Realizado por: Noelia Irala Villarreal, Álvaro Recuero Gavete,

Carolina Rodríguez Pereira, Rita Amar, Ezz Al Dahhan

Asignatura de Bioinformática
Índice:
1. Introducción
2. Materiales y métodos
3. Resultados y discusión
3.1 Estudio de la enzima
3.1.1 Secuencia
3.1.2 Propiedades fisico-químicas
3.1.3 Características estructurales
3.1.4 Familia a la que pertenece: principales características y super familia
3.2 Estudio de fármaco
3.2.1 Estructura
3.2.2 Propiedades fisico-químicas
3.2.3 Mecanismo de acción
3.2.3.1 unión del fármaco a la diana terapéutica
3.2.4 Farmacodinámica
3.2.5 Farmacocinética
3.2.5.1. Absorción
3.2.5.2. Distribución
3.2.5.3. Biotransformación
3.2.5.4. Eliminación
3.2.6 Eficacia terapéutica
3.2.6.1 Pacientes adultos
3.2.6.2 Pacientes pediátricos
3.2.7 Seguridad y toxicidad
3.2.8 Mecanismo de resistencia al fármaco
4. Conclusiones
5. Bibliografía

1
1. Introducción
El Oseltamivir es un fármaco antiviral del grupo de los inhibidores de la neuraminidasa, enzima externa del virus
influenza. (2)
Se puede encontrar disponible en la versión genérica o con el nombre comercial Tamiflu® en administración oral.
Aprobado por la FDA para el tratamiento temprano de la influenza sin complicaciones. (2) Este fármaco está
indicado en adultos y niños, incluidos los recién nacidos, siempre y cuando presenten los signos y síntomas de la
gripe. (1)
La presentación comercializada es vía oral en formato cápsulas de 30, 45 o 75 mg, pues se ha demostrado que
posee una buena biodisponibilidad. Mientras que para pacientes pediátricos y adultos con dificultad en la deglución
de cápsulas o por necesidad de dosis más bajas a las comercializadas en este formato, se presenta en polvo para
suspensión oral de 6 mg/ml. (1)

El virus de la influenza pertenece a la familia Orthomyxoviridae, con genoma ARN monocatenario de sentido
negativo segmentado. En la actualidad se conocen tres serotipos que afectan al ser humano, la Influenza A, B y
C. (3) La envoltura lipídica que posee, contiene insertadas dos tipos de glucoproteínas codificadas por el virus, la
hemaglutinina (HA) y la neuraminidasa (NA), las cuales están expuestas como espigas, y son importantes en la
determinación de la variación antigénica de estos virus y la inmunidad del hospedador. (4)
La Influenza de tipo A, se considera la más importante como causa de enfermedad, pues posee una gran
variabilidad antigénica. En cuanto a la Influenza de tipo B es capaz de producir cambios antigénicos, y a veces
causa epidemias, pero con menor grado que el serotipo anterior. Y con respecto a la influenza de tipo C es el que
presenta mayor estabilidad antigénica, por lo que rara vez causa enfermedad, siendo los más afectados los
inmunocomprometidos. (4)

En este trabajo nos centraremos en estudiar profundamente sobre el antiviral, así pues, se estudiará su estructura,
mecanismo de acción, propiedades fisicoquímicas y su implicación en los procesos LADME, además de su eficacia
terapéutica. No obstante, también se estudiará la enzima neuraminidasa del virus de la Influenza, la cual es capaz
de inhibir dicho antiviral.

2. Materiales y métodos
La información general de la enzima se ha obtenido a través de la base de datos de uniprot, la secuencias de
aminoácidos de la enzima fue obtenida a traves de Uniprot, mientras que la secuencia de nucleótidos que codifica
a la enzima se ha obtenido de GenBank, la información con respecto a la estructura de las enzimas se obtuvieron
a través de Protein Data Bank y la imagen de su estructura de Pymol, la información correspondiente a la familia
de la neuraminidasa se ha obtenido de la base de datos de InterPro y la superfamilia a través del alineamiento de
la secuencia con BLAST, para calcular parámetros físicos y químicos de la enzima se utilizó ProtParam.
Respecto a la información del fármaco y su estructura, se ha recopilado información de varias fuentes como
Pubmed, pubchem y AEMPS. Las estructuras y moléculas 2D y 3D fueron realizadas en Pymol y en Chemsketch.

3. Resultados y discusión
3.1. Estudio de la enzima:
3.1.1. Secuencia
El Oseltamivir inhibe la neuraminidasa tanto del virus de la influenza (1) La neuraminidasa es una enzima con
función sialidasa, lo que significa que elimina los ácidos siálicos de las glicoproteínas H y N que permite al virus
ser liberado. (7)
Código de uniprot Q6BC95, revisada, nombre de la proteína es Hemagglutinin-neurominidase, nombre del gen es
NH, el organismo donde se extrajo esta secuencia es Mumps orthorubulavirus (virus de influenza).

