Biología Molecular - Adn

BIOLOGÍA MOLECULAR: ADN
1. Concepto
• Polímeros de nucleótidos de elevado p.m (visibles en el microscopio electrónico).

• Dos tipos:
- Ácido desoxirribonucleico (ADN).
- Ácido ribonucleico (ARN).
• Inicialmente ARN (ribozimas).
• Con el paso del tiempo el ADN pasó a ser el depósito de información ya que es
bioquímicamente más estable.
• Contienen C, H, O, N e P.
• Se encuentran en:
- Células eucariotas: núcleo, mitocondrias, cloroplastos y ribosomas.
- Cromosomas de procariotas.
- Cromosomas de virus.
2. Composición
Nucleósido: azúcar + base nitrogenada. Unidos mediante un enlace N-glucosídico.

Nucleótido: nucleósido + ácido fosfórico. Unidos mediante un enlace éster fosfórico.
Enlace Fosfodiéster: unión entre el -OH del C3' de la pentosa de un nucleótido y el radical fosfato
unido al C5' de otro nucleótido, liberando una molécula de agua. Los polinucleótidos resultantes
con dos extremos libres, (extremo 5’, grupo fosfato unido a la pentosa y extremo 3', grupo OH libre
del C3´).
3. ADN
• Bicatenario (excepto en algunos virus).

• Puede ser circular o lineal.
• En eucariotas: núcleo, mitocondrias y cloroplastos.
Estructura primaria
• Polímero lineal monocatenario de
desoxirribonucleótidos:
- Pentosa (Desoxirribosa) + Fosfato. Parte
invariable
- Bases nitrogenadas: adenina, guanina, citosina
y timina. Parte variable.
• Enlaces fosfodiéster con orientación 5´-3´.
Estructura secundaria:
La estructura secundaria del ADN se dedujo teniendo en
cuenta datos previos:
- Densidad y viscosidad del ADN superiores a las
esperadas para una cadena sencilla.
- Reglas de Chargaff: la composición en bases del
ADN varía de una especie a otra. Siempre igual
en la misma especie.
 A=T
 C=G
 A+G=T+C
 (A+G)/(T+C)=1
Franklin y Wilkins descubren por difracción de rayos X:

- El ADN tenía una estructura fibrilar de unos 20 Å de
diámetro.
- Había unas unidades que se repetían cada 3,4 Å y cada 34 Å.
El 25 de abril de 1953 Watson y Crick publicaron en la revista Nature el Modelo de la Doble Hélice
de ADN.
Dos cadenas de nucleótidos:

• Antiparalelas (una 5´-3´, otra 3´-5´).
• Complementarias: A y T se unen
mediante 2 puentes de H; C y G
mediante tres puentes de H.
Las bases de ambas cadenas se mantienen unidas

por enlace de hidrógeno.
El número de enlaces de hidrógeno depende de la

complementariedad de las bases.
• Las dos cadenas se enrollan alrededor de un eje imaginario,
formando una doble hélice de 20 Å de diámetro.
• La hélice es dextrógira.
• Las bases nitrogenadas (hidrófobas) en el interior con planos
perpendiculares al eje.
• Las pentosas y los grupos fosfato en el exterior estabilizan la
doble hélice.
• Cada vuelta de hélice 10 pares de nucleótidos= 34 Å.
• Entre cada pareja de nucleótidos 3,4 Å.
• Surco mayor y surco menor.
• Este es el ADN-B
TIPO DE ADN GIRO DE HÉLICE Nm POR VUELTA PLANO ENTRE Nº DE

BASES NUCLEÓTIDOS POR
VUELTA
A Dextrógiro 2.8 Inclinado 11

B Dextrógiro 3.4 Perpendicular 10
Z Levógiro 4.5 Zig-zag 12
En el citoplasma de las células procariotas y en el núcleo de las eucariotas, el ADN adopta

estructuras condensadas o empaquetadas.
Extendida, la doble hélice ocuparía:

1 mm en procariotas
180 cm en eucariotas
Debe reducir su volumen hasta ocupar micras.
La condensación también facilita a división del material

genético.
En bacterias, en mitocondrias y cloroplastos, el ADN es una doble hélice circular que se retuerce
sobre si misma para formar una superhélice.
NIVELES DE EMPAQUETAMIENTO EN EUCARIOTAS
Primer nivel de empaquetamiento (estructura terciaria):
• Fibra de cromatina de 100 Å o collar de perlas:

• Nucleosomas:
- La doble hélice (200 pb) gira un par de veces al rededor
del octámero de histonas
- Estructura con un diámetro de unos 100 Å.
• El ADN que queda entre un nucleosoma y el siguiente recibe
el nombre da ADN espaciador.
• Una novena histona fuera del nucleosoma H1.
• En el núcleo de células eucariotas (excepto espermatozoides:
ADN+protaminas) durante la interfase del ciclo celular.
Segundo nivel de empaquetamiento (estructura cuaternaria):
• Fibra de cromatina de 300 Å o solenoide:

- La fibra de 100 Å vuelve a enrollarse con seis nucleosomas por vuelta alrededor de
un eje formado por las histonas H1.
- Diámetro de 300 Å
Esta fibra de 30 nm puede sufrir una espiralización de segundo grado con un diámetro de 300
nm y así sucesivamente hasta llagar a la superespiralización en el momento de iniciar la mitosis,
en el que la cromatina se compacta para formar cromosomas.
DESNATURALIZACIÓN Y RENATURALIZACIÓN
La doble hélice es muy estable, aun así:

• Desnaturalización:
- Tª>80-90ºC o cambios de pH extremos.
- Rompen los puentes de H y las dos cadenas se
separan.
- [C+G] ^ > Tª de desnaturalización ^
• Renaturalización
- Tª< 65 ºC o reestablecimiento del pH.
- Unión de las dos cadenas.
Esto es la base de muchas técnicas de laboratorio: PCR,
hibridación (Southern blot).
4. ARN
• Ribonucleótidos:
- Pentosa: ribosa (β−D-ribofuranosa).
- Bases nitrogenadas: adenina, guanina, citosina y uracilo.
• Enlaces fosfodiéster en sentido 5' → 3'.
• Suelen ser monocatenarios (estructura 1ª), excepto algunos virus (bicatenarios con doble
hélice).
• A veces se forman en la misma cadena regiones con estructura de doble hélice (horquillas)
por presencia de bases complementarias, separadas por zonas no complementarias.
4.1. ARNm (ARN mensajero)
• Monocatenario.
• Generalmente lineal.
• p.m de entre 200 y 1000 kDa.
• Se sintetiza en el núcleo a partir del ADN (transcripción).
• Transmite el mensaje genético para la síntesis de proteínas
en los ribosomas.
• En eucariotas:
- Generalmente monocistrónico: síntesis de solo un
polipéptido.
- Formado por exones (codificantes) e intrones (no
codificantes), eliminados en la maduración. Con
matices.
- Cola poli-A (evita degradación y señaliza) y caperuza
(evita degradación, exportación del núcleo, iniciación
traducción).
• En procariotas:
- No presenta intrones. No madura.
- Policistrónico, lleva información para dos o más polipéptidos diferentes.
4.2. ARNhn (ARN heterogéneo nuclear)
• Precursor del ARNm.

• Sintetizado directamente a partir de la cadena molde de ADN.
• En general con intrones, que se cortan, y exones, que se empalman, para dar el ARNm
(maduración) que saldrá del núcleo hacia los ribosomas para la síntesis de proteínas.
4.3. ARNt (ARN transferente)
• Formado por cadenas de 70-90 nucleótidos (unos 25 kDa).

• Presenta algunos nucleótidos excepcionales como el ácido pseudouridílico y el inosílico,
también puede presentar timina.
• En el citoplasma.
• Se conocen unos 50 tipos de ARNt.
• Transportan a los aminoácidos hasta los ribosomas para la síntesis de proteínas.
• Presenta zonas con estructura en doble hélice y zonas sin ella que forman asas o bucles.
• En el plano, forma de trébol con 4 brazos:
1. Brazo aceptor:
- Extremo 5’: ribonucleótido de guanina.
- Extremo 3’: triplete CCA, donde se enlaza el aminoácido.
2. Brazo anticodón: triplete de bases (anticodón) complementario al codón do ARNm.
3. Brazo T, se une al ribosoma durante la traducción.
4. Brazo D se une a las enzimas que catalizan la unión del ARNt con el aminoácido que
transporta.
4.4. ARNr (ARN ribosómico)
• Constituye los ribosomas (60% de la masa del ribosoma).

• Diferentes tipos de ARN que se asocian con proteínas para
formar las dos subunidades de los ribosomas.
4.5. ARNn (ARN nucleolar)
• Se origina a partir de la región organizadora nucleolar del ADN.

