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Medio L.I.A. Los cambios en el pH se verifican gracias al contenido de

(Lysine – Iron – Agar) púrpura de bromocresol: la producción de ácido se ve
como cambio del color a amarillo con valores de pH
8 inferiores a 5.2, en tanto que la alcalinización como

l
cambio del indicador hacia el púrpura con valores de pH
2 sobre 6.8. La actividad de la lisina decarboxilasa se
observa como un viraje hacia el color púrpura en todo el

h
medio de cultivo, o bien como medio de cultivo sin cambio
285-173 (neutro) en la columna de agar, en tanto que la ausencia
de la enzima produce un viraje hacia el color amarillo en

V Material para Diagnóstico In Vitro

la columna y neutro en la zona inclinada.

La actividad de la lisina deaminasa de los de algunos

microorganismos, como los géneros Proteus y
Presentación: Providencia, se observa como color rojizo en la zona
inclinada, con fondo amarillo en el tubo.
Medio de cultivo listo para su uso.
Estuche de 30 unidades, agar tendido envasado en tubos También puede observarse producción de gas por efecto
taponados de 16x125 mm. (ref. 285-173). de fermentación de la glucosa.
______________________________________________
Materiales y Reactivos necesarios, pero no
Composición (gramos / litro): suministrados:
Extracto de levadura 3.00 Estufa de cultivo.
Digesto pancreático de gelatina: 5.00 Asa de siembra.
Dextrosa 1.00
L-lisina HCL 10.00 PRECAUCIONES PARA SU USO ADECUADO:
Citrato de Amonio Férrico: 0.50
Tiosulfato de sodio: 0.04 Material para diagnóstico In Vitro.
Púrpura de Bromocresol: 0.02 Sólo para el uso de personal calificado.
Agar Bacteriológico 13.50 Contiene compuestos de origen animal, la inocuidad no
pH final medio de cultivo listo para el uso: 6.5 +/- 0.2 es garantizada. Requiere manipulación con precaución
______________________________________________ relativa a productos potencialmente infecciosos. No
ingerir ni inhalar el producto.
Uso Previsto: No debe ser usado como materia prima para ninguna
otra fabricación.
Medio de cultivo diferencial para la identificación de No debe usarse pasado su fecha de expiración.
enterobacterias, según su capacidad de fermentar No debe usarse si el envase esta deteriorado. Material
glucosa, degradar lisina y generar H2S. garantizado solo con sellos intactos.
No debe usarse si se observa contaminación
bacteriana.
Descripción:
Ambientar los tubos antes de su uso. No utilizar con
condensación excesiva.
El Medio de Lisina y hierro (L.I.A.) es un medio de cultivo Para la interpretación de los resultados se debe tener
ampliamente utilizado para la diferenciación de bacilos en cuenta las características propias de cada especie
Gram negativos entéricos, especialmente miembros del bacteriana sometida a prueba.
género Salmonella, sobre la base de la producción de El material utilizado debe descartarse de manera
H2S y la actividad de la enzima Lisina decarboxilasa. segura de acuerdo a las normativas de bioseguridad
También es posible observar cambios debidos a la vigentes en el país.
actividad de la enzima lisina deaminasa, característica
del género Proteus y Providencia. Conservación:
Las peptonas y el extracto de levadura aportan Conservado refrigerado entre 2º y 8º C es estable hasta
aminoácidos y nutrientes esenciales, la dextrosa la fecha de caducidad. El medio de cultivo se debe
constituye una fuente de energía. almacenar taponado y en posición vertical.
El citrato de amonio ferrico y el tiosulfato de sodio actúan
como marcadores de la producción de H2S, en este caso Muestras a cultivar:
se observa el desarrollo de sulfuro de hierro negro en el
tubo.. El agar actúa como agente gelificante Cepas aisladas de bacilos Gram negativos
(enterobacterias, especialmente Salmonellas), que deban

