Tecnicas Histológicas
Tecnicas Histológicas
Tecnicas Histológicas
HISTOLÓGICAS
INTRODUCCIÓN
⦿ HISTOLOGIA
ιστός: histós "tejido"
⦿ TEJIDO
Asociación de células de naturaleza similar,
diferenciadas de modo determinado y ordenadas
regularmente con un comportamiento fisiológico
común.
⦿ CELULA
INTRODUCCIÓN
⦿ Histología:
Inmunohistoquímica
Uso de anticuerpos marcados con un colorante fluorescente
dirigidos a un componente celular particular o
la actividad enzimática inherente”
Citoquímica
Identificación y localización de la proteína
VASA
(en verde.) Ovocitos
INTRODUCCIÓN
⦿ Se utilizan para preparar tejidos para su estudio.
⦿ Las etapas son: - Obtención del material
- Fijación
- Deshidratación
- Aclaramiento
- Inclusión
- Microtomía
- Montaje y Rehidratación
- Tinción
FIJACIÓN
Clasificación
❑Fijadores químicos
- Fijadores simples, constituidos por una sola sustancia química
- Fijadores compuestos o mezclas fijadoras cuando varias
sustancias intervienen en su constitución.
❑ Fijadores físicos
1. Calor seco húmedo.
2. Criodesecación
3. Criosustitución
4. Congelación
FIJACIÓN
FIJADORES SIMPLES FIJADORES COMPUESTOS
a) Formol al 10%, es el más usado. a) Líquido de Fleming, mezcla cromo-
b) Alcohol etílico absoluto o de 96% osmio-acética.
(microquímica)
c) Alcohol metílico, se le emplea con b) Líquido de Zenker, mezcla
frecuencia para fijar frotis bicromato-sublimado-acética.
desecados (sangre, médula ósea,
ganglio, bazo, líquidos de punción, c) Líquido de Helly, mezcla Zenker-
etc.). formol.
d) Ácido ósmico al 1 ó 2%, es poco
penetrante pero enérgico, conserva d) Líquido de Bouin, mezcla picro-
muy bien estructuras celulares. formos-acética.
e) Bicromato de potasio al 3-5%.
e) Liquido de Duboscq-Brasil, o Bouin
alcohólico.
FIJACIÓN
⦿ Xilol
⦿ Eltejido se torna transparente
⦿ Distinguir entre sí las células superpuestas en un tejido y la
matriz extracelular
INCLUSIÓN
⦿ PARAFINA.
⦿ Se coloca el tejido en un envase con parafina fundida
hasta que se infiltre completamente.
⦿ Se sumergen las piezas en parafina (46-60º de punto de
fusión)
⦿ Después de 1 a 2 horas se renueva la parafina.
⦿ Luego se coloca en un receptáculo con parafina fundida,
se deja endurecer para formar el bloque de parafina .
⦿ Conservar la muestra. Rigidez
PROCESADOR DE TEJIDOS
INCLUSION
BLOQUES DE PARAFINA
INCLUSION
Otros medios de inclusión:
⦿ Se colocan en el microtomo
⦿ Colorantes Ácidos
- Carga negativa
- Reaccionan con los grupos
cationicos de las células y
tejidos ⦿ Colorantes básicos
-Acidofilia - Carga neta positiva
- Reaccionan con los
grupos aniónicos de
las células
- Basofilia
COLORACION
⦿ Tambien pueden ser:
HEMATOXILINA NEGRO:
FÉRRICA Estriaciones del
músculo, núcleo y
eritrocitos
TINCIÓN ARGENTICA NEGRO : FIBRAS
RETICULARES
ROJO SUDAN
GOMORI GROCOTT
ZIEHL NEELSEN
PAS
TRICRÓMICO DE
MASSON
TECNICAS HISTOLOGICAS
TECNICAS HISTOLOGICAS
GRACIAS…