Genética Microbiana
Genética Microbiana
Genética Microbiana
Trminos Conjugacin: transferencia de genes de una clula procariota a otra por un mecanismo que incluye contacto clula a clula y un plsmido. Diploide: clula eucariota u organismo conteniendo dos juegos de cromosomas. Elemento transponible: elemento gentico que tiene la capacidad de moverse (transponerse) de un sitio a otro en un cromosoma. Fenotipo: las caractersticas observables de un organismo. Gametos: en organismos eucariticos, las clulas, germinales haploides que se producen por meiosis. Genotipo: la constitucin gentica precisa de un organismo.
Haploide: clula u organismo que tiene slo un juego de cromosomas. Mapa gentico: ordenacin de genes en un cromosoma. Mutacin: cambio heredable en la secuencia de bases del genoma de un organismo. Mutacin puntual: mutacin que afecta solo a un par o unos pocos pares de bases. Mutgenos: agentes que causan mutacin. Mutante: organismo cuyo genoma lleva una mutacin. Plsmido: elemento gentico extracromosomal que no tiene forma extracelular. Recombinacin: proceso por el que, en parte o por completo, las molculas de DNA de dos fuentes distintas se intercambian o juntan en una unidad.
Thr (treonina), Ser (serina), Val (valina), leu (leucina), Ile (isoleucina), Pro (procina)
TIPOS DE MUTACIN
Seleccin: disposicin de los organismos bajo condiciones en que ser favorecido el crecimiento de aquellos con un genotipo particular. Transduccin: transferencia de genes bacterianos implicando DNA libre. Transposn: tipo de elemento transponible que lleva genes adicionales a los implicados en la transposicin. Transposicin: situacin anormal inversa.
Es el estudio de la variabilidad y la herencia de la caractersticas de un organismo. Gentica microbiana: a proporcionado grandes aportes, antes se realizan los estudios genticos en animales o plantas superiores, con limitaciones debido a que su tiempo de generacin son muy largos y el nmero de descendencia es pequea. Se usa experimentalmente a las bacterias Escherichia coli
Las bacterias poseen sistema de recombinacin gentica. Recombinacin gentica: las clulas descendientes pueden surgir con combinaciones de genes diferentes de los de sus antecesores Cuando mayor sea la poblacin (n de generaciones) ms alta es la probabilidad de que se logre una recombinacin gentica.
Los microorganismos especialmente las bacterias se multiplican con gran rapidez. Escherichia coli es su etapa logartmica se duplica a intervalos de 20 minutos aprox. : una generacin nueva cada 20 minutos. Por lo tanto el n de clulas despus de 18 a 24 horas de incubacin llega a 2 mil millones/ml. Es convenientes para la investigacin de procesos genticos: La rpida divisin. Elevado n de poblaciones Facilidad de manipulacin experimental
GENOTIPO Y FENOTIPO
Caractersticas generales de la descendencia y la del antecesor. Estas caractersticas no pueden ser idnticas al antecesor debido a las condiciones ambientales diferentes. Los cambios estn relacionados con el genotipo y fenotipo. Genotipo: dotacin total de genes que posee la clula. Fenotipo: expresin de las propiedades expresadas por una clula.
El genotipo de un cultivo permanece relativamente constante durante la incubacin pero puede ocurrir un cambio en el material gentico (genes). El genotipo determinan las caractersticas de un organismo y esta sujeto a modificaciones cambios del medio. El genotipo es el potencial de la clula. El fenotipo las caractersticas por lo que manifiesta el genotipo.
Caractersticas internas (genes) Caractersticas externas (fsicas) generales de la descendencia y la del generales de la descendencia y la del antecesor. antecesor.
Genotipo: dotacin total de genes que Fenotipo: expresin de posee la clula. propiedades expresadas por clula.
las una
El genotipo de un cultivo permanece El fenotipo es la manifestacin del relativamente constante durante la genotipo, es decir las caractersticas incubacin pero puede ocurrir un cambio externas. en el material gentico (genes). El genotipo es el potencial gentico de la clula. Se pueden mantener las caractersticas por aos pero si modifica el medio van a ocurrir modificaciones.
GENOTIPO
FENOTPO
Cambio genotpico mutacin : a nivel Modificacin: alteracin fenotpica de una clula aislada. Suceso no muy abarca la mayor parte de clulas del frecuente cultivo. Un cambio genotpico mutacin- es Las alteraciones fenotpicas son hereditario. menos estables y no es hereditario
En condiciones uniformes las bacterias muestran constancia en sus propiedades ejemplo: Neisseria perflava Asla ________nasofaringe Diplococo Gramnegativo Metabolismo___ fermentativo (glucosa, fructosa, maltosa, sacarosa) Neisseria meningitidis Asla ________ nasofaringe Diplococo Gramnegativo Metabolismo ___ fermentativo (glucosa, maltosa)
Se pueden mantener las caractersticas por aos pero si modifica el medio van a ocurrir modificaciones. Modificaciones: variaciones fenotpicas o adaptacin fisiolgica, sin alteracin gentica. Modificacin: alteracin fenotpica abarca la mayor parte de clulas del cultivo. Cambio genotpico: a nivel de una clula aislada. Suceso raro. Las alteraciones fenotpicas son menos estables que un cambio genotpico y no es hereditaria. Cuando las clulas modificadas se introducen a las condiciones de cultivo originales, el fenotipo original se manifiesta.
