Tecnicas para El Estudio de Linfocitos
Tecnicas para El Estudio de Linfocitos
Tecnicas para El Estudio de Linfocitos
Linfocitos B: Inmunoglobulinas
de superficie
Rosetas con
Linfocitos T: eritrocitos de
carnero
Linfocitos B
Linfocitos T
.- Para los linfocitos B: inmunoglobulinas de superficie que pueden ser detectadas con
suero policlonales o Acs. monoclonales marcados con fluorescencia (isotiocianato
de fluoresceína). En el microscopio de fluorescencia se puede observar que en la
membrana aparece una reacción fluorescente positiva.
Técnicas:
.- Lisis Ac/Complemento
.- Panning
.- S. Magnética
.- Análisis por citometría de flujo.
.- Inmunohistoquímica.
Identificación Separación
- positiva
Panning:
- negativa Rendimiento: > 90% pureza y viabilidad
Ag -
Ag -
Ag+ Ag -
Ag -
Ag -
Ag -
• El citómetro de flujo es un
aparato que permite • Las células, sobre las que se
caracterizar e incluso adicionan los monoclonales
separar las diferentes (se pueden valorar varios a la
poblaciones linfocitarias “in vez) frente al marcador objeto
vitro” mediante el uso de de estudio (CD2, CD4, CD8,
anticuerpos monoclonales etc.) pasan a través de un haz
marcados con fluoresceína, de un láser que detecta su
PE,etc; frente a los capacidad para dispersar la
marcadores de superficie luz (tamaño de las células) y
específicos de cada la fluorescencia que emiten
subpoblación que se desee (tipo de célula). Las
estudiar. mediciones obtenidas se
indican en porcentajes de
cada población.
Forward scatter
(size)
• INMUNOENSAYOS: ELISA
Cuidadosos controles