GUÍA DE GENERALIDADES EN BACTERIOLOGÍA VETERINARIA

TÉRMINOS USADOS EN INFECTOLOGÍA VETERINARIA

Las bacterias como agentes etiológicos de enfermedades infecciosas:

Las bacterias son ubicuas, es decir, pueden encontrarse en cualquier lugar,
particularmente en todo tipo de materia orgánica muerta y desempeñar un
importante papel en los procesos metabólicos de la materia viva, descomponiendo
los sustratos orgánicos de plantas y animales, mineralizándolos y restituyéndolos
a la naturaleza para su nuevo aprovechamiento.
Estos microorganismos realizan diversos procesos bioquímicos que le permiten
sobrevivir a expensas de los compuestos más simples, no obstante, aquellas
bacterias productoras de enfermedades tienen requerimientos metabólicos tan
complejos que están obligadas a vivir de la materia viva, mediante su adaptación
al modo de vida parásito, por haber perdido la capacidad de sintetizar algunos
compuestos esenciales, y entre ellas evidentemente a nosotros nos interesan las
que pueden colonizar el cuerpo de los animales.

Características generales de las bacterias:

1. Son organismos procariotas, (organismo cuyo ácido desoxirribonucleico no está
confinado en el interior del núcleo, sino extendido en el citoplasma), por tanto, sus
células no cuentan de núcleo.
2. Unicelulares.
3. Se encuentra generalmente conformando colonias.
4. Generalmente, su alimentación es por medio de la absorción, pero algunas
especies son capaces de realizar procesos fotosintéticos o quimiosintéticos.
5. Su tipo de reproducción es generalmente asexual: por fisión o por yemas.
6. Se pueden encontrar especies que son inmóviles y otros que tienen la
capacidad de desplazarse.

Principales formas y agrupaciones bacterianas

Si se observan las bacterias al microscopio, esas se diferencian por su forma en
tres grupos fundamentales:
1. Forma Esférica o Redonda: Cocos, (del latín coccus, esférico). Estas bacterias
no presentan siempre una forma esférica perfecta, sino que a veces pueden ser
algo ovaladas, o presentarse en forma de granos de café, como es el caso de los
gonococos;
2. Forma de Bastones: Bacilos. Estos microorganismos pueden parecer bastones
cortos o largos, con extremos redondeados, puntiagudos o rectos.
3. Forma Espiral o Curva: Vibriones y Espirilos. Los vibriones son
microorganismos que presentan una curvatura en su célula y tienen forma de
célula ortográfica, mientras que los espirilos (del latín spira, espiral), son
microorganismos que presentan varias curvaturas en su célula y tienen forma de S
retorcida.
La disposición de las células viene determinada por el número de planos por los
que se divide cada célula que en el caso de las bacterias estas se agrupan de la
forma siguiente:
- COCOS. Disposición:
Monococos: se caracterizan por presentar células aisladas o colocadas
desordenadamente.
Diplococos: (del griego diplo, doble), se caracterizan por tener células unidas en
parejas, o sea de dos en dos.
Tetracocos: (del griego tetra, cuatro), se caracterizan por tener sus células
dispuestas en grupos de a cuatro, situadas perpendicularmente entre sí, es decir
en forma de cuadrado.
Estreptocoocos: (del griego streptos, cadena), se caracterizan por agruparse
formando cadenas de diferentes longitudes (cortas o largas), siendo estas
generalmente curvas.
Estafilococos: (del griego staphilos, racimos), se caracterizan por agruparse en
racimos muy semejantes a los de uvas.
Sarcinas: (del griego sarcio, reunía), se caracterizan por sus células, las cuales se
agrupan entre planos, formando paquetes cúbicos parecidos a los dados.

- BACILOS. Disposición:
Estos microorganismos se agrupan en tres formas fundamentales durante su
reproducción:
Monobacilos: presentan células aisladas o colocadas desordenadamente.
Diplobacilos: sus células se disponen en parejas, pero siempre en sentido
longitudinal, es decir unidas por sus extremos y nunca por los lados.
Estreptobacilos: sus células se presentan reunidas en cadenas de diferentes
longitudes y al igual que en las anteriores se unen por los extremos.
Además, existen bacilos que se caracterizan por su capacidad para formar
ramificaciones sencillas, parecidas a retoños laterales como son los bacilos
causantes de la tuberculosis y de la lepra.

