LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI PERTANIAN

ACARA IV
ISOLASI MIKROBA RHIZOSFER

Oleh:
Imam Rajuna
A1D022027
Rombongan 1

KEMENTERIAN PENDIDIKAN, KEBUDAYAAN, RISET, DAN

TEKNOLOGI
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS PERTANIAN
PURWOKERTO
2023
 I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Mikroorganisme merupakan makhluk hidup atau suatu organisme yang

berukuran sangat kecil. Mikroorganisme memiliki peranan penting dalam bidang
pertanian baik menguntungkan ataupun merugikan. Mikroorganisme berperan
sebagai dekomposer atau pengurai bahan organik dalam tanah sehingga
meningkatkan ketersediaan nutrisi atau unsur hara tanah. Selain itu, beberapa
mikroorganisme dapat berperan sebagai pemacu pertumbuhan tanaman, seperti
bakteri rhizosfer.
Terdapat dua jenis bakteri rhizosfer berdasarkan sifat simbiosisnya, yaitu
bakteri simbiotik dan non simbiotik. Bakteri rhizosfer berperan sebagai Plant
Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) karena dapat melakukan fiksasi N2
bebas di atmosfer atau udara sehingga meningkatkan ketersediaan nitrogen di
dalam tanah. Salah satu contoh bakteri rhizosfer adalah bakteri rhizobium yang
bersifat simbiotik dengan tanaman. Bakteri Rhizobium adalah bakteri yang berasal
dari kelompok Alphaproteobacteria dan Betaproteobacteria yang berperan sebagai
penyuplai utama nitrogen dan mempunyai kapasitas untuk membentuk suatu
simbiosis fiksasi nitrogen dengan legum (Widawati, 2015).
Morfologi bakteri umunya sangat bervariasi dan secara langsung
mempengaruhi fungsi biologis bakteri. Pengamatan morfologi bakteri dapat
dilakukan dengan menumbuhkan bakteri di dalam media tertentu. Tindakan
isolasi bakteri perlu dilakukan sebelum menumbuhkan bakteri di dalam media.
Isolasi merupakan tahap memindahkan suatu mikroba dari suatu suspensi atau
objek ke dalam medium pertumbuhan yang telah disiapkan. Teknik isolasi dapat
diartikan sebagai usaha untuk menumbuhkan mikroba di luar lingkungan asalnya.
Teknik isolasi bertujuan untuk menumbuhkan biakan murni dan memisahkan
mikroba yang ingin ditumbuhkan dengan mikroba lain yang dapat tercampur.

1
Pengetahuan dan keterampilan mengenai teknik isolasi merupakan dasar yang
harus dipahami untuk dapat menumbuhkan bakteri rhizosfer sebagai kultur murni.

B. Tujuan

Praktikum ini bertujuan untuk:

1. Mengetahui pengertian dan tujuan isolasi bakteri.
2. Mengetahui tahapan dan metode isolasi bakteri.

2
 II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Teknik Isolasi Mikroba

Mikroorganisme merupakan makhluk hidup yang berukuran mikroskopis

yang umumnya hanya dapat diamati menggunakan alat bantu khusus. Dalam
lingkungan alami, populasi mikroorganisme terdiri dari berbagai jenis
mikroorganisme baik yang ada di tanah, air, udara, makanan, maupun di tubuh
hewan dan tumbuhan. Pemisahan bakteri umumnya dibutuhkan untuk
mengidentifikasi jenis, morfologi, fisiologi, dan karakteristik suatu bakteri. Isolasi
merupakan metode pemisahan bakteri yang bersamaan dengan tahap pemurnian.
Isolasi bakteri adalah tahap mengeluarkan bakteri dari media atau lingkungan
asalnya dan menumbuhkannya di media buatan untuk menghasilkan biakan yang
murni (Sabbathini et al., 2017).
Menurut Lestari & Hartati (2017), isolasi bakteri adalah suatu teknik
mengangkat bakteri dari lingkungan alaminya dan menumbuhkan di suatu media
buatan sehingga biakan murni dapat didapatkan. Biakan murni hasil teknik isolasi
disebut dengan isolat. Pembuatan isolat dilakukan dengan metode pengambilan
sampel dari lingkungan baik dari tanah, air, ataupun udara. Sampel yang telah
diperoleh kemudian dibiakkan menggunakan medium universal atau selektif. Pada
media universal umumnya akan didapatkan biakan mikroba campuran. Untuk
tahap identifikasi ataupun isolasi bakteri jenis tertentu harus dilakukan proses
pembuatan isolat tunggal dari isolat campuran tersebut. Tahap isolasi bakteri
terdiri dari tiga tahap, yaitu teknik propagasi atau preparasi suspensi, teknik
pengenceran, dan teknik penanaman.
Teknik preparasi suspensi merupakan langkah awal isolasi bakteri yang
bertujuan untuk melarutkan atau melepaskan mikroorganisme dari substratnya ke
dalam air. Teknik preparasi suspensi dibedakan berdasarkan bentuk sampelnya.
Menurut Hafsan (2017), pada sampel permukaan padat umumnya dilakukan
teknik swab. Teknik swab bertujuan untuk mendapatkan mikroorganisme yang

