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    Diagnstico Virologico

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    Lucas Villalba
    El documento describe los métodos para el diagnóstico virológico. Estos incluyen métodos directos como el aislamiento y cultivo de virus, la detección de antígenos virales y genomas virales mediante técnicas moleculares. También incluye métodos indirectos que detectan la respuesta inmune al virus a través de anticuerpos en el suero, como ELISA e inmunoglobulinas. El diagnóstico virológico es importante para guiar el tratamiento y comprender la epidemiología de las infecciones virales.

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    El documento describe los métodos para el diagnóstico virológico. Estos incluyen métodos directos como el aislamiento y cultivo de virus, la detección de antígenos virales y genomas virales mediante técnicas moleculares. También incluye métodos indirectos que detectan la respuesta inmune al virus a través de anticuerpos en el suero, como ELISA e inmunoglobulinas. El diagnóstico virológico es importante para guiar el tratamiento y comprender la epidemiología de las infecciones virales.

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    diagnstico virologico

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    El documento describe los métodos para el diagnóstico virológico. Estos incluyen métodos directos como el aislamiento y cultivo de virus, la detección de antígenos virales y genomas virales mediante técnicas moleculares. También incluye métodos indirectos que detectan la respuesta inmune al virus a través de anticuerpos en el suero, como ELISA e inmunoglobulinas. El diagnóstico virológico es importante para guiar el tratamiento y comprender la epidemiología de las infecciones virales.

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    El documento describe los métodos para el diagnóstico virológico. Estos incluyen métodos directos como el aislamiento y cultivo de virus, la detección de antígenos virales y genomas virales mediante técnicas moleculares. También incluye métodos indirectos que detectan la respuesta inmune al virus a través de anticuerpos en el suero, como ELISA e inmunoglobulinas. El diagnóstico virológico es importante para guiar el tratamiento y comprender la epidemiología de las infecciones virales.

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    DIAGNOSTICO VIROLOGICO

    VIROLOGIA MEDICA | GUEDILLA DONATO

    Los primeros indicios para establecer el diagnóstico de una de espera de resultados (días o semanas), su alto costo y
    infección vírica se obtienen de la historia y los síntomas del realización compleja, ya que requiere personal entrenado,
    paciente, y mediante de la exclusión de otros tipos de infraestructura costosa para trabajo en condiciones de
    infección (hongos, bacterias, etc). esterilidad y bioseguridad en cultivos celulares y para
    mantenimiento de animales. Además, no todos los virus que
    causan patología en humanos son cultivables.
    ¿Para qué sirve un diagnóstico virológico?
    • Cultivo celular: Aislamiento del agente viral a través de
    El diagnóstico de certeza es fundamental para decidir una
    cultivos celulares (líneas celulares) en los cuales se
    intervención terapéutica, establecer el pronóstico en la
    emplean diferentes tipos de células en cultivos de tejidos.
    evolución de un paciente, monitorear la respuesta a los
    • Huevos embrionados
    tratamientos antivirales específicos, indicar la necesidad de
    • Animales de experimentación
    una vacunación, y desde un punto de vista epidemiológico,
    adoptar medidas de salud pública en una comunidad. Partículas virales (microscopia
    Thomas Milton Rivers, 1937 - Modifica los postulados de Koch
    electrónica)
    (válidos en infecciones bacterianas) Microscopia Electrónica
    • Visualización directa de los virus
    1) Aislamiento del virus desde el hospedador enfermo. • La morfología y el tamaño se utilizan como guía para
    2) Aislamiento de virus en cultivo en células. llegar al diagnóstico presuntivo.
    3) Prueba de tamaño por filtrado. • La identificación de los viriones se logra incubando el
    4) Producción de enfermedad comparable cuando el virus material en el estudio con anticuerpos específicos
    cultivado es inoculado para infectar animales de (inmunomicroscopia). El complejo virus-anticuerpo
    experimentación. permite su identificación.
    5) Re-aislamiento del mismo virus desde el animal de
    experimentación.
    6) Detección de una respuesta inmune específica contra el
    Antígenos virales por técnica de
    virus. inmunomarcación
    • ELISA
    ¿Qué información nos dará? • IF
    • RIA