Estructuras bacterianas celulares y su función

Pared celular.
La pared celular se encuentra fuera de la membrana citoplasmática y protege el
interior de la célula de los cambios ambientales adversos. Es una estructura
semirrígida compleja que proporciona integridad estructural a la célula, mantiene
la forma celular (cocos, bacilos y espirales) y protege el citoplasma del choque
osmótico. La pared celular determina la reacción de Gram, que clasifica a las
bacterias en términos generales en bacterias grampositivas o gramnegativas.
Toxicidad inducida por las bacterias gram negativas.
El LPS de las bacterias gramnegativas tiene tres componentes:
a) Lípido A: Los ácidos grasos del componente lipídico están ligados a la capa de
fosfolípidos de la MO y son responsables de muchas de sus actividades
biológicas, incluida la toxigenicidad.
b) Polisacárido del núcleo: El núcleo está compuesto por azúcares, incluidos dos
azúcares característicos, el ácido cetodesoxioctanoico y la heptosa. El núcleo une
el lípido A al O-polisacárido.
c) O-polisacárido:
El polisacárido se extiende hacia afuera desde la superficie de OM y está
compuesto por varios azúcares, incluidos algunos azúcares inusuales. La
composición varía entre especies y cepas dentro de una especie. El polisacárido
O es antigénico (antígeno somático o O), que es la base de la serotipificación en
muchas bacterias gramnegativas, particularmente en los géneros de Escherichia y
Salmonella.
Tinción de Gram: es un proceso que consiste en la coloración de las estructuras
bacterianas previamente estudiadas con el fin de determinar si son gram +
(azules) o gram – (rojas). Los pasos para su realización se pueden ver en la
siguiente figura.

La muestra debe fijarse con calor a la placa portaobjeto, luego de esto, se inicia la
tinción de gram. Entre cada uno de los tintes debe lavarse con agua natural con el
fin de retirar el exceso. El cristal violeta tiñe la pared bacteriana, debido a que las
bacterias gram + tienen la pared más gruesa estas resisten la decoloración con
alcohol. El yodo sirve para fijar el cristal violeta a la pared bacteriana. La adición
de alcohol sirve para eliminar el cristal violeta de la pared bacteriana de las gram -,
debido a que esta, al ser más delgada no puede mantener el tinte azul. Por último,
la safranina o fuscina tiñe la membrana externa de las gram – la cual está llena de
LPS que absorben el tinte.
Paredes celulares complejas
Las paredes celulares complejas están presentes en las especies Mycobacterium,
Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, que
causa la tuberculosis y la enfermedad de Johne, respectivamente. La pared celular
de las micobacterias incluye un peptidoglicano delgado unido a cadenas de
galactosa y arabinosa, llamado arabinogalactano. Los extremos del
arabinogalactano están vinculados a lípidos cerosos inusuales y complejos
llamados ácido micólico. Los ácidos micólicos, que son hidrófobos, representan el
60 % de los constituyentes de la pared celular de las micobacterias. El
arabinogalactano mantiene unidos los ácidos micólicos y el peptidoglicano. La
capa lipídica hace que Mycobacterium se agrupe para formar paquetes de células
en caldos de cultivo. Tampoco permite la entrada de tintes y, por lo tanto, no se
tiñe con el procedimiento de tinción de Gram.
Esporas y esporulación
Las esporas son estructuras citoplasmáticas formadas en ciertas bacterias,
generalmente en bacterias grampositivas. Las esporas son la forma deshidratada,
altamente duradera, resistente y latente de la célula bacteriana. Pueden sobrevivir
durante mucho tiempo y resistir el calor extremo, la falta de agua, los productos
químicos, la radiación, etc. La resistencia se debe a la gruesa capa de esporas
que se forma durante la esporulación. Entre los patógenos, Bacillus y Clostridium
son los dos géneros importantes que son formadores de esporas. Coxiella burnetii,
una especie gramnegativa, también forma estructuras similares a esporas que
resisten el calor y los productos químicos.
El proceso de formación de esporas dentro de una célula (célula vegetativa) se
llama esporulación o esporogénesis. El proceso comienza cada vez que un
nutriente clave (carbono o nitrógeno) se agota o es deficiente o cuando las células
están expuestas a condiciones adversas. Durante el proceso, se sintetiza una
gruesa capa de esporas que consiste en proteínas fuera de la pared celular que
confiere resistencia al entorno hostil. Las esporas pueden liberarse libremente al
medio ambiente por la ruptura de las células vegetativas (Figura 2.9). La
importancia clínica de las esporas es que son resistentes a los procesos, como el
calor, los desinfectantes y la radiación, que normalmente matan las células
vegetativas. La mayoría de las bacterias patógenas mueren calentándolas a 70 °C
o hirviéndolas (100 °C), pero las esporas pueden sobrevivir.
 FISIOLOGÍA BACTERIANA
Metabolismo bacteriano
El metabolismo es la suma de todas las reacciones bioquímicas que ocurren en
una célula. Las reacciones bioquímicas liberan o requieren energía. Por lo tanto, el
metabolismo se divide en dos tipos de procesos: catabolismo y anabolismo. El
catabolismo es el proceso de romper moléculas complejas (reacciones
degradativas) en moléculas más pequeñas y simples con liberación simultánea de
energía ATP y electrones o cofactores reductores, como nicotinamida adenina
dinucleótido reducido (NADH), flavina dinucleótido (FADH) y ferredoxina. El ATP
generado en las vías catabólicas se utiliza en las vías anabólicas.
Producción de energía
Las bacterias que utilizan sustancias químicas ya sean inorgánicas u orgánicas,
para obtener energía se denominan quimiotrofas. Todos los patógenos
bacterianos son quimiotrofas. Los compuestos inorgánicos, como el nitrógeno, el
azufre y el hierro, se utilizan para obtener electrones y energía. Hay dos
mecanismos de producción de energía: la respiración y la fermentación.
Los patógenos bacterianos que ingresan al cuerpo de un animal tienen acceso,
además de los sacáridos y polisacáridos, a otras moléculas orgánicas complejas,
principalmente proteínas y lípidos, que pueden utilizarse para generar la energía
necesaria para el crecimiento. Los mecanismos metabólicos utilizados por
carbohidratos, lípidos y proteínas para generar ATP están interrelacionados.

