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ROTEIRO DE AULA PRÁTIA I
Universidade Cruzeiro do Sul- UNICSUL

Disciplina de Biologia Celular e Tecidual - Biomedicina
Profa. Graziela Batista
Normas do Relatório:
1)Preparado em Word, salvar e enviar como PDF:
a) tamanho = A4; orientação = retrato;
b) fonte da letra: Times New Roman;
c) tamanho da letra = 12;
d) margens: esquerda 3 cm, direita 2cm, superior 3cm, inferior 2cm;
e) parágrafo: justificado;
g) espaçamento entre linhas: 1,5cm;
f) paginação no canto superior direito;
g) mínimo de páginas: 3;
2)Apresentar capa com nome, campus, período, rgm, disciplina, título da atividade
(Relatório da Prática: Microscópia);
3)Apresentar o protocolo descrito abaixo.
4)Apresentar os resultados obtidos durante a observação das lâminas no
microscópio.
5)Responder as 07 questões apresentadas nesse documento, apresentando a
pergunta e a resposta;
6)Referenciar as fontes para respostas das questões com textos científicos ou
publicações em mídias confiáveis.
Critérios de avaliação:
1) Apresentação do relatório;
2) Organização da apresentação do resultados obtidos na aula;
3) Conteúdo de respostas do questionário;
4) Fonte de consultas descritas nas referências.
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CONHECENDO O MICROSCÓPIO ÒPTICO
PORÇÃO MECÂNICA
1. Pé ou base – serve de apoio para os demais componentes do microscópio.
2. Coluna ou Braço – fixo à base, serve de suporte a outros elementos.
3. Mesa ou Platina – onde se fixa a amostra a observar; apresenta uma janela por
onde passam os raios luminosos e também parafusos dentados que permitem
deslocar a amostra.
4. Tubo ou canhão – suporta a ocular na extremidade superior.
5. Revólver ou Óptico – peça giratória portadora de objetivas de diferentes
ampliações.
6. Parafuso macrométrico – a sua rotação é responsável por movimentos verticais
da platina, rápidos e de grande amplitude.
7. Parafuso micrométrico – a sua rotação é responsável por movimentos verticais
da platina, lentos e de pequena amplitude, permitem aperfeiçoar a focalização.
8. Comando de Charriot - movimenta a lâmina de um lado para o outro, permitindo
uma análise da lâmina como um todo.
9. Presilha – prende o material a ser observado na mesa
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PORÇÃO ÓPTICA
1. Condensador – conjunto de duas ou mais lentes convergentes que orientam e
espalham regularmente a luz emitida pela fonte luminosa sobre o campo de visão do
microscópio.
2. Diafragma – é constituído por palhetas que podem ser aproximadas ou afastadas
do centro através de uma alavanca ou parafuso, permitindo regular a intensidade da
luz que incide no campo de visão do microscópio.
3. Objetivas – permitem ampliar a imagem do objeto 10x, 40x, 50x, 90x ou 100x.
As objetivas de 10x, 40x e 50x são designadas objetivas secas pois entre a amostra
e a objetiva existe somente ar.
As objetivas de 90x e 100x são designadas objetivas de imersão, uma vez que, para
utilizá-las, é necessário colocar uma gota de óleo de imersão entre elas e a amostra,
o qual, por ter um índice de refração semelhante ao do vidro, evita o desvio do feixe
luminoso para fora da objetiva.
4. Oculares – sistema de lentes que permite ampliar a imagem real fornecida pela
objetiva, formando uma imagem virtual que se situa a aproximadamente 25 cm dos
olhos do observador.
As oculares mais utilizadas são as de ampliação 10x, mas nos microscópios
binoculares também existem oculares de 12,5x, 8x e 6x.
5. Fonte luminosa – a mais utilizada atualmente é a luz artificial, fornecida por uma
lâmpada de tungstênio ou de halogênio, incluída no aparelho juntamente com um
interruptor com reostato, que permite regular a intensidade da luz emitida.
LENTES OBJETIVAS
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PROCEDIMENTOS BÁSICOS PARA A CORRETA OBSERVAÇÃO
MICROSCÓPICA DE UMA PREPARAÇÃO:
1. Ligar a fonte luminosa.
2. Colocar a lâmina com a preparação sobre a platina.
3. Com o auxílio do condensador e do diafragma obter uma boa iluminação.
4. Olhando pelo lado externo, girar o parafuso macrométrico de forma a aproximar a

objetiva de 10x o mais perto possível da preparação.
5. Olhando pela ocular, girar o mesmo parafuso no sentido inverso até obter uma
imagem nítida da preparação.
6. A seguir fazer o foco com a objetiva de 40x: girar o tambor colocando a objetiva
de 40x na direção da preparação e focalizar com o auxílio do parafuso micrométrico.
7. Para uma ampliação maior, (objetiva de 100x), girar o canhão apenas o suficiente
para afastar a objetiva de 40x da preparação. Colocar uma gota de óleo de imersão
sobre a preparação citológica. Em seguida, girar o tambor de forma que a objetiva
de 100x fique posicionada sobre a preparação. Girar o parafuso micrométrico até
obter o melhor foco do material.
ATENÇÃO! Evitar o contato do óleo de imersão com as objetivas de 10 e 40x, pois

