CURS 1 INTRODUCERE

Biochimia este o tiin modern, cu caracter complex, care are drept material de studiu materia vie i fenomenele specifice acesteia, din punct de vedere al organizrii, compoziiei i structurii biomoleculelor componente, precum i al proceselor complexe de transformare a acestora, n corelaie cu efectele energetice asociate reaciilor metabolice. Cunoaterea substratului biochimic al materiei vii, i a mecanismelor reaciilor biochimice ofer cheia nelegerii tiinifice a fenomenelor particulare lumii vii cum ar fi: procesele fiziologice normale sau patologice, formarea speciilor, variabilitatea, ereditatea, reproductibilitatea, adaptabilitatea etc., i proiectarea posibilitilor de intervenie i de aplicare a unor alternative optime. Datorit interesului suscitat, dar mai ales a posibilitilor fizico-chimice moderne de investigare, biochimia s-a dezvoltat n ultimii ani foarte mult, fcnd posibil evaluarea structurii moleculare a vieii, deschiznd pori spre domenii noi de cercetare, cum ar fi: secvenionarea ADN, obinerea unor noi combinaii genetice, elucidarea mecanismului de control al metabolismului i al proceselor de transport prin membranele celulare etc.

Caracteristici biochimice ale materiei vii

Materia vie este constituit din aceleai elemente chimice care alctuiesc materia lumii minerale, organizate n structuri care se supun acelorai legi, fizice i chimice, care guverneaz lumea nevie. n constituia organismele vii, vegetale i animale, sunt reprezentate un numr de aproximativ 60 din cele peste o sut de elemente chimice cunoscute. Dintre acestea 12 elemente chimice (99,9%) se regsesc n structura tuturor celulelor vii i sunt denumite macrobioelemente: C, H, O, N, P, S, Cl, Si, Mg, K, Na, Ca. Un numr de patru elemente chimice: C, O, H, N, reprezentnd peste 99% din masa total a organismelor vii se gsesc n proporii diferite n plante, n animale i n organismul uman. n proporii mai reduse, (aproximativ 1%), dar manifestnd un important rol biocatalitic n procesele metabolice, se gsesc o serie de microbioelementele (oligobioelemente): B, V, Mn, Co, Ni, Mo, Cu, Zn etc. De ordinul milionimilor de procente au fost identificate n cenua plantelor i ultrabiomicroelemente: Au, Ag, Hg, Pb, Ge etc. Dei este constituit pornind de la molecule mici, cu compoziie elemental simpl, (H2O, CO2, NH3, aminoacizi, monoglucide, lipide simple etc.), materia vie este total diferit prin proprieti de cea mineral, caracterizndu-se printr-un nalt grad de complexitate i organizare, ntr-o mare varietate de forme, rezultat al procesului de evoluie ndelungat. Cu toat varietatea i complexitatea chimic a organismelor, materia vie este organizat dup un principiu unitar. Componenii celulari nu alctuiesc o serie continu, mrimea i complexitatea biomoleculelor nu variaz treptat. Majoritatea constituenilor celulari sunt compui macromoleculari i doar un numr relativ redus de biomolecule au dimensiuni mici, n timp ce speciile moleculare cu dimensiuni intermediare sunt practic absente. Aceast discontinuitate ntre mrimea i gradul de complexitate a celor dou tipuri de biomolecule este rezultatul mijloacelor pe care celulele le utilizeaz pentru edificarea lor. ntr-o prim

etap, printr-o mare diversitate de reacii biochimice, organismele vii sintetizeaz biomolecule primordiale: cteva tipuri de monozaharide, 20 de aminoacizi, opt nucleotide, civa acizi grai i alcooli. A doua etap a chimiei celulare const n policondensarea moleculelor primordiale sub form de macromolecule: proteine, acizi nucleici, polizaharide, lipide complexe. Prin repetarea aceluiai gen de biosintez, cu maximum de economie de materiale i energie, din molecule mici se formeaz treptat macromolecule, proces care decurge cu randament maxim i fr formare de compui intermediari. Componenii celulari, n afar de dimensiuni, se deosebesc i prin caracterul lor specific sau nespecific. Unii dintre ei, cum ar fi moleculele mici, biomoleculele promordiale: monozaharidele, aminoacizii, nucleotidele, acizii grai sunt identici n toate organismele vii, vegetale i animale, alii prezint specificitate de specie, de organ i mai ales de individ. Constituenii celulari specifici sunt macromoleculele proteice i acizii nucleici, care pot exista ntr-o varietate practic infinit, dar fiecare celul, fiecare organism cuprinde un set distinct de proteine i de acizi nucleici. Diversitatea structural a celor 5 milioane de specii de proteine i un numr corespunztor de specii acizi nucleici, se realizeaz prin mijloace simple, de combinarea a unui numr redus de specii moleculare, respectiv, 20 de aminoacizi pentru proteine i cte patru tipuri de nucleotide pentru acizii nucleici. Prin legarea unui numr mare al acestor uniti n succesiuni variate se poate obine un numr infinit de combinaii. O anumit secven de aminoacizi sau de nucleotide conine o cantitate de informaie care confer proteinelor i acizilor nucleici caracterul de molecule informaionale. n contrast cu multitudinea posibilitilor de legare a aminoacizilor n proteine sau a nucleotidelor n acizi nucleici, ntr-un organism dat nu se realizeaz dect succesiuni care i sunt proprii, pentru care primete informaie de la predecesori, prin intermediul acizilor dezoxiribonucleici ADN. Chintesena materiei vii o reprezint capacitatea de autoreplicare de la o generaie la alta. Structurile celulare sunt edificii complexe, cu entropii reduse, care se dezagreg i se refac continuu; n organismele vegetale i animale adulte cele dou procese sunt echilibrate, astfel nct masa lor rmne constant. Refacerea structurilor celulare decurge, parial, pe seama produilor de degradare a componenilor proprii, iar ceea ce se pierde este completat prin elementele preluate din mediul nconjurtor, ca substane nutritive. ntreinerea morfologiei proprii, creterea i dezvoltarea organismului implic i un consum permanent de energie. Plantele i cteva specii de microorganisme nmagazineaz prin fotosintez energia solar n glucide, lipide, proteine, care alctuiesc hrana oamenilor sau a animalelor, consumate la rndul lor de ctre om. De fapt, organismele animale iau din mediul nconjurtor o form de energie de calitate superioar pe care o utilizeaz pentru ndeplinirea tuturor funciilor vitale i elibereaz n mediu o cantitate de energie de calitate inferioar (cldur). Schimburile de materie i de energie dintre organism i mediu, care definesc nsi viaa, implic desfurarea unui numr mare de reacii chimice, care alctuiesc metabolismul, cu dou laturi principale: catabolismul (degradarea constituenilor celulari la compui mai simpli) implic procese exergonice, n care se produce energie; anabolismul (edificare i refacerea constituenilor celulari) decurge prin reacii endergonice, n care se consum energia mobilizat n procesele catabolice. Organismele vii sunt deci sisteme deschise, aflate ntr-un permanent schimb de energie i materie cu mediul nconjurtor, constituind sediul unui triplu flux, de materie, de energie i de informaie. La baza activitii chimice celulare stau biocatalizatorii enzime, care catalizeaz multitudinea de reacii care alctuiesc metabolismul. Enzimele sunt proteine care se

