78 PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE Staphylococcu
78 PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE Staphylococcu
78 PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE Staphylococcu
Janet Salazar L
Bacteriloga
IUCMde A
1.catalasa:
Stomacoccus Planococcus
2. Coagulasa:
Enzima que estimula la conversion del fibrinogeno en fibrina, comprueba la facultad de un MO de coagular el plasma por accion de esta enzima Coagulasa tubo: coagulasa libre: detectala produccion de la enzima estafilocoagulasa Coagulasa placa: detecta la produccion de una proteina localizada en gran parte del Staphylococo
** recomendado plasma de conejo con EDTA , no se debe usar el plasma citratato por que los Mos que pueden usar citrato ej especies de Enterococcus produciran resultados positivos confundiendose con staphylococcus El plasma humano puede contener anticuerpos antiestafilococicos (material vencido de bancos de sangre)
La prueba de la coagulasa es usada especficamente para diferenciar las especies del genero staphylococccus:
S. aureus S. epidermidis
Positiva Negativa
Placa: Una prueba positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos. Una pruebasi positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos. La prueba negativa la La prueba negativadentro si la aglutinacin aglutinacin no ocurre de 3-4 no ocurre dentro de 3-4 minutos. minutos. Tubo: interpretacin prueba positiva coagulo completo coagulo parcial, el coagulo no abarca completamente la columna del fluido. prueba negativa: no hay formacin de coagulo, la suspensin permanece homognea
3. Oxidasa
Determinar la presencia de enzimas oxidasa La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidacin del citocromo que es reducido por el oxgeno molecular que produce agua o perxido de hidrgeno segn la especie bacteriana
Aerococcus
Stomacoccus Micrococcus Catalasa + oxidasa+
Nota: los Staphylococcus mediante la prueba de oxidasa y resistencia a la furazolidona
Prueba oxidasa
6. Prueba de la novobiocina
Staphylococcus saprophyticus: (R ) Halo 6-12 mm Otros Staphylococcus y S. aureus: ( S) Halo >=16 mm
7. manitol
Manitol ( +) S. aureus
Manitol ( )S. epidermidis
Crecimiento en Agar manitol sal Izquierda bacteria manitol negativo y derecha manitol positivo
8. Agar DNAsa
para determinar actividad de desoxirribonucleasa el cual es visualizado agregando HCL 0.1
los que degradan DNA se observara transparencia alrededor de la siembra y los que no degradan DNA no se observara transparencia la siembra debe ser puntos de inoculacion de aproximadamente 5mm de diametro Util para S. aureus: DNAsa : positiva
9. urea
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad uresica Se utiliza para estafilococos
Negativa/ positiva
ESPECIE
PYR
Coag
Urea
Man
Saca
Bac1
Poli2
Novo3
-/+d + + NP + + +
+ + +L + + +
S V S S S V S V
S S R S S S S S
S R S SS S R S R
ESPECIE
Ureasa
Oxidasa
Fos-Alc
Acido trealosa
S. saprophyticus S. cohnii subs cohnii S. cohnii subs.urealyticum S. sciuri subs.sciuri S. hominis subs.novobiosepticus
+ + +
+ -
+ + -
+ + + + -
S. aureus:
Coco Gram positivo que se agrupa Catalasa positivo Coagulasa positivo tanto en lamina como
Oxidasa negativo Fermenta el Manitol
en tubo en racimos
Api Staph
Sistema estandarizado de identificacion de los generos Staphylococcus Micrococcus Kocuria
identificacin
se obtiene a partir del perfil numrico
Determinacin del perfil numrico:
En la hoja de resultados, los tests estn separados en grupos de 3 y se asigna para cada uno un valor 1, 2 4. Sumando en el interior de cada grupo los nmeros
que corresponden a reacciones positivas, se obtienen 7cifras que constituyen el perfil numrico.
identificacin: Se realiza a partir de la base de datos * Con la ayuda del Catlogo Analtico: - Localizar el perfil numrico en la lista de los perfiles. * Por medio del software de identificacin apiweb TM : - Introducir manualmente por teclado el perfil numrico de 7 cifras. 6 706 113 Staphylococcus epidermidis