Neuraminidasa del virus de influenza A

El nombre de la proteína es neuraminidasa y el nombre del gen es NA.
La función de la neuraminidasa es catalizar la eliminación de residuos de ácido siálico terminal de glicoconjugados
virales y celulares. Separa los ácidos siálicos terminales en el HA glicosilado facilitando la liberación del virus,
además, ayuda a la propagación del virus a través de la circulación al eliminar aún más los ácidos siálicos de la
superficie celular. Estas escisiones evitan la autoagregación y aseguran la propagación del virus de una célula a
otra, ya que, de lo contrario, la infección estaría limitada a una sola ronda de replicación, también puede facilitar
la invasión viral de las vías respiratorias superiores al dividir los restos de ácido siálico en la mucina de las células
epiteliales de las vías respiratorias. Es probable que desempeñe un papel en el proceso de gemación a través de

2
su asociación con balsas de lípidos durante el transporte intracelular. La actividad de sialidasa en el tráfico tardío
de endosomas/lisosomas parece mejorar la replicación del virus.

Secuencia de aminoácidos en formato FASTA de la enzima neuraminidasa del virus de influenza A, obtenida de
Uniprot con el código Q6DPL2_9INFA.
>tr|Q6DPL2|Q6DPL2_9INFA Neuraminidase OS=Influenza A virus OX=284218 GN=NA PE=1 SV=1
MNPNQKIITIGSICMVTGIVSLMLQIGNMISIWVSHSIHTGNQHQSEPISNTNFLTEKAV
ASVKLAGNSSLCPINGWAVYSKDNSIRIGSKGDVFVIREPFISCSHLECRTFFLTQGALLNDKHSNGTVKDRSPHR
TLMSCPVGEAPSPYNSRFESVAWSASACHDGTSWLTIGISGPDNGAVAVLKYNGIITDTIKSWRNNILRTQESECA
CVNGSCFTVMTDGPSNGQASHKIFKMEKGKVVKSVELDAPNYHYEECSCYPNAGEITCVCRDNWHGSNRPWV
SFNQNLEYQIGYICSGVFGDNPRPNDGTGSCGPVSSNGAYGVKGFSFKYGNGVWIGRTKSTNSRSGFEMIWDP
NGWTETDSSFSVKQDIVAITDWSGYSGSFVQHPELTGLDCIRPCFWVELIRGRPKESTIWTSGSSISFCGVNSDT
VGWSWPDGAELPFTIDK

Secuencia de nucleótidos en formato FASTA de neuraminidasa del virus de influenza A obtenida de GenBank,
con el código FJ766839.1
>AY651447.1 Influenza A virus (A/Viet Nam/1203/2004(H5N1)) neuraminidase (NA) gene,
complete cds
ATGAATCCAAATCAGAAGATAATAACCATCGGATCAATCTGTATGGTAACTGGAATAGTTAGCTTAATGTTACAAATTGGGAA
CATGATCTCAATATGGGTCAGTCATTCAATTCACACAGGGAATCAACACCAATCTGAACCAATCAGCAATACTAATTTTCTTA
CTGAGAAAGCTGTGGCTTCAGTAAAATTAGCGGGCAATTCATCTCTTTGCCCCATTAACGGATGGGCTGTATACAGTAAGGAC
AACAGTATAAGGATCGGTTCCAAGGGGGATGTGTTTGTTATAAGAGAGCCGTTCATCTCATGCTCCCACTTGGAATGCAGAAC
TTTCTTTTTGACTCAGGGAGCCTTGCTGAATGACAAGCACTCCAATGGGACTGTCAAAGACAGAAGCCCTCACAGAACATTAA
TGAGTTGTCCTGTGGGTGAGGCTCCCTCCCCATATAACTCAAGGTTTGAGTCTGTTGCTTGGTCAGCAAGTGCTTGCCATGAT
GGCACCAGTTGGTTGACGATTGGAATTTCTGGCCCAGACAATGGGGCTGTGGCTGTATTGAAATACAATGGCATAATAACAGA
CACTATCAAGAGTTGGAGGAACAACATACTGAGAACTCAAGAGTCTGAATGTGCATGTGTAAATGGCTCTTGCTTTACTGTAA
TGACTGACGGACCAAGTAATGGTCAGGCATCACATAAGATCTTCAAAATGGAAAAAGGGAAAGTGGTTAAATCAGTCGAATTG
GATGCTCCTAATTATCACTATGAGGAATGCTCCTGTTATCCTAATGCCGGAGAAATCACATGTGTGTGCAGGGATAATTGGCA
TGGCTCAAATCGGCCATGGGTATCTTTCAATCAAAATTTGGAGTATCAAATAGGATATATATGCAGTGGAGTTTTCGGAGACA
ATCCACGCCCCAATGATGGAACAGGTAGTTGTGGTCCGGTGTCCTCTAACGGGGCATATGGGGTAAAAGGGTTTTCATTTAAA
TACGGCAATGGTGTCTGGATCGGGAGAACCAAAAGCACTAATTCCAGGAGCGGCTTTGAAATGATTTGGGATCCAAATGGGTG
GACTGAAACGGACAGTAGCTTTTCAGTGAAACAAGATATCGTAGCAATAACTGATTGGTCAGGATATAGCGGGAGTTTTGTCC
AGCATCCAGAACTGACAGGACTAGATTGCATAAGACCTTGTTTCTGGGTTGAGTTGATCAGAGGGCGGCCCAAAGAGAGCACA
ATTTGGACTAGTGGGAGCAGCATATCTTTTTGTGGTGTAAATAGTGACACTGTGGGTTGGTCTTGGCCAGACGGTGCTGAGTT
GCCATTCACCATTGACAAGTAG

