แอนติบอดีโมโนโคลนัล
แอนติบอดีจากโคลนของเซลล์เม็ดเลือดเดียวกัน

การแสดงทั่วไปของวิธีการที่ใช้ในการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัล[1] [2]

แอนติบอดีโมโนโคลนัล ( mAbหรือเรียกกันทั่วไปว่าmoAb ) คือแอนติบอดีที่ผลิตจากกลุ่มเซลล์ที่เกิดจากการโคลนเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดเฉพาะแอนติบอดีที่ตามมาทั้งหมดที่ได้จากวิธีนี้สามารถติดตามย้อนกลับไปยังเซลล์ต้นกำเนิดชนิดเฉพาะได้

แอนติบอดี โมโนโคลนัลสามารถมี ความสัมพันธ์ แบบโมโนวาเลนต์ ได้ โดยจับกับ เอพิโทปเดียวกันเท่านั้น(ส่วนของแอนติเจนที่แอนติบอดีรับรู้) [3]ในทางตรงกันข้ามแอนติบอดีโพลีโคลนัลจะจับกับเอพิโทปหลายตัว และโดยปกติแล้วสร้างขึ้นจากกลุ่มเซลล์พลาสมา ที่หลั่งแอนติบอดีที่แตกต่างกันหลายกลุ่ม แอนติบอดีโมโนโคลนัลแบบไบ สเปซิฟิก ยังสามารถออกแบบได้ด้วยการเพิ่มเป้าหมายการรักษาของแอนติบอดีโมโนโคลนัลหนึ่งตัวเป็นเอพิโทปสองตัว

เป็นไปได้ที่จะผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัลที่จับกับสารที่เหมาะสมเกือบทุกชนิดโดยเฉพาะ จากนั้นแอนติบอดีจะทำหน้าที่ตรวจจับหรือทำให้บริสุทธิ์สารดังกล่าว ความสามารถนี้ได้กลายเป็นเครื่องมือในการสืบสวนในสาขาชีวเคมีชีววิทยาโมเลกุลและการแพทย์แอนติบอดีโมโนโคลนัลใช้ในการวินิจฉัยโรค เช่นมะเร็งและการติดเชื้อ[4]และใช้ในทางการแพทย์ เช่น มะเร็งและโรค อักเสบ

ประวัติศาสตร์

ในช่วงต้นทศวรรษปี 1900 นักภูมิคุ้มกันวิทยา Paul Ehrlichได้เสนอแนวคิดเกี่ยวกับZauberkugelหรือ " กระสุนวิเศษ " ซึ่งคิดขึ้นเป็นสารประกอบที่กำหนดเป้าหมายเฉพาะที่จุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค และสามารถส่งสารพิษไปยังจุลินทรีย์นั้นได้ แนวคิดนี้สนับสนุนแนวคิดเรื่องแอนติบอดีโมโนโคลนอลและคอนจูเกตยาโมโนโคลนอล Ehrlich และÉlie Metchnikoff ได้รับ รางวัลโนเบลสาขาสรีรวิทยาหรือการแพทย์ในปี 1908 จากการให้พื้นฐานทางทฤษฎีสำหรับวิทยาภูมิคุ้มกัน

ในช่วงทศวรรษ 1970 เซลล์ลิมโฟไซต์ที่ผลิตแอนติบอดีชนิดเดียวเป็นที่รู้จักในรูปแบบของ มะเร็ง ไมอีโลม่าหลาย เซลล์ ซึ่งเป็นมะเร็งที่ส่งผลต่อเซลล์บีแอนติบอดีที่ผิดปกติเหล่านี้หรือพาราโปรตีนถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาโครงสร้างของแอนติบอดี แต่ยังไม่สามารถสร้างแอนติบอดีที่เหมือนกันและจำเพาะต่อแอนติเจน ที่กำหนด ได้[5] : 324 ในปี 1973 เจอโรลด์ ชวาเบอร์ได้บรรยายเกี่ยวกับการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอลโดยใช้เซลล์ไฮบริดมนุษย์-หนู[6]งานนี้ยังคงได้รับการอ้างอิงอย่างกว้างขวางในกลุ่มที่ใช้ไฮบริดโอ มาที่ได้จาก มนุษย์[7]ในปี 1975 จอร์จ โคห์เลอร์และเซซาร์ มิลสไตน์ประสบความสำเร็จในการหลอมรวมสายเซลล์ไมอีโลม่ากับเซลล์บีเพื่อสร้างไฮบริดโอมาที่สามารถผลิตแอนติบอดีที่จำเพาะต่อแอนติเจนที่รู้จักและคงอยู่ชั่วนิรันดร์[8]พวกเขาและนีลส์ คัจ เจอร์น ได้ รับรางวัลโนเบลสาขาสรีรวิทยาหรือการแพทย์ร่วมกันในปี 1984 สำหรับการค้นพบนี้[8]

ในปี 1988 Gregory Winterและทีมงานของเขาเป็นผู้บุกเบิกเทคนิคในการ สร้าง แอนติบอดีโมโนโคลนัลให้มีลักษณะของมนุษย์[9]โดยขจัดปฏิกิริยาที่แอนติบอดีโมโนโคลนัลหลายชนิดก่อให้เกิดในผู้ป่วยบางราย ในช่วงทศวรรษ 1990 การวิจัยเกี่ยวกับการใช้แอนติบอดีโมโนโคลนัลในการบำบัดกำลังมีความคืบหน้า และในปี 2018 James P. AllisonและTasuku Honjoได้รับรางวัลโนเบลสาขาสรีรวิทยาหรือการแพทย์สำหรับการค้นพบการบำบัดมะเร็งด้วยการยับยั้งการควบคุมภูมิคุ้มกันเชิงลบ โดยใช้แอนติบอดีโมโนโคลนัลที่ป้องกันการเชื่อมโยงแบบยับยั้ง[10]

งานแปลที่จำเป็นในการนำแนวคิดเหล่านี้ไปใช้ได้รับเครดิตจาก Lee Nadler ตามที่อธิบายไว้ในบทความของ NIH "เขาเป็นคนแรกที่ค้นพบแอนติบอดีโมโนโคลนัลที่กำหนดเป้าหมายไปที่แอนติเจนเฉพาะเซลล์ B ของมนุษย์ และอันที่จริง แอนติเจนเฉพาะเซลล์ B ของมนุษย์ที่ทราบทั้งหมดถูกค้นพบในห้องทดลองของเขา เขาเป็นนักวิจัยด้านการแปลที่แท้จริง เนื่องจากเขาใช้แอนติบอดีโมโนโคลนัลเหล่านี้เพื่อจำแนกมะเร็งเม็ดเลือดขาวและมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของเซลล์ B ของมนุษย์ ตลอดจนสร้างตัวแทนการรักษาสำหรับผู้ป่วย . . . ที่สำคัญกว่านั้น เขาเป็นคนแรกในโลกที่ให้แอนติบอดีโมโนโคลนัลกับมนุษย์ (ผู้ป่วยมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของเซลล์ B)" [11]

การผลิต

การดูสไลด์ของวัฒนธรรมเซลล์ที่สร้างแอนติบอดีโมโนโคลนัล
แอนติบอดีโมโนโคลนัลสามารถปลูกได้ในปริมาณไม่จำกัดในขวด
การเติมของเหลวลงในบ่อน้ำด้วยมือเพื่อการทดสอบการวิจัย การทดสอบนี้เกี่ยวข้องกับการเตรียมวัฒนธรรมที่ปลูกลูกผสมในปริมาณมากเพื่อผลิตแอนติบอดีที่ต้องการ ซึ่งทำได้โดยการหลอมรวม เซลล์ ไมอีโลม่าและลิมโฟไซต์ของหนู เพื่อสร้างเซลล์ลูกผสม ( ไฮบริดโดมา )
การแช่สไลด์ที่เตรียมไว้ในสารละลาย