Crecimiento bacteriano
El crecimiento bacteriano significa un aumento en el número de células y no en su
tamaño. Las bacterias se reproducen asexualmente mediante un proceso llamado
fisión binaria. Por lo general, la fisión binaria se inicia con la elongación de la
célula, seguida de la replicación del ADN, la formación de una partición llamada
tabique y la separación de dos células hijas. Cada célula hija tendrá información
genética idéntica a la célula madre. El tiempo requerido para que una célula se
divida en dos células se llama tiempo de generación. El tiempo de generación
varía considerablemente entre las especies bacterianas y depende de las
condiciones de crecimiento, como la temperatura, el pH y la disponibilidad de
nutrientes. Puede variar desde 20 minutos hasta varias horas o varios días. La
mayoría de las bacterias patógenas tienen un tiempo de generación de una a tres
horas.

Curva de crecimiento y fases

* Fase de adaptación: Las bacterias acomodan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales y de nutrientes para iniciar el crecimiento exponencial.
• Fase exponencial o logarítmica: Tanto la velocidad de crecimiento como el
consumo de nutrientes son máximos, las bacterias tienen un tiempo de generación
mínimo y corresponde a la fase de infección y multiplicación del agente infeccioso
dentro del organismo.
• Fase estacionaria: No se incrementa el número de bacterias y estas presentan
un metabolismo diferente al de la fase exponencial; se observa acumulación y
liberación de metabolitos secundarios que tienen importancia en el curso de las
infecciones o intoxicaciones. Esta fase sucede porque se agotan uno o varios
nutrientes esenciales en el medio, bien ser porque, los productos de desecho
liberados en la fase de crecimiento exponencial convierten el medio en inhóspito
para el crecimiento microbiano o por la presencia de competidores que limitan su
crecimiento
• Fase de muerte: se produce una reducción del número de bacterias viables del
cultivo.