La neuraminidasa contiene 8 dominios, de los cuales, 6 son de tipo EGF (factor de crecimiento epidérmico), que
presentan una longitud de alrededor de 50 aminoácidos y presentan tres puentes disulfuro; uno es conservado de
las anafilotoxinas, que también son producidas por el sistema de complemento, y otro es VWFC con una longitud
de alrededor de 70 aminoácidos.

Neuraminidasa del virus de influenza B

Su función es catalizar la eliminación de residuos de ácido siálico terminal de glicoconjugados virales y celulares.
Código de Uniprot C0LT34, nombre de la proteína es neuraminidase, nombre del gen es NA.
Secuencia de aminoácidos en formato FASTA de la enzima neuraminidasa del virus de influenza B, obtenida de
Uniprot con el código C0LT34.
>tr|C0LT34|C0LT34_9INFB Neuraminidase OS=Influenza B virus OX=604436 GN=NA PE=1 SV=1
MLPSTIQTLTLFLTSGGVLLSLYVSASLSYLLYSDILLKFSPTEITAPTMPLDCANASNVQAVNRSATKGVTLLLPEP
EWTYPRLSCPGSTFQKALLISPHRFGETKGNSAPLIIREPFIACGPNECKHFALTHYAAQPGGYYNGTRGDRNKL
RHLISVKLGKIPTVENSIFHMAAWSGSACHDGKEWTYIGVDGPDNNALLKVKYGEAYTDTYHSYANKILRTQESA
CNCIGGNCYLMITDGSASGVSECRFLKIREGRIIKEIFPTGRVKHTEECTCGFASNKTIECACRDNSYTAKRPFVKL
NVETDTAEIRLMCTDTYLDTPRPNDGSITGPCESNGDKGSGGIKGGFVHQRMESKIGRWYSRTMSKTERMGMG
LYVKYDGDPWADSDALAFSGVMVSMKEPGWYSFGFEIKDKKCDVPCIGIEMVHDGGKETWHSAATAIYCLMGS
GQLLWDTVTGVDMAL

Secuencia de nucleótidos en formato FASTA de neuraminidasa del virus de influenza B obtenida de GenBank,
con el código FJ766839.1

3
 >FJ766839.1:54-1454 Influenza B virus (B/Brisbane/60/2008) segment 6 NB protein
(NB) and neuraminidase (NA) genes, complete cds
ATGCTACCTTCAACTATACAAACGTTAACCCTATTTCTCACATCAGGGGGAGTATTATTATCACTATATGTGTCAGCTTCATT
ATCATACTTACTATATTCGGATATATTGCTAAAATTCTCACCAACAGAAATAACTGCACCAACAATGCCATTGGATTGTGCAA
ACGCATCAAATGTTCAGGCTGTGAACCGTTCTGCAACAAAAGGGGTGACACTTCTTCTCCCAGAACCGGAGTGGACATACCCG
CGTTTATCTTGCCCGGGCTCAACCTTTCAGAAAGCACTCCTAATTAGCCCTCATAGATTCGGAGAAACCAAAGGAAACTCAGC
TCCCTTGATAATAAGGGAACCTTTTATTGCTTGTGGACCAAATGAATGCAAACACTTTGCTCTAACCCATTATGCAGCCCAAC
CAGGGGGATACTACAATGGAACAAGAGGAGACAGAAACAAGCTGAGGCATCTAATTTCAGTCAAATTGGGCAAAATCCCAACA
GTAGAAAACTCCATTTTCCACATGGCAGCATGGAGCGGGTCCGCGTGCCATGATGGTAAGGAATGGACATATATCGGAGTTGA
TGGCCCTGACAATAATGCATTGCTCAAAGTAAAATATGGAGAAGCATATACTGACACATACCATTCCTATGCAAACAAAATCC
TAAGAACACAAGAAAGTGCCTGCAATTGCATCGGGGGAAATTGTTATCTTATGATAACTGATGGCTCAGCTTCAGGTGTTAGT
GAATGCAGATTTCTTAAGATTCGAGAGGGCCGAATAATAAAAGAAATATTTCCAACAGGAAGAGTAAAACACACTGAGGAATG
CACATGCGGATTTGCCAGCAATAAAACCATAGAATGTGCCTGTAGAGATAACAGTTACACAGCAAAAAGACCTTTTGTCAAAT
TAAACGTGGAGACTGATACAGCAGAAATAAGATTGATGTGCACAGATACTTATTTGGACACCCCCAGACCAAACGATGGAAGC
ATAACAGGCCCTTGTGAATCTAATGGGGACAAAGGGAGTGGAGGCATCAAGGGAGGATTTGTTCATCAAAGAATGGAATCCAA
GATTGGAAGGTGGTACTCTCGAACGATGTCTAAAACTGAAAGGATGGGGATGGGACTGTATGTCAAGTATGATGGAGACCCAT
GGGCTGACAGTGATGCCCTAGCTTTTAGTGGAGTAATGGTTTCAATGAAAGAACCTGGTTGGTACTCCTTTGGCTTCGAAATA
AAAGATAAGAAATGCGATGTCCCCTGTATTGGGATAGAGATGGTACATGATGGTGGAAAAGAGACTTGGCACTCAGCAGCAAC
AGCCATTTACTGTTTAATGGGCTCAGGACAGCTGCTGTGGGACACTGTCACAGGTGTTGACATGGCTCTGTAA