3
biasanya menempel pada permukaan suatu objek dan memiliki kemungkinan yang
sangat kecil atau tidak ada mikroba yang menempel pada objek tersebut. Alat
yang biasanya digunakan untuk teknik swab adalah cotton-tiped swab stick.
Hafsan (2014) menyatakan bahwa teknik pengenceran bertujuan untuk
memperoleh kuantitas bakteri dalam jumlah yang bisa dihitung. Teknik
pengenceran yang umumnya digunakan adalah teknik pengenceran secara berseri.
Sementara itu, teknik penanaman atau inokulasi adalah suatu kegiatan
memindahkan suatu mikroba dari suatu suspensi ke dalam medium pertumbuhan
yang telah disiapkan. Terdapat beberapa metode inokulasi, yaitu metode streak,
agar tuang atau pour plate, serta agar sebar atau spread plate. Jufri (2020)
menyatakan bahwa terdapat beberapa faktor yang harus diperhatikan dalam
melakukan isolasi mikroba, yaitu sifat setiap jenis mikroba yang akan diisolasi,
lingkungan asal mikroba, medium pertumbuhan mikroba yang sesuai, teknik
inokulasi mikroba, teknik menetaskan mikroba, metode pengujian untuk
menentukan mikroba yang diisolasi sudah menjadi kultur murni, serta
mempertahankan mikroba yang sudah diisolasi tetap menjadi biakan murni.

B. Rhizosfer

Achmad (2019) menyatakan bahwa rhizosfer merupakan tanah di sekeliling

area perakaran tanaman yang secara langsung dipengaruhi oleh mikroorganisme
tanah dan eksudasi perakaran tanaman tersebut. Variasi struktur dan kegunaan
dari populasi bakteri rhizosfer ditentukan oleh spesies tanaman. Selain itu, faktor
yang menentukan komponen populasi mikroba rhizosfer meliputi jenis tanah, fase
pertumbuhan, praktik penanaman, dan sejarah penggunaan lahan.
Bakteri rhizosfer mempunyai beragam peran penting dalam bidang
pertanian, seperti menyediakan kebutuhan nutrisi untuk tanaman dan melindungi
tanaman dari infeksi bakteri patogen, khususnya pada area perakaran. Selain itu,
bakteri rhizosfer juga memproduksi berbagai hormon pertumbuhan yang memacu
pertumbuhan tanaman, seperti indol acetic acid (IAA), pelarut fosfat, dan

4
pengikat nitrogen. Bakteri rizosfer umumnya mampu mempengaruhi ketersediaan
dan siklus nutrisi bagi tanaman dengan menjaga konsistensi tekstur tanah
(Khairani et al., 2019). Beberapa jenis bakteri rhizosfer yang dapat memacu
pertumbuhan tanaman atau biasa disebut dengan Plant Growth Promoting
Rhizobacteria (PGPR) adalah Enterobacter, Azotobacter, Bacillus, Azospirillum,
dan Serratia yang mampu meningkatkan produksi hormon IAA (Achmad, 2019).
Bakteri Azotobacter dan Azospirillum adalah bakteri penambat N yang bersifat
non simbiotik yang dapat bertahan hidup di daerah perakaran baik pada tanah
subur, tanah marginal, tanah salin ataupun di tanah masam (Widawati, 2015).