MODIFICACIONES MORFOLGICAS:
Una bacteria presenta su curva de crecimiento en un medio lquido. En la fase Lag o retardo las clulas son grandes, Log y cerca de la estacionaria las clulas son pequeas y uniformes. En la etapa Log se caracteriza la morfologa del organismo. Cuando el cultivo es viejo se observa aspectos inusuales ejemplo formacin de granos intracelulares que son apreciados por las coloraciones, variacin de tamao, de forma. Pero si estas clulas se transfieren a un medio nuevo (fresco, joven) su desarrollo ser normal. Las modificaciones del medio, en cuanto a su composicin da por resultado modificaciones morfolgicas bacterianas; ejemplo
Produccin de cpsula: ciertas especies bacterianas cuando se cultivan en leche producen cpsula y cuando se ponen en medio, caldo nutritivo, no la producen. Esporulacin: medio lquido o slido, temperatura de incubacin. Ejemplo: Bacillus sphaericus si se cultiva en un medio con 2% de peptona, toda la poblacin la forman clulas vegetativas, aun en una incubacin prolongada. En un medio con 0.1% de peptona, toda la poblacin esprtula, esporulacin total, a los 2 das de incubacin.
MODIFICACIONES DE CULTIVO Produccin de pigmentos. Ejemplo: Serratia marcescens Incuba a temperatura ambiente produce un pigmento ntido rojo ladrillo. Si se incuba a 37C no produce pigmento. La composicin del medio influye en la intensidad del pigmento y otras caractersticas. Agrobacterium radiobacter Cultivado en medios diferentes: a) Medio salino sacarosa b) Agar soya tripticasa colonias mucoides colonias no mucoides colonias grandes colonias pequeas
Bacterias jvenes en multiplicacin activa son ms susceptibles de ser destruidas por agentes qumicos. Bacterias que pasan la fase Log son menos susceptibles. La resistencia de los microorganismos a los agentes qumicos y fsicos vara por la edad del cultivo. Las bacterias de una especie pueden desarrollarse en ambientes fsicos y qumicos muy diferentes y requieren diferentes enzimas por las nuevas condiciones externas.
Las bacterias son capaces de elaborar enzimas para adaptarse al diferente medio y son las enzimas inducidas por el medio. El organismo tiene conocimiento para hacer la enzima, esto es una capacidad inherente a su genotipo. Produccin de enzimas (expresin fenotpica) por un inductor.
Ejemplo: Escherichia coli forma galactosidasa (enzima que escinde los azcares que contienen galactosa o compuestos afines). Genotipo: conocimiento (gentico) para hacer la enzima. Fenotipo: produccin de la enzima. a) Bacteria cultivada en glucosa resembrada en caldo lactosa b) Bacteria cultivada en lactosa y resembrada en caldo lactosa
a)
Actividad enzimtica galatosidasa inducida Tiempo Tiempo
b)
Actividad enzimtica
a) Hay retraso hasta que sintetiza galactosidasa b) No hay retraso bacteria pro-inducida
Los cambios estn relacionados con la etapa de desarrollo son propios de la especie. Cuando las condiciones son controladas: Temperatura Incubacin uniformes Tiempo Composicin del medio La especie se mantiene constante sus caractersticas por largo tiempo
CAMBIOS GENOTPICOS
a) Los organismos poseen estructura llamadas genes (el genoma determina sus caractersticas: genes). b) Todo gen es capaz de cambiar o MUTAR debido a ello altera una caracterstica. El fenotipo se modifica por diferentes condiciones de desarrollo. Max Delbruck y Salvador Luna, en 1943 en un experimento determinaron mecanismos hereditarios estables. Emplearon un fago: bacterifago. Algunos sobreviven tambin su descendencia: Mutante. Mutacin es diferente a modificacin. Cambios de bases DNA: mutaciones Sustitucin Insercin Supresin
Tipos de mutantes bacterianos Mutantes que exhiben una tolerancia aumentada a agentes inhibitorios: antibiticos. Mutantes, demuestran una capacidad de fermentacin alterada Mutante con deficiencia nutritivas. Mutantes que muestran cambios en la forma de colonia, Mutante representa un cambio en la estructura qumica. Mutante resistente a la accin de los bacterifagos Mutante que exhiben algn cambio en los aspectos morfolgicos. Perdida en produccin, esporas, cpsula o flagelos.
Mutacin
Transposicin
TRANSFORMACION
Proceso por el cual el DNA libre de un organismo es insertado en otro microorganismo. En este proceso los genes se transfieren de una bacteria a otra como DNA desnudo en solucin.
Resea histrica: Griffith trabajando con Diplococcus pneumoniae detect este fenmeno (Inglaterra 1928).
TRANSDUCCION
Transferencia de DNA de una bacteria a otra va un bacterifago temperado. La transferencia es efectuada por un bacterifago especializado.
Bacterifagos: Fase ltica o infecciosa Fase lisognica (la bacteria o husped lisognico y el fago temperado)
PLASMIDO F o FACTOR F:
* Su presencia genera alteraciones en la clula husped. * Capacidad de sntesis de pelo sexual} * Movilizacin de DNA * Alteracin de la superficie celular.