3.1.2. Propiedades físico-químicas

Neuraminidasa del virus de influenza A

La neuraminidasa está compuesta por cuatro cadenas de 387 aminoácidos cada una. Las cadenas están
compuestas de 3.077 átomos y tiene un peso de 43,9 kDa. Su estructura se ha determinado por difracción de
rayos X, con una longitud de 2,8 y 2,5 Å. El valor de R obtenido, (grado de similitud entre el modelo cristalográfico
obtenido y el resultado experimental hallado por cristalografía), es de 0,179.

Código de Data Protein Bank es 3CL2

La neuraminidasa está compuesta por ocho cadenas, con un total de 449 aminoácidos. La enzima es una hidrolasa
y presenta 23.840 átomos, con un peso molecular total de 339,54 kDa. Su estructura se ha determinado por
difracción de rayos X, con una longitud de 2,8 y 2,5 Å. El valor de R obtenido, que es el grado de similitud entre el
modelo cristalográfico obtenido y el resultado experimental hallado por cristalografía, es de 2,54 Å por lo que no
presenta una muy buena resolución ya que es mayor de 2 Å. La enzima presenta un punto isoeléctrico de 6,26,
su fórmula química es C2158H3298N596O666S26, por lo que está compuesta por 2158 carbonos, 3298 de hidrógenos,
596 de nitrógenos, 666 de oxígenos y 26 de sulfuro, el total de moléculas cargadas negativas ( aspartato +
glutamato) son 40 y el total de moléculas cargadas positivamente (arginina + lisina) son 36, el coeficiente de
extinción es 100015 en unidades de M-1 cm-1, a 280 nm medidos en agua, asumiendo que todos los residuos de
cisteínas proviene de cristinas que es lo que sucede fisiológicamente, el tiempo de vida media estimado es de 30
horas en mamíferos, presenta un índice de inestabilidad de 31,21 por lo que se considera que la molécula es
estable, el índice alifático es 69,42 y su promedio de hidropaticidad es de -0,272.

Neuraminidasa del virus de influenza B

Neuraminidasa del virus de influenza B, código de Data Protein Bank es 4CPM, es una hidrolasa, la enzima
presenta un peso molecular de 105,67 kDa, tiene una longitud de 466 aminoácidos y no contiene ninguna
mutación, está compuesta por dos cadenas A y B, el número total de átomos es de 6.342, su punto isoeléctrico
es 7,10 su estructura se ha determinado a través del método de difracción de rayos X con una resolución de 2,75
Å se considera que no presenta muy buena resolución ya que debe ser menor de 2 Å y presenta un valor de R de
0,162, presenta un total de residuos cargados positivamente (arginina + lisina) de 48 y un total de residuos
cargados negativamente (aspartato + glutamato) de 48, su composición atómica es 2257 de carbonos, 3519 de
hidrógenos, 609 de nitrógenos, 682 de oxígeno y 32 de sulfuro, su fórmula química es C 2257H3519N609O682S32 ,el
coeficiente de extinción es de 74925 en unidades de M-1 cm-1, a 280 nm medidos en agua, la vida media estimada
en mamíferos in vitro es de 30 horas, su índice de inestabilidad es de 39,96 por lo que esta proteína se considera
estable, su índice alifático es de 74,12 y su promedio de hidropaticidad es de -0,236.

4
3.1.3. Características estructurales
Neuraminidasa del virus de influenza A
La enzima neuraminidasa está compuesta por ocho cadenas A, B, C, D, E, F, G y H, presenta 8 ligandos de
(3R,4R,5S)-4-(acetilamino)-5-amino-3-(pentan-3-yloxy) uno en cada cadena de la enzima, presenta 24 hélices ,la
primera va de la asparagina 104 a serina 110, la estructura presenta una resolución de 2,54 Å, contiene 64 enlaces
disulfuro el cual el primer enlace de disulfuro es entre la cisteína 92 y la cisteína 417, la publicación relacionada
con la enzima es Crystal Structures of Oseltamivir-resistanat Influenza Virus Neuraminidase Mutants publicada en
2008.