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ser sometidas a pruebas de identificación, resultado se declara en el Certificado de Analisis emitido
específicamente producción de H2S, lisina decarboxilasa para cada lote.
y lisina deaminasa. No obstante, el usuario puede someter este medio de
cultivo a sus propios controles de calidad según su propio
Inoculación: criterio, lo que podría quedar fuera de la garantía
certificada. A modo de referencia, puede realizarse el
Antes de realizar la siembra, permitir que el medio de siguiente ensayo de control de calidad:
cultivo alcance la temperatura ambiente. Sembrar las
muestras mediante estría en la superficie tendida y una Resultados esperados tras 24 horas de cultivo a 35º-37ºC:
picadura vertical y profunda en el centro del tubo.
Tabla de Control de Resultados para el Medio L.I.A.
Cepa de Control desarrollo Reacción H2S gas.
Incubación: en el tubo
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Bueno K/K + +
Incubar por 24 a 48 horas entre 35º y 37ºC . Escherichia coli ATCC 25922 Bueno K/K (-) + / (-)
Algunas cepas pueden requerir mayor tiempo de Proteus mirabilis ATCC 25933 Bueno R/A (-) (-)
incubación. Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 Bueno K/K (-) + / (-)
Shigella flexneri ATCC 12022 Bueno K/A (-) (-)
Lectura e Interpretación de Resultados:

Una vez completado el período de incubación, observar Limitaciones de Uso:

el desarrollo microbiano en la superficie tendida y en la
columna del tubo. Considerar el viraje de pH por El Agar Lisina- Hierro (L.I.A.) es un medio de cultivo
alcalinización (púrpura) o acidificación (amarillo). diferencial, por lo que su uso está recomendado para la
Observe además la producción de H2S como color negro taxonomia bacteriana basada en pruebas bioquímicas.
en el tubo, y la generación de gas No se recomienda su uso para aislamiento general o
selectivo, ni para manutención de cepas.
Compare los resultados de acuerdo a los siguientes Los resultados obtenidos deben complementarse con
patrones: otras pruebas bioquímicas para obtener la identificación
de especie bacteriana.
1.- Producción de H2S
Resultado positivo: el desarrollo microbiano produce Certificados de Análisis:
coloración negra en el medio de cultivo en todo el tubo.
Resultado negativo: ausencia de coloración negra. Certificados de Análisis para cada lote pueden ser
2.- Lisina decarboxilasa: consultados por el cliente en el sitio web
Resultado positivo: se verifica como alcalinización (K) del www.valtekdiagnostics.com
medio de cultivo con un viraje hacia el púrpura en todo el
tubo, o como medio de cultivo neutro. Eliminación de Desechos:
Resultado negativo: se observa acidificación (A) con
viraje hacia el amarillo en la columna del tubo, y El usuario es responsable de la adecuada eliminación de
alcalinización (color púrpura) en la zona inclinada. los materiales para diagnóstico microbiológico estén
3.- Lisina deaminasa: utilizados o no, para lo que deberá estar en conocimiento
Resultado positivo: producción de color rojo granate (R) cabal de la normativa local vigente respecto de la
en la superficie inclinada. disposición de material infeccioso o potencialmente
Resultado negativo: ausencia de color rojo granate. infeccioso. Cada laboratorio asume la responsabilidad de
la gestión de sus desechos y efluentes, sea por cuenta
Registre sus resultados relacionando los cambios de pH propia o mediante terceros que garanticen el adecuado
en el plano inclinado y en la columna del tubo, observe tratamiento de estos, y según lo determinen las
además la producción de H2S y gas. reglamentaciones locales vigentes.

Ejemplo: Referencias:
Inclinado alcalino (K), columna ácida (A), con H2S, (+) y Ederer, G.M., and M. Clark. 1970. Motility-Indole-Ornithine medium. Appl.
Microbiol. 2:849.
sin gas, (-): Oberhofer, T.R., and R. Hajkowski. 1970. Evaluation of non-lactose-
Anotación: K/A +/ (-) fermenting members of the Klebsiella-Enterobacter-Serratia
Division. I. Biochemical characteristics. Am. J. Clin. Pathol. 54:720.
La evaluación de los resultados es válida solo para las
condiciones de tiempo, y temperatura de incubación
señalados. Períodos de incubación prolongados, o a
mayores temperaturas pueden alterar la respuesta del
medio de cultivo para estos aspectos.
Control de Calidad:

El control de calidad de la performance se ajusta a los

criterios de diseño y desarrollo del producto, y su Rev.03: 11/2019 CIO

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