caracterizeaz printr-o activitate catalitic mult superioar catalizatorilor chimici i o nalt specificitate. Reaciile catalitice care alctuiesc metabolismul intermediar nu sunt independente, ele alctuiesc secvene liniare sau secvene ramificate sau cicluri, att anabolice ct i catabolice. Dei termenii extremi ai acestor secvene sunt identici, procesele de biosintez nu au loc prin inversarea reaciilor de degradare, secvena anabolic nu este o simpl parcurgere n sens invers a celei catabolice, cele dou procese se difereniaz prin una sau mai multe etape. Reaciile distincte ale celor dou secvene opuse sunt adesea acele reacii care au efectele energetice cele mai pronunate, respectiv sunt puternic endergonice sau exergonice. Un alt aspect important al metabolismului este coerena funcional a diverselor reacii biochimice. Metabolismul nu este o sum de reacii, ci este alctuit din sisteme de reacii intercorelate care asigur funcionarea optim a organismului. Cu toate c organismul este sediul unei activiti biochimice intense i variate, compoziia sa chimic calitativ i cantitativ este relativ constant. Homeostazia biologic (meninerea ntre anumite limite a parametrilor biochimici i fiziologici ai organismului) este rezultatul funcionrii unor mecanisme de autoreglare. La nivel celular se exercit un control primitiv metabolic prin accelerarea i ncetinirea reaciilor metabolice ca rezultat al modificrii activitii enzimelor existente n celule sau prin inducia i represia sintezei proteinelor cu rol biocatalitic. La nivelul organismului se adaug sistemul de control neuro-umoral, cu rol de coordonare a activitilor metabolice celulare.

Curs 2 2. GLUCIDE
Glucidele (glycos = dulce), cunoscute i sub numele de hidrai de carbon (formula general = Cn(H2O)m) sau zaharuri (sakkharom = substan dulce) sunt substane de origine predominant vegetal, i se formeaz n procesul de fotosintez care decurge n plantele verzi. Glucidele, componente principale ale hranei omului i animalelor, sunt compui foarte rspndii n natur, att sub form liber (pentoze, hexoze), ct i sub form de combinaii (glicozide, glicoproteide, glicolipide etc.). Proporia lor n regnul vegetal reprezint peste 50% din substana uscat a organismelor vegetale superioare. n organismele animale exist un numr mai mic de reprezentani ai glucidelor, aflate ntro proporie mai mic, comparativ cu protidele i lipidele. Pe lng importana lor ca substane de constituie i rezerv ale organismelor vii, ele ndeplinesc i funcii specifice, cum ar fi: sunt componente ale acizilor nucleici, componente ale unor enzime, glicoproteide i glicolipide din membranele celulare.

2.1. STRUCTUR CHIMIC. CLASIFICARE

Glucidele sunt substane ternare, constituite din atomi de: C, H, O (foarte rar N i S) cu funciuni chimice mixte: polihidroxialdehide (aldoze) i polihidroxicetone (cetoze). Glucidele se clasific n dou grupe mari: glucide simple, numite oze (monoglucidele sau monozaharide) i glucide compuse numite ozide. Clasificarea glucidelor poate fi redat astfel: trioze tetroze pentoze hexoze aldoze cetoze oligozide (oligoglucide) holozide OZIDE heterozide Ozele (glucide nehidrolizabile), se clasific n funcie de natura grupei carbonil n aldoze i cetoze, iar n funcie de numrul atomilor de carbon din molecul n: trioze, tetroze, pentoze, hexoze etc. Ozidele sunt clasa de glucide formate din mai multe resturi de molecule de monoglucide unite ntre ele prin legturi de tip glicozidic. n funcie de numrul resturilor de oze componente se clasific n oligoglucide (cu numr de pn la ase resturi de molecule de monoglucide) i poliglucide (numr mai mare de ase resturi de molecule de monoglucide). Ozidele se clasific la rndul lor n holozide (se transform prin hidroliz acid sau enzimatic n monoglucide) i heterozide (combinate cu alte substane de natur neglucidic, din care se pot pune n libertate prin hidroliz). poliozide (poligoglucide)

OZE

GLUCIDE

2.2. MONOGLUCIDE (OZE)

Monoglucidele sunt compui polihidroximonocarbonilici (polihidroxialdehide i polihidroxicetone) nescindabili n alte glucide prin hidroliz. Deoarece raportul dintre atomii de hidrogen i atomii de oxigen n glucide este de doi la unu (ca i n formula apei), s-a conferit glucidelor i denumirea de hidrai de carbon. Formula molecular este Cn(H2O)n, unde n 3.

2.2.1. Formule de reprezentare a structurii monoglucidelor

Pentru a stabili structura ozelor, s-au efectuat reacii chimice asupra glucozei, care au condus la concluzia c ozele au n general o caten neramificat, pe care sunt grefate grupe funcionale hidroxil i o grup funcional carbonil. Monoglucidele pot fi reprezentate prin mai multe formule de structur. Atomii de carbon se numeroteaz ncepnd cu cel purtator al grupei funcionale carbonil (sau cel vecin ei n cazul cetozelor). a) Formula aciclic (liniar sau carbonilic) este corespunztoare strii solide a glucidelor; ea pune n eviden natura grupelor funcionale coninute: hidroxil alcoolic, carbonil aldehidic sau cetonic:
H H HO H H
1 2 3

C C C C C

O OH H OH OH OH HO H H

1 H2C 2 3

OH O H OH OH OH

C C C C

4 5

4 5

6 H2C

6 H2C

D-glucoz (aldohexoz) D-fructoz (cetohexoz) (formule aciclice liniare sau carbonilice)

Aceast formul s-a constatat a nu fi ntotdeauna n concordan cu proprietile fizicochimice ale unor glucide. Astfel, glucoza nu prezint una dintre reaciile specifice grupei carbonil (recolorarea fuxinei decolorate cu dioxid de sulf). S-a constatat c una dintre grupele hidroxil (hidroxilul glicozidic) este mai reactiv i prezint proprieti deosebite. O alt abatere de la comportarea normal este variaia n timp a rotaiei specifice. Astfel, soluia proaspt preparat de -glucoz are rotaia specific 1120, dup un timp aceasta scznd la 52,50 (deoarece n soluie exist ambii monomeri i ). Aceste comportri specifice ale unor glucide au putut fi explicate dup ce s-a stabilit c moleculele pentozelor i hexozelor se prezint sub form ciclic, formnd semiacetali intramoleculari (reacie de adiie de ROH, specific compuilor carbonilici):
R CH O + HO R' R CH O R' OH

b) Formulele ciclice semiacetalice rezult n urma reaciei de semiacetalizare dintre grupa carbonil i grupa hidroxil de la C4 sau C5 de pe catena aldozei, respectiv C5 sau C6 de pe

catena cetozei. Prin analogie cu denumirile heterociclilor formai din patru atomi de carbon i un atom de oxigen (furan), respectiv cel format din cinci atomi de carbon i un atom de oxigen (piran), semiacetalii ciclici obinui sunt denumii: forma furanozic, respectiv forma piranozic.

furan
1 1

piran
1

H H HO H H

1 2 3

1
C OH OH O C H OH
HO H H HO H C H OH O
C

C C C C C

O OH H OH OH OH

H H
3

C
2

OH OH O H

HO H
3

C
2

H OH O H

H
2

2
C
C

C C
4

C C
4

H
3

3
H OH

HO H H

HO H

HO H
5

4 5

4
C

C
5

C
5

C C
6

5
C

C
6

OH OH

C
6

OH OH

H2C

6
OH
H2C OH

H2C

H2C

H2C

D-glucoza

-D-glucofuranoza -D-glucofuranoza -D-glucopiranoza -D-glucopiranoza

n acelai fel pot fi reprezentate i formulele ciclice semiacetalice ale cetohexozelor, de exemplu ale fructozei:
1 H2C 2 3

OH O H OH OH OH

C C C C

1 H2C 2 C

OH OH
HO

H2C
2 3

OH

1 H2C 2 C

OH OH
HO

1 H2C 2 C 3 C 4 C 5 C 6 H2C

OH

C C C C OH H OH O

HO H H

HO
H H

H
OH O

HO H H

HO H H

3 C 4 C 5 C 6 H2C

H OH O OH

HO H H

H OH O OH

4 5

4 5

4 5

C OH

H2C

H2C

H2C

D-fructoz

-D-fructofuranoz -D-fructofuranoz

-D-fructopiranoz -D-fructopiranoz

n aceste structuri grupa funcional carbonil este mascat, noua grup hidroxil aprut, denumit grup OH semiacetalic sau glicozidic este mai reactiv i are proprieti diferite fa de ale celorlalte grupe hidroxil alcoolice din molecul. Ozele la care hidroxilul glicozodic este situat la dreapta n formula ciclic semiacetalic se noteaz cu , iar cele la care acesta se afl la stnga, se noteaz cu . Izomerii care se deosebesc ntre ei prin poziia hidroxilului glicozidic se numesc anomeri, iar fenomenul poart numele de anomerie sau izomerie , . Anomeria a fost confirmat prin existena a dou tipuri de glicozide i . c) Formulele ciclice perspectivice (Haworth) ofer o mai bun reprezentare a lungimii legturii C-O semiacetalice, comparativ cu legtura de C-O dintre atomii de carbon din caten i grupele hidroxil, sau legtura C-C din caten. Se consider c atomii ciclului fac parte dintrun plan perpendicular pe planul hrtiei, fa de care grupele hidroxil (cu excepia celor de la

carbonul cinci din forma furanozic i carbonul ase din forma piranozic) aezate n dreapta catenei aciclice se vor lega la covalenele de sub planul ciclului, iar cele dispuse n stnga catenei se vor lega la covalenele plasate deasupra planului ciclului. Ambele forme se afl n soluie n echilibru. n produsele naturale, pentru aldohexoze predomin forma piranozic, iar pentru aldopentoze forma furanozic.
6 6

CH2OH H
4 5

CH2OH O H
1 4

O H OH H

OH
1

H OH OH
3 2

OH H OH

OH

H
3 2

OH

-D-glucopiranoz -D-glucopiranoz (formule perspectivice)

