Guia Metabolismo Bacteriano 2023
Guia Metabolismo Bacteriano 2023
Guia Metabolismo Bacteriano 2023
1. INTRODUCCIÓN:
2. OBJETIVOS:
• Defina metabolismo.
• ¿Qué es y que evalúa una prueba bioquímica?
• Cuáles son las principales pruebas bioquímicas, ¿qué evalúa cada una?
• ¿Cómo se pueden clasificar las pruebas bioquímicas?
• ¿Cómo por medio de las pruebas bioquímicas se pueden identificar
bacterias?
• ¿Cuáles son las principales características de la familia de las
Enterobacterias?
• Defina sistema de identificación rápido (basado en pruebas bioquímicas.
• Cuáles son los más conocidos, cuáles son sus beneficios o ventajas.
• Qué permite identificar el Kit API 20E, por qué.
Equipos Cantidad
Microscopio 1 unidad
Incubadora 35 °C 1 unidad por salón de clase
Reactivos Cantidad
Cristal Violeta para Gram 3 baterías por salón de clase
Lugol para Gram 3 baterías por salón de clase
Alcohol Acetona para Gram 3 baterías por salón de clase
Safranina/ Fucsina para Gram 3 baterías por salón de clase
Plantillas del sistema BBL Crystal 1 unidad
E/NF o API 20E
Aceite de inmersión 3 baterías por salón de clase
Hipoclorito al 2,5 % (spray) 3 frascos por salón de clase
Insumos Cantidad
Portaobjetos 1unidad
Asa Bacteriológica (Metálica) 1 unidad
Mechero de alcohol 2 unidades
Papel de arroz (libreta) 2 unidades por salón de clase
Cubeta para tinción 3 unidades por salón de clase
Parrilla para tinción 3 unidades por salón de clase
Cronometro 1 unidad
Pinzas de madera 6 unidades por salón de clase
Frasco lavador 3 unidades por salón de clase
Bandeja rectangular para Descartar 1 unidad
Material Contaminado
Cultivos frescos (18-24 horas) de 7 unidades por salón de clases
bacterias Gram Negativas, oxidasa
Negativas (Cepas congeladas)
suspenciones de 2 ml de solución
salina de los siguientes
microorganismos: E. coli,
Salmonella, Enterebacter, Proteus,
Pseudomonas y otros bacilos gran
negativos según disponibilidad
Reactivo para medir actividad 1 unidad
oxidasa
Micropipetas de 100 µl 1 unidad
Puntas Amarillas para Micropipeta de 1 caja
100 µl. Estériles
Tubos de 15 ml Estériles con 10 ml 1 unidades
de agua destilada esteril
Batería de reactivos para revelar 3 unidades
pruebas bioquímicas de API TDA,
VP1, VP2, NIT A, NIT B, JAMES.
5. METODOLOGIA:
7. Interpretar (ver tabla 2.) y registrar (ver tabla 1.) todas las reacciones. Leer
primero todos los otros compartimentos antes de hacerlo con las pruebas
TDA, IND y VP, los cuales se hacen de la siguiente manera:
-VP: adicionar una gota del reactivo VP A (KOH), y después una gota del
reactivo VP B (alfa naftol). Se considera una reacción positiva si se produce
un color rojo (no rosa tenue) dentro de los 10 minutos siguientes.
-IND: adicionar una gota del reactivo de Kovacs. La prueba se lee como
positiva si hay la formación de un anillo rojo dentro de los 2 minutos
siguientes.
Figura 1.
Reacciones Bioquímicas API 20E
Amarillo,
NO2 Rojo, burbujas, ausencia de
N2 gas Reducción de nitratos amarillo burbujas,
N2O después de la naranja
adición de Zinc después de la
adición de
Zinc
Cambios de color y Reacciones Bioquímicas API 20E
6. REFERENCIAS: