NIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES

LABORATORIO CLINICO
HOSPITAL DE CLINICAS

PRUEBAS PRE-
TRANSFUSIONALES
ROTE: MEDICINA TRANSFUNCIONAL
INTERNA: KAREN PAMELA MAMANI ALANOCA
 importancia de la
medinica transfusional

Los Servicios de Transfusión son servicios intrahospitalarios con objetivos,

recursos humanos insumos, etc. diferentes al laboratorio del hospital
donde se encuentra instalado; su función principal es realizar estudios
inmunohematológicos, pruebas pre transfusionales (compatibilidad entre
el paciente y la unidad a transfundirse), entregar los hemocomponentes a
transfundir o en casos específicos instalar la transfusión Efectuadas en
Servicios de Sangre y gestionan su stock en coordinación con un Banco de
Sangre del cual se abastece, efectuando la trazabilidad de los mismos.
Los integrantes del Sistema Nacional de Sangre comparten fines comunes
para lograr el acceso a Sangre Segura, por lo que la centralización de
Bancos de Sangre y la incorporación de Servicios de Transfusión en los
hospitales de 2do, 3er y 4to nivel son de vital importancia para Bolivia,
para su consecución es trascendental el trabajo integral, fraternal,
solidario y colaborado de las autoridades centrales, departamentales y
municipales.
RE-CLASIFICACION
Y
COMPATIBILIDAD
SANGUINEA
RE-CLASIFICACION
Y COMPATIBILIDAD
SANGUINEA
La muestra adecuada para la
clasificación ABO, es sangre completa
con anticoagulante EDTAK3 , para la
prueba directa y sangre sin
anticoagulante en tubo seco para la
prueba inversa. De manera alternativa,
el plasma también podría utilizarse para
realizar la prueba inversa
 Se necesitaran sueros hemoclasificadores
que contengan anticuerpos monoclonales
RE-CLASIFICACION Anti-A, Anti-B, Anti-AB. En cuanto a
Glóbulos Rojos testigos para la prueba
Y COMPATIBILIDAD inversa se requieren glóbulos: A, B y O. Lo
adecuado es preparar una suspensión al 5%
SANGUINEA en solución salina fisiológica estéril SSFE,
o en Solución Alsever. Los glóbulos rojos
también podrán ser adquiridos de manera
comercial
 Separar el suero/plasma de los hematíes
mediante la centrifugación de los tubos de

TÉCNICA EN ensayo que contienen la muestra, de

acuerdo al tiempo y número de
revoluciones que se hubieran estandarizado
TUBO en el Servicio de Sangre

Lavar los hematíes mediante tres ciclos de

lavado de 3 minutos a 2,500 rpm y
preparar la suspensión de hematíes al 5%,
ó a la concentración que indique el
fabricante para la técnica en tubo,
utilizando en caso de ser posible tubos de
ensayo nuevos o lavados y esterilizados
mediante calor seco de manera correcta
 Una vez que se han preparado las
suspensiones celulares correctas, según el

TÉCNICA EN ejemplo establecido en el Apéndice 13, se

debe preparar para cada muestra la
siguiente batería de tubos de ensayo
TUBO rotulándolos como se observa en el
siguiente gráfico:
TÉCNICA EN Toda vez que se han transferido 50
microlitros de las suspensiones celulares

TUBO preparadas a los tubos marcados Anti-A,

Anti-B, Anti-AB y 50 microlitros (una gota
dispensada con el gotero de cada reactivo
comercial al tubo que corresponda), se
debe mezclar los tubos ligeramente y
proceder a colocarlos de manera
equilibrada en la centrifuga incluyendo el
tubo de auto control del donante o
paciente, según sea el caso, incluyendo el
suero y hematíes propios.
 TÉCNICA EN En los tubos marcados como células alfa,
células beta y células O, se deben

