El aceite de inmersión genera el medio óptimo

que la imagen aumente en 1000 diámetros (Universidad Nacional de la Patagonia [UNP],

proporciona la mayor amplificación, la cual es necesaria para observar a la mayoría de los

microorganismos con excepción de los virus. En la presente práctica se observó bacterias y

levaduras, los tamaños de estos microorganismos son de alrededor de 0,1 a 5 µm y 3 a 40 µm

respectivamente (Grupo Técnico de Microbiología de la RENALOA, 2014), lo que los hace

es esencial para analizar y estudiar una imagen nítida de los microorganismos.

con lo cual se logró diferenciar las diferentes bacterias.

de tinción especifica (Corrales, L., & Caycedo, L. 2020).

Con estas especificaciones de la tinción de Gram y el debido uso del microscopio, se

colorantes utilizados en microbiología Principios fisicoquímicos de los colorantes.

Nova, 18(33). https://doi.org/10.22490/24629448.370

Grupo Técnico de Microbiología de la RENALOA. (2014). Microorganismos indicadores.

Guzmán M. (2015). Remoción de la aberración cromática lateral en imágenes de microscopía

óptica de campo claro. Repositorio Institucional de IPICYT.

Mandigan T, Martinko M, Bender S, Buckley H, Stahl A. (2015). Biología de los

microorganismos. Quinceava Edición, Madrid, Editorial, Addison-Wesley.

Tinción de Gram – Microbiología. (s.f.). Recuperado de:

Tinción de Gram | Lab Tests Online-ES. (2022). Labtestsonline.es. Obtenido de:

Universidad Nacional de la Patagonia [UNP]. (2017). Microscopía/Microscopía Ambiental.

Facultad de Ciencias Naturales y Ciencias de la Salud.

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