Agar Mueller Hinton Con Glucosa y Azul de Metileno Valtek Versión 2 1

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VALTEK S.A.

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Av. Marathon 1943 - Ñuñoa
Santiago – CHILE

Agar Mueller Hinton azul de metileno mejora la definición de los halos de


inhibición.
Con Glucosa y Azul de metileno
(ref. 285-255) Materiales y Reactivos necesarios, pero no
suministrados:
8
h l
Sensidiscos de fluconazol (25 g) y voriconazol (1.0 g)
285-255 2 Suero fisiológico estéril.
Estufa de cultivo

V Material para Diagnóstico In Vitro PRECAUCIONES PARA SU USO ADECUADO:

Material para uso diagnóstico IN VITRO.


Presentación: Material listo para ser usado. No requiere interfaz u
otro producto sanitario para ser utilizado.
Medio de cultivo listo para su uso, estuche de 10 No realizar intervenciones en el producto. La
unidades, Placas de 90mm. (ref. 285-255). utilización según el uso previsto siguiendo las
instrucciones que se indican mantiene las garantías.
Uso sólo por parte de personal calificado..IVD
diseñado para ser usado en laboratorios de
Composición (gramos / litro): microbiología clínica.
No debe ser usado como materia prima para ninguna
Extracto de carne 2.0 otra fabricación.
Hidrolizado ácido de caseína 17.5 No debe usarse pasado su fecha de expiración.
Almidón soluble: 1.5 No debe usarse si el empaque o el producto esta
D- (+) Glucosa 20.0 deteriorado. Material garantizado solo con sus sellos
Azul de Metileno 0.0005 intactos.
Agar bacteriológico 17.0 No debe usarse si se observa contaminación
pH final medio de cultivo listo para el uso 7.3 +/- 0.1 bacteriana.
No debe usarse si presenta signos de deshidratación,
congelación o agrietamiento
Ambientar la placa sin sello antes de su uso. No re
Uso Previsto: sellar.
El material utilizado debe descartarse de manera
Medio de cultivo para el estudio de susceptibilidad de segura de acuerdo a las normativas de bioseguridad
levaduras mediante difusión en agar. vigentes en el país
Debe utilizarse según normas del CLSI. El uso bajo
Descripción: otras normas debe ser validado por el usuario.
Este artículo ha sido calibrado para uso según
El Agar Mueller Hinton suplementado con 2% de glucosa recomienda CLSI en el documento M44-A.
y 0.5 ug/mL de azul de metileno, corresponde a la
fórmula recomendada en el documento M44-A del CLSI,
para el estudio de susceptibilidad de levaduras frente a
antifúngicos mediante difusión en agar. Conservación:

El estudio de la susceptibilidad del género Candida frente Conservado refrigerado entre 2º y 8º C es estable hasta
a los antifúngicos mediante difusión en agar utilizando la fecha de caducidad. El medio de cultivo se debe
discos o tabletas, ha presentado limitaciones debido a la almacenar sellado y con la cubierta de la placa (tapa)
difusión del antimicótico en el medio de cultivo, y además hacia abajo.
falta de correlación clínica. No obstante, las pruebas
realizadas con discos de fluconazol (25 g) y de Muestras a cultivar:
voriconazol (1 g) en este medio de cultivo tienen una
correlación satisfactoria. En consecuencia, durante el Este medio de cultivo debe utilizarse con inóculos
año 2003 el CLSI ha estandarizado la prueba calibrados obtenidos a partir de cepas puras de Candida
susceptibilidad por difusión para ambos antifúngicos sp. aisladas sobre Agar Sabouraud dextrosa. Para
publicando el documento definitivo M44-A preparar el inóculo, toque cinco colonias aisladas de un
cultivo de 24 horas, y suspéndalas en suero fisiológico
En esta fórmula, la glucosa proporciona una fuente de estéril, ajuste a una turbidez equivalente al standard
energía que facilita el desarrollo de las levaduras, y el McFarland 0.5. Se obtiene una suspensión equivalente a
6 6
1x10 a 5x10 UFC/mL

