Copia de Equipo 12. Curva Estándar
Copia de Equipo 12. Curva Estándar
Copia de Equipo 12. Curva Estándar
E Q U I P O :
Beltran Hernández Yahir
Casas Guillermo Eros Yael
Matías Ortiz Cynthia Atenea
Rico García Itze Mariana
G r u p o : 1452
S e m e s t r e: 25-1
C a r r e r a : Q.F.B
● Objetivos
- Desarrollar y analizar una curva estándar.
- Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el
método de Lowry.
● Resumen
La ley de Beer-Lambert establece que la cantidad de luz que absorbe una solución
es proporcional a la concentración de la solución y al paso de luz. En otras palabras,
una solución más concentrada absorbe más luz que una diluida.
Método de Lowry
El método de Lowry (1951) utiliza tres sistemas para producir coloración por la
presencia de proteínas. En primer lugar, el Cu+ forma complejos de coordinación
con dos enlaces peptídicos consecutivos de las proteínas, dando lugar a un
compuesto coloreado azul de manera similar al método del biuret.
En segundo lugar, este compuesto es capaz de reducir al reactivo de
Folin-Ciocalteu, dando un color más azulado. Por último, el reactivo de
Folin-Ciocalteu también reacciona con los restos de tirosinil de la cadena
polipeptídica, produciendo asimismo un color azul por la reducción del
fosfomolibdato en medio básico.
● Resultados
TUBO BLANCO 2 3 4 5 6 7
Imagen 1. Tubos 4-7 con la solución patrón, agua destilada y los reactivos 3 y 4
Imagen 1. Tubos 2 y 3 con la solución problema, agua destilada y los reactivos 3 y 4
5mg/50mL
0.1mg/mL
Ya que se hizo esa relación se procedió a hacer una regla de 3 para obtener los mg
a partir de los mL de los tubos 4, 5, 6 y 7…
0.1mg—---------------1mL
x—---------------(mL de cada tubo)
Tubo mL Absorbancia
2 0.2 0.078
3 0.4 0.156
Tabla 3. Resultados obtenidos del tubo 2 y 3 con el espectrofotómetro.
Gráfica I. Curva estándar de la albúmina presente en la clara de huevo.
y = 2.02x - 0.004
R² = 0.9939
Concentración aproximada para una absorbancia de 0.078 (P1): 0.202
Concentración aproximada para una absorbancia de 0.156 (P2): 0.198
● Análisis de resultados
● Conclusión
Por tanto, los objetivos planteados al inicio de la práctica fueron cumplidos, ya que
no solo se logró establecer una curva estándar que evidencia la relación
absorbancia-concentración, sino que también se verificó la eficacia del método de
Lowry para la determinación de proteínas en el rango de concentraciones estudiado.
Asimismo, esta práctica refuerza la importancia de seguir de manera rigurosa los
procedimientos experimentales para minimizar errores y obtener resultados
confiables en la cuantificación de biomoléculas como las proteínas.
● Referencias
○ Roca, Pilar, et al. Bioquímica: técnicas y métodos, Editorial Hélice,
2004. ProQuest Ebook Central,
http://ebookcentral.proquest.com/lib/bibliodgbsp/detail.action?docID=3
159423.
○ Manual de Laboratorio de Bioquímica celular y de los tejidos 1.
UNAM.[2022]