Cada cadena de las 4 que forman la neuraminidasa tiene 4 dominios, que son SCOP/SCOPe, SCOP2, ECOD y
CATH. Todos los dominios están compuestos de una estructura secundaria de seis hélices beta, pero los dominios
SCOP/SCOPe y SCOP2 se engloban dentro de la superfamilia de las sialidasas, al igual que el dominio SCOP2.

Figura 1: Dominios SCOP/SCOPe, SCOP2, ECOD y CATH de la neuraminidasa del virus de influenza A

Figura 2: estructura de la proteína neuraminidasa Figura 3: representación de la cristalización por distracción de

del virus de influenza A obtenida de Pymol rayos X de la neuraminidasa del virus de la influenza A, obtenida a
través de swiss-model de Uniprot realizada en 2008-05-20.

Neuraminidasa del virus de influenza B

La neuraminidasa está compuesta por dos cadenas A y B, la publicación relacionada con la estructura es A Novel
I221 L Substitution in Neuraminidase Confers High Level Resistanve to Oseltamivir in Influenza B Viruses y fue
depositada 2014-02-07, para realizar su actividad catalítica utiliza como cofactor Ca(2+) y presenta 10 ligandos
de los cuales dos de ellos son uniones con calcio uno en la cadena A y otro en la cadena B, 7 ligandos que son
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopiranosa y el último ligando es beta-D-manopiranosa, contiene 4 hélices dos
en la cadena A y dos en la cadena B respectivamente, la primera va de serina en la posición 98 a glicina de la
posición 103, la segunda hélice va de la prolina 195 a la asparagina 198, la tercera hélice va de la serina 98 a
glicina 103 y el ultimo va de la prolina 195 a asparagina 198, también presenta 16 puentes de disulfuro 8 en la
cadena A y los otros 8 en la cadena B, el primer puente de disulfuro se da entre las cisteínas de la posición 86 y
416.

5
 Figura 5: representación de la cristalización por difracción de rayos
Figura 4: estructura de la proteína neuraminidasa del virus
X de la neuraminidasa del virus de la influenza A obtenida a través
de la influenza A obtenida de Pymol
de swiss-model de Uniprot realizada el 2014-05-14.

Figura 6: Dominios SCOP/SCOPe y SCOP2 de la neuraminidasa del virus de influenza B

Figura 7: Dominios ECOD y CATH de la neuraminidasa del virus de influenza B.

3.1.4. Familia a la que pertenece: principales características y superfamilia

Neuraminidasa del virus de la influenza A
La enzima pertenece al virus de influenza A de la superfamilia sialidasa y se clasifica por su función dentro de la
familia de las enzimas hidrolasas.
En el alineamiento con BLAST se observa que otras secuencias del mismo virus presenta un porcentaje de
similitud alto, esto quiere decir que las secuencias con las que fueron alineadas presentan alta similitud en su
secuencia de aminoácidos, esta información es útil para la utilización del fármaco ya que puede ser activo frente

6
a las distintas variedades del virus, también presenta un query cover alto esto nos indica que se ha alineado toda
la secuencia, el E value es cero esto nos indica que la probabilidad de que el alineamiento se haya hecho al azar
es cero y por último el score ha salido alto por lo que el alineamiento ha sido bueno (figura 8).
el segundo alineamiento con BLAST se ha realizado frente a la base de datos de Protein Data Bank, el
alineamiento se ha realizado con la neuraminidasa de otros virus como el H1N1 o con otras estructuras
cristalizadas de la neuraminidasa y se observa que el porcentaje de identidad disminuye, ya que la secuencia de
aminoácidos de la neuraminidasa presenta cierta diferencia con la de otros virus, el query cover varía entre 100%
a 86%, por lo que en unos casos el alineamiento se ha realizado con toda la secuencias y en otros casos con una
parte de la secuencia, el E value es de cero por lo que la probabilidad de que el alineamiento se haya dado al azar
es de cero y por último presenta un score alto (figura 9).

Figura 8: alineamiento con BLAST de la neuraminidasa del virus de influenza A

Figura 9: alineamiento con Blast frente a la base de datos de Protein Data Bank de la neuraminidasa del virus de influenza A

Neuraminidasa del virus de la influenza B

La enzima pertenece al virus Influenza B de la superfamilia es sialidasa y se clasifica por su función dentro de la
familia de enzimas hidrolasa.
Alineamiento con BLAST de la neuraminidasa del virus de la influenza B se observa que el porcentaje de similitud
con otras neuraminidasas del virus de influenza B son muy altos, esto puede ser debido a que presentan gran
parte de similitud en su secuencia y la diferencia puede deberse de ciertas mutaciones que contenga la secuencia,
se ha obtenido un query cover de 100% esto nos indica que se ha alineado toda la secuencia, también tenemos
un E value de 0, esto quiere decir que la probabilidad de los alineamientos se hayan realizado al azar es cero y
por último el score ha sido alto por lo que se podría decir que el alineamiento se ha realizado óptimamente (figura
10).
En el segundo alineamiento se realizó con BLAST frente a la base de datos RefSeq_protein se observa que el
porcentaje de similitud son más bajos, esto puede ser debido a que algunas de las secuencias con las que se
alinearon pertenecen al virus de influenza A que presenta mayor diferencia en la secuencia de aminoácidos y
también se ha alineado con otros organismos y se observa que presentan cierta similitud en sus neuraminidasas,
pero no muy alta, con respecto al query cover varía de 100% a 75% por lo que no en todas se ha alineado la

7
secuencia completa, el E value también varia y solo la primera es de cero, esto quiere decir que las demás tienen
una cierta probabilidad de que el alineamiento se haya dado al azar y no porque exista una coincidencia entre las
secuencias y por último no todos presentan un alto score, esto es debido a que no todos los alineamientos que se
realizando presentan una alta similitud (figura 11).