6 H2C 5 1 CH2OH

OH H

O OH
3 H

6 H2C 5

OH H

OH O OH
3 H 2

H 4 OH

OH

H 4 OH

CH2OH 1

-D-fructofuranoz -D-fructofuranoz (formule perspectivice)

n schemele 2.1 i 2.2 sunt redate formulele de reprezentare pentru glucoz i fructoz. d) Formulele conformaionale reprezint i mai riguros structura monoglucidelor (hexozelor), innd cont de faptul c ciclurile de ase atomi (piranozice) au o configuraie spaial, (asemntoare ciclohexanului) astfel nct s se evite deformarea unghiurilor de valen i deci apariia tensiunii de ciclu. Ciclurile piranozice care stau la baza structurii monoglucidelor hexoze se prezint n dou forme de izomeri de conformaie, unul de tip scaun (cel mai stabil) i unul de tip baie. Astfel, -glucoza i -glucoza pot exista sub forma a doi izomeri conformaionali tip scaun, conformaia stabil fiind aceea n care grupele hidroxil de la atomii de carbon 2, 3, 4, 6 au orientare ecuatorial.
H HO HO HO H H OH OH H H H O HO HO H OH H OH H HO H O

-glucoz (formule conformaionale tip scaun)

-glucoz

H C OH
2

H C OH
2

H2C OH HC OH
4 5

H C OH
3

O H
2

H
1

HO C H
4

H C OH
3

HO C H
4

CH2OH O H
2

H
4

H
1

OH
3

H C
5

H C OH
5

OH
3

OH OH

H C OH
6

H C
6

OH

OH

H2C OH

H2C OH

OH

-D-glucofuranoz (C1-C4)
1 2 3

-D-glucopiranoz (C1-C5)

C O C OH

HO C

4 5

C OH

C OH

6 H2C

OH

D(+)-glucoz

HO C H
2

HO C H
2

H2C OH HC OH
4 5

H C OH
OH

HO

O
H 2 1

3 C 4 5

H C OH

HO

3 C 4 5

CH2OH H
4 5

O H
2

OH
1

OH
3

H C H C OH
6

H C OH
H C
6

OH
3

H OH

OH

H2C OH

H2C OH

OH

-D-glucofuranoz (C1-C4)

-D-glucopiranoz (C1-C5)

Schema 2.1. Formule de reprezentare a glucozei

H2C OH OH 2 C
6 1

H2C OH
5

O
3

CH2OH OH H
2

HO C H H C OH H C H2C OH
6 5 4

H2C OH OH 2 C

H H
5 6

HO C H

O OH
3

CH2OH
2

H
4

H C OH

OH

H C OH
6 H2 C

H
4

OH

OH

OH

OH

-D-fructofuranoz (C2-C5)
1 2 3

-D-fructopiranoz (C2-C6)

H2C OH C O HO C H H H
4

C OH C OH OH

6 H2C

D(-)-fructoz

H2C OH HO C
6
2

H2C OH HO C
2

H H
6

H2C OH
5

O
3

OH OH H
2

HO C H H C OH H C
6 H2 C 5 4

HO C H H C OH H C OH
5 6 H2C 4

O OH
3

OH
2

H
4

H
4

OH

CH2OH 1

OH

CH2OH
1

OH

OH

-D-fructofuranoz (C2-C5)

-D-fructopiranoz (C2-C6)

Schema 2.2. Formule de reprezentare a fructozei

2.2.2. Proprietile fizice ale monoglucidelor

Monoglucidele sunt substane solide, cristalizate, incolore, uor solubile n ap (datorit prezenei grupelor hidroxil), greu solubile n solveni organici (alcool etilic, eter etc.). Au n general gust dulce (fructoza este cea mai dulce dintre ele). n prezena H2SO4 concentrat, ozele se deshidrateaz, nnegrindu-se, iar la temperatur ridicat se caramelizeaz. 2.2.2.1. Izomerie a) Izomerie structural (de funciune, de compensaie) - se refer la cele dou tipuri de oze, aldoze i cetoze, pe care le pot forma monoglucidele cu aceeai formul molecular (vezi exemplele de formule structurale din Schemele 2.1 i 2.2). b) Stereoizomerie (izomerie spaial) Izomeria geometric stabilete apartenena monoglucidelor la una dintre seriile sterice D sau L, lund drept criteriu structura aldehidei glicerice, care avnd un atom de carbon asimetric, prezint dou configuraii: D (+) aldehida gliceric (cu grupa OH n dreapta atomului de carbon asimetric), respectiv L (-) aldehida gliceric (cu grupa OH n stnga atomului de carbon asimetric):
H C O H C* OH H2C OH
D-aldehida gliceric

H C O HO C* H H2C OH
L- aldehida gliceric

Prin analogie, toate monoglucidele care au configuraia atomului de carbon asimetric cel mai deprtat de gruparea carbonil identic cu cea a atomului de carbon asimetric al D (+) aldehidei glicerice aparin seriei sterice D, respectiv monoglucidele cu configuraia L (-) aldehidei glicerice, fac parte din seria sterica L:
H C* HO H2C OH
seria D

HO C* H H2C OH
seria L

Izomeria optic (enantiomeria). Datorit asimetriei moleculare (chiralitatea moleculei) i prezenei atomilor de carbon asimetrici n moleculele monozaharidelor (cu exceptia dihidroxiacetonei), acestea prezint fenomenul de izomerie optic, caracterizat prin rotirea planului luminii polarizate spre dreapta (izomerul dextrogir), sau spre stnga (izomerul levogir). Numrul izomerilor optici (stabilit de vant Hoff) este de 2n, unde n este numrul atomilor de carbon asimetrici. De exemplu, aldozele cu patru atomi de carbon asimetrici (hexoze, forma liniar aciclic) vor avea 24 = 16 stereoizomeri optici. Glucoza (dextrogir) rotete planul luminii polarizate spre dreapta (+), iar fructoza (levogir) rotete planul luminii polarizate spre stnga (), amndou aparinnd ns seriei sterice D. n realitate, numrul izomerilor optici este mai mare, determinat la ciclizare de poziia diferit a grupei hidroxil glicozidic fa de atomul de carbon C4: izomerul (anomerul ) corespunde poziiei grupei -OH glicozidice de aceeai parte cu a grupei -OH de la C4, iar

izomerul (anomerul ) corespunde poziiei grupei -OH glicozidice de parte opus grupei -OH de la C4. Aceast form de izomerie (anomerie) a fost pus n eviden prin fenomenul de mutarotaie, care scoate n eviden existena unui nou centru de asimetrie a moleculei n soluie apoas. Mutarotaia const n modificarea unghiului de rotaie a soluiei unei substane optic active n urma dizolvrii ei n ap. Astfel, -glucoza are unghiul de rotaie specific [] = 112,50, n timp ce -glucoza are [] = 18,70. La dizolvarea celor doi izomeri - i -glucoza, separat n ap, dup acelai numr de ore, unghiul de rotaie specific are aceeai valoare [] = 52,70 pentru amndoi anomerii. Soluia conine deci ambele forme i -furanozice i piranozice ct i o mic cantitate de form aldehidic, ntre toate aceste forme existnd un echilibru dinamic. Trecerea reversibil a anomerilor i n soluie unul n cellalt, decurge prin deschiderea ciclului i formarea intermediar a formei aldehidice.
1

