Aula 2 - Meios de Cultura

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Classificação dos Meios de Cultura

Artificiais
Meios de cultura artificiais
• Classificação dos meios de cultura:

Meios de Cultura

Classificação de
Procedências Composição
Estado físico acordo com o
dos constituintes química
objetivo funcional

Estado sólido Naturais Simples


Meios de transporte e conservação
Meio de crescimento ou isolamento
Estado semi-
Artificiais
Artificiais Especiais Meios de enriquecimento
sólido Meios diferenciais
Meios seletivos
Meios para provas de identificação
líquido
Meios para testes de sensibilidade antimicrobiana
Meios de cultura artificiais
• Classificação de acordo com o estado físico:
• Meios líquidos ou caldos:
• Não tem agente solidificante: nutrientes dissolvidos em
solução aquosa.
• Meios Sólidos Meio solido >> Ágar-ágas
• Adição de uma substância solidificante (ágar-ágar) em (polímero de galactose)
determinada quantidade (1 a 2%)
• Superfície endurecida – permite formação de colônias
• Meios semi-sólido
• Adição de agente solidificante (ágar-ágar) em menor
quantidade (0,5 a 0,8%)
Meios de cultura artificiais
• Classificação de acordo com a procedência dos
constituintes:
• Naturais (Complexos):
• Meios de cultura sem uma composição química definida,
contêm geralmente hidrolisados de proteínas, extrato de
carne ou de leveduras, sangue, açúcar, aminoácidos ou
vitaminas e etc.
• Usados para microrganismos menos exigentes

• Artificiais (ou quimicamente definidos):


• Meio com composição química definida usados para
cultivar microrganismos mais específicos ou exigentes
Meios de cultura artificiais
• Meios de cultura de acordo com o objetivo funcional:
• Meios de transporte e conservação:
• Ágar Cary Blair – transporte de material fecal

• Salina tamponada – transporte de material fecal Meio Ágar Cary


Blair
• Meio Stuart – transporte de diversos materiais

• Ágar Nutriente

Meio salina tamponada


Meio Stuart
Meios de cultura artificiais
• Meios de cultura de acordo com o objetivo funcional:
• Meios de crescimento, isolamento ou manutenção:
• Dá viabilidade, mantendo as características (conservando) dos microrganismos no
laboratório de microbiologia.
• Ágar Nutriente • Ágar BHI
• Ágar Chocolate
• Ágar CLED
• Ágar Thayer Martin chocolate
• Ágar Sangue • Ágar tetrationato
• Ágar MacConkey • Ágar tioglicolato c/s indicador
• Ágar Salmonela-Shigella • Ágar Lowenstein Jensen
• Ágar batata Dextrose
• Ágar CHROMagar
• Ágar Sabouraud
Meios de Cultura
• Meios de cultura de acordo com o objetivo funcional:
• Meios para provas de identificação:
• Ágar citrato Simmons • Ágar Esculina
• Ágar EPM • Ágar Fenilalanina
• Ágar MILI • Ágar CTA

• Ágar Bilis-esculina • Caldo Triptona


• Ágar TSI
• Ágar Sangue – Teste de CAMP

• Ágar DNAse
Meios de Cultura
• Meios de cultura de acordo com o
objetivo funcional:
• Meios para testes de sensibilidade aos
antibióticos:
• Ágar Mueller Hinton
• Meio utilizado para a realização do
teste de avaliação da resistência aos
antimicrobianos pelos métodos de
difusão em disco e E-test para
enterobactérias, não
fermentadores, Staphylococcus, Enteroc
occus sp.
Antibiograma
Meios de Cultura
• Classificação de acordo com o objetivo funcional
• Meios de enriquecimento:
• Proporcionam nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos
exigentes e fastidiosos.

• Esses meios tem a propriedade de estimular o crescimento de


determinados microrganismos

Ex: Ágar Chocolate (contém sague de ovelha)


Ex: Caldo BHI (Infusão de cérebro e coração
Meios de Cultura
• Classificação de acordo com o objetivo funcional
• Meios diferenciais e Seletivos
São meios que permitem a distinção entre dois ou mais tipos de bactérias pela
simples observação das características apresentadas pelas colônias que nele se
desenvolvem e permitem apenas o crescimento de um tipo de bactéria.
• Meio MacConkey
• Lactose – formam colônias vermelhas Ácidos biliares e cristal violeta – inibe
bactérias G+.
• Não Lactose – formam colônias brancas
Cresce apenas BG-

Diferencial Seletivo
Meio diferencial e seletivo
Ágar MacConkey
Diferencial: difere bactérias Seletivo: Permite apenas o crescimento
fermentadoras de lactose das de bactérias Gram negativas.
não fermentadoras de lactose. Inibe o crescimento das Gram positivas

Este meio contém vermelho-neutro como indicador de


pH e, como resultado, as colônias que metabolizam As bactérias lactose negativas (Salmonella,
lactose aparecem em vermelho a partir da produção de Pseudomonas e Shigella) não consegue
ácidos mistos. utilizar a lactose, e utilizam a peptona.
• As bactérias produtoras de ácidos fortes, • Isto forma amónia, que eleva o pH do ágar,
como Escherichia coli, formam colônias vermelho- levando à formação de colónias
escuro. brancas/sem cor)
• As bactérias produtoras de ácidos fracos formam
colônias rosa-pálido ou colônias que são claras na
periferia e têm o centro rosado.
Meio diferencial e seletivo
Ágar EMB (Eosin Methylene Blue)
Colônias pretas
Colônias azuladas Colônias incolores ou cor
(reflexo verde metalizado)
âmbar transparente

Salmonella/Shigella

• O EMB contém corantes de eosina e azul de metileno que inibem as bactérias Gram-positivas e permite
o crescimento de bactérias Gram Negativas.
• Os corantes (eosina e azul de metileno) funcionam também como indicadores de diferenciação em
resposta à fermentação da lactose e/ou sacarose por micro-organismos (Difere LAC+ de LAC - ).

Interpretação: LAC + : azul/preto; LAC - : sem cor ou roxo claro.


Meio apenas diferencial
Ágar Sangue

• Meio Ágar Sangue – Diferencia bactérias que produzem:


• Hemolisina Sangue de carneiro
• Não produtoras de hemolisina
desfibrinado
Hemolisina - são exotoxinas produzidas por bactérias que provocam lise dos eritrócitos in vitro. Visualização da hemólise em
eritrócitos em placas de ágar facilita a categorização de algumas bactérias patogénicas como Streptococcus.
MEIOS DE CULTURA
• MEIO ÁGAR CHROMAGAR
• Meio seletivo e diferencial para espécies de Candida.
• Contêm substratos cromogênicos no meio, permitindo a detecção de diferentes espécies
de Candida pela cor das colônias.
PRINCIPAIS MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS E
SUAS APLICAÇÕES
• MEIO LÖWENSTEIN JENSEN
• Meio Seletivo
• A base do meio é constituída por ovos integrais, o que permite
amplo crescimento das micobactérias e o crescimento é
satisfatório para o teste de niacina (que é positivo para
Mycobacterium tuberculosis).

• Utilidade
• Isolamento primário das micobactérias.
• Cor original do meio: verde claro
• Positivo: Crescimento de colônias amarelas
• Negativo: ausência de crescimento.

Outro meio: MEIO BIFÁSICO: LÖWENSTEIN E MIDDLEBROOK


FIM

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