E-mail: [email protected] – WEB site: http://www.valtekdiagnostics.com


Inoculación: Control de Calidad del Usuario:

Sumergir una tórula estéril de algodón en la suspensión El control de calidad de la performance se ajusta a los
de levaduras, escurrir el exceso y sembrar toda la criterios de diseño y desarrollo del producto, y su
superficie del agar, rotando la placa tres veces para una resultado se declara en el Certificado de Análisis emitido
distribución uniforme. Deje secar unos minutos hasta que para cada lote.
se absorba el exceso de humedad. Aplique los discos
presionando suavemente contra el agar, conserve una El usuario puede realizar control de calidad de acuerdo a
distancia de unos 6 cm entre los discos para obtener los protocolos CLSI o según sus propios criterios.
halos no confluentes. A modo de referencia puede utilizar la siguiente
información según la norma CLSI M44-A
Incubación:
Medida del halo (mm) para cepas control:
24 horas entre 35º C para Cándida sp. y 48 horas para
Cryptococcus sp. Incubar hasta 48 horas si no hay Levadura Fluconazol Voriconazol Posaconazol
desarrollo suficiente a las 24 horas. Candida glabrata y 25 g 1.0 g 5.0 g
Candida krusei pueden requerir 48 horas de incubación. C. krusei ND 16 -25 23 - 31
ATCC 6258
Lectura e interpretación de resultados: C. parapsilosis 22 - 33 28 - 37 25 - 36
ATCC 22019
C. albicans 28 - 39 31 - 42 24 - 34
Medir el diámetro de los halos de inhibición hasta el ATCC 90028
margen del desarrollo, sin considerar las micro colonias C. tropicalis 26 - 37 ND 23 - 33
en los bordes o las colonias aisladas al interior del halo. ATCC 050
Comparar los valores leídos con las correspondientes ND: no documentado.
tablas de puntos de corte según CLSI, y determinar la Los usuarios son responsables de la frecuencia y de los
categoría “Resistente” (R), “Sensibilidad Dosis alcances de sus controles de calidad.
Dependiente” (S-DD), o “Sensible” (S).
Limitaciones de Uso:
Puntos de corte para Candida sp. y su equivalencia en
CIM, según documento M44-A del CLSI: El Agar Mueller Hinton con glucosa y azul de metileno
está desarrollado para las pruebas que se indican en este
Antifúngico Halo de Inhibición (mm) documento, calibradas según recomendaciones del CLSI.
R S-DD S Cualquier otra variación de su uso es de responsabilidad
Fluconazol 25 g ≤ 14 15-18 ≥ 19 del usuario.
Voriconazol 1.0 g ≤ 13 14-16 ≥ 17
Certificados de Análisis:
Caspofungina 5.0 g ≤ 10* ------- ≥ 11
Certificados de Análisis para cada lote pueden ser
(R): resistente, consultados por el cliente en el sitio web
(S-DD): sensibilidad dosis dependiente, www.valtekdiagnostics.com
(S): sensible
* no sensible

Antifúngico CIM µg/mL) Eliminación de Desechos:


R S-DD S
≥ 64 16-32 ≤8 El usuario es responsable de la adecuada eliminación de
Fluconazol 25 g
los materiales para diagnóstico microbiológico estén
Voriconazol 1.0 g ≥ 4 2 ≤1
utilizados o no, para lo que deberá estar en conocimiento
Caspofungina 5.0 g ≥ 2* ------- ≤ 2 cabal de la normativa local vigente respecto de la
disposición de material infeccioso o potencialmente
(R): resistente, infeccioso. Cada laboratorio asume la responsabilidad de
(S-DD): sensibilidad dosis dependiente,
(S): sensible
la gestión de sus desechos y efluentes, sea por cuenta
* no sensible propia o mediante terceros que garanticen el adecuado
tratamiento de estos, y según lo determinen las
reglamentaciones locales vigentes.
Referencias:
1.- National Committee for Clinical Laboratory
Standards.2004. Method for antifungal disk diffusion susceptibility
testing of yeast. Approved standard M44-A.
Clinical and Laboratory Standards Institute. Wayne, Pa.

Rev.2:. 01/2018 CIO

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