este pode danificá-las.
Limpar o óleo da lente assim que terminar a observação para que este não seque e
danifique lente.
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EXPERIMENTO I
Observação de células humanas em esfregaço de mucosa bucal
INTRODUÇÃO:
A mucosa bucal reveste toda a cavidade bucal. Apresenta células epiteliais
pavimentosas estratificadas e não queratinizadas, com formato irregular, núcleo
central e esférico, citoplasma granuloso e bordos dobrados, quando observadas em
lâminas histológicas (tais células não têm parede celular rígida, típica de células
vegetais). A membrana plasmática, por ser muito fina, não é observada com
microscopia óptica. Porém, evidenciamos a sua presença através do limite celular.
Essas células, além de serem pequenas, não apresentam contraste entre os

seus constituintes, por isso é necessária a utilização de corante. Sendo assim, de
acordo com os constituintes a observar, deve-se empregar o corante certo. Para esta
atividade, será utilizado o azul de metileno, um corante básico que atua
preferencialmente sobre o núcleo, corando-o de azul.
OBJETIVOS:
Preparar lâmina “a fresco” das células da mucosa bucal com e sem coloração.
MATERIAIS:
 Palitos de madeira ou Swab;

 Lâmina e lamínula;
 Papel de filtro;
 Conta-gotas ou pipeta de Pasteur;
 Cuba de coloração ou Becker para colocar a lâmina;
 Pinça;
 Pisete com água;
 Corante: azul de metileno 0,5%;
 Álcool 70%;
 Solução salina 2%;
 Microscópio.
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PROCEDIMENTO:
1) Raspar a mucosa bucal com o auxílio de um palito de madeira ou Swab.

2) Fazer um esfregaço espalhando sobre uma lâmina de vidro o material raspado
da bochecha. OBS: FAZER DUAS LÂMINAS.
3) Fixar o material mergulhando a lâmina com o esfregaço em álcool 70%.
Aguardar 2 minutos.
4) Retirar a lâmina do álcool e escorrer o excesso de líquido em um pedaço de
papel filtro.
5) Colocar a lâmina sobre a bancada e pingar, sobre a região do esfregaço, uma
gota de azul de metileno. Aguardar 2 minutos. OBS: CORAR APENAS UMA
LÂMINA.
6) Com o auxílio de uma pisseta, remover o excesso de azul de metileno,
jogando sobre a lâmina um jato de água. OBS: APENAS DA LÂMINA
CORADA.
7) Pingar uma gota de água sobre a região do esfregaço. Cobrir a preparação
com uma lamínula. OBS: NAS DUAS LÂMINAS.
8) Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamínula com a pinça.
9) Colocar a preparação dentro de um pedaço de papel filtro dobrado. Pressionar
levemente para retirar o excesso de líquido.
10) Observar ao microscópio o material, usando a objetiva de 10x e em seguida
a de 40x. Girar vagarosamente o micrométrico para obter o melhor foco. Fazer
um desenho das células observadas.
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RESULTADOS
Anotar os resultados observados.
Desenhe as estruturas celulares

observadas no microscópio.
Aumento de 100X – Sem corante

Aumento de 400X – Sem corante

Aumento de 100X – Com corante

Aumento de 400X – Com corante
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RESPONDA AS SEGUINTES QUESTÕES
1) Quais as estruturas observadas nas células coradas e não coradas?

2) Sugerir uma explicação para o tratamento do esfregaço com álcool 70%.
3) Qual a função do azul de metileno?
4) Que estruturas você pode observar nas células da bochecha?
5) Foi possível observar a membrana plasmática? O que é o limite celular?
6) Qual a forma do núcleo e que posição ocupa nessas células?
7) Compare das estruturas internas de uma célula animal (eucariótica) com as
de uma bactéria (procariótica). Faça uma lista das estruturas comuns e não
comuns aos dois tipos de células.
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ROTEIRO DE AULA PRÁTIA I

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4. Olhando pelo lado externo, girar o parafuso macrométrico de forma a aproximar a

ATENÇÃO! Evitar o contato do óleo de imersão com as objetivas de 10 e 40x, pois

Essas células, além de serem pequenas, não apresentam contraste entre os

 Palitos de madeira ou Swab;

1) Raspar a mucosa bucal com o auxílio de um palito de madeira ou Swab.

Desenhe as estruturas celulares

Desenhe as estruturas celulares

Desenhe as estruturas celulares

Desenhe as estruturas celulares

1) Quais as estruturas observadas nas células coradas e não coradas?

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