Agar Mueller Hinton Con Glucosa y Azul de Metileno Valtek Versión 2 1
Agar Mueller Hinton Con Glucosa y Azul de Metileno Valtek Versión 2 1
Agar Mueller Hinton Con Glucosa y Azul de Metileno Valtek Versión 2 1
El estudio de la susceptibilidad del género Candida frente Conservado refrigerado entre 2º y 8º C es estable hasta
a los antifúngicos mediante difusión en agar utilizando la fecha de caducidad. El medio de cultivo se debe
discos o tabletas, ha presentado limitaciones debido a la almacenar sellado y con la cubierta de la placa (tapa)
difusión del antimicótico en el medio de cultivo, y además hacia abajo.
falta de correlación clínica. No obstante, las pruebas
realizadas con discos de fluconazol (25 g) y de Muestras a cultivar:
voriconazol (1 g) en este medio de cultivo tienen una
correlación satisfactoria. En consecuencia, durante el Este medio de cultivo debe utilizarse con inóculos
año 2003 el CLSI ha estandarizado la prueba calibrados obtenidos a partir de cepas puras de Candida
susceptibilidad por difusión para ambos antifúngicos sp. aisladas sobre Agar Sabouraud dextrosa. Para
publicando el documento definitivo M44-A preparar el inóculo, toque cinco colonias aisladas de un
cultivo de 24 horas, y suspéndalas en suero fisiológico
En esta fórmula, la glucosa proporciona una fuente de estéril, ajuste a una turbidez equivalente al standard
energía que facilita el desarrollo de las levaduras, y el McFarland 0.5. Se obtiene una suspensión equivalente a
6 6
1x10 a 5x10 UFC/mL
Sumergir una tórula estéril de algodón en la suspensión El control de calidad de la performance se ajusta a los
de levaduras, escurrir el exceso y sembrar toda la criterios de diseño y desarrollo del producto, y su
superficie del agar, rotando la placa tres veces para una resultado se declara en el Certificado de Análisis emitido
distribución uniforme. Deje secar unos minutos hasta que para cada lote.
se absorba el exceso de humedad. Aplique los discos
presionando suavemente contra el agar, conserve una El usuario puede realizar control de calidad de acuerdo a
distancia de unos 6 cm entre los discos para obtener los protocolos CLSI o según sus propios criterios.
halos no confluentes. A modo de referencia puede utilizar la siguiente
información según la norma CLSI M44-A
Incubación:
Medida del halo (mm) para cepas control:
24 horas entre 35º C para Cándida sp. y 48 horas para
Cryptococcus sp. Incubar hasta 48 horas si no hay Levadura Fluconazol Voriconazol Posaconazol
desarrollo suficiente a las 24 horas. Candida glabrata y 25 g 1.0 g 5.0 g
Candida krusei pueden requerir 48 horas de incubación. C. krusei ND 16 -25 23 - 31
ATCC 6258
Lectura e interpretación de resultados: C. parapsilosis 22 - 33 28 - 37 25 - 36
ATCC 22019
C. albicans 28 - 39 31 - 42 24 - 34
Medir el diámetro de los halos de inhibición hasta el ATCC 90028
margen del desarrollo, sin considerar las micro colonias C. tropicalis 26 - 37 ND 23 - 33
en los bordes o las colonias aisladas al interior del halo. ATCC 050
Comparar los valores leídos con las correspondientes ND: no documentado.
tablas de puntos de corte según CLSI, y determinar la Los usuarios son responsables de la frecuencia y de los
categoría “Resistente” (R), “Sensibilidad Dosis alcances de sus controles de calidad.
Dependiente” (S-DD), o “Sensible” (S).
Limitaciones de Uso:
Puntos de corte para Candida sp. y su equivalencia en
CIM, según documento M44-A del CLSI: El Agar Mueller Hinton con glucosa y azul de metileno
está desarrollado para las pruebas que se indican en este
Antifúngico Halo de Inhibición (mm) documento, calibradas según recomendaciones del CLSI.
R S-DD S Cualquier otra variación de su uso es de responsabilidad
Fluconazol 25 g ≤ 14 15-18 ≥ 19 del usuario.
Voriconazol 1.0 g ≤ 13 14-16 ≥ 17
Certificados de Análisis:
Caspofungina 5.0 g ≤ 10* ------- ≥ 11
Certificados de Análisis para cada lote pueden ser
(R): resistente, consultados por el cliente en el sitio web
(S-DD): sensibilidad dosis dependiente, www.valtekdiagnostics.com
(S): sensible
* no sensible