5
 III. METODE PRAKTIKUM

A. Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam praktikum acara empat ini adalah sampel
tanah, akuades, alkohol, spirtus larutan induk pengenceran, media PDA, media
NA. Sementara itu, alat yang dibutuhkan meliputi cawan petri, mikropipet, tip
biru, bunsen, batang L/Drigalsky, seal, kapas, vortex, rak tabung reaksi, tabung
reaksi, dan jarum ose.

B. Prosedur Kerja

Praktikum acara empat ini dilakukan dengan prosedur, sebagai berikut:

1. Buku panduan praktikum Mikrobiologi Pertanian dipelajari.
2. Bahan dan alat yang dibutuhkan disiapkan.
3. Sampel tanah perakaran diambil.
4. Dilakukan teknik pengenceran sampel tanah untuk memperkecil jumlah
mikroba yang tersuspensi dalam cairan.
5. Suspensi sampel dibuat hingga seri pengenceran ke 10-9..
6. Teknik penanaman mikroba dengan metode spread plate, pour plate, dan
streak dilakukan.

6
 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

Tabel 4.1 Teknik Pengenceran

No Dokumentasi Prosedur Kerja
.
1. Bahan dan alat disiapkan. Bahan yang
digunakan meliputi sampel tanah, akuades, dan
alkohol. Sementara itu, alat yang digunakan
meliputi tabung reaksi, tip, mikropipet, rak
tabung reaksi, bunsen, kapas, dan vortex.

2. Mikropipet diatur volumenya sebesar 1000 µl.

Tip biru kemudian dimasukkan pada tempat tip
di ujung mikropipet dengan ditekan secara
perlahan.

3. Larutan sampel tanah diambil menggunakan

mikropipet dengan menekan sebagian tombol
penekan. Tombol penekan dilepaskan untuk
menarik larutan sampel tanah ke dalam tip.

7
4. Larutan sampel tanah dimasukkan ke dalam
tabung reaksi pertama yang berisi 5 ml akuades
dengan menekan tombol penekan secara penuh.
Mulut tabung reaksi kemudian dipanaskan
dengan api bunsen dan ditutup dengan kapas
kembali.
5. Pengenceran pertama dilakukan dengan
menggunakan vortex selama 15 detik untuk
menghomogenkan larutan.

6. Pengenceran kedua diambil dari larutan

pengenceran pertama dan seterusnya hingga
tabung reaksi kesembilan.

7. Pengenceran dilakukan dengan menggunakan

vortex selama 15 detik agar homogen.
Pengenceran 3 dan 4 digunakan untuk media
PDA, sedangkan pengenceran ke 8 dan 9 untuk
media NA.

8
Tabel 4.2 Teknik Penanaman Metode Spread Plate
No Dokumentasi Prosedur Kerja
.
1. Bahan dan alat disiapkan. Bahan yang
digunakan meliputi larutan induk pengenceran
10-3 - 10-9, media NA, media PDA, alkohol, dan
spirtus. Sementara itu, alat yang digunakan
meliputi cawan petri, mikropipet, tip biru,
bunsen, batang L/Drigalsky, dan seal.
2. Cawan petri yang berisi media agar yang telah
padat dipanaskan terlebih dahulu dengan api
bunsen secara memutar dan cawan dalam
keadaan tertutup.

3. Larutan induk pengenceran 3 dan 4 digunakan

untuk media PDA serta pengenceran ke 8 dan 9
untuk media NA. Larutan diambil sebanyak 0,1
ml dari tabung reaksi menggunakan mikropipet.

4. Larutan induk pengenceran 10-8 atau 10-9

sebanyak 0,1 ml diteteskan di atas permukaan
agar media NA yang telah memadat.

9
 5. Batang Drigalsky disterilkan terlebih dahulu
dengan menggunakan api bunsen dan diangin-
anginkan selama beberapa detik agar tetap steril
dan tidak dalam kondisi panas.

6. Larutan induk disebarkan dengan menggunakan

batang Drigalsky yang digoreskan pada
permukaan media NA untuk meratakan tetesan.
Penyebaran lebih efektif apabila cawan petri
diputar.