การพัฒนาไฮบริดโดมา

งานส่วนใหญ่เบื้องหลังการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัลมีรากฐานมาจากการผลิตไฮบริดโอมา ซึ่งเกี่ยวข้องกับการระบุเซลล์พลาสมา/พลาสมาบลาสต์ที่จำเพาะต่อแอนติเจนที่ผลิตแอนติบอดีที่จำเพาะต่อแอนติเจนที่สนใจ และการรวมเซลล์เหล่านี้เข้ากับเซลล์ไมอีโลม่า[8]เซลล์ B ของกระต่ายสามารถนำมาใช้เพื่อสร้างไฮบริดโอมาของกระต่ายได้[12] [13] โพลีเอทิลีนไกลคอลใช้ในการรวมเยื่อหุ้มพลาสมาที่อยู่ติดกัน[14]แต่มีอัตราความสำเร็จต่ำ ดังนั้นจึงใช้ตัวกลางแบบเลือกสรรซึ่งเซลล์ที่รวมเข้าด้วยกันเท่านั้นที่จะเติบโตได้ ซึ่งเป็นไปได้เนื่องจากเซลล์ไมอีโลม่าสูญเสียความสามารถในการสังเคราะห์ไฮโปแซนทีน-กัวนีน-ฟอสโฟริโบซิลทรานสเฟอเรส (HGPRT) ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกเพื่อกู้คืน การไม่มี HGPRT ไม่ใช่ปัญหาสำหรับเซลล์เหล่านี้ เว้นแต่ เส้นทาง การสังเคราะห์พิวรีนใหม่จะถูกรบกวนด้วย การเปิดเผยเซลล์ให้ได้รับอะมิโนปเทอริน ( กรดโฟลิกแอนะล็อกที่ยับยั้งไดไฮโดรโฟเลตรีดักเตส ) ทำให้เซลล์ไม่สามารถใช้เส้นทางเดอโนโวได้ และกลายเป็นออโซโทรฟิก อย่างสมบูรณ์ สำหรับกรดนิวคลีอิกดังนั้นจำเป็นต้องได้รับอาหารเสริมเพื่อความอยู่รอด

อาหารเลี้ยงเชื้อแบบเลือกสรรเรียกว่าอาหารเลี้ยงเชื้อ HATเนื่องจากมีไฮโปแซนทีนอะมิโนปเทอริน และไทมิดีนอาหารเลี้ยงเชื้อนี้เหมาะสำหรับเซลล์ที่หลอมรวม ( ไฮบริดโดมา ) เซลล์ไมอีโลม่าที่ไม่ได้หลอมรวมไม่สามารถเจริญเติบโตได้เนื่องจากขาด HGPRT จึงไม่สามารถจำลองดีเอ็นเอของตัวเองได้ เซลล์ม้ามที่ไม่ได้หลอมรวมไม่สามารถเจริญเติบโตได้เรื่อยๆ เนื่องจากมีอายุขัยจำกัด เฉพาะเซลล์ไฮบริดโดมาเท่านั้นที่สามารถเจริญเติบโตได้เรื่อยๆ ในอาหารเลี้ยงเชื้อ เนื่องจากเซลล์ม้ามซึ่งเป็นพันธมิตรจะทำหน้าที่จัดหา HGPRT และเซลล์ไมอีโลม่าซึ่งเป็นพันธมิตรจะมีลักษณะที่ทำให้เซลล์ดังกล่าวเป็นอมตะ (คล้ายกับเซลล์มะเร็ง)

จากนั้นจึงเจือจางส่วนผสมของเซลล์เหล่านี้และปลูกโคลนจากเซลล์ต้นกำเนิดเดี่ยวบนหลุมไมโครไทเตอร์ จากนั้นจึงทดสอบแอนติบอดีที่หลั่งออกมาจากโคลนต่างๆ เพื่อดูว่าสามารถจับกับแอนติเจนได้หรือไม่ (ด้วยการทดสอบ เช่นELISAหรือการทดสอบแอนติเจนไมโครอาร์เรย์) หรืออิมมูโนดอตบล็อตจากนั้นจึงเลือกโคลนที่มีประสิทธิผลและเสถียรที่สุดสำหรับใช้ในอนาคต

สามารถปลูกไฮบริดโดมาได้ไม่จำกัดเวลาในอาหารเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสม นอกจากนี้ยังสามารถฉีดเข้าไปในหนูได้ (ในช่องท้องโดยรอบลำไส้) ที่นั่น ไฮบริดโดมาจะสร้างเนื้องอกที่หลั่งของเหลวที่มีแอนติบอดีสูงที่เรียกว่าของเหลว ในช่องท้อง

จำเป็นต้องเพิ่มความเข้มข้นของอาหารเลี้ยงเชื้อระหว่าง การคัดเลือก ในหลอดทดลองเพื่อให้เกิดการเจริญเติบโตของไฮบริดโดมามากขึ้น ซึ่งสามารถทำได้โดยใช้ชั้นของเซลล์ไฟโบรไซต์ที่ทำหน้าที่ป้อนอาหารหรืออาหารเลี้ยงเชื้อเสริม เช่น บริโคลน สามารถใช้อาหารเลี้ยงเชื้อที่ปรับสภาพด้วยแมคโครฟาจได้ การผลิตในอาหารเลี้ยงเชื้อมักนิยมใช้เนื่องจากเทคนิคในการรักษาโรคท้องมานจะสร้างความเจ็บปวดให้กับสัตว์ หากมีเทคนิคอื่น ๆ การรักษาโรคท้องมานจะถือว่าไม่ถูกต้องตามจริยธรรม [ 15]

เทคโนโลยีการพัฒนา mAb แบบใหม่

เทคโนโลยีแอนติบอดีโมโนโคลนัลหลายอย่างได้รับการพัฒนาเมื่อไม่นานนี้[16]เช่นการแสดงฟาจ[17]การเพาะเลี้ยงเซลล์ B เดี่ยว[18]การขยายเซลล์เดี่ยวจากประชากรเซลล์ B ต่างๆ[19] [20] [21] [22] [23]และเทคโนโลยีการซักถามเซลล์พลาสมาเดี่ยว แตกต่างจากเทคโนโลยีไฮบริดโดมาแบบดั้งเดิม เทคโนโลยีใหม่ใช้เทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุลเพื่อขยายสายหนักและเบาของยีนแอนติบอดีด้วย PCR และผลิตในระบบแบคทีเรียหรือสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมด้วย เทคโนโลยี รีคอมบิแนนท์ข้อดีอย่างหนึ่งของเทคโนโลยีใหม่คือสามารถนำไปใช้กับสัตว์หลายชนิด เช่น กระต่าย ลามะ ไก่ และสัตว์ทดลองทั่วไปอื่นๆ ในห้องปฏิบัติการ

การชำระล้าง

หลังจากได้ตัวอย่างเนื้อเยื่อเลี้ยงเซลล์จากไฮบริดโอมาหรือตัวอย่างของเหลวในช่องท้องแล้ว จะต้องสกัดแอนติบอดีที่ต้องการออกมา สิ่งปนเปื้อนในตัวอย่างเพาะเลี้ยงเซลล์ประกอบด้วยส่วนประกอบของเนื้อเยื่อเลี้ยงเซลล์เป็นหลัก เช่น ปัจจัยการเจริญเติบโตฮอร์โมนและทรานสเฟอร์ ริน ในทางตรงกันข้าม ตัวอย่าง ในร่างกายมักจะมีแอนติบอดี ของโฮสต์ โปรตีเอส นิวคลีเอส กรดนิวคลีอิก และไวรัส ในทั้งสองกรณี อาจมีสารคัดหลั่งอื่นๆ จากไฮบริดโอมา เช่นไซโตไคน์ นอกจากนี้ อาจมีการปนเปื้อนของแบคทีเรียด้วย และส่งผลให้มี เอนโดทอกซินที่แบคทีเรียหลั่งออกมา ขึ้นอยู่กับความซับซ้อนของเนื้อเยื่อเลี้ยงเซลล์และสารปนเปื้อน วิธีใดวิธีหนึ่ง ( ในร่างกายหรือในหลอดทดลอง ) อาจดีกว่า

ตัวอย่างจะถูกปรับสภาพหรือเตรียมไว้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ก่อน โดยจะกำจัดเซลล์ เศษเซลล์ ไขมัน และวัสดุที่จับตัวเป็นก้อนก่อน โดยปกติจะใช้การปั่นเหวี่ยงตามด้วยการกรองด้วยตัวกรองขนาด 0.45 ไมโครเมตร อนุภาคขนาดใหญ่เหล่านี้สามารถทำให้เกิดปรากฏการณ์ที่เรียกว่าการเกาะติดของเยื่อหุ้มเซลล์ในขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ในภายหลัง นอกจากนี้ ความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์ในตัวอย่างอาจไม่เพียงพอ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่แอนติบอดีที่ต้องการนั้นผลิตขึ้นโดยเซลล์ที่มีการหลั่งต่ำ ดังนั้น ตัวอย่างจึงถูกทำให้เข้มข้นโดยใช้การกรองด้วยอัลตราฟิลเตรชันหรือการไดอะไลซิส

สิ่งเจือปนที่มีประจุส่วนใหญ่มักเป็นแอนไอออนเช่น กรดนิวคลีอิกและเอนโดทอกซิน ซึ่งสามารถแยกสารเหล่านี้ได้โดยโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออน[24] โคร มาโตกราฟี แลกเปลี่ยนไอออน จะใช้ ค่าpH ต่ำเพียงพอ ที่แอนติบอดีที่ต้องการจะจับกับคอลัมน์ในขณะที่แอนไอออนไหลผ่าน หรือ ใช้ โครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนแอน ไอออน ที่ค่า pH สูงเพียงพอที่แอนติบอดีที่ต้องการจะไหลผ่านคอลัมน์ในขณะที่แอนไอออนจับกับคอลัมน์ โปรตีนต่างๆ สามารถแยกได้พร้อมกับแอนไอออนโดยพิจารณาจากจุดไอโซอิเล็กทริก (pI) ในโปรตีน จุดไอโซอิเล็กทริก (pI) ถูกกำหนดให้เป็นค่า pH ที่โปรตีนไม่มีประจุสุทธิ เมื่อ pH > pI โปรตีนจะมีประจุลบสุทธิ และเมื่อ pH < pI โปรตีนจะมีประจุบวกสุทธิ ตัวอย่างเช่นอัลบูมินจะมี pI เท่ากับ 4.8 ซึ่งต่ำกว่าแอนติบอดีโมโนโคลนอลส่วนใหญ่ที่มี pI เท่ากับ 6.1 อย่างมาก ดังนั้นที่ค่า pH ระหว่าง 4.8 ถึง 6.1 ประจุเฉลี่ยของโมเลกุลอัลบูมินมีแนวโน้มที่จะเป็นลบมากกว่าในขณะที่โมเลกุล mAbs มีประจุบวก ดังนั้นจึงสามารถแยกโมเลกุลเหล่านี้ออกจากกันได้ ในทางกลับกัน ทรานสเฟอร์รินมีค่า pI เท่ากับ 5.9 ดังนั้นจึงไม่สามารถแยกได้ง่ายด้วยวิธีนี้ ความแตกต่างของ pI อย่างน้อย 1 จำเป็นสำหรับการแยกที่ดี

ทรานสเฟอรินสามารถกำจัดออกได้โดยใช้โครมาโทกราฟีแบบแยกตามขนาดวิธีนี้เป็นหนึ่งในเทคนิคโครมาโทกราฟีที่เชื่อถือได้มากที่สุด เนื่องจากเรากำลังจัดการกับโปรตีน คุณสมบัติ เช่น ประจุและความสัมพันธ์จึงไม่สม่ำเสมอและเปลี่ยนแปลงตามค่า pH เนื่องจากโมเลกุลถูกโปรตอนและดีโปรตอน ในขณะที่ขนาดยังคงค่อนข้างคงที่ อย่างไรก็ตาม วิธีนี้มีข้อเสีย เช่น ความละเอียดต่ำ ความจุต่ำ และเวลา ในการชะออก ต่ำ

วิธีการแยก โปรตีน A/G แบบขั้นตอนเดียวที่รวดเร็วกว่ามากคือโครมาโทกราฟีแบบจับกับโปรตีน A/G แอนติบอดีจะจับกับโปรตีน A/G อย่างเลือกสรร จึงทำให้ได้ระดับความบริสุทธิ์ที่สูง (โดยทั่วไป >80%) สภาวะที่รุนแรงโดยทั่วไปของวิธีนี้อาจทำลายแอนติบอดีที่เสียหายได้ง่ายได้ ค่า pH ต่ำสามารถทำลายพันธะเพื่อแยกแอนติบอดีออกจากคอลัมน์ นอกจากอาจส่งผลกระทบต่อผลิตภัณฑ์แล้ว ค่า pH ต่ำยังอาจทำให้โปรตีน A/G เองรั่วไหลออกจากคอลัมน์และปรากฏในตัวอย่างที่ชะออกมาได้ ระบบบัฟเฟอร์การชะแบบอ่อนโยนที่ใช้ความเข้มข้นของเกลือสูงมีไว้เพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้แอนติบอดีที่ไวต่อค่า pH ต่ำ ต้นทุนยังเป็นปัจจัยสำคัญที่ต้องพิจารณาสำหรับวิธีนี้ เนื่องจากโปรตีน A/G ที่ถูกตรึงไว้เป็นเรซินที่มีราคาแพงกว่า

เพื่อให้ได้ความบริสุทธิ์สูงสุดในขั้นตอนเดียว สามารถทำการชำระด้วยความสัมพันธ์ได้ โดยใช้แอนติเจนเพื่อให้แอนติบอดีมีความจำเพาะ ในวิธีนี้ แอนติเจนที่ใช้สร้างแอนติบอดีจะถูกยึดติดแบบโควาเลนต์กับตัว รองรับ อะกาโรสหากแอนติเจนเป็นเปปไทด์แอนติเจนมักจะสังเคราะห์ด้วยซิสเตอีน ปลาย ซึ่งช่วยให้สามารถยึดติดอย่างเลือกสรรกับโปรตีนตัวพา เช่นKLHในระหว่างการพัฒนาและเพื่อรองรับการชำระล้าง จากนั้นจึงฟักตัวกลางที่มีแอนติบอดีกับแอนติเจนที่เคลื่อนที่ไม่ได้ โดยฟักเป็นชุดหรือเมื่อแอนติบอดีผ่านคอลัมน์ ซึ่งจะจับกันอย่างเลือกสรรและสามารถคงไว้ได้ในขณะที่สิ่งเจือปนถูกชะล้างออกไป จากนั้นจึงใช้บัฟเฟอร์ที่มี pH ต่ำหรือบัฟเฟอร์ที่มีเกลือสูงที่อ่อนโยนกว่าในการชะล้างแอนติบอดีที่บริสุทธิ์จากตัวรองรับ

ความไม่เหมือนกันของแอนติบอดี

ความหลากหลายของผลิตภัณฑ์มักพบในแอนติบอดีโมโนโคลนัลและผลิตภัณฑ์ชีวภาพรีคอมบิแนนท์อื่นๆ และโดยทั่วไปมักจะนำเข้ามาในช่วงก่อนการแสดงออกหรือช่วงหลังระหว่างการผลิต[25] [26] [27]

โดยทั่วไปแล้วตัวแปรเหล่านี้จะเป็นมวลรวมผลิตภัณฑ์ดีอะมิเดชัน ตัวแปร ไกลโคไซเลชัน โซ่ข้างของกรดอะมิโนที่ถูกออกซิไดซ์ ตลอดจนการเติมกรดอะมิโนและกรดอะมิโนปลายคาร์บอกซิล[28]การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่ดูเหมือนเล็กน้อยเหล่านี้อาจส่งผลต่อเสถียรภาพก่อนทางคลินิกและการเพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการ ตลอดจนศักยภาพของผลิตภัณฑ์ทางการรักษา ความสามารถ ในการดูด ซึมทางชีวภาพและภูมิคุ้มกันวิธีการทำให้บริสุทธิ์ที่ยอมรับโดยทั่วไปของลำดับกระบวนการสำหรับแอนติบอดีโมโนโคลนัล ได้แก่ การจับเป้าหมายของผลิตภัณฑ์ด้วยโปรตีนเอการชะออก การทำให้เป็นกรดเพื่อทำให้ไวรัสในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่มีฤทธิ์ลดลง ตามด้วยโครมาโทกราฟีไอออนก่อนด้วยลูกปัดแอนไอออนจากนั้นด้วยลูกปัดเคชั่น[ จำเป็นต้องอ้างอิง ]

โครมาโทกราฟีแบบแทนที่ถูกนำมาใช้เพื่อระบุและกำหนดลักษณะตัวแปรที่มักมองไม่เห็นเหล่านี้ในปริมาณที่เหมาะสมสำหรับการประเมินก่อนทางคลินิกในภายหลัง เช่นการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์ ของสัตว์ [29] [30]ความรู้ที่ได้รับในระหว่างขั้นตอนการพัฒนาก่อนทางคลินิกมีความสำคัญต่อการทำความเข้าใจคุณภาพผลิตภัณฑ์ที่ดีขึ้น และเป็นพื้นฐานสำหรับการจัดการความเสี่ยงและความยืดหยุ่นในการควบคุมที่เพิ่มขึ้น โครงการคุณภาพโดยการออกแบบ ของสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาล่าสุด พยายามที่จะให้คำแนะนำเกี่ยวกับการพัฒนาและอำนวยความสะดวกในการออกแบบผลิตภัณฑ์และกระบวนการที่เพิ่มประสิทธิภาพและโปรไฟล์ความปลอดภัยสูงสุดในขณะที่เพิ่มความสามารถในการผลิตผลิตภัณฑ์[31]

รีคอมบิแนนท์

การผลิต แอนติบอดีโมโนโคลนัล รีคอมบิแนนท์เกี่ยวข้องกับโคลนนิ่ง คลัง ข้อมูลCRISPR/Cas9หรือเทคโนโลยี การแสดง ฟาจ / การแสดงยีสต์[32]วิศวกรรมแอนติบอดีรีคอมบิแนนท์เกี่ยวข้องกับการผลิตแอนติบอดีโดยใช้ไวรัสหรือยีสต์แทนที่จะใช้หนู เทคนิคเหล่านี้อาศัยการโคลนนิ่งอย่างรวดเร็วของเซกเมนต์ยีนอิมมูโนโกลบูลินเพื่อสร้างคลังแอนติบอดีที่มี ลำดับ กรดอะมิโน ที่แตกต่างกันเล็กน้อย ซึ่งสามารถเลือกแอนติบอดีที่มีความจำเพาะที่ต้องการได้[33]คลังแอนติบอดีฟาจเป็นรูปแบบหนึ่งของคลังแอนติเจนฟาจ[34]เทคนิคเหล่านี้สามารถใช้เพื่อเพิ่มความจำเพาะที่แอนติบอดีใช้ในการจดจำแอนติเจน ความเสถียรของแอนติเจนในสภาวะแวดล้อมต่างๆ ประสิทธิภาพในการรักษา และการตรวจจับแอนติเจนในแอปพลิเคชันการวินิจฉัย[35]ห้องหมักถูกใช้สำหรับการผลิตแอนติบอดีในปริมาณมาก

แอนติบอดีไคเมอริก

แม้ว่าโครงสร้างแอนติบอดีของหนูและมนุษย์จะคล้ายคลึงกัน แต่ความแตกต่างระหว่างแอนติบอดีทั้งสองก็เพียงพอที่จะกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเมื่อ ฉีดแอนติบอดีโมโนโคลนัล ของหนูเข้าไปในมนุษย์ ส่งผลให้แอนติบอดีถูกกำจัดออกจากเลือดอย่างรวดเร็ว นอกจากนี้ยังมีผลต่อการอักเสบทั่วร่างกายและทำให้เกิดแอนติบอดีต่อหนูในมนุษย์ (HAMA) อีกด้วย

ตั้งแต่ช่วงปลายทศวรรษ 1980 เป็นต้นมา มีการศึกษาดีเอ็นเอรีคอมบิแนนท์เพื่อเพิ่มระยะเวลาในการคงอยู่ ในวิธีหนึ่งที่เรียกว่า "การปลูกถ่าย CDR" [36]ดีเอ็นเอของหนูที่เข้ารหัสส่วนที่จับของแอนติบอดีโมโนโคลนัลถูกผสานเข้ากับดีเอ็นเอที่สร้างแอนติบอดีของมนุษย์ในเซลล์ที่มีชีวิต การแสดงออกของดีเอ็นเอ " ไคเมอริก " หรือ "ทำให้เป็นมนุษย์" นี้ผ่านการเพาะเลี้ยงเซลล์ให้ผลเป็นแอนติบอดีของหนูบางส่วนและของมนุษย์บางส่วน[37] [38]

แอนติบอดีของมนุษย์

มีการพัฒนาวิธีการในการแยกโมโนโคลนอลแอนติบอดีของมนุษย์[16]

นับตั้งแต่มีการค้นพบว่าสามารถสร้างแอนติบอดีโมโนโคลนัลได้ นักวิทยาศาสตร์ก็มุ่งเป้าไปที่การสร้าง ผลิตภัณฑ์จากมนุษย์ ทั้งหมดเพื่อลดผลข้างเคียงของแอนติบอดีของมนุษย์หรือไคเมอริก มีการเสนอแนวทางที่ประสบความสำเร็จหลายวิธี ได้แก่เมาส์ทรานสเจนิก[39] การแสดงฟาจ[17]และการโคลนเซลล์ B เดี่ยว[16]

ค่าใช้จ่าย

แอนติบอดีโมโนโคลนัลนั้นมีราคาแพงกว่าในการผลิตเมื่อเทียบกับโมเลกุลขนาดเล็กเนื่องจากกระบวนการที่ซับซ้อนและขนาดโดยรวมของโมเลกุล นอกเหนือไปจากต้นทุนการวิจัยและพัฒนามหาศาลในการนำสารเคมีชนิดใหม่มาสู่ผู้ป่วย แอนติบอดีเหล่านี้ถูกกำหนดราคาเพื่อให้ผู้ผลิตสามารถชดเชยต้นทุนการลงทุนที่มักจะสูงได้ และหากไม่มีการควบคุมราคา เช่น ในสหรัฐอเมริกา ราคาอาจสูงขึ้นได้หากให้คุณค่าที่ดี นักวิจัยเจ็ดคนจากมหาวิทยาลัยพิตต์สเบิร์กสรุปว่า "ราคาประจำปีของการบำบัดด้วย mAb สูงกว่าในสาขาเนื้องอกวิทยาและโลหิตวิทยาประมาณ 100,000 ดอลลาร์เมื่อเทียบกับโรคอื่นๆ" โดยเปรียบเทียบตามจำนวนผู้ป่วยต่อรายกับโรคหลอดเลือดหัวใจหรือความผิดปกติของการเผาผลาญ ภูมิคุ้มกัน โรคติดเชื้อ ภูมิแพ้ และจักษุวิทยา[40]

แอปพลิเคชั่น

การตรวจวินิจฉัย

เมื่อผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัลสำหรับสารที่กำหนดแล้ว สามารถใช้แอนติบอดีดังกล่าวเพื่อตรวจหาการมีอยู่ของสารดังกล่าวได้ สามารถตรวจจับโปรตีนได้โดยใช้ การทดสอบ เวสเทิร์นบล็อตและอิมมูโนดอตบล็ อต ในอิมมูโนฮิสโตเคมีสามารถใช้แอนติบอดีโมโนโคลนัลเพื่อตรวจจับแอนติเจนในส่วนเนื้อเยื่อที่ตรึงไว้ได้ และในทำนองเดียวกัน สามารถใช้ อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์เพื่อตรวจจับสารในส่วนเนื้อเยื่อที่แช่แข็งหรือเซลล์ที่มีชีวิตได้

การใช้วิเคราะห์และเคมี

นอกจากนี้ แอนติบอดียังสามารถใช้เพื่อแยกสารประกอบเป้าหมายออกจากส่วนผสมได้ โดยใช้วิธีการตกตะกอนภูมิคุ้มกัน

การใช้ประโยชน์ทางการรักษา

แอนติบอดีโมโนโคลนัลเพื่อการรักษาจะออกฤทธิ์ผ่านกลไกต่างๆ มากมาย เช่น การปิดกั้นการทำงานของโมเลกุลเป้าหมาย การเหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสในเซลล์ที่แสดงเป้าหมาย หรือโดยการปรับเปลี่ยนเส้นทางการส่งสัญญาณ[41] [42] [43]

การรักษาโรคมะเร็ง

การรักษา มะเร็งที่เป็นไปได้วิธีหนึ่ง เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีโมโนโคลนัลที่จับกับ แอนติเจนเฉพาะเซลล์มะเร็งเท่านั้นและกระตุ้นให้เกิดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเซลล์มะเร็งเป้าหมาย mAb ดังกล่าวสามารถดัดแปลงเพื่อส่งมอบสารพิษไอโซโทปรังสี ไซโต ไคน์ หรือ คอนจู เกตที่ใช้งานอื่นๆ หรือเพื่อออกแบบแอนติบอดีแบบไบสเปซิฟิกที่สามารถจับกับบริเวณ Fabทั้งกับแอนติเจนเป้าหมายและกับเซลล์คอนจูเกตหรือเซลล์เอฟเฟกเตอร์ แอนติบอดีที่สมบูรณ์ทุกตัวสามารถจับกับตัวรับเซลล์หรือโปรตีนอื่นๆ ที่มีบริเวณ Fcได้

แอนติบอดีโมโนโคลนัลสำหรับมะเร็ง ADEPTการบำบัดด้วยเอนไซม์ที่ควบคุมด้วยแอนติบอดีADCC : การทำลายเซลล์ที่ขึ้นอยู่กับแอนติบอดี CDC: การทำลายเซลล์ที่ขึ้นอยู่กับคอมพลีเมนต์ MAb: แอนติบอดีโมโนโคลนัล scFv ชิ้นส่วน Fv สายเดี่ยว[44]

MAbs ที่ได้รับการรับรองจาก FDA สำหรับโรคมะเร็ง ได้แก่: [45]

โรคภูมิคุ้มกันตนเอง

แอนติบอดีโมโนโคลนัลที่ใช้สำหรับโรคภูมิต้านทานตนเองได้แก่อินฟลิซิแมบและอะดาลิมู แมบ ซึ่งมีประสิทธิภาพใน การรักษา โรค ข้ออักเสบ รู มาตอยด์ โรคโครห์นโรคลำไส้ใหญ่เป็นแผลและ โรคข้ออักเสบกระดูกสันหลังแข็ง โดยความสามารถในการจับกับและยับยั้งTNF-α [ 46] บาซิลิซิแมบและดาคลิซูแมบจะยับยั้งIL-2บนเซลล์ T ที่ถูกกระตุ้น และด้วยเหตุนี้จึงช่วยป้องกันการปฏิเสธการปลูกถ่ายไต อย่างเฉียบพลัน [46] โอมาลิซูแมบจะยับยั้งอิมมูโนโกลบูลินอี ของมนุษย์ (IgE ) และมีประโยชน์ในการรักษา โรคหอบหืดจากการแพ้ปานกลางถึงรุนแรง

ตัวอย่างของแอนติบอดีโมโนโคลนัลเพื่อการรักษา

สามารถค้นหาแอนติบอดีโมโนโคลนัลสำหรับการประยุกต์ใช้ในการวิจัยได้โดยตรงจากซัพพลายเออร์แอนติบอดี หรือผ่านการใช้เครื่องมือค้นหาเฉพาะทาง เช่นCiteAbด้านล่างนี้คือตัวอย่างของแอนติบอดีโมโนโคลนัลที่มีความสำคัญทางคลินิก

หมวดหมู่หลักพิมพ์แอปพลิเคชันกลไก/เป้าหมายโหมด
ต้าน
การอักเสบ		อินฟลิซิแมบ[46]ยับยั้งTNF-αคิเมอริก
อะดาลิมูแมบยับยั้งTNF-αมนุษย์
อุสเทคินูแมบขัดขวางอินเตอร์ลิวคิน IL-12และIL-23มนุษย์
บาซิลิซิแมบ[46]ยับยั้งIL-2บนเซลล์ T ที่ถูกกระตุ้นคิเมอริก
ดาคลิซูแมบ[46]ยับยั้งIL-2บนเซลล์ T ที่ถูกกระตุ้นความเป็นมนุษย์
โอมาลิซูแมบยับยั้งภูมิคุ้มกันของมนุษย์อิมมูโนโกลบูลินอี (IgE)ความเป็นมนุษย์
ป้องกันมะเร็งเจมทูซูแมบ[46]กำหนดเป้าหมายแอนติเจน CD33บนพื้นผิวเซลล์ไมอีลอยด์บนเซลล์ มะเร็งเม็ดเลือดขาวความเป็นมนุษย์
อาเลมทูซูแมบ[46]กำหนดเป้าหมายแอนติเจนCD52บนเซลล์ทีและบีลิมโฟไซต์ความเป็นมนุษย์
ริทูซิแมบ[46]กำหนดเป้าหมายฟอสโฟโปรตีนCD20บนลิมโฟไซต์ Bคิเมอริก
ทราสทูซูแมบกำหนดเป้าหมายไปที่ ตัวรับ HER2/neu (erbB2)ความเป็นมนุษย์
นิโมทูซูแมบ
  • ได้รับการรับรองในมะเร็งเซลล์สความัส , เนื้องอกในสมอง
  • การทดลองทางคลินิกสำหรับข้อบ่งชี้อื่น ๆ อยู่ระหว่างดำเนินการ
สารยับยั้งEGFRความเป็นมนุษย์
เซทูซิแมบสารยับยั้งEGFRคิเมอริก
พานิทูมูแมบสารยับยั้งEGFRมนุษย์
เบวาซิซูแมบและรานิบิซูแมบยับยั้งVEGFความเป็นมนุษย์
ต้านมะเร็งและต้านไวรัสบาวิทูซิแมบ[47]ภูมิคุ้มกันบำบัดมุ่งเป้าไปที่ฟอสฟาติดิลเซอรีน[47]คิเมอริก
แอนตี้ไวรัส

คาซิริวิแมบ/อิมเดวิแมบ[48]

ภูมิคุ้มกันบำบัดมุ่งเป้าไปที่โปรตีนสไปก์ของSARS-CoV-2มนุษย์
บัมลานิวิแมบ/เอเตเซวิแมบ[49]ภูมิคุ้มกันบำบัดมุ่งเป้าไปที่โปรตีนสไปก์ของSARS-CoV-2มนุษย์
โซโตรวิแมบ[50]ภูมิคุ้มกันบำบัดมุ่งเป้าไปที่โปรตีนสไปก์ของSARS-CoV-2มนุษย์
อื่นพาลิวิซูแมบ[46]ยับยั้งโปรตีนฟิวชัน RSV (F)ความเป็นมนุษย์
แอบซิซิแมบ[46]ยับยั้งตัวรับGpIIb/IIIaบนเกล็ดเลือดคิเมอริก

โควิด 19

ในปี 2020 การบำบัดด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนอลBamlanivimab/etesevimabและCasirivimab/imdevimabได้รับอนุญาตให้ใช้ในกรณีฉุกเฉินโดยสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยา ของสหรัฐอเมริกา เพื่อลดจำนวนการเข้ารักษาในโรงพยาบาล การไปห้องฉุกเฉิน และการเสียชีวิตอันเนื่องมาจากCOVID-19 [ 48] [49]ในเดือนกันยายน 2021 รัฐบาลของไบเดนได้ซื้อ แอนติบอดีโมโนโคลนอล Regeneron มูลค่า 2.9 พันล้านดอลลาร์สหรัฐ ในราคา 2,100 ดอลลาร์ต่อโดส เพื่อควบคุมการขาดแคลน[51]

ณ เดือนธันวาคม พ.ศ. 2564 การทดสอบการทำให้เป็นกลาง ในหลอดทดลองบ่งชี้ว่าการบำบัดด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนัล (ยกเว้นโซโตรวิแมบและทิกซาจวิแมบ/ซิลกาวิแมบ ) ไม่น่าจะออกฤทธิ์ต่อตัวแปรโอไมครอน[52]

ในช่วงปี 2021–22 งานวิจัยของ Cochrane 2 ชิ้น พบว่าไม่มีหลักฐานเพียงพอสำหรับการใช้แอนติบอดีโมโนโคลนอลที่เป็นกลางในการรักษาการติดเชื้อ COVID-19 [53] [54]งานวิจัยนี้ใช้เฉพาะกับผู้ที่ไม่ได้รับวัคซีนป้องกัน COVID-19 และใช้กับตัวแปร COVID-19 ที่มีอยู่ในระหว่างการศึกษาเท่านั้น ไม่ใช้กับตัวแปรที่ใหม่กว่า เช่น Omicron [54]

ในเดือนมีนาคม พ.ศ. 2567 Pemivibartซึ่งเป็นยาแอนติบอดีโมโนโคลนัล ได้รับอนุญาตให้ใช้ในกรณีฉุกเฉินจากสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาของสหรัฐฯ เพื่อใช้เป็นยาป้องกันก่อนการสัมผัสเพื่อปกป้องผู้ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องปานกลางถึงรุนแรงบางรายจาก COVID-19 [55] [56]

ผลข้างเคียง

แอนติบอดีโมโนโคลนัลหลายชนิด เช่นเบวาซิซูแมบและเซทูซิแมบอาจทำให้เกิดผลข้างเคียงได้หลายประเภท[57]ผลข้างเคียงเหล่านี้สามารถแบ่งประเภทได้เป็นผลข้างเคียงทั่วไปและผลข้างเคียงร้ายแรง[58]

ผลข้างเคียงที่พบบ่อย ได้แก่:

  • อาการเวียนหัว
  • อาการปวดหัว
  • อาการแพ้
  • ท้องเสีย
  • ไอ
  • ไข้
  • อาการคัน
  • อาการปวดหลัง
  • จุดอ่อนทั่วไป
  • อาการเบื่ออาหาร
  • นอนไม่หลับ
  • อาการท้องผูก[59]

ผลข้างเคียงร้ายแรงที่อาจเกิดขึ้นได้ ได้แก่: [59]

ดูเพิ่มเติม

อ้างอิง

  1. ^ Gelboin HV. "Cytochrome P450 Mediated Drug and Carcinogen Metabolism using Monoclonal Antibodies". home.ccr.cancer.gov . เก็บถาวรจากแหล่งเดิมเมื่อ 15 ตุลาคม 2004. สืบค้นเมื่อ 2 เมษายน 2018 .
  2. ^ Gelboin HV , Krausz KW, Gonzalez FJ, Yang TJ (พฤศจิกายน 1999). "แอนติบอดีโมโนโคลนอลที่ยับยั้งเอนไซม์ไซโตโครม P450 ของมนุษย์: หนทางใหม่สำหรับการค้นพบยา" Trends in Pharmacological Sciences . 20 (11): 432–438. doi :10.1016/S0165-6147(99)01382-6. PMID  10542439.
  3. ^ Liu JK (11 กันยายน 2014). "ประวัติศาสตร์การพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลนัล – ความก้าวหน้า ความท้าทายที่เหลืออยู่ และนวัตกรรมในอนาคต". Annals of Medicine and Surgery . 3 (4): 113–116. doi :10.1016/j.amsu.2014.09.001. ISSN  2049-0801. PMC 4284445 . PMID  25568796. 
  4. ^ Waldmann TA (มิถุนายน 1991). "แอนติบอดีโมโนโคลนัลในการวินิจฉัยและการบำบัด". Science . 252 (5013): 1657–1662. Bibcode :1991Sci...252.1657W. doi :10.1126/science.2047874. PMID  2047874. S2CID  19615695.
  5. ^ Tansey EM, Catterall PP (กรกฎาคม 1994). "แอนติบอดีโมโนโคลนัล: การสัมมนาพยานในประวัติศาสตร์การแพทย์ร่วมสมัย". Medical History . 38 (3): 322–327. doi :10.1017/s0025727300036632. PMC 1036884 . PMID  7934322. 
  6. ^ Schwaber J, Cohen EP (สิงหาคม 1973). "โคลนลูกผสมเซลล์โซมาติกของมนุษย์กับหนูที่หลั่งอิมมูโนโกลบูลินของพ่อแม่ทั้งสองประเภท" Nature . 244 (5416): 444–447. doi :10.1038/244444a0. PMID  4200460. S2CID  4171375.
  7. ^ Cambrosio A, Keating P (1992). "Between fact and technique: the beginnings of hybridoma technology". Journal of the History of Biology . 25 (2): 175–230. doi :10.1007/BF00162840. PMID  11623041. S2CID  45615711.
  8. ^ abc Marks LV. "เรื่องราวของ César Milstein และแอนติบอดีโมโนโคลนัล" WhatisBiotechnology.org สืบค้นเมื่อ23 กันยายน 2020
  9. ^ Riechmann L, Clark M, Waldmann H, Winter G (มีนาคม 1988). "การปรับรูปร่างแอนติบอดีของมนุษย์สำหรับการบำบัด" Nature . 332 (6162): 323–327. Bibcode :1988Natur.332..323R. doi : 10.1038/332323a0 . PMID  3127726. S2CID  4335569
  10. ^ Altmann DM (พฤศจิกายน 2018). "A Nobel Prize-worthy Pursuit: cancer immunology and harnessing immunity to tumour neoantigens". Immunology . 155 (3): 283–284. doi :10.1111/imm.13008. PMC 6187215 . PMID  30320408. 
  11. ^ Nadler LM, Roberts WC (ตุลาคม 2007). "Lee Marshall Nadler, MD: การสนทนากับบรรณาธิการ" Proceedings . 20 (4). National Institutes of Health: 381–389. doi :10.1080/08998280.2007.11928327. PMC 2014809 . PMID  17948113. 
  12. ^ Spieker-Polet H, Sethupathi P, Yam PC, Knight KL (กันยายน 1995). "แอนติบอดีโมโนโคลนัลกระต่าย: การสร้างพันธมิตรการหลอมรวมเพื่อผลิตไฮบริดโดมากระต่าย-กระต่าย" Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 92 (20): 9348–9352. Bibcode :1995PNAS...92.9348S. doi : 10.1073/pnas.92.20.9348 . PMC 40982 . PMID  7568130. 
  13. ^ Zhang YF, Phung Y, Gao W, Kawa S, Hassan R, Pastan I, et al. (พฤษภาคม 2015). "แอนติบอดีโมโนโคลนัลที่มีความสัมพันธ์สูงชนิดใหม่จะจดจำเอพิโทปที่ไม่ทับซ้อนกันบนเมโซทีลินเพื่อการติดตามและรักษาเมโซทีลิโอมา" Scientific Reports . 5 : 9928. Bibcode :2015NatSR...5E9928Z. doi :10.1038/srep09928. PMC 4440525 . PMID  25996440 
  14. ^ Yang J, Shen MH (2006). "การหลอมรวมเซลล์ด้วยโพลีเอทิลีนไกลคอล". Nuclear Reprogramming . Methods Mol Biol. เล่มที่ 325. หน้า 59–66. doi :10.1385/1-59745-005-7:59. ISBN 1-59745-005-7. PMID  16761719.
  15. ^ คณะกรรมการว่าด้วยวิธีการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัลของสภาวิจัยแห่งชาติ (สหรัฐอเมริกา) "คำแนะนำ 1: บทสรุปผู้บริหาร: การผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนัล" วอชิงตัน (ดีซี): สำนักพิมพ์ National Academies (สหรัฐอเมริกา); 1999 ISBN 978-0309075114 
  16. ^ abc Ho M (มิถุนายน 2018). "บทบรรณาธิการเปิดตัว: การค้นหากระสุนวิเศษ". Antibody Therapeutics . 1 (1): 1–5. doi :10.1093/abt/tby001. PMC 6086361 . PMID  30101214 
  17. ^ ab Ho M, Feng M, Fisher RJ, Rader C, Pastan I (พฤษภาคม 2011). "แอนติบอดีโมโนโคลนัลมนุษย์ที่มีความสัมพันธ์สูงใหม่กับเมโซทีลิน" วารสารมะเร็งนานาชาติ . 128 (9): 2020–2030. doi :10.1002/ijc.25557. PMC 2978266 . PMID  20635390 
  18. ^ Seeber S, Ros F, Thorey I, Tiefenthaler G, Kaluza K, Lifke V และคณะ (2014). "แพลตฟอร์มประสิทธิภาพสูงสำหรับสร้างแอนติบอดีโมโนโคลนัลรีคอมบิแนนท์แบบมีฟังก์ชันโดยใช้เซลล์ B ของกระต่ายจากเลือดส่วนปลาย" PLOS ONE . ​​9 (2): e86184. Bibcode :2014PLoSO...986184S. doi : 10.1371/journal.pone.0086184 . PMC 3913575 . PMID  24503933. 
  19. ^ Wardemann H, Yurasov S, Schaefer A, Young JW, Meffre E, Nussenzweig MC (กันยายน 2003). "การผลิตออโตแอนติบอดีที่โดดเด่นโดยเซลล์ต้นกำเนิด B ของมนุษย์ในระยะแรก" Science . 301 (5638): 1374–1377. Bibcode :2003Sci...301.1374W. doi : 10.1126/science.1086907 . PMID  12920303. S2CID  43459065.
  20. ^ Koelsch K, Zheng NY, Zhang Q, Duty A, Helms C, Mathias MD, et al. (มิถุนายน 2007). "เซลล์ B โตเต็มวัยที่เปลี่ยนเป็น IgD มีปฏิกิริยาตอบสนองอัตโนมัติในบุคคลที่มีสุขภาพแข็งแรง" วารสารการสืบสวนทางคลินิก . 117 (6): 1558–1565. doi :10.1172/JCI27628. PMC 1866247 . PMID  17510706 
  21. ^ Smith K, Garman L, Wrammert J, Zheng NY, Capra JD, Ahmed R, et al. (1 มกราคม 2009). "การสร้างแอนติบอดีโมโนโคลนัลของมนุษย์อย่างสมบูรณ์อย่างรวดเร็วที่จำเพาะต่อแอนติเจนสำหรับการฉีดวัคซีน" Nature Protocols . 4 (3): 372–384. doi :10.1038/nprot.2009.3. PMC 2750034 . PMID  19247287. 
  22. ^ Duty JA, Szodoray P, Zheng NY, Koelsch KA, Zhang Q, Swiatkowski M, et al. (มกราคม 2009). "ภาวะภูมิแพ้ทางการทำงานในกลุ่มย่อยของเซลล์ B naive จากมนุษย์ที่มีสุขภาพดีซึ่งแสดงออกตัวรับอิมมูโนโกลบูลินที่ตอบสนองเอง" วารสารการแพทย์เชิงทดลอง . 206 (1): 139–151. doi :10.1084/jem.20080611. PMC 2626668 . PMID  19103878 
  23. ^ Huang J, Doria-Rose NA, Longo NS, Laub L, Lin CL, Turk E, et al. (ตุลาคม 2013). "การแยกแอนติบอดีโมโนโคลนัลของมนุษย์จากเซลล์ B ในเลือดส่วนปลาย" Nature Protocols . 8 (10): 1907–1915. doi :10.1038/nprot.2013.117. PMC 4844175 . PMID  24030440 
  24. ^ Vlasak J, Ionescu R (ธันวาคม 2008). "ความหลากหลายของแอนติบอดีโมโนโคลนอลที่เปิดเผยโดยวิธีการที่ไวต่อประจุ" Current Pharmaceutical Biotechnology . 9 (6): 468–481. doi :10.2174/138920108786786402. PMID  19075686
  25. ^ Liu H, Nowak C, Shao M, Ponniah G, Neill A (กันยายน 2016). "ผลกระทบของการเพาะเลี้ยงเซลล์ต่อความไม่เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์แอนติบอดีโมโนโคลนัลรีคอมบิแนนท์" Biotechnology Progress . 32 (5): 1103–1112. doi :10.1002/btpr.2327. ISSN  1520-6033. PMID  27452958
  26. ^ Xu Y, Wang D, Mason B, Rossomando T, Li N, Liu D และคณะ (17 ธันวาคม 2018). "โครงสร้าง ความหลากหลาย และการประเมินความสามารถในการพัฒนาของแอนติบอดีที่ใช้ในการรักษา" mAbs . 11 (2): 239–264. doi :10.1080/19420862.2018.1553476. ISSN  1942-0862. PMC 6380400 . PMID  30543482. 
  27. ^ Beck A, Nowak C, Meshulam D, Reynolds K, Chen D, Pacardo DB และคณะ (20 พฤศจิกายน 2022). "Risk-Based Control Strategies of Recombinant Monoclonal Antibody Charge Variants". Antibodies . 11 (4): 73. doi : 10.3390/antib11040073 . ISSN  2073-4468. PMC 9703962 . PMID  36412839. 
  28. ^ Beck A, Wurch T, Bailly C, Corvaia N (พฤษภาคม 2010). "กลยุทธ์และความท้าทายสำหรับแอนติบอดีเพื่อการรักษารุ่นต่อไป" Nature Reviews. Immunology . 10 (5): 345–352. doi :10.1038/nri2747. PMID  20414207. S2CID  29689097
  29. ^ Khawli LA, Goswami S, Hutchinson R, Kwong ZW, Yang J, Wang X และคณะ (2010). "ตัวแปรของประจุใน IgG1: การแยก ลักษณะเฉพาะ คุณสมบัติการจับในหลอดทดลอง และเภสัชจลนศาสตร์ในหนู" mAbs . 2 (6): 613–624. doi :10.4161/mabs.2.6.13333. PMC 3011216 . PMID  20818176. 
  30. ^ Zhang T, Bourret J, Cano T (สิงหาคม 2011). "การแยกและลักษณะเฉพาะของตัวแปรประจุแอนติบอดีที่ใช้ในการรักษาโดยใช้โครมาโทกราฟีแบบแทนที่การแลกเปลี่ยนไอออนบวก" Journal of Chromatography A . 1218 (31): 5079–5086. doi :10.1016/j.chroma.2011.05.061. PMID  21700290.
  31. ^ Rathore AS, Winkle H (มกราคม 2009). "คุณภาพตามการออกแบบสำหรับชีวเภสัชกรรม" Nature Biotechnology . 27 (1): 26–34. doi :10.1038/nbt0109-26. PMID  19131992. S2CID  5523554.
  32. ^ van der Schoot JM, Fennemann FL, Valente M, Dolen Y, Hagemans IM, Becker AM และคณะ (สิงหาคม 2019). "Functional diversification of hybridoma-produced antibodies by CRISPR/HDR genomic engineering". Science Advances . 5 (8): eaaw1822. Bibcode :2019SciA....5.1822V. doi :10.1126/sciadv.aaw1822. PMC 6713500 . PMID  31489367. 
  33. ↑ ซีเกล ดีแอล (มกราคม พ.ศ. 2545) "เทคโนโลยีโมโนโคลนอลแอนติบอดีชนิดรีคอมบิแนนท์" การถ่าย คลีนิกข์ และ Biologique . 9 (1): 15–22. ดอย :10.1016/S1246-7820(01)00210-5. PMID11889896  .
  34. ^ "Dr. George Pieczenik". ศิษย์เก่า LMB . ห้องปฏิบัติการชีววิทยาโมเลกุลของ MRC (LMB) 17 กันยายน 2009 เก็บถาวรจากแหล่งเดิมเมื่อ 23 ธันวาคม 2012 . สืบค้นเมื่อ17 พฤศจิกายน 2012 .
  35. ^ Schmitz U, Versmold A, Kaufmann P, Frank HG (2000). "Fhage display: a molecular tool for the generation of antibodies – a review". Placenta . 21 (Suppl A): S106–S112. doi :10.1053/plac.1999.0511. PMID  10831134.
  36. ^ Zhang YF, Ho M (กันยายน 2016). "การทำให้เป็นมนุษย์ของแอนติบอดีที่มีความสัมพันธ์สูงที่กำหนดเป้าหมายที่ไกลพิแคน-3 ในมะเร็งตับ" Scientific Reports . 6 : 33878. Bibcode :2016NatSR...633878Z. doi :10.1038/srep33878. PMC 5036187 . PMID  27667400 
  37. ^ Boulianne GL, Hozumi N, Shulman MJ (1984). "การผลิตแอนติบอดีไคเมริกของเมาส์/มนุษย์ที่ทำงานได้" Nature . 312 (5995): 643–646. Bibcode :1984Natur.312..643B. doi :10.1038/312643a0. PMID  6095115. S2CID  4311503
  38. ^ Chadd HE, Chamow SM (เมษายน 2001). "เทคโนโลยีการแสดงออกของแอนติบอดีเพื่อการรักษา" Current Opinion in Biotechnology . 12 (2): 188–194. doi :10.1016/S0958-1669(00)00198-1. PMID  11287236
  39. ^ Lonberg N, Huszar D (1995). "แอนติบอดีของมนุษย์จากหนูทรานสเจนิก" International Reviews of Immunology . 13 (1): 65–93. doi :10.3109/08830189509061738. PMID  7494109
  40. ^ Hernandez I, Bott SW, Patel AS, Wolf CG, Hospodar AR, Sampathkumar S, et al. (กุมภาพันธ์ 2018). "ราคาของการบำบัดด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนัล: สูงขึ้นหากใช้กับมะเร็ง?". The American Journal of Managed Care . 24 (2): 109–112. PMID  29461857.
  41. ^ Breedveld FC (กุมภาพันธ์ 2000). "แอนติบอดีโมโนโคลนัลเพื่อการรักษา". Lancet . 355 (9205): 735–740. doi :10.1016/S0140-6736(00)01034-5. PMID  10703815. S2CID  43781004.
  42. ^ Australian Prescriber (2006). "การบำบัดด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนัลสำหรับโรคที่ไม่ใช่มะเร็ง" Australian Prescriber . 29 (5): 130–133. doi : 10.18773/austprescr.2006.079 .
  43. ^ Rosenn (กันยายน 2023). "สงครามโมโนโคลนัล: คลังอาวุธแอนติบอดีและเป้าหมายสำหรับการประยุกต์ใช้ที่ขยาย" Immuno . 3 (3): 346-357. doi : 10.3390/immuno3030021 .
  44. ^ ดัดแปลงจากCarter P (พฤศจิกายน 2001). "การปรับปรุงประสิทธิภาพของการบำบัดมะเร็งโดยใช้แอนติบอดี" Nature Reviews. Cancer . 1 (2): 118–129. doi :10.1038/35101072. PMID  11905803. S2CID  10169378.
  45. ^ Takimoto CH, Calvo E. (1 มกราคม 2005) "หลักการของการบำบัดด้วยยาทางมะเร็ง" ใน Pazdur R, Wagman LD, Camphausen KA, Hoskins WJ (บรรณาธิการ) การจัดการมะเร็ง เก็บถาวร 4 ตุลาคม 2013 ที่ เวย์แบ็กแมชชีน
  46. ^ abcdefghij Rang HP (2003). Pharmacology . Edinburgh: Churchill Livingstone. หน้า 241 สำหรับตัวอย่าง infliximab, basiliximab, abciximab, daclizumab, palivusamab, gemtuzumab, alemtuzumab และ rituximab และกลไกและโหมดISBN 978-0443071454-
  47. ^ เกี่ยวกับ "Bavituximab - Avid Bioservices" AdisInsight . Springer Nature Switzerland AG
  48. ^ ab "Coronavirus (COVID-19) Update: FDA Authorizes Monoclonal Antibodies for Treatment of COVID-19". สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาของสหรัฐอเมริกา(FDA) (ข่าวเผยแพร่). 21 พฤศจิกายน 2020. สืบค้นเมื่อ21 พฤศจิกายน 2020 . สาธารณสมบัติบทความนี้รวมข้อความจากแหล่งนี้ซึ่งอยู่ในโดเมนสาธารณะ
  49. ^ ab "FDA Authorizes Monoclonal Antibodies for Treatment of COVID-19". สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาของสหรัฐอเมริกา(FDA) (ข่าวเผยแพร่). 9 กุมภาพันธ์ 2021. สืบค้นเมื่อ10 กุมภาพันธ์ 2021 . สาธารณสมบัติบทความนี้รวมข้อความจากแหล่งนี้ซึ่งอยู่ในโดเมนสาธารณะ
  50. ^ "จดหมายอนุญาตใช้ในกรณีฉุกเฉิน" (PDF) . สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา(FDA) . 16 ธันวาคม 2021 . สืบค้นเมื่อ6 มกราคม 2022 . สาธารณสมบัติบทความนี้รวมข้อความจากแหล่งนี้ซึ่งอยู่ในโดเมนสาธารณะ
  51. ^ Bernstein L (14 กันยายน 2021). "Biden administration moves to stave off shortages of monoclonal antibodies". The Washington Post . ISSN  0190-8286 . สืบค้นเมื่อ21 ธันวาคม 2021 .
  52. ^ Kozlov M (ธันวาคม 2021). "Omicron เอาชนะการรักษาด้วยแอนติบอดี COVID ที่สำคัญในการทดสอบระยะเริ่มต้น" Nature . doi :10.1038/d41586-021-03829-0. PMID  34937889. S2CID  245442677.
  53. ^ Kreuzberger N, Hirsch C, Chai KL, Tomlinson E, Khosravi Z, Popp M, et al. (กันยายน 2021). "แอนติบอดีโมโนโคลนอลที่ทำให้ SARS-CoV-2 เป็นกลางสำหรับการรักษา COVID-19". ฐานข้อมูลการทบทวนวรรณกรรมอย่างเป็นระบบของ Cochrane . 2021 (9): CD013825. doi :10.1002/14651858.cd013825.pub2. PMC 8411904 . PMID  34473343. 
  54. ^ ab Hirsch C, Park YS, Piechotta V, Chai KL, Estcourt LJ, Monsef I และคณะ (มิถุนายน 2022). "แอนติบอดีโมโนโคลนอลที่ทำให้ SARS-CoV-2 เป็นกลางเพื่อป้องกัน COVID-19" ฐานข้อมูลการทบทวนวรรณกรรมอย่างเป็นระบบของ Cochrane . 2022 (6): CD014945 doi :10.1002/14651858.cd014945.pub2 PMC 9205158 . PMID  35713300 
  55. ^ MacMillan C (5 เมษายน 2024). "FDA อนุมัติยา COVID Pemgarda สำหรับผู้ป่วยที่มีความเสี่ยงสูง" Yale Medicineสืบค้นเมื่อ8 เมษายน 2024
  56. ^ Cavazzoni P (3 เมษายน 2024). "EUA 122 Invivyd Pemgarda LOA". สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาของสหรัฐอเมริกา. เก็บถาวรจากแหล่งเดิมเมื่อ 8 เมษายน 2024 . สืบค้นเมื่อ8 เมษายน 2024 .
  57. ^ "แอนติบอดีโมโนโคลนัลเพื่อรักษามะเร็ง". สมาคมมะเร็งอเมริกันสืบค้นเมื่อ19เมษายน2018
  58. ^ "ยาแอนติบอดีโมโนโคลนัลสำหรับมะเร็ง: กลไกการทำงาน". Mayo Clinic . สืบค้นเมื่อ19 เมษายน 2018 .
  59. ^ ab Ogbru O (12 ตุลาคม 2022). Davis CP (ed.). "Monoclonal Antibodies: List, Types, Side Effects & FDA Uses (Cancer)". MedicineNet . สืบค้นเมื่อ19 เมษายน 2018 .

อ่านเพิ่มเติม

  • Rajewsky K (พฤศจิกายน 2019). "การถือกำเนิดและการเพิ่มขึ้นของแอนติบอดีโมโนโคลนัล" Nature . 575 (7781): 47–49. Bibcode :2019Natur.575...47R. doi :10.1038/d41586-019-02840-w. PMID  31686050
  • Kimball JA. “แอนติบอดีโมโนโคลนัล” หน้าชีววิทยาของ Kimball
  • โมโนโคลนัล+แอนติบอดีที่ หัวเรื่องทางการแพทย์ของห้องสมุดการแพทย์แห่งชาติสหรัฐอเมริกา(MeSH)
  • Antibodypedia เป็นที่เก็บข้อมูลเสมือนแบบเปิดที่เผยแพร่ข้อมูลและความคิดเห็นเกี่ยวกับแอนติบอดีต่างๆ ที่เข้าถึงได้สำหรับชุมชนวิทยาศาสตร์
  • คู่มือการฟอกแอนติบอดี เก็บถาวร 5 ธันวาคม 2551 ที่เวย์แบ็กแมชชีน
ทรัพยากรห้องสมุดเกี่ยวกับ
โมโนโคลนอลแอนติบอดี
  • ทรัพยากรในห้องสมุดของคุณ
  • แหล่งข้อมูลในห้องสมุดอื่น ๆ
ดึงข้อมูลจาก "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=แอนติบอดีโมโนโคลนอล&oldid=1252171893"