1 C 2 C 3

H
2

C C
3

OH
H

HO
OH
2

C C
3

H OH O H OH

H HO H
5

OH O
HO H

H
C H

C
4

H OH
H

4 C 5 C 6 H2C

HO
OH

C
4

C C
6

H
OH
5

C C
6

H
OH

H2C

OH

H2C

OH

-D-glucopiranoz

D-glucoz (formul aciclic)

-D-glucopiranoz

La stabilirea denumirii monoglucidelor trebuie precizate toate particularitile structurale (vezi Schemele 2.1 i 2.2): tipul izomerului (anomerul sau ); seria steric (D sau L); izomerul optic (enantiomerul dextrogir (+) sau levogir (-); numele glucidei; tipul formulei perspectivice (piranozic sau furanozic).

CURS 3 2.2.3. Proprietile chimice ale ozelor (monoglucidelor)

Proprietile chimice ale monoglucidelor sunt corelate cu structura lor chimic, respectiv, prezena n molecul a grupelor funcionale specifice:
R
H C O R
carbonil aldehidic

R C O R
carbonil cetonic

H2C OH R
alcool primar

HC OH R
alcool secundar

2.2.3.1. Proprieti chimice datorate grupei carbonil a) Reacii de oxidare blnd Dintre toate grupele funcionale prezente n monoglucide, cea mai vulnerabil la oxidare este grupa carbonil aldehidic liber. Aceasta se oxideaz n condiii blnde (ap de clor, hipoclorii, Ag2O, reactiv Tollens, reactiv Fehling), aldozele transformndu-se n acizi aldonici, care prin deshidratare formeaz lactonele acizilor gluconici:
H OH H OH glucoza CH2OH O H H OH H OH

H OH

CH2OH OH H H COOH - H O OH 2 H OH

H OH

CH2OH O H H OH H OH

C O

acid gluconic

lactona acidului gluconic

Oxidarea blnd care decurge n prezena agenilor oxidani cum ar fi: reactivul Tollens, (AgNO3 n soluie amoniacal), respectiv reactivul Fehling, evideniaz cel mai bine proprietile reductoare ale aldozelor, care reduc Ag+ (din AgNO3) la Ag0 metalic (oglinda de argint), iar Cu2+ (din reactivul Fehling, de culoare albastr) la Cu+ de culoare roie-crmizie. b) Reacii de oxidare energic Oxidarea energic (n prezen de HNO3) transform aldozele n acizi zaharici (acizi dicarboxilici), n care grupele carboxil (-COOH) se gsesc la extremitile catenei de atomi de carbon:
CH2OH O H H OH H OH COOH H OH H OH H OH OH H OH H COOH

H OH

-glucoz

acid glucozaharic

Acizii zaharici sunt importani la identificarea glucidelor, fr a avea un rol biologic deosebit. Cetozele se oxideaz numai cu oxidai energici, cnd are loc ruperea catenei de atomi de carbon i formarea unui acid aldonic cu un atom de carbon mai puin dect oza iniial i o molecul de acid formic. c) Reacii de oxidare protejat Acest tip de oxidare a aldozelor decurge prin protejarea prealabil a grupei carbonil, respectiv hidroxilul glicozidic, prin eterificare, i conduce la acizi uronici:
CH2OH O H H OH H OH CH2OH O H H OH H OH COOH H OR
[O]

COOH O H OR
H 2O

H OH

H OH

RX

H OH

H OH

- HX

H OH H

H OH

O H OH H H

H OH

H OH

- ROH

OH

glucoz

acid glucuronic

Acizii uronici sunt componente importante ale multor polizaharide (pectine, gume, mucilagii vegetale). Ei prezint proprieti reductoare datorit grupei carbonil libere. ndeplinesc n organism rol detoxifiant, datorit posibilitii de legare a unor toxine, medicamente etc. d) Reacii de reducere Aldozele i cetozele se transform prin reducerea grupei carbonil (hidrogenare n prezen de catalizatori metalici sau amalgam de natriu n ap) n polialcooli (polioli) cu acelai numr de atomi de carbon (pentitoli din pentoze, hexitoli din hexoze). De exemplu, prin reducerea glucozei i a fructozei se obine acelai hexitol, sorbitolul:
H H HO C C C O OH [H] H H HO H2C C C OH OH [H] H HO C H (H COH)2 H2C OH (HCOH)2 H2C OH H2C C OH O

(HCOH)2 H2C OH

D-glucoz

D-sorbitol

D-fructoz

n acelai timp, din fructoz poate rezulta i D-manitol (hexoze epimere care se deosebesc doar prin configuraia unui atom de carbon asimetric). Alturi de pentitoli i hexitoli aciclici, n organismele vegetale i animale pot rezulta, prin aldolizare intramolecular, hexitoli ciclici, denumii ciclitoli sau ciclite. Un astfel de ciclitol este inozitolul (hexahidroxiciclohexan), dintre ai crui numeroi stereoizomeri, mezoinozitolul, este factor de cretere n organism i component al lipidelor fosfatidice (inozitol-fosfolipide):

