Adn Electroforeza
Adn Electroforeza
Adn Electroforeza
ADN si ARN
Electroforeza pe gel de
agaroza
In vederea detectarii
mutatiilor se utilizeaza
metode diferite
Pentru a detecta mutatiile
cunoscute se folosesc
urmatoarele metode: PCR si
separarea pe baza marimii
fragmentului de ADN; PCR
si digestia cu enzime de
restrictie sau metoda
amplificarii cu alele
specifice.
Secventializarea ADN
Secventializarea ADN
reprezinta identificarea
tipului, felului si succesiunii
nucleotidelor dintr-un
fragment ADN de analizat
In momentul de fata s-au
dezvoltat tehnici de
secventiere automate: fie
chimic prin metoda MaxamGilbert, fie enzimatic prin
metoda Sanger
Cromatografia de
schimb ionic se
utilizeaza pentru
extractia rapida de ADN
si ARN din diverse
probe biologice, in
cantitati suficiente
Electroforeza fragmentelor de
ADN este o metoda analitica
folosita pentru separarea
acestor fragmente in functie de
marimea lor
In solutie libera, la pH neutru
sau alcalin, acizii nucleici nu pot
fi separati
Pentru separarea lor se se
folosesc matrici de gel de
agaroza sau poliacrilamida
Fragmentele se separa
sub forma unor benzi
electroforetice
Mobilitatea unui
fragment de ADN este
invers proportionala cu
masa moleculara, fiind
de asemenea
influentata de o serie
de factori
Tampoanele de
electroforeza au rolul de a
mentine un pH si o putere
ionica constante, la valori
optime pentru separare
Agentii denaturanti(ureea,
formamida, formaldehida)
indeplinesc functia de
combatere a fenomenelor
de agregare si adsorbtie a
moleculelor de acizi nucleici
pe matricea de gel, dar si
functia de inlaturare a
diferentelor conformationale
Determinarea marimii
fragmentelor se face
uzual prin compararea
cu DNA-ladders ce
contin fragmente liniare
de ADN, de lungimi
cunoscute
De aici sesizam cu
usurinta importanta
functie a utilizarii
tehnologiei ADN in
prognosticare,
diagnosticare,
monitorizare si terapie