Figura 10: Alineamiento con BLAST de la secuencia de la neuraminidasa del virus de influenza B

Figura 11: alineamiento con BLAST frente a la base de datos de RefSeq_protein de la secuencia de la neuraminidasa del virus de la influenza B.

Figura 12: alineamiento con BLAST frente a la base de datos de Protein Data Bank de la secuencia de la neuraminidasa del virus de la influenza
B.

En el alineamiento múltiple de las secuencias de la neuraminidasa de ambos virus se observan asterisco que nos
indica que son residuos que se mantienen en ambas secuencias, los dos puntos indican que se ha dado cambios
de aminoácidos por otros aminoácidos que son muy similares, por lo que las regiones que presentan varios
asteriscos y puntos son regiones imprescindibles para la función de las proteínas (figura 13).

8
 Figura 13: alineamiento múltiple con secuencias de neuraminidasa del virus de influenza A y B.

3.2. Estudio del fármaco

3.2.1. Estructura
Se trata de una estructura soluble en agua, es decir, hidrófila y no puede atravesar la barrera hematoencefálica
por lo que no tiene efecto sobre el sistema nervioso central.
Aunque es hidrófila, no se interacciona con las proteínas plasmáticas de la sangre ni con los medicamentos en
general por lo que tiene una biodisponibilidad de más del 75% (5).
Grupos polares de la estructura activa del fármaco:
● Ácido carboxílico
● Amina
● Éter
● Amida
El resto de la estructura son carbonos, que proporcionan propiedades apolares a la estructura. (figura 14)

Figura 14. Estructura del fármaco realizada en chemsketch

3.2.2. Propiedades físico-químicas

Peso molecular 312.40
XLogP3-AA 1.1
Donante de enlace de hidrógeno 2
Aceptor de enlace de hidrógeno 5
Enlaces rotables 8
Masa exacta 312.20490738
Masa monoisotópica 312.20490738
Área de superficie polar 90.6 Ų
Carga formal 0
Complejidad 418

9
 Átomos isotopos 0
Átomos/centros esterogénicos 3
Enlaces covalentes 1 (5)

Es un polvo entre blanco y blanquecino, soluble en agua e insoluble en disolventes orgánicos. Su solubilidad
acuosa depende del pH, con una solubilidad máxima de aproximadamente 0,5 mg/mL a pH 6,5.
El valor log P del oseltamivir es de 1,1 y la superficie polar es de 90,6 Å2. Su punto de fusión se sitúa entre 146°C
y 150°C y su presión de vapor es de 7,8 x 10-7 mmHg a 25°C. El oseltamivir es estable en soluciones acuosas a
pH 3-7 y tiene una semivida estimada de 6-10 horas. Se metaboliza principalmente en el hígado por las enzimas
CYP2C19 y CYP3A4 y se excreta sin cambios en la orina.

3.2.3. Mecanismo de acción

El oseltamivir inhibe de forma selectiva la enzima neuraminidasa de los virus de influenza A y B impidiendo a las
células infectadas liberar partículas virales y así impidiendo la replicación de los virus. El metabolismo de fármaco
se produce mayoritariamente en el hígado, transformándose a metabolitos activos que son oseltamivir carboxilato
por las esterasas presentes en el hígado. Una vez metabolizado ejerce su función que es la inhibición de la enzima
neuraminidasa impidiendo el desarrollo de la enfermedad.

3.2.3.1. Unión del fármaco a la diana terapéutica

Todos los enlaces del oseltamivir con la neuraminidasa son puentes de hidrógeno que se dan entre los grupos
carboxilo, carbonilo y amino. (figura 15)

Figura 15. puentes de hidrógeno que se dan entre los grupos carboxilo, carbonilo y amino para la unión del fármaco a la diana terapéutica
realizada en Pymol.