    La elección de la muestra y el momento de su obtención


    dependerán de la patogenia de cada infección viral y de la
    cinética de la producción de anticuerpos. Por ejemplo, los virus
    respiratorios se eliminan en altos títulos en secreciones Genomas virales por técnicas
    respiratorias por lo que se pueden detectar en muestras
    respiratorias obtenidas durante los primeros días de moleculares (PCR)
    enfermedad, ya que subsiguientemente, el título de los virus en PCR ( Reacción en Cadena de la Polimerasa)
    dichas secreciones disminuye, dificultando así su diagnóstico. • Técnica que me permite obtener en gran cantidad copias
    Por el contrario, en la hepatitis B crónica el antígeno de de un fragmento de ADN de interés, desde una pequeña
    superficie será detectable en el suero por más de seis meses y muestra.
    aun durante años. • Con la amplificación es más fácil identificar el agente
    causante de enfermada.
    • Es necesario disponer de: Termociclador (realiza ciclos de
    T°) | ADN, gen de interés | Cebadores o primes,
    METODOS DIRECTOS complementarios | Nucleótidos | Polimerasa
    Se denominan métodos directos de diagnóstico virológico a • La desnaturalización del ADN separa las bases y los
    aquellos que detectan la presencia del virus (o algunos de sus cebadores se unen por complementariedad y en
    componentes) en muestras clínicas, lo que puede realizarse a presencia de la polimerasa y nucleótidos libres se inicia
    través de diversas técnicas que investigan la presencia de: síntesis de la nueva hebra viral. La reacción se repite y se
    logra sintetizar grandes cantidades de segmentos de ADN
    amplificados, los cuales se ponen en evidencia en un gel
    Agentes infecciosos (mediante la de agarosa para electroforesis.
    • En los virus ARN primero se realiza una reacción mediada
    observación de su replicación en por la transcriptasa inversa para obtener ADN.
    cultivos celulares) ELECTROFORESIS
    • Segmentos de ácidos nucleicos son puesto en geles de
    AISLAMIENTO Y CULTIVO DE LOS VIRUS agarosa o poliacrilamida.
    El aislamiento viral es el “gold standard” del diagnóstico, ya • Con corriente se puede mostrar el patrón de migración
    que permite la obtención de la cepa viral, lo que presenta gran electroforética.
    importancia no solo para el diagnóstico un caso individual sino • El patrón de migración es puesto en evidencia por algún
    para estudios epidemiológicos. Sus desventajas son: el tiempo método de tinción (sales de plata, bromuro de etidio)
    METODOS INDIRECTOS
    • Se denominan métodos indirectos o serológicos a aquellos
    que investigan la respuesta inmune humoral mediada por
    anticuerpos específicos antivirales en el suero o plasma del
    paciente.
    • Por ende, no detectan la presencia del agente etiológico.
    • Para realizar un diagnóstico virológico sustentado en la
    serología es necesario determinar la seroconversión o bien
    la presencia de IgM específica antiviral.

    INMUNOGLOBULINA M INMUNOGLOBULINA G

    Técnicas serológicas para identificar y cuantificar la


    respuesta inmune humoral inducida por una infección
    viral. Deteccion de IgM, IgG, IgA

    • ELISA (enzima inmuno ensayo)


    · El anticuerpo presente en el suero problema se
    une a un antígeno formando un complejo
    antígeno – anticuerpo.
    · Un 2° anticuerpo marcado con enzima actúa
    sobre un sustrato.
    · La reacción entre sustrato y enzima genera un
    color y la intensidad del mismo refleja la
    cantidad de antígeno.
    · Se mide con un espectrofotómetro y se evalúa
    con una curva patrón estándar.
    • RIA (radio inmuno ensayo)
    • INMUNOFLUORESCENCIA

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