TUBO INVERSA dispensar 100 ul del suero del donante o

del paciente en quien se está investigando
el grupo sanguíneo y posteriormente
dispensar una gota de células de fenotipo
conocido A al tubo alfa, una gota de
células de fenotipo conocido B al tubo
beta y una gota de células O al tubo
marcado con la letra O. Se debe mezclar
los tubos ligeramente y proceder a
colocarlos de manera equilibrada en la
centrífuga
TÉCNICA EN Proceder a centrifugar según el tiempo y
revoluciones por minuto establecidas por

TUBO el fabricante y que deberán estar bien

descritas en el inserto, una alternativa
sería centrifugar a 1000 rpm durante un
minuto
Observar siempre con ayuda de la luz de
un aglutinoscopio la presencia de
aglutinación o hemólisis, registrar los
resultados obtenidos de acuerdo a la tabla
de intensidad de reacción
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de
anticuerpos irregulares son de suma
importancia, ya que permiten que los
antígenos y anticuerpos puedan ser
PRUEBAS
CRUZADAS
detectados y estudiados en el
laboratorio; coadyuvando a prevenir la
transfusión de sangre incompatible, y
otorgando al paciente el mayor
porcentaje de seguridad y beneficio.
 No exista incompatibilidad ABO y Rh D entre el
receptor (paciente) y la sangre o componente
sanguíneo a transfundir. Las unidades son pre
PRUEBAS
CRUZADAS
seleccionadas isogrupo en los sistemas ABO y Rh
antígeno D.  No existan otros anticuerpos
irregulares que puedan causar una reacción
transfusional hemolítica o un acortamiento de la
vida media de las células transfundidas en el caso
de transfusiones de Paquetes Globulares y Sangre
total.  Se pretende detectar posibles anticuerpos
irregulares que se unirían a los antígenos de la
membrana de los hematíes causando su
sensibilización y correspondiente hemólisis o
destrucción.
FASE I SALINA INMEDIATA 
FASE II POTENCIADOR DE
REACCIÓN/TÉRMICA 
PRUEBAS
FASE III
ANTIGLOBULÍNICA
FASE
CRUZADAS
Para la obtención de las muestras
de los componentes sanguíneos,
se procederá separando un PRUEBAS
fragmento de la tubuladura
conocido también como “piloto” CRUZADAS
En el caso de receptores de los
componentes sanguíneos, se requiere tomar
4 ml de sangre venosa recogida en un tubo
de ensayo con EDTAK3 , así como también 4
ml de sangre recogida en un tubo sin
anticoagulante para realizar la prueba
sérica, detección de anticuerpos irregulares
y pruebas cruzadas
 REACTIVOS POTENCIADORES DE
REACCIÓN
Albumina Sérica Bovina al 22% 
Solución de Baja Fuerza Iónica LISS
PRUEBAS Solución de Bromelina (opcional) 
REACTIVO DE COOMBS POLIESPECÍFICO
Anti Inmunoglobulina Humana Anti-Ig G,
CRUZADAS Anti-C3 d (verde) 
CÉLULAS CONTROL DE COOMBS
Las células control de Coombs son
hematíes humanos Grupo O Rhesus D-
positivo que han sido sensibilizados “in
vitro” con diferentes cantidades de
anticuerpos anti-D (IgG)
 Culminado el tiempo de incubación,
centrifugar inmediatamente a 1000 rpm
durante un minuto y proceder a la
lectura con ayuda de la fuente de luz del
PRUEBAS rhesuscopio, en caso de ser evidente la
reacción de aglutinación, implicaría
incompatibilidad, y habría que
CRUZADAS seleccionar otra unidad y empezar el
procedimiento nuevamente. Siendo
negativa la presencia de aglutinación, y
presumiblemente compatible la unidad
hasta este momento, se procede con la
siguiente fase de la prueba. f) Realizar
tres lavados de 3 minutos a 2.500 rpm,
con SSFE o SSFE tamponada con PBS,
PRUEBA
MAYOR

INCUBAR A 37° C POR 10 MIN

 Culminado el tiempo de incubación, centrifugar
inmediatamente a 1000 rpm durante un minuto y proceder
a la lectura con ayuda de la fuente de luz del rhesuscopio,
en caso de ser evidente la reacción de aglutinación,
implicaría incompatibilidad, y habría que seleccionar otra
unidad y empezar el procedimiento nuevamente.