7. Cawan petri ditutup dengan menggunakan seal

untuk menghindari kontaminasi mikroba dari
luar.

Tabel 4.3 Teknik Penanaman Metode Pour Plate

No. Dokumentasi Prosedur Kerja
1. Bahan dan alat disiapkan. Bahan yang
diperlukan adalah media NA/PDA cair,
alkohol, dan spirtus. Sementara itu, alat yang
dibutuhkan meliputi cawan petri, mikropipet,
tip, bunsen, dan seal.

10
2. Suspensi sel diambil dengan menggunakan
mikropipet ke dalam tabung reaksi. Larutan
pengencer 3 dan 4 untuk media PDA,
sedangkan larutan pengencer 8 dan 9 untuk
media NA.

3. Cawan petri dipanaskan dengan api bunsen

secara memutar dan merata untuk menghindari
kontaminasi.

4. Larutan suspensi mikroba dimasukkan ke dalam

cawan petri, kemudian cawan petri
digoyangkan untuk meratakan larutan.

5. Media NA/PDA dimasukkan ke dalam cawan

petri dengan perlahan dan hati-hati serta
secukupnya, kemudian cawan petri
digoyangkan untuk meratakan media dengan
larutan suspensi.

11
 6. Cawan petri dipanaskan kembali dengan api
bunsen untuk menghindari kontaminasi.

7. Cawan petri ditutup dengan menggunakan seal

untuk menghindari kontaminasi mikroba dari
luar.

Tabel 4.4 Teknik Penanaman Metode Streak

No. Dokumentasi Prosedur Kerja
1. Bahan dan alat disiapkan. Bahan yang
digunakan adalah media NA/PDA, spirtus,
alkohol, dan larutan sampel tanah. Sementara
itu, alat yang digunakan meliputi cawan petri,
bunsen, jarum ose, dan seal.

2. Cawan petri dipanaskan dengan api bunsen

untuk menghindari kontaminasi, kemudian
jarum ose dipanaskan dengan api bunsen untuk
mensterilkan alat dan menghindari kontaminasi.

12
3. Kapas penutup tabung reaksi dibuka dengan jari
kelingking, kemudian tabung reaksi dipanaskan
dengan api bunsen untuk menghindari
kontaminasi.

4. Jarum ose dicelupkan ke dalam larutan sampel

tanah untuk mengambil suspensi bakteri atau
jamur.

5. Cawan petri dibuka dengan hati-hati, kemudian

suspensi mikroba dimasukkan ke dalam cawan
petri.

6. Jarum ose digoreskan membentuk goresan

sinambung pada permukaan agar atau media
PDA/NA secara cepat dan dengan perasaan
untuk menghindari kerusakan.

13
 7. Cawan petri dipanaskan kembali untuk
menghindari kontaminasi, kemudian cawan
petri ditutup rapat menggunakan seal supaya
tetap steril atau terjaga dari udara luar yang
dapat menyebabkan kontaminasi.

8. Cawan petri diberi label nama dan ukuran

larutan pengencer yang digunakan (10-3/10-4 dan
10-8/10-9).

B. Pembahasan

Memisahkan atau memindahkan suatu mikroba tertentu dari habitat

alaminya dan membiakkannya pada medium buatan untuk memperoleh kultur
murni disebut dengan isolasi mikroba. Kultur murni sangat bermanfaat dalam
mikrobiologi karena dapat memperkirakan dan mengidentifikasi mikroorganisme
serta menumbuhkannya sebagai biakan murni dalam medium buatan. Kultur
murni juga dikenal sebagai kultur yang sel-sel mikroorganismenya bersumber dari
pembelahan sel tunggal (Mikdarullah & Nugraha, 2017).
Prashar et al. (2014) menyatakan bahwa rhizosfer adalah area tanah kecil
yang dipengaruhi dan mengelilingi akar tanaman. Area tanah tersebut
menunjukkan aktivitas biologis dan kimia yang kuat sehingga umumnya memiliki
kandungan nutrisi yang tinggi dibandingkan dengan tanah curah. Rhizosfer terdiri
dari berbagai macam makro dan mikroorganisme, seperti bakteri, jamur, virus,