3.2.4. Farmacodinamia
Oseltamivir es un profármaco del metabolito activo (Oseltamivir carboxilato), que se administra oralmente,
actuando como un inhibidor selectivo de las enzimas neuraminidasas del virus influenza A y B, (1,6) glucoproteína
situada en la superficie del virión. (6)

La inhibición de la neuraminidasa evita la actividad de ésta y por tanto su diseminación en el organismo, pues la
neuraminidasa viral es imprescindible para el virus a la hora de entrar en la célula sana, además de ser importante
en la liberación de las partículas virales en células infectadas, y, por tanto, para la diseminación posterior del virus
por el organismo. (6)

El volumen medio de distribución del oseltamivir carboxilato es de 23 litros, volumen equivalente al líquido
extracelular corporal. (1)
Puesto que la actividad de la neuraminidasa es extracelular, oseltamivir carboxilato, se distribuye a todos los
lugares de diseminación del virus influenza A y B. (1)
Se ha demostrado que la unión que representa este fármaco con respecto a las proteínas plasmáticas del plasma
humano, es de un 3% aproximadamente, por lo que se consideró como dato despreciable. (1)

10
 3.2.5. Farmacocinética
3.2.5.1. Absorción
Oseltamivir es de fácil absorción en el tracto gastrointestinal, transformándose en oseltamivir carboxilato, su
metabolito activo, gracias a las esterasas hepáticas. (1)

Un 75% del metabolito activo llega a la circulación sistémica una vez se ha administrado el fármaco por vía oral.
Quedando alrededor de un 5% de profármaco sin metabolizar. Por lo que se puede decir que las concentraciones
plasmáticas del profármaco y del metabolito activo son proporcionales a la dosis administrada, no observándose
interacciones al administrarse junto a los alimentos. (1)

3.2.5.2. Distribución
El volumen medio de distribución del oseltamivir carboxilato es de 23 litros, volumen equivalente al líquido
extracelular corporal. (1)
Puesto que la actividad de la neuraminidasa es extracelular, oseltamivir carboxilato, se distribuye a todos los
lugares de diseminación del virus influenza A y B. (1)
Se ha demostrado que la unión que representa este fármaco con respecto a las proteínas plasmáticas del plasma
humano, es de un 3% aproximadamente, por lo que se consideró como dato despreciable. (1)

3.2.5.3. Biotransformación
Como se indicó anteriormente, el oseltamivir se convierte ampliamente en su metabolito activo por acción de las
esterasas, principalmente en el hígado. (1)

Estudios realizados in vitro demostraron que ni oseltamivir ni el metabolito activo son sustratos o inhibidores de
las principales isoformas del citocromo P450. Además, no se identificaron in vivo conjugados de fase 2 de ninguno
de los compuestos. (1)

3.2.5.4. Eliminación
El 90% del fármaco absorbido, una vez transformado en metabolito activo, se eliminará exclusivamente por vía
renal, en la orina. Por lo que irán disminuyendo las concentraciones plasmáticas máximas, obteniendo una
semivida de entre 6 y 10 horas. (1)

El aclaramiento renal (18,8 l/h) es superior a la tasa de filtración glomerular (7,5 l/h), mostrando que no sólo sufre
una filtración glomerular, sino que sufre también una secreción tubular. (1)

En estudios con dosis oral marcados radiactivamente, se observó que menos del 20% de la dosis oral se elimina
a través de heces. (1)

3.2.6. Eficacia terapéutica

En ensayos clínicos aleatorizados, doble ciego y controlados con placebo, el oseltamivir resultó eficaz para reducir
la duración de los síntomas gripales y el riesgo de complicaciones derivadas del virus. Se observó que el
tratamiento con oseltamivir en las 48 horas siguientes al inicio de los síntomas reducía la duración de la fiebre, la
tos y otros síntomas en aproximadamente un día, y el riesgo de complicaciones en aproximadamente un 60%.
También se observó que el oseltamivir reducía el riesgo de hospitalización por gripe en un 80% y el riesgo de
muerte por gripe en un 67%.

Además, se ha demostrado que el oseltamivir es eficaz tanto en la profilaxis como en la profilaxis post-exposición
de la gripe. En ensayos clínicos aleatorizados, doble ciego y controlados con placebo, se observó que el
oseltamivir reduce la incidencia de la gripe hasta en un 85% cuando se administra de forma profiláctica, y hasta
en un 85% cuando se administra en las 48 horas siguientes a la exposición a un individuo infectado.

En general, se ha demostrado que el oseltamivir es un medicamento eficaz para el tratamiento y la prevención de

la gripe A y B, ya que reduce la duración de los síntomas, el riesgo de complicaciones y el riesgo de hospitalización
y muerte por el virus.

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3.2.6.1. Pacientes adultos y Pacientes pediátricos
El oseltamivir está aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE.UU. (FDA) para el
tratamiento de la gripe en pacientes pediátricos y adultos. La dosis recomendada para adultos es de 75 mg dos
veces al día durante cinco días, mientras que la dosis para pacientes pediátricos se basa en el peso. El fabricante
recomienda que los pacientes pediátricos reciban 30 mg dos veces al día durante cinco días si pesan más de 40
kg, o 45 mg dos veces al día durante cinco días si pesan 40 kg o menos. Es importante señalar que el oseltamivir
debe iniciarse lo antes posible tras el inicio de los síntomas de la gripe.

El oseltamivir ha demostrado ser eficaz para reducir los síntomas de la gripe y el riesgo de complicaciones tanto
en pacientes pediátricos como adultos.