Siendo negativa la presencia de aglutinación, y presumiblemente

compatible la unidad hasta este momento, se procede con la
siguiente fase de la prueba. f) Realizar tres lavados de 3 minutos a
2.500 rpm, con SSFE o SSFE tamponada con PBS, después del
PRUEBA último lavado, en el que se debe eliminar al máximo la solución
salina realizando la maniobra de volcar los tubos sobre papel

MAYOR
absorbente, dispensar 2 gotas del reactivo de Coombs a los tubos de
ensayo que podrán ser uno o dos según se utilizó uno o dos
potenciadores de reacción y al tubo AUTOCONTROL para luego
centrifugar un minuto a 1000 rpm.
 PRUEBA Finalmente, para corroborar que el procedimiento
se realizó de manera correcta, se deben dispensar
50 uL de las Células Control de Coombs que se

MAYOR preparan regularmente en cada Servicio de

Sangre, siguiendo las recomendaciones del
Apéndice 4 y centrifugar inmediatamente a 1000
r.p.m. durante un minuto y proceder a la lectura
con ayuda de la fuente luz del rhesuscopio

Los resultados positivos se interpretan de 1

a 4 cruces de aglutinación, sin dejar de
considerar que
la presencia de hemólisis implica también
incompatibilidad.
 PRUEBA
MENOR

INCUBAR A 37° C POR 10 MIN

 Culminado el tiempo de incubación, centrifugar
inmediatamente a 1000 rpm durante un minuto y proceder
a la lectura con ayuda de la fuente de luz del rhesuscopio,
PRUEBA
en caso de ser evidente la reacción de aglutinación,
implicaría incompatibilidad, y habría que seleccionar otra
unidad y empezar el procedimiento nuevamente.
MENOR
Siendo negativa la presencia de aglutinación, y presumiblemente
compatible la unidad hasta este momento, se procede con la
siguiente fase de la prueba. f) Realizar tres lavados de 3 minutos a
2.500 rpm, con SSFE o SSFE tamponada con PBS, después del
último lavado, en el que se debe eliminar al máximo la solución
salina realizando la maniobra de volcar los tubos sobre papel
absorbente, dispensar 2 gotas del reactivo de Coombs a los tubos de
ensayo que podrán ser uno o dos según se utilizó uno o dos
potenciadores de reacción y al tubo AUTOCONTROL para luego
centrifugar un minuto a 1000 rpm.
 PRUEBA Finalmente, para corroborar que el procedimiento
se realizó de manera correcta, se deben dispensar
50 uL de las Células Control de Coombs que se

MENOR preparan regularmente en cada Servicio de

Sangre, siguiendo las recomendaciones del
Apéndice 4 y centrifugar inmediatamente a 1000
r.p.m. durante un minuto y proceder a la lectura
con ayuda de la fuente luz del rhesuscopio

Los resultados positivos se interpretan de 1

a 4 cruces de aglutinación, sin dejar de
considerar que
la presencia de hemólisis implica también
incompatibilidad.
La prueba de Coombs directa (o Prueba de
Antiglobulina humana Directa PAD)

TEST DE
detecta anticuerpos ya unidos a la
superficie de los hematíes “in vivo”. Para
el procesamiento de la técnica, la muestra
que se utiliza son hematíes.
La prueba de Coombs indirecta (o Prueba
de Antiglobulina humana Indirecta PAI),
detecta anticuerpos libres que pueden
COOMBS
reaccionar “in vitro” con hematíes que
tienen los antígenos específicos. Para el
procesamiento de la técnica, la muestra
que se utiliza es suero.
 TEST DE
COOMBS
DIRECTO