• Precursor de los diferentes tipos de ARN ribosómicos.
4.6. ARNpm (ARN pequeño nuclear)
• Son ARN de pequeño tamaño.

• Se unen con proteínas formando ribonucleoproteínas pequeñas nucleares (RNPpn) que
forman el espliceosoma (splicing: eliminación de los intrones durante la maduración del
ARNm).
• Forman bucles en los intrones (secuencias complementarias a los extremos de estos)
para que los exones se coloquen correctamente.
4.7. ARNi (ARN de interferencia)
• Doble cadena. Unos 20-25 nucleótidos.

• Secuencia de bases complementaria con determinados ARNm a los que se une,
bloqueando su traducción y provocando su degradación.
5. Diferencias entre ARN y ADN
ADN ARN
Doble cadena helicoidal Cadena simple
Tiene las bases A, T, G y C Tiene las bases A, U, G y C
La pentosa es una desoxirribosa La pentosa es una ribosa
Es una macromolécula Es más pequeña que el ADN
Está en el núcleo Se encuentra en el citoplasma
Constituye los genes (se replica o se Es una molécula involucrada en la síntesis
transcribe a ARN) de proteínas
6. Nucleótidos libres
• Nucleótidos derivados del AMP (Adenosín monofosfato).

- AMP=Adenina+ Ribosa+ácido ortofosfórico.
- ADP= Adenina+ Ribosa+ 2 (ácido ortofosfórico).
- ATP=Adenina+ Ribosa+ 3 (ácido ortofosfórico). “moneda de intercambio energético”.
ATP + H2O= ADP + H3PO4 + Energía (7,3 Kcal/mol)
También:
- GTP (Guanosín trifosfato).
- CTP (Citidín trifosfato)
- TTP (Timidín trifosfato)
- UTP (Uridín trifosfato)
• NAD+.
- Coenzima de reacciones de oxidación-reducción. Pasa de oxidado (NAD+) a reducido
(NADH).
- Importante en la respiración celular.
NAD+ + H+ + 2e- → NADH
• NADP. Molécula similar al NAD pero con ácido fosfórico en el C2´ de la ribosa unida a
la adenina. Importante en la fotosíntesis.
• FAD. También intervienen en reacciones de óxido-reducción.
• Coencima A (CoA o CoA-SH) Participa en la acilación. Importante Acetil-CoA.
• Nucleótidos cíclicos. 2º mensajero celular.

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• Polímeros de nucleótidos de elevado p.m (visibles en el microscopio electrónico).

Nucleósido: azúcar + base nitrogenada. Unidos mediante un enlace N-glucosídico.

• Bicatenario (excepto en algunos virus).

Franklin y Wilkins descubren por difracción de rayos X:

Dos cadenas de nucleótidos:

Las bases de ambas cadenas se mantienen unidas

El número de enlaces de hidrógeno depende de la

TIPO DE ADN GIRO DE HÉLICE Nm POR VUELTA PLANO ENTRE Nº DE

A Dextrógiro 2.8 Inclinado 11

En el citoplasma de las células procariotas y en el núcleo de las eucariotas, el ADN adopta

Extendida, la doble hélice ocuparía:

Debe reducir su volumen hasta ocupar micras.

La condensación también facilita a división del material

NIVELES DE EMPAQUETAMIENTO EN EUCARIOTAS

Primer nivel de empaquetamiento (estructura terciaria):

• Fibra de cromatina de 100 Å o collar de perlas:

Segundo nivel de empaquetamiento (estructura cuaternaria):

• Fibra de cromatina de 300 Å o solenoide:

La doble hélice es muy estable, aun así:

4.1. ARNm (ARN mensajero)

4.2. ARNhn (ARN heterogéneo nuclear)

• Precursor del ARNm.

4.3. ARNt (ARN transferente)

• Formado por cadenas de 70-90 nucleótidos (unos 25 kDa).

• Constituye los ribosomas (60% de la masa del ribosoma).

4.5. ARNn (ARN nucleolar)

• Se origina a partir de la región organizadora nucleolar del ADN.

4.6. ARNpm (ARN pequeño nuclear)

• Son ARN de pequeño tamaño.

4.7. ARNi (ARN de interferencia)

• Doble cadena. Unos 20-25 nucleótidos.

5. Diferencias entre ARN y ADN

• Nucleótidos derivados del AMP (Adenosín monofosfato).

ATP + H2O= ADP + H3PO4 + Energía (7,3 Kcal/mol)

NAD+ + H+ + 2e- → NADH

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