3.2.7. Seguridad/Toxicidad
Generalmente se tolera bien, con pocos efectos secundarios y un bajo riesgo de toxicidad. Los efectos secundarios
más frecuentes son náuseas, vómitos, diarrea, dolor de cabeza y dolor abdominal. En raras ocasiones pueden
producirse efectos secundarios graves, como reacciones alérgicas y alteraciones de las pruebas de función
hepática.

En ensayos clínicos, el oseltamivir resultó ser seguro y bien tolerado (16). En un ensayo aleatorizado, doble ciego y
controlado con placebo realizado en 831 niños japoneses, no se notificaron efectos adversos graves. (17) En un
estudio realizado en 1.516 adultos sanos, el oseltamivir fue bien tolerado y no se notificaron efectos adversos
graves (18)

En general, el oseltamivir es un medicamento seguro y eficaz para el tratamiento de la gripe. Sin embargo, al igual
que con cualquier otro medicamento, es importante comentar los posibles riesgos y beneficios con un profesional
sanitario antes de utilizarlo.

3.2.8. Mecanismos de resistencia al fármaco

Los virus cambian constantemente y existen dos diferentes formas de mutación, la primera manera es variación
antigénica del virus que consiste en los cambios que se producen en los genes y a medida que reproduce el virus,
se aumentan los cambios en los genes hasta que el cuerpo no puede reconocer al virus y tiene que formar una
nueva respuesta inmune adquirida hacia el mismo virus.
El otro tipo de mutación es cambio antigénico mayor, que consiste en el cambio a nuevas proteínas de
hemaglutinina y nuevas proteínas de la neuraminidasa. Un ejemplo de este tipo es cepas de influenza estacional
H1N1 resistentes al oseltamivir. La principal mutación que le confiere resistencia a la neuraminidasa de influenza
respecto a oseltamivir es la sustitución de un residuo de histidina en la posición 274 de la enzima por uno de
tirosina. (7)

4. Conclusiones
El Oseltamivir, comercializado como Tamiflu(R), es un fármaco del grupo antiviral, por lo que evita la progresión
de la enfermedad causada por el virus de la Influenza, no pudiendo eliminar al virus por completo, pues éstos
habitan en el interior de las células del organismo, y el fármaco no es capaz de llegar hasta él. Por lo que debe
ser nuestro organismo el que deba eliminar al virus por completo. Además, se demostró que es un medicamento
muy seguro para toda la población.
Se trata de una estructura polar, es decir, soluble en agua y no puede atravesar la membrana hematoencefálica
por lo que no tiene efecto al sistema nervioso central. Se ha comprobado que no interacciona con las proteínas
plasmáticas ni con la mayoría de los medicamentos y su biodisponibilidad llega al 75% por lo que se considera
que es un medicamento seguro.

Por el momento, las variantes mutaciones sufridas por el virus de la Influenza son reactivas con el Oseltamivir,
además de otros como el Zanamivir. Pero hay que estar en constante investigación por las nuevas cepas que
puedan surgir al tratarse de una familia muy mutágena.

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5. Bibliografía
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de diciembre de 2022]. Disponible en: https://cima.aemps.es/cima/dochtml/ft/85057/FT_85057.html
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el 6 de diciembre de 2022];16(2):227–38. Disponible en:
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5. National Center for Biotechnology Information (2022). PubChem Compound Summary for CID 65028,
Oseltamivir. Retrieved December 11, 2022 from https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Oseltamivir.
6. Antivirales para uso sistémico, Inhibidores de la neuraminidasa. Código ATC: J05AH02 [Internet]. Gob.ve. [citado
el 12 de diciembre de 2022]. Disponible en:
http://citas.inhrr.gob.ve/sistemas_inhrr/SRCFFA/archivos/20210628123201_7850.pdf
7. La Epidemia de Influenza A/H1N1 (capítulo 1, Biología del virus de Influenza A) en México. Córdoba Villalobos
J.A., Valdespino Gómez J.M., Ponce de León Rosales S.; Editorial Médica Panamericana; [citado 18 de
diciembre de 2022]. Disponible en:
https://books.google.es/books?id=HguGafrWe8YC&pg=PA10&dq=neuraminidasa+influenza+funcion&hl=es&
sa=X&ved=2ahUKEwjGppXu0IP8AhXUSKQEHThwBogQ6AF6BAgIEAI#v=onepage&q=neuraminidasa%
20influenza%20funcion&f=false
8. Administración de Alimentos y Medicamentos de EE.UU. (FDA). La FDA aprueba Tamiflu para el tratamiento de
la gripe en pacientes pediátricos.
http://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm187735.htm
9. Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades. Medicamentos antivirales contra la gripe: Resumen
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10. Organización Mundial de la Salud. Gripe (estacional). Disponible en: https://www.who.int/news-room/fact-
sheets/detail/influenza-(seasonal)
11. Tamiflu (oseltamivir) cápsulas. Biblioteca Nacional de Medicina de EEUU. Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK470367/
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15. Jefferson, T. et al. (2014). Inhibidores de la neuraminidasa para la prevención y el tratamiento de la gripe en
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