H C HO HO CH CH CH OH

O CH3 CH OH

H C HO HO CH CH CH OH

OH CH2 CH OH

metilpentoza
H C HO HO CH CH CH OH H2C CH OH OH HO HO CH CH CH OH O H C CH CH OH OH OH

quercitol
OH H H OH OH H OH OH OH H H H

aldohexoz

inozitol

mezoinozitol

e) Reacii de condensare Asemntor aldehidelor i cetonelor, glucidele (aldoze i pentoze) formeaz n urma unor reacii de condensare cu hidrazina (H2NNH2) sau fenilhidrazina (H2NNHC6H5), diferii compui: hidrazone, fenilhidrazone, osazone, osone. Aceste reacii reprezint o cale de conversie a aldozelor n cetoze:
H H C C O H2N-NH-C6H5 OH H2O H C OH H C N HN C6H5 H2N-NH-C6H5 H C C N O HN C6H5 H2N-NH-C6H5 H2O H

- NH3 - H2N-C6H5

aldoz (aldohexoz)
H H2N-NH-C6H5 H2O H C N C N

fenilhidrazon

cetofenilhidrazon

HN HN

C6H5

C C

O [H] O H

2HOH
C6H5 -2H2N-NH-C6H5 H

H2C C

OH O

fenilosazon

oson

cetoz (cetohexoz)

Glucoza, fructoza si manoza formeaz aceeai fenilosazon (nu se poate diferenia configuria atomilor de carbon 1 i 2).

2.2.3.2. Proprieti chimice datorate grupelor funcionale hidroxil n formula ciclic semiacetalic a monoglucidelor exist dou feluri de grupe hidroxil:

una de natur semiacetalic (glicozidic), care este cea mai reactiv, restul de natur alcoolic (primar i secundar) mai puin reactive:

H H

C C

OH OH O

hidroxil semiacetalic (glicozidic) hidroxil alcoolic secundar

H2C

OH

hidroxil alcoolic primar

a) Reacii de eterificare Monoglucidele (ozele) particip la reacii de eterificare (condensare) cu alcooli, fenoli, steroli, n primul rnd prin grupa hidroxil semiacetalic, mai reactiv dect restul grupelor alcoolice. Se formeaz compui de tip eter (R-O-R) denumii ozide (glicozide de la glucoz, galactozide de la galactoz etc.). n funcie de forma anomeric ( sau ) a ozei, se pot forma -glicozide sau -glicozide:
CH2OH O CH2OH O CH2OH O OH CH2OH O OR

OR

OH

-glicozid

-glucoz

-glucoz

-glicozid

Grupa hidroxil glicozidic se poate eterifica (condensa) cu grupe -OH alcoolice ale altei monoglucide cu formare de diglucide i poliglucide, reductoare sau nereductoare. b) Reacii de esterificare Aceste reacii pot avea loc ntre grupele hidroxil ale monoglucidei i un acid anorganic sau organic cu formare de esteri. Esterii ozelor cu acizii organici pot fi obinui prin sintez (esteri cu acidul acetic i benzoic), sau se ntlnesc n natur sub form de galo-taninuri (esterii cu acidul galic i galoilgalic):
R CH2 OH + HO C R O
- H2O

R CH2 O C R O

ester al unui acid carboxilic ester al acidului fosforic

OH R CH2 OH + HO P OH O
- H2O

OH R CH2 O P OH O

Esterii ozelor cu acizii anorganici. Dintre punct de vedere biologic, un interes deosebit

prezint esterii fosforici ai monoglucidelor, care sunt implicai n metabolismul glucidic. Coninutul de fosfai ai ozelor variaz n funcie de organele plantelor (0,31% n fina de mazre i ntre 0,0034-0,046% n frunze). Un interes deosebit n metabolismul glucidic l prezint esterii fosforici (fosfaii) ai triozelor, pentozelor i hezozelor. Triozofosfai
H H C C O OH O P H2C H C H2C OH O O P

Tetrozofosfai
H C O H C OH H C OH H2C O P

H2C

aldehid 3-fosfogliceric

hidroxiacetonfosfat

eritrozofosfat

Pentozofosfai
H C O H C OH H C OH H C OH H2C O P
H2C OH H C O H C OH H C OH H2C O P

H2C O P H C O H C OH H C OH H2C O P

H2C OH H C O HO C H H C OH H2C O P
ester-xilulozo-5-fosfat

ester-ribozo-5-fosfat ester-ribulozo-5-fosfat ester-ribulozo-1,5-difosfat

Hexozofosfai
CH2OH O
CH2O P
O

CH2O P
OH

OH

CH2O P

OH

OP

CH2OH

CH2O P
Fructozo 1,6-di P ester HARDEN-YOUNG

Glucozo 1- P ester CORI

Glucozo 6- P ester ROBINSON

Fructozo 6- P ester NEUBERG

2.2.3.3. Reacii la care particip ambele grupe funcionale ale ozelor (carbonil i hidroxil) a) Reacii n mediul acid Monozaharidele sunt stabile la aciunea acizilor minerali diluai. Acizii tari produc totui deshidratarea i ciclizarea pentozelor (la furfurol) i a hexozelor (la hidroximetilfurfurol, care se descompune final n acid levulinic i acid formic):
HO H2C OH H C H C CH OH OH H C O
- 3H2O

O
furfurol

CHO

pentoza

HO H2C HO CH

H C

H C CH

OH H C O
- 3H2O

H2C HO

CHO

OH

OH

hexoza

hidroximetilfurfurol

Furfurolul se obine industrial din materiale bogate n pentozani (tre, coceni, coji de semine de floarea-soarelui i ovz) prin nclzire cu H2SO4 diluat, sau prin antrenare cu vapori de ap supranclzii (furfur = tre). b) Reacii n mediul bazic Sub aciunea bazelor tari diluate (NaOH) sau a bazelor slabe la temperatura camerei, ozele sufer un proces de izomerizare (epimerizare), care decurge prin intermediul unui enol, cu formarea epimerilor corespunztori (vezi conversii de la aldoze la cetoze). La temperaturi ridicate sau n prezen de soluii concentrate, bazele tari produc asupra ozelor transformri mai profunde, oxidri, polimerizri, cu formarea unor produi de scindare a catenei (metilglioxal, acid lactic, aldehid gliceric). c) Reacii de interconversie a monoglucidelor Cele mai importante reacii ale ozelor care implic ambele grupe funcionale sunt interconversiile, n urma crora aldozele trec n cetoze i invers, sau monoglucidele se transform n reprezentani cu numr mai mare sau mai mic de atomi de carbon n molecul. 1. Conversii ale glucidelor fr schimbarea numrului de atomi de carbon Conversii de la aldoze la cetoze Aceste tip de conversii decurg prin reacii de epimerizare a aldozelor sub aciunea bazelor slabe, cnd se schimb poziia grupei carbonil pe caten de la atomul C1 la atomul C2. Epimeria este un alt tip de izomerie ntlnit la oze. Se numesc epimere, ozele care se deosebesc ntre ele prin configuraia unui atom de carbon asimetric.
H H C C O OH H C C OH OH H H C C OH O

aldoza

dienol

cetoza (epimerul aldozei)

