Este documento trata sobre diferentes temas relacionados con el mejoramiento genético mediante cultivo de tejidos vegetales in vitro. Habla sobre mutaciones espontáneas e inducidas, variación somaclonal, factores que determinan las alteraciones genéticas, rescate de embriones sexuales y aplicaciones del cultivo de embriones.
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Este documento trata sobre diferentes temas relacionados con el mejoramiento genético mediante cultivo de tejidos vegetales in vitro. Habla sobre mutaciones espontáneas e inducidas, variación somaclonal, factores que determinan las alteraciones genéticas, rescate de embriones sexuales y aplicaciones del cultivo de embriones.
Este documento trata sobre diferentes temas relacionados con el mejoramiento genético mediante cultivo de tejidos vegetales in vitro. Habla sobre mutaciones espontáneas e inducidas, variación somaclonal, factores que determinan las alteraciones genéticas, rescate de embriones sexuales y aplicaciones del cultivo de embriones.
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MUTACIONES. VARIACIÓN SOMACLONAL.
ALTERACIONES GENÉTICAS Y FRECUENCIA. RESCATE DE EMBRIONES SEXUALES.
Dr. Julio Chico Ruíz
MEJORAMIENTO GENÉTICO MEDIANTE CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES IN VITRO • 1.mutación física y química • 2. variación somaclonal. • 3. rescate de embriones sexuales • 4. obtención de haploides • 5. cultivo de protoplastos • 6. transformación genética MUTANTES • ORGANISMOS QUE PRESENTAN CAMBIOS HEREDABLES REPENTINOS Y LA DESCENDENCIA MUESTRA UNA ALTERACIÓN EN TAMAÑO, FORMA O COMPOSICIÓN. • Grupo 1. cambios en la estructura química del gen (presencia de un locus en el cual se puede efectuar, o se ha efectuado, algún cambio o alteración-mutaciones genéticas o de punto-). • Grupo 2. alteraciones cromosómicas (translocaciones, inversiones superiores y duplicaciones, etc.) • Grupo 3. Cambios en el número de cromosomas. MUTANTES:CARACTERÍSTICAS • Los cambios perjudiciales superan a los favorables en una alta proporción. • La mayoría de mutantes son recesivos. • Cultivar poblaciones muy numerosas en segunda generación. • Se aplica a la mejora de características de interés agrícola. • Pueden ser espontáneas o inducidas. MUTACIONES ESPONTÁNEAS • El cambio afecta a un solo gen. • Mayoría son perjudiciales. • Planta mutante puede usarse directamente como variedad. • Ó como base para incorporar el nuevo carácter a variedades tradicionales (por hibridación y retrocruzamiento). • Uso frecuente en especies ornamentales( flor doble, enanismo, etc.) • Son errores durante el proceso de replicación del propio ADN.(10-7 y 10-11) • La mayoría de las mutaciones espontáneas son recesivas. MUTACIONES INDUCIDAS • Métodos físicos y químicos. • Físicos: radiaciones ionizantes: rayos equis, gama, partículas alfa y neutrones). Radiaciones no ionizantes: luz UV-B). • Químicos: metanosulfonato de etilo, sulfato de dieetilo, compuestos nitrosados, análogos de nucleósidos, azida sódica. • Agentes intercalantes: acridinas • Químicos: mutaciones puntuales • Radiaciones ionizantes: anomalías cromosómicas. VARIACIÓN SOMACLONAL • Proceso por el cual se genera variación en los tejidos, inducida por el cultivo in vitro. • Presente en sistema de regeneración de plantas que incluyen una fase callosa. CARACTERISTICAS • Como regla general, entre mayor sea el nivel de desorganizacion del tejido del explante y mayor el tiempo que este pasa en la fase de cultivo in vitro, mayores seran las probabilidades de generar variacion somaclonal. • En general, el tejido mas ampliamente usado para la seleccion es el callo, aunque pueden • utilizarse tambien otros explantes que conducen a una organogenesis directa. El callo tiene la ventaja de ser producido facilmente y de que puede regenerarse potencialmente en plantulas. Ademas, la carencia de cuticula facilita la toma de moleculas pequenas tales como las fitotoxinas (Okole et al. 2000). CARACTERISTICAS • Las variaciones epigeneticas, debido a su naturaleza, son inestables y se revierten con una alta frecuencia en las lineas celulares, sin que haya consecuencias fenotipicas en las plantas regeneradas (Sanchez-Chiang & Jimenez, 2009). • Variación somaclonal de origen genético si se trasmite y expresa en la descendencia de las plantas regeneradas. • la ocurrencia de variación somaclonal esta asociada a mutaciones puntuales, rearreglos y recombinaciones cromosomicas, metilacion del ADN, alteracion en el numero de copias de segmentos de ADN, y ocurrencia de elementos transponibles ( Jain, 2001) FACTORES QUE DETERMINAN LAS ALTERACIONES GENÉTICAS Y SU FRECUENCIA EN LA VARIACIÓN SOMACLONAL • El genotipo • El tipo de explante • La vía de regeneración • La composición del medio de cultivo • Duración del periodo de cultivo. VARIACIÓN SOMACLONAL VERSUS GENÉTICA • La variación somaclonal (vs) puede usarse, con mucha más frecuencia, para recuperar la variación genética natural de una variedad. • Vs puede causar una variación temporal o una variación genética. • Cambios epigenéticos no se trasmiten meióticamente, entonces no son útiles en mejoramiento. • Para calcular el valor y la base genética de los somaclones, se debe examinar la progenie obtenida sexualmente RESCATE DE EMBRIONES SEXUALES • Producto del cruzamiento entre dos especies distantes que son genéticamente incompatibles. • Embriones con anomalías en el desarrollo, entonces funcionamiento alterado del cigoto en consecuencia suspensor afectado en toma de nutrientes. • Necesidad de rescatarlos de la flor y cultivarlos in vitro DESARROLLO DE EMBRIONES • Estado temprano: es heterotrófico, embriones globulares se desarrollan a expensas del endospermo y poseen baja capacidad de síntesis. • Estado tardío: es autotrófico, embriones en estado de corazón, depende de compuestos orgánicos como hormonas, aminoácidos, carbohidratos, vitaminas, purinas, pirimidinas que se encuentran en saco embrionario.(Pedraza, 184) CULTIVO DE EMBRIONES • El cultivo de embriones consiste en el aislamiento y crecimiento in vitro, en condiciones estériles, de un embrión inmaduro, con el fin de obtener una planta viable. • 1904 Hanning fue el primer investigador que obtuvo plantas viables, a partir de embriones de crucíferas, aislados in vitro. GERMINACIÓN DE EMBRIONES DE LIMONERO FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CULTIVO DE EMBRIONES • Genotipo • Las condiciones de crecimiento de la planta madre. • Estado de desarrollo del embrión en el momento del aislamiento. • Composición del medio nutritivo. • Oxígeno • Luz • Temperatura APLICACIONES DEL CULTIVO DE EMBRIONES SEXUALES • 1. eliminar la inhibición de germinación de las semillas. • 2. germinación de semillas de parásitos obligados. • 3. acortar el ciclo de mejora • 4. producción de haploides. • 5. prevención del aborto embrionario en frutales de hueso precoces. • 6. prevención del aborto embrionario como resultado de la incompatibilidad. • 7. propagación vegetativa (Pedroza, 194 p.)