Laporan Praktikum Uji Enzim Katalase
Laporan Praktikum Uji Enzim Katalase
Laporan Praktikum Uji Enzim Katalase
ANGGOTA:
1. ABDILLAH NAZRIL
2. AGISNA KURLI
3. AILYSSA RASSVITA
4. HAIKAL ABDILA
5. M.IKMAL MUHANIQ
SMAN 1 SUKABUMI
JALAN RH.DIDI SUKARDI NO 124 SUKABUMI
A. Tujuan
Tujuan dari praktikum ini adalah mempelajari kerja enzim dan mengetahui
faktor – faktor yang memengaruhi kerja enzim.
B. Landasan Teori
Metabolisme adalah merupakan suatau reaksi kimia yang selalu terjadi
didalam tubuh makhluk hidup. Reaksi metabolisme tersebut dimaksudkan untuk
memperoleh energi, menyimpan energi, menyusun bahan makanan, merombak
bahan makanan, memasukkan atau mengeluarkn zat - zat, melakukan gerakan,
menyusun struktur sel, merombak struktur – struktur sel yang tidak dapat
digunakan lagi, dan menanggapi rangsang. Dalam reaksi kimia metabolisme yang
terjadi di dalam sel, reaksi berjalan bukan merupakan reaksi bolak – balik,
melainkan berjalan satu arah. Dalam metabolisme, diperlukan adanya suatu
biokatalisator yang disebut enzim. (Kirana, 2012)
Metabolisme dibedakan menjadi 2, yaitu anabolisme dan katabolisme.
Anabolisme adalah metabolisme yang menyusun beberapa senyawa organik
sederhana menjadi senyawa kimia atau molekul kompleks. Proses ini
membutuhkan energi dari luar. Energi yang digunakan dalam reaksi ini dapat
berupa energi cahaya ataupun energi kimia. Energi tersebut, selanjutnya
digunakan untuk mengikat senyawa-senyawa sederhana tersebut menjadi senyawa
yang lebih kompleks. Jadi, dalam proses ini energi yang diperlukan tersebut tidak
hilang, tetapi tersimpan dalam bentuk ikatan-ikatan kimia pada senyawa kompleks
yang terbentuk. Anabolisme yang menggunakan energi cahaya dikenal
dengan fotosintesis, sedangkan anabolisme yang menggunakan energi kimia
dikenal dengan kemosintesis
Katabolisme adalah adalah reaksi penguraian senyawa kompleks menjadi
senyawa yang lebih sederhana dengan bantuan enzim. Penguraian senyawa ini
menghasilkan atau melepaskan energi berupa ATP yang biasa digunak4an
organisme untuk beraktivitas. Katabolisme mempunyai dua fungsi, yaitu
menyediakan bahan baku untuk sintesis molekul lain, dan menyediakan energi
kimia yang dibutuhkan untuk melakukan aktivitas sel. Reaksi yang umum terjadi
adalah reaksi oksidasi. Energi yang dilepaskan oleh reaksi katabolisme disimpan
4
dalam bentuk fosfat, terutama dalam bentuk ATP (Adenosin trifosfat) dan
berenergi elektron tinggi NADH2 (Nikotilamid adenin dinukleotida H2) serta
FADH2 (Flavin adenin dinukleotida H2). (Rahcmadiarti, 2007)
1) Pengertian Enzim
Enzim adalah merupakan biokatalisator,yang artinya dapat
mempercepat reaksi-reaksi biologi tanpa mengalami perubahan struktur kimia.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa enzim
adalah suatu protein.
Kerja enzim tentunya dipengaruhi oleh faktor dalam dan luar
enzim.Faktor dalam misalnya substansi – substansi genetik yang dibawa oleh
masing – masing enzim, suhu, pH, konsentrasi enzim, dan activator.
Kebanyakan enzim berukuran lebih besar dari substratnya. Akan tetapi,
hanya daerah tertentu dari molekul enzim tersebut yang berikatan dengan substart,
yaitu di bagian yang disebut sisi aktif (activesite). Substrat adalah suatu bahan
atau molekul yang dikatalis oleh enzim dan berupa karbohidrat, protein, maupun
lemak.
Beberapa enzim memerlukan komponen nonprotein yang disebut gugus
prostetik agar dapat bekerja dalam suatu reaksi. Enzim yang lengkap tersebut
disebut holoezim. Secara kimia, enzim yang langkap (holoenzim) tersusun atas
dua bagian, yaitu bagian protein dan bagian bukan protein.
Bagian protein disebut apoenzim, tersusun atas asam asam amino dan merupakan
tempat melekatnya substrat sekaligus mereaksikan substrat. Bagian protein
bersifat labil (mudah berubah), misalnya terpengaruh oleh suhu dan keasaman.
Misal : NAD+.
Bagian yang bukan protein disebut gugus prostetik, yaitu gugusan yang
aktif. Gugus prostetik yang berasal dari molekul anorganik disebut kofaktor,
misalnya besi, tembaga, zink. Gugus prostetik bersifat stabil pada suhu relatif
tinggi, dan tidak berubah pada akhir reaksi.
Gugus prostetik yang terdiri dari senyawa organic kompleks disebut
koenzim, misalnya NADH, FADH, koenzim A, tiamin (vitamin B1), riboflavin
6
(vitamin B2), asam pantotenat (vitamin B5), niasin (asam nikotinat), piridoksin
(vitamin B6), biotin, asam folat dan kobalamin (vitamin B12).
Enzim tersusun atas protein dan molekul lainnya bekerja dengan
menurunkan energi aktivasi, sehingga tidak diperlukan suhu dan energi tinggi
untuk melakukan suatu reaksi kimia didalam tubuh.Jika tidak terdapat katalisator
dalam metabolisme, maka suhu tubuh akan meningkat dan membahayakan bagi
tubuh makhluk hidup. (Arif Priadi, 2009)
Substrat yang tepat akan masuk ke dalam situs aktif enzim dan
membentuk kompleks enzim-substrat. Ini adalah di situs ini aktif bahwa substrat
ditransformasikan ke produk yang dapat digunakan. Setelah reaksi selesai, dan
produk yang dirilis, situs aktif tetap sama dan siap untuk bereaksi dengan substrat
baru. Teori ini didalilkan oleh Emil Fischer pada tahun 1894. Teori ini
memberikan gambaran dasar tentang aksi enzim pada substrat. Namun, ada
faktor-faktor tertentu yang tetap tidak dapat dijelaskan. Sesuai teori ini, asam
amino (dalam keadaan terikat) di situs aktif bertanggung jawab untuk bentuk
spesifik. Ada enzim tertentu yang tidak membentuk bentuk apapun dalam bentuk
terikat. Kunci dan teori kunci gagal untuk menjelaskan aksi enzim tersebut.
b). Perubahan pH
Pada umumnya, pH optimum berada dikisaran 6 – 8. Namun beberapa
pengecualian terjadi, contohnya pada lambung manusia, pepsin akan bekerja pada
pH 2. Perubahan pH yang cukup tajam juga akan menyebabkan enzim
terdenaturasi.
c). Konsentrasi Substrat
Konsentrasi substrat memainkan peran utama dalam berbagai aktivitas
enzim. Hal ini jelas karena konsentrasi yang lebih tinggi dari substrat berarti lebih
banyak jumlah molekul substrat yang terlibat dengan aktivitas enzim. Sedangkan,
konsentrasi rendah substrat berarti jumlah kurang dari molekul akan mendapatkan
melekat pada enzim. Ini pada gilirannya mengurangi aktivitas enzim. Ketika laju
reaksi enzimatik maksimum dan enzim berada di negara yang paling aktif,
peningkatan konsentrasi substrat tidak akan membuat perbedaan dalam aktivitas
enzim. Dalam kondisi ini, substrat terus diganti dengan yang baru pada situs aktif
enzim dan tidak ada ruang lingkup untuk menambahkan molekul-molekul ekstra
di sana.
d). Konsentrasi Enzim
Dalam reaksi enzimatik, jumlah molekul substrat yang terlibat lebih
dibandingkan dengan jumlah enzim. Kenaikan konsentrasi enzim akan
meningkatkan aktivitas enzim untuk alasan sederhana bahwa lebih enzim yang
berpartisipasi dalam reaksi. Laju reaksi berbanding lurus dengan jumlah enzim
yang tersedia untuk itu. Namun, itu tidak berarti bahwa kenaikan konstan dalam
konsentrasi enzim akan menyebabkan kenaikan mantap dalam laju reaksi.
Sebaliknya, konsentrasi yang sangat tinggi dari enzim dimana semua molekul
substrat sudah habis tidak memiliki dampak apapun pada laju reaksi. Tepatnya,
setelah laju reaksi telah mencapai stabilitas, peningkatan jumlah enzim tidak
mempengaruhi laju reaksi lagi.
e). Inhibitor
Seperti namanya, inhibitor adalah substansi yang memiliki kecenderungan
untuk mencegah aktivitas enzim. Inhibitor enzim mengganggu fungsi enzim
dalam dua cara yang berbeda. Berdasarkan ini, mereka dibagi menjadi dua
kategori: inhibitor kompetitif dan inhibitor kompetitif. Sebuah inhibitor kompetitif
memiliki struktur yang sama dengan molekul substrat, dan sehingga akan melekat
pada diaktifkan pusat enzim mudah dan membatasi pembentukan ikatan kompleks
enzim-substrat. Sebuah inhibitor nonkompetitif adalah salah satu yang membawa
perubahan (s) dalam bentuk enzim dengan bereaksi dengan situs aktif. Dalam
kondisi ini, molekul substrat tidak dapat mengikat dirinya pada enzim dan dengan
demikian, kegiatan selanjutnya diblokir.
5) Enzim Katalase
Katalase adalah enzim antioksidan yang ditemukan pada hampir semua
organisme hidup yang mengkatalisis proses dekomposisi hidrogen
peroksida menjadi air dan oksigen. Katalase adalah salah satu enzim yang paling
efisien, satu molekul katalase dapat mengkonversi jutaan molekul hidrogen
peroksida menjadi air dan oksigen. Fungsi enzim Katalase Hidrogen peroksida
(H2O2) merupakan hasil dari respirasi dan dibuat dalam seluruh sel hidup. H2O2
berbahaya dan harus dibuang secepatnya. Enzim katalase diproduksi sel untuk
mengkatalis H2O2. Katalase berperan sebagai enzim peroksidasi khusus dalam
reaksi dekomposisi hydrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Enzi mini
mampu mengoksidasi 1 molekul hydrogen peroksida menjadi oksigen. Kemudian
secara simultan juga dapat mereduksi molekul hydrogen peroksida kedua menjadi
air. Reaksi dapat berjalan bila terdapat senyawa pemberi ion hydrogen (H2)
seperti methanol, etanol dan format. Peran katalase dalam mengkatalis H2O2
relatif lebih kecil dibandiingkan dengan kecepatan pembentukannya. Sel-sel yang
mengandung katalase dalam jumlah sedikit sangat rentan terhadap peroksida.
Oleh karena itu katalase berperan penting dalam mekanisme pertahanan sel darah
merah terhadap serangan oksidaror hydrogen peroksida.
D. Cara Kerja
1) Menyelidiki aktivitas enzim katalase :
Tabung reaksi diisi dengan 7 – 10 tetes ekstrak hati ayam, lalu
dimasukkan H2O2 kedalam tabung reaksi setinggi 1cm,lalu diamati
perubahan gelembung yang terjadi dan dicatat dalam tabel
pengamatan.
2) Pengukuran Aktivitas Enzim Katalase
a. Percobaan nomor 1 diulangi, namun dengan
menambahkan H2SO4 sebanyak 3 tetes, diamati yang
terjadi dan dicatat dalam tabel pengamatan.
b. Percobaan ekstrak hati dengan H2SO4, namun dengan
ditambahkan KMnO4sebanyak 3 tetes. Amati dan catat
perubahannya.
c. Percobaan nomor 1, dan ditambahkan NaOH sebanyak 3
tetes, amati dan catat perubahannya.
d. Percobaan nomor 1 diulangi, namun tabung reaksi
dipanaskan secukupnya. Amati dan catat perubahannya.
e. Percobaan nomor 1di ulangi, kemudian dimasukkan bara
api dari dupa ke dalam tabung reaksi. Saat memasukkan
bara api, jangan sampai terlalu ke dalam.