Reacia de conversie de la aldoz la cetoz poate decurge i prin izomerizare:

H H

C C H2C

O OH O P

H C C H2C

OH O O P

aldehid 3-fosfogliceric

hidroxiacetonfosfat

Conversia de la aldoze la cetoze poate decurge i prin reacia de condensare a aldozelor cu fenilhidrazina cu formare de fenilhidrazone, osazone, osone, cetoze. Conversii de la cetoze la aldoze Aceste tip de conversii decurg prin intermediul unei succesiuni de reacii de reducere, oxidare, lactonizare:
H2C C HO C OH O H
reducere

H2C HC HO C

OH OH H
oxidare

COOH HC HO C OH H
- H2O

C HC HO C

O OH H

O
reducere

H H HO

C C C

O OH H

cetoza

poliol

acid aldonic

lactona acidului

aldoza

2. Conversii ale glucidelor cu schimbarea numrului de atomi de carbon De la aldoze inferioare la aldoze superioare Acest tip de conversii decurg prin reacii de adiie de HCN la grupa carbonil a aldozei.
C H H C C O OH
HCN

N OH OH
H2O - NH3

COOH H H C C OH OH
reducere - H2O

H H H

C C C H

O OH OH

H H

C C

aldopentoza C5

cianhidrina aldopentozei C6

acid aldoaldonic C6

aldohexoza C6

Conversii de la aldoze superioare la aldoze inferioare Acest tip de reacii de conversie decurg printr-o succesiune de reacii de oxidare cu formare de acizi aldonici, urmat de decarboxilarea acestora:
H H H C C C O OH OH
O

COOH H H C C OH OH
- CO2

H2C HC

OH OH

H H

C C

O OH

aldohexoza C6

acid aldonic C6

pentitol C5

aldopentoza C5

Astfel de conversii sunt ntlnite n metabolismul glucidic, de exemplu: transformarea esterului fructozo-1,6-difosfat n aldehida-3-fosfogliceric i hidroxoacetonfosfat etc.

2.2.4. Reprezentani ai monoglucidelor

Unele oze exist libere n regnul vegetal (trioze, tetroze, pentoze, hexoze, octoze, nonoze), altele se gsesc sub form de derivai, sau intr n constituia oligozidelor i poliozidelor. Principalii reprezentani ai monoglucidelor sunt ilustrai n Schema 2.3. Triozele - o aldoz cu doi izomeri (aldehida gliceric) i o cetoz (dihidroxiacetona) apar ca intermediari n metabolismul glucidelor, ca atare, sau sub form de esteri fosforici. Tetrozele nu se gsesc libere n natur, ele rezult prin degradarea pentozelor sau prin sintez. Esterul fosforic al eritrozei se formeaz n procesul de fotosintez i la degradarea glucozei. Pentozele sunt foarte rspndite n natur (mai puin sub form liber) mai ales sub form de poliglucide (pentozani), glicozide i esteri. n frunzele plantelor se gsesc cantiti mici de pentoze, n proporie mai mare se ntnesc pentozani, poliozide care nsoesc celuloza. Cele mai importante dintre pentoze sunt: riboza, deoxiriboza, xiloza, arabinoza, ribuloza. Riboza i deoxiriboza sunt componente ale acizilor nucleici ARN i ADN i ale unor enzime. Xiloza (zahrul de lemn) este component a membranelor celulare vegetale, nsoind celuloza sub forma poliozidelor xilani, mai ales n partea lemnoas a plantelor (paie, coceni de porumb, lemn de stejar, smburi de fructe etc.). Xiluloza (epimerul xilozei) particip la procesul de fotosintez. Arabinoza este prezent n liliacee, sucul fructelor i n lemnul coniferelor. Poliglucidele arabinozei (arabanii) sunt rspndite n hemiceluloze, materii pectice, gume, mucilagii vegetale. Hexozele sunt rspndite n regnul vegetal att libere ct i sub form de derivai (holozide). Glucoza (dextroza, zahr de amidon sau zahr de struguri) este monoglucida cea mai rspndit i important din punct de vedere biologic. n stare liber se gsete n toate fructele, n flori, n miere, n tomate, alturi de fructoz i zaharoz. Mierea de albine este un amestec echimolecular de D-glucoz i D-fructoz.
ALDOTRIOZE DIOZE
H C O H2C OH
H C O