El Test de Coombs Directo se reporta: POSITIVO o NEGATIVO

  ALBÚMINA SÉRICA
BOVINA AL 22%

POTENCIA La Albúmina Sérica Bovina al 22% está

preparada a partir de una mezcla de
suero de albúmina bovina y tampón

DORES salino, cada solución está lista para ser

utilizada tal y como se proporciona, la
adición de este reactivo aumenta la
constante dieléctrica del medio de
reacción, el cual a su vez, ocasiona una
reducción del potencial zeta de las célula
  ALBÚMINA SÉRICA
BOVINA AL 22%

POTENCIA Esta reducción de la carga negativa

disminuye la distancia existente entre las
células rojas permitiendo que puedan

DORES aproximarse entre ellas con mayor

facilidad y así se otorgan a los
anticuerpos IgG mayores posibilidades de
que produzcan la aglutinación. La
utilización de ASB 22% permite disminuir
el tiempo de incubación en la técnica de
detección/identificación de anticuerpos
irregulares con relación a
  SOLUCIÓN DE BAJA
FUERZA IÓNICA LISS

POTENCIA Solución utilizada para la ejecución de

técnicas inmunohematológicas que se
provee lista para su uso y contiene

DORES Glicina, Cloruro de Sodio, Glucosa,

Inosina, Adenina, EDTA, e Hidróxido de
Sodio. Además puede contener
Sulfametoxazol (0,003 g/l) y Trimetro-
prim (0,0006g/l) como preservantes
  SOLUCIÓN DE BAJA
FUERZA IÓNICA LISS

POTENCIA Se utiliza para reducir la fuerza iónica del

medio de reacción en los procedimientos de
detección e identificación de anticuerpos

DORES irregulares y en las pruebas de compatibilidad.

La presencia de este reactivo refuerza la
interacción antígeno-anticuerpo durante el paso
que corresponde la incubación dentro de la
técnica que se realiza para detectar e
identificar anticuerpos irregulares
 LA TRIPSINA,
PAPAINA, BROMELINA

POTENCIA Y FICINA
Son las principales enzimas
proteolíticas, capaces de sacar de

DORES la membrana
fragmentos
eritrocitaria
peptídicos de
glucoproteínas de membrana
conteniendo moléculas de acido
siálico, disminuyendo la carga
negativa de los globulos rojos
 polietilenoglicol
peg

POTENCIA Disminuye el escudo de cargas

positivas, debido a esto, baja el
DORES valor del potencial y disminuye
la fuerza de repulsión
interglobular, favoreciendo la
aglutinación
 CARACTERISTICAS
la Tecnología DG Gel para realizar y DE TARJETAS
agilizar pruebas pretranfusionales
adaptándose a las necesidades y
GEL
tamaño de los laboratorios y bancos de
sangre. ofreciendo una gran variedad
de equipos en conjunto con las tarjetas
DG Gel de 8 columnas con tecnología
de aglutinación en gel (CAT)que están
listas para usarse en pacientes y
donadores ofreciendo seguridad,
rapidez y claridad en los resultados.
Carrusel de muestras con capacidad CARACTERISTICAS
para 48 tubos.
Bandeja de reactivos para 16 DE TARJETAS
reactivos y dos diluyentes.
Código de barras.
GEL
Dilución de células.
Re suspensión de reactivos
eritrocitarios.
Incubadora para 24 tarjetas en dos
bloques independientes de
temperatura (25°C, 37°C).
 CARACTERISTICAS
Lectura de resultados mediante DE TARJETAS
cámara CCD.
Posicionamiento aleatorio de GEL
muestras y reactivos.
Pruebas que realiza:
Grupos sanguíneos ABO (directo e
inverso) y Rh.
Fenotipo Rh/Kell.
Fenotipos fuera del sistema ABO y CARACTERISTICAS
Rh.
Pruebas para neonatos. DE TARJETAS
Pruebas de compatibilidad.
Rastreo e identificación de GEL
anticuerpos.
Coombs directo monoespecífico y
poliespecifico.
¡Gracias por
tu atención!