Oxígeno
El oxígeno es un requisito crítico para muchas bacterias; dicta el tipo de
metabolismo que llevan a cabo para generar energía para el crecimiento. Las
bacterias varían en su necesidad y tolerancia al oxígeno. Se dividen en dos
grandes grupos, aerobios y anaerobios, según su necesidad de oxígeno y cómo
les afecta el oxígeno.

Temperatura
La temperatura es un factor ambiental importante que afecta el crecimiento y la
supervivencia de las bacterias. Generalmente, una temperatura demasiado baja o
alta inhibirá el crecimiento de bacterias. La razón probable es el requerimiento de
temperatura para reacciones metabólicas catalizadas por enzimas óptimas. Las
temperaturas mínimas y máximas varían mucho entre las bacterias. Según la
temperatura óptima para el crecimiento, las bacterias se clasifican en tres grandes
grupos:
a) Los psicrófilos son bacterias que crecen mejor a 10–15 °C (rango 0–25 °C).
b) Los mesófilos son bacterias que crecen mejor a 30–37 °C (rango 15–45 °C).
c) Los termófilos son bacterias que crecen mejor a 55 °C (rango 35–70 °C).
La mayoría de las bacterias patógenas son mesófilas porque la temperatura
corporal de los animales y los humanos se encuentra en ese rango.

pH
El pH (logaritmo negativo de la concentración de iones de hidrógeno) del entorno
bacteriano (hábitats naturales o medios de cultivo bacterianos), que refleja la
concentración de moléculas ácidas o básicas, tiene un gran impacto en el
crecimiento bacteriano e incluso en la supervivencia. Cada especie bacteriana
tiene un requisito de pH mínimo, máximo y óptimo. Los hábitats bacterianos en la
naturaleza varían desde condiciones extremadamente ácidas (pH de 1 a 2) hasta
condiciones extremadamente alcalinas (pH de 10 a 12). La mayoría de las
bacterias patógenas crecen mejor (pH óptimo) a pH neutro (pH 7,0) con un rango
de 6,8 a 7,2. Ciertos patógenos son tolerantes a los ácidos y pueden sobrevivir a
las duras condiciones del estómago.
Presión osmótica y iones.
Las bacterias patógenas suelen crecer mejor a presiones osmóticas equivalentes
a las de una solución salina fisiológica (150 mM o NaCl al 0,65 %). Cualquier
cambio en la concentración osmótica del medio circundante, ya sea concentración
hipotónica o hipertónica, afectará a las bacterias, aunque la pared celular
proporcionará cierta protección. Algunas bacterias se han adaptado para tolerar o
crecer en altas concentraciones de sal.
Nutrientes
Las bacterias requieren nutrientes para crecer. Algunos nutrientes se requieren en
grandes cantidades (macronutrientes), otros en cantidades menores o incluso
mínimas (micronutrientes). Diferentes bacterias requieren diferentes nutrientes, a
menudo en formas específicas. Los dos macronutrientes principales son el
carbono y el nitrógeno, que son los dos elementos principales de las células
bacterianas. La principal fuente de carbono es orgánica (principalmente
carbohidratos). Las fuentes de nitrógeno son orgánicas (proteínas, urea, etc.) o
inorgánicas (amoníaco, nitratos, etc.). Otros macronutrientes son fósforo, azufre,
potasio, magnesio, calcio y sodio. Junto al carbono y el nitrógeno, el fósforo y el
azufre son macronutrientes importantes necesarios para sintetizar aminoácidos
que contienen azufre. Aunque la mayoría de las bacterias utilizan la glucosa como
fuente de energía, los patógenos que entran en el cuerpo de un animal están
equipados para utilizar carbohidratos complejos, proteínas y lípidos. Los
micronutrientes se requieren en pequeñas cantidades, pero son críticos para la
función celular. Son vitaminas y metales (cobre, hierro, manganeso, molibdeno,
níquel, zinc, etc.) y, por lo tanto, a menudo se denominan oligoelementos.
Transferencia horizontal de genes en las bacterias
Es un mecanismo utilizado por los agentes bacterianos con el fin de transferir su
material genético a otras bacterias presentes en el medio. A través de este
proceso, los agentes bacterianos pueden intercambiar información y adquirir
factores de virulencia de otros microorganismos con los cuales interactúa.
Mecanismos patogénicos de las bacterias