CETOTRIOZE
H2C OH

H C OH

C O

H2C OH

H2C OH

aldehid glicolic
ALDOTETROZE
H C O H C OH H C OH H2C OH H C O

aldehid gliciceric

dihidroxiaceton

HO C H H C OH

CETOTETROZE

H2C OH

H2C OH

C O
H
1

D-eritroz

D-treoz
1 4

C OH

H
4

O
3 2

O
3 2

H2C OH

D-eritruloz

-D-eritrofuranoz

-treofuranoz

ALDOPENTOZE
H C O H C OH H C OH H C OH H2C OH H C O H C H H C OH H C OH H2C OH H C O H C OH HO C H H C OH H2C OH

H C O
H C OH
HO C H

H C O
HO C H
HO C H

HO C H

H C OH

H2C OH

H2C OH

D-riboz
5
5

D-deoxiriboz
O
2

D-Xiloz
5

D-arabinoz
5
1 2

D-lixoz
5

CH2OH
3

O
2

CH2OH
3

CH2OH
3

CH2OH
3

O
2

CH2OH
3

O
2

-ribofuranoz

-deoxiribofuranoz

-xilofuranoz
CETOPENTOZE

-arabofuranoz

-lixofuranoz

H2C OH C O H C OH H C OH H2C OH

H2C OH C O HO C H H C OH H2C OH

D-ribuloz
1

D-xiluloz

O
5 4 3

CH2OH
2 5 4

O
3

CH2OH
2

OH

OH

-ribulofuranoz

-xilulofuranoz

ALDOHEXOZE

H C O H C OH H C OH H C OH H C OH H2C OH

H C O HO C H H C OH H C OH H C OH H2C OH

H C O H C OH HO C H H C OH H C OH H2C OH

H C O H C OH HO C H HO C H H C OH H2C OH

H C O HO C H HO C H H C OH H C OH H2C OH
manoz
6

aloz
6

altroz
6

glucoz
6

galactoz
6

CH2OH O
1 4 3 2

CH2OH

CH2OH

CH2OH

5 4

O
1 4 3 2

O
1 4 3 2

O
1
4

CH2OH O
1 3 2

-alopiranoz

-altropiranoz

-glucopiranoz

-galactopiranoz -mananopiranoz

CETOHEXOZE

H2C OH C O H C OH H C OH H C OH H2C OH
sorboza
6 5 4 3 1

H2C OH C O HO C H H C OH H C OH H2C OH
fructoza

CH2OH
2
5

CH2OH
2

OH

-sorbopiranoz
HEPTOZE

-fructopiranoz
OCTOZE

H2C OH C O H C OH H C OH H C OH H C OH H C OH H2C OH
gliceromonooctuloz
Schema 2.3. Clasificarea monoglucidelor

H2C OH C O H C OH H C OH H C OH H C OH H2C OH
sedoheptuloz

Glucoza intr n structura diglucidelor (zaharoza, maltoza, celobioza, lactoza) i a poliglucidelor (amidon, celuloz). Din combinaiile sale glucoza se separ prin hidroliz acid sau enzimatic. Coninutul de glucoz din plante variaz n funcie de temperatur i de gradul de expunere la lumin a plantelor. Galactoza este o glucid rspndit mai ales sub form de diglucide (lactoza), triglucide (rafinoza) i poliozidele (galactani, galactoarabani etc.) n agar-agar, gume i mucilagii vegetale, glicozide i lipide complexe. Fructoza (zahrul din fructe, cea mai dulce dintre oze) este o cetohexoz rspndit att n stare liber, n fructe, ct i sub form de diglucide (zaharoza), poliglucide (inulina, fructani) i glicozide. Sorboza este o cetohexoz izomer cu fructoza, rspndit n scoruul de munte i alte fructe, mai ales sub form de sorbitol, care n contact cu aerul se oxideaz la sorboz. Se utilizeaz la obinerea acidului ascorbic (vitamina C). Aminoglucidele sunt derivai ai glucidelor care conin i grupa funcional amino. Mai rspndite n natur sunt glucozamina, component a chitinei (poliglucid a exoscheletului insectelor i racilor) i galactozamina (component a glicolipidelor).

CURS 4 2.3. GLUCIDE COMPUSE (OZIDE)

Ozidele sunt produse de condensare (eterificare) a ozelor (holozide) sau produse de condensare a ozelor cu substane de natur neglucidic (heterozide). Holozidele (holos = acelai fel) se clasific dup numrul monoglucidelor componente n: oligozide (oligoglucide, oligozaharide) dac sunt formate din 2-6 uniti structurale de oze, i poliozide (poliglucide, polizaharide), dac au structur macromolecular.

2.3.1. Oligozide (oligoglucide)

Din punct de vedere structural, oligozidele pot fi considerate produse de condensare a monoglucidelor identice sau diferite: n monoglucide - (n-1) H2O = oligoglucide Dup numrul unitilor de monoglucide componente, oligozidele pot fi: di-, tri-, tetra-, penta-, hexaglucide. Dup natura grupelor hidroxil, participante la formarea legturilor de tip eter (R-O-R), oligozidele (oligoglucidele) pot fi: monocarbonilice (reductoare) dac particip la formarea legturii o grupa hidroxil glicozidic (semiacetalic) i o grup hidroxil neglicozidic a celei de a doua oze. Diglucida format posed cel puin o grup-OH glicozidic care se poate oxida, deci manifest caracter reductor fa de reactivul Tollens, reactivul Fehling etc. dicarbonilice (nereductoare) cnd la formarea legturii eterice particip ambele grupe hidroxil glicozidice. Diglucida rezultat nu se poate oxida cu nici unul dintre agenii oxidani amintii (nu are caracter reductor). 2.3.1.1. Diglucide. Reprezentani ai diglucidelor Cele mai importante i mai rspndite oligozide din natur sunt diglucidele, constituite din dou resturi de monoglucide. Maltoza este o diglucid reductoare omogen format din dou resturi de -Dglucopiranoz unite prin legtur 1,4--glicozidic. Se gsete liber n orzul ncolit (zahr de mal) i este unitatea structural a poliglucidei amidon. Maltoza elibereaz prin hidroliz enzimatic (cu enzima maltaz) dou molecule de -D-glucopiranoz.
CH2OH H H OH OH H OH O H OH H + OH H OH H H OH CH2OH O H OH H
- H2O

CH2OH H H OH OH H OH O H O H H

CH2OH O H OH H OH H OH H

-glucoz

-glucoz

maltoz

Celobioza este o diglucid reductoare omogen, format din dou resturi de -D-

glucopiranoz, unite prin legtura 1,4--glicozidic. Se gsete liber n cantiti mici n seva unor arbori i reprezint unitatea structural a poliglucidei celuloza. Celuloza elibereaz prin hidroliz enzimatic (cu enzima celulaza) dou molecule de -D-glucopiranoz.
CH2OH H H OH OH