14
protozoa, alga, nematoda, dan mikroartropoda. Bakteri yang biasanya berada di
sekitar rhizosfer yang menguntungkan dan pemacu pertumbuhan tanaman (PGPR)
dikenal sebagai rhizobakteri.
Rhizobakteri pemacu pertumbuhan tanaman merupakan bakteri tanah yang
mobile atau hidup bebas dan bersifat agresif dalam mengolonisasi akar tanaman.
bakteri rhizosfer dapat meningkatkan pertumbuhan dan daya hasil atau
produktivitas tanaman apabila diaplikasikan pada benih dan tanaman
(Kumar et al., 2014)
. Bakteri rhizosfer umunya memproduksi metabolit tertentu yang dapat
memacu pertumbuhan tanaman secara langsung. Terdapat beberapa mekanisme
yang membuktikan bahwa bakteri rhizosfer sebagai PGPR yang menguntungkan
bagi tanaman inang, yaitu produksi zat pengatur tumbuh atau fitohormon seperti
asam indol asetat (IAA), fiksasi N2 asimbiotik, serta pelarutan fosfat anorganik
dan mineralisasi fosfat organik. Selain itu, bakteri rhizosfer juga dapat dijadikan
agen pengendali hayati karena memiliki sifat antagonisme terhadap
mikroorganisme penyebab penyakit atau patogen dengan menghasilkan senyawa
siderofor, sintesis antibiotik dan enzim degradatif tertentu, senyawa fungisida,
serta mekanisme persaingan dengan mikroorganisme patogen
(Majeed et al., 2015)
.
Teknik isolasi bakteri rhizosfer pada praktikum acara empat ini dimulai
dengan tahap preparasi suspensi dan tahap pengenceran. Menurut Zunairoh et al.
(2019), pengambilan sampel yang berasal baik dari bahan alam maupun suatu
produk tergantung pada tingkat cemaran mikroorganisme yang terdapat pada
sampel tersebut. Pada umumnya, suatu sampel mengandung banyak mikroba
sehingga teknik pengenceran harus dilakukan. Pengenceran juga bertujuan untuk
mereduksi jumlah mikroba yang tersuspensi di dalam cairan.
Tahap pengenceran dimulai dengan menyiapkan bahan dan alat yang
dibutuhkan terlebih dahulu. Bahan yang digunakan meliputi sampel tanah,
akuades, dan alkohol. Sementara itu, alat yang digunakan meliputi tabung reaksi,
tip, mikropipet, rak tabung reaksi, bunsen, kapas, dan vortex. Mikropipet diatur
volumenya sebesar 1000 µl. Tip biru kemudian dimasukkan pada tempat tip di
ujung mikropipet dengan ditekan secara perlahan. Setelah itu, larutan sampel

15
tanah diambil menggunakan mikropipet dengan menekan sebagian tombol
penekan. Tombol penekan dilepaskan untuk menarik larutan sampel tanah ke
dalam tip. Larutan sampel tanah kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi
pertama yang berisi 5 ml akuades dengan menekan tombol penekan secara penuh.
Setelah itu, mulut tabung reaksi kemudian dipanaskan dengan api bunsen dan
ditutup dengan kapas kembali. Pengenceran pertama dilakukan dengan
menggunakan vortex selama 15 detik untuk menghomogenkan larutan.
Pengenceran kedua diambil dari larutan pengenceran pertama dan seterusnya
hingga tabung reaksi kesembilan. Pengenceran dilakukan dengan menggunakan
vortex selama 15 detik agar homogen. Pengenceran 3 dan 4 digunakan untuk
media PDA, sedangkan pengenceran ke 8 dan 9 untuk media NA.
Teknik isolasi dengan metode spread bertujuan merupakan teknik
penanaman mikroba dengan menyebarkan suspensi bakteri di permukaan agar.
Metode spread atau agar sebar dimulai dengan mempersiapkan bahan dan alat
yang diperlukan. Cawan petri yang berisi media agar yang telah padat kemudian
dipanaskan terlebih dahulu dengan api bunsen secara memutar dan cawan dalam
keadaan tertutup. Penggunaan larutan pengenceran dibedakan, yaitu larutan induk
pengenceran 3 dan 4 digunakan untuk media PDA serta larutan pengenceran ke 8
dan 9 untuk media NA. Setelah itu, larutan diambil sebanyak 0,1 ml dari tabung
reaksi menggunakan mikropipet dan diteteskan di atas permukaan agar media
yang telah memadat. Larutan induk disebarkan dengan menggunakan batang
Drigalsky yang digoreskan pada permukaan media NA untuk meratakan tetesan.
Menurut Prasetya & Dewi (2016), batang Drigalsky harus disterilkan
terlebih dahulu setiap akan meratakan larutan suspensi dengan dicelupkan ke
dalam alkohol, kemudian dibakar di atas api bunsen dan diangin-anginkan selama
beberapa detik sampai batang Drigalsky tidak terlalu panas. Penyebaran larutan
pengenceran lebih efektif apabila cawan petri diputar. Setelah disebarkan, cawan
petri kemudian ditutup dengan menggunakan seal untuk menghindari kontaminasi
mikroba dari luar.
Teknik penanaman dengan metode pour plate membutuhkan agar yang
belum padat yang dituang berbarengan dengan suspensi bakteri ke dalam cawan

16
petri. Metode agar tuang bertujuan untuk menyebarkan sel-sel bakteri secara
menyeluruh baik pada permukaan agar ataupun terendam di dalam agar. Metode
pour plate atau agar tuang menggunakan larutan pengencer 3 dan 4 untuk media
PDA, sedangkan larutan pengencer 8 dan 9 untuk media NA. Setelah alat dan
bahan disiapkan, cawan petri dipanaskan dengan api bunsen secara memutar dan
merata untuk menghindari kontaminasi. Setelah itu, larutan suspensi mikroba
diambil menggunakan mikropipet, kemudian dimasukkan ke dalam cawan petri
dan digoyangkan untuk meratakan larutan. Media NA atau PDA selanjutnya
dimasukkan ke dalam cawan petri dengan perlahan dan hati-hati, kemudian cawan
petri digoyangkan untuk meratakan media dengan larutan suspensi. Cawan petri
kemudian dipanaskan kembali dengan api bunsen untuk menghindari
kontaminasi. Setelah itu, cawan petri ditutup dengan menggunakan seal untuk
menghindari kontaminasi mikroba dari luar.
Teknik penanaman metode streak merupakan teknik isolasi yang bertujuan
memindahkan atau membiakkan suatu sel bakteri ke dalam media baru. Metode
streak hanya dilakukan apabila koloni campuran telah tumbuh di media hasil
teknik isolasi pour plate dan spread plate sehingga koloni yang akan tumbuh di
media baru benar-benar satu jenis mikroba. Metode penanaman streak dimulai
dengan memanaskan cawan petri dan jarum ose menggunakan api bunsen terlebih
dahulu untuk menghindari kontaminasi. Setelah itu, kapas penutup tabung reaksi
dibuka dengan jari kelingking, kemudian tabung reaksi dipanaskan dengan api
bunsen untuk menghindari kontaminasi. Jarum ose kemudian dicelupkan ke dalam
larutan sampel tanah untuk mengambil suspensi bakteri atau jamur. Cawan petri
dibuka dengan hati-hati, kemudian suspensi mikroba dimasukkan ke dalam cawan
petri. Jarum ose kemudian digoreskan membentuk goresan sinambung pada
permukaan agar atau media PDA atau NA secara cepat dan dengan perasaan
untuk menghindari kerusakan. Setelah itu, cawan petri dipanaskan kembali untuk
menghindari kontaminasi, kemudian cawan petri ditutup rapat menggunakan seal
supaya tetap steril atau terjaga dari udara luar yang dapat menyebabkan
kontaminasi. Cawan petri kemudian diberi label nama dan ukuran larutan
pengencer yang digunakan (10-3/10-4 dan 10-8/10-9).

17
 V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Kesimpulan yang diperoleh dari praktikum acara empat ini adalah sebagai
berikut:
1. Isolasi bakteri adalah suatu teknik memindahkan bakteri dari lingkungan
alaminya dan menumbuhkan di suatu media buatan sehingga biakan murni
dapat didapatkan. Biakan murni yang tumbuh tersebut nantinya akan
digunakan untuk identifikasi morfologi koloni mikroba.
2. Terdapat tahapan yang harus dilewati sebelum tahap isolasi bakteri, yaitu
teknik propagasi atau preparasi suspensi dan teknik pengenceran. Teknik
preparasi suspensi bertujuan untuk melarutkan atau melepaskan
mikroorganisme dari substratnya ke dalam air, sedangkan teknik pengenceran
bertujuan untuk memperoleh kuantitas bakteri dalam jumlah yang bisa
dihitung. Teknik penanaman terdiri dari tiga metode, yaitu metode streak, agar
tuang atau pour plate, serta agar sebar atau spread plate.

B. Saran

Saran untuk praktikum periode selanjutnya adalah sebaiknya praktikan lebih

tertib selama melakukan kegiatan praktikum di laboratorium untuk mencegah
kecelakaan kerja.

18
 DAFTAR PUSTAKA

Achmad, F. 2019. Produksi Hormon IAA (Indole Acetic Acid) Isolat

BakteriRhizosfer dari Beberapa Tegakan Hutan Rakyat. Skripsi. Fakultas
Kehutanan, Universitas Hasanuddin, Makassar

Hafsan, H. 2014. Mikrobiologi Analitik. Makassar: Alauddin University Press.

Jufri, R. F. 2020. Microbial isolation. Journal La Lifesci, 1(1): 18-23.

Khairani., Aini, F., & Riany, H. 2019. Karakterisasi dan identifikasi

bakteri rizosfer tanaman sawit jambi. Al-Kauniyah: Jurnal Biologi,
12(2): 198-206.

Kumar, A., Maurya, B. R., & Raghuwanshi, R. 2014. Isolation and characterization of
PGPR and their effect on growth, yield and nutrient content in wheat
(Triticum aestivum L.). Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, 3(4):
121–128.

Lestari, P. B., & Hartati, T. W. 2017. Mikrobiologi Berbasis Inkuiry. Malang: Gunung
Samudera.

Majeed, A., Abbasi, M. K., Hameed, S., Imran, A., & Rahim, N. 2015. Isolation and
characterization of plant growth-promoting rhizobacteria from wheat
rhizosphere and their effect on plant growth promotion. Frontiers in
Microbiology, 6: 1–10.

Mikdarullah, M., & Nugraha, A. 2017. Teknik isolasi bakteri proteolitik dari
sumber air panas Ciwidey, Bandung. Buletin Teknik Litkayasa
Akuakultur, 15(1): 11-14.

Prasetya, A. W., & Dewi, L. 2016. Deteksi kandungan rhodamin b pada saus serta
cemaran boraks dan bakteri Salmonella sp. pada cilok keliling
Salatiga. Agric, 28(1): 69-78.

Prashar, P., Kapoor, N., & Sachdeva, S. 2014. Rhizosphere: Its structure, bacterial
diversity and significance. Reviews in Environmental Science and
Biotechnology, 13(1): 63–77.

Sabbathini. G. C., Pujiyanto, S., Wijanarka., & Lisdiyanti, P. 2017. Isolasi dan
identifikasi bakteri genus Sphingomonas dari daun Padi (Oryza sativa) di Area
Persawahan Cibinong. Jurnal Biologi, 6(1): 59-64.

Zunairoh, A., Syauqi, A., & Rahayu, T. 2019. Isolasi dan analisis koloni bakteri
rizosfer untuk agen pengendali penyakit layu Fusarium pada tanaman stroberi
(Fragaria sp). Biosaintropis, 5(1): 45-52.

19
Widawati, S. 2015. Uji bakteri simbiotik dan nonsimbiotik pelarutan Ca vs. P dan efek
inokulasi bakteri pada anakan turi (Sesbania grandiflora L. Pers.). Jurnal
Biologi Indonesia, 1192): 295-307.

20
 LAMPIRAN

Lampiran 4.1 ACC Praktikum Acara IV

21
22
23
24
25
26
27
Lampiran 4.2 Dokumentasi Praktikum Acara IV

Sterilisasi Jarum Ose Penutupan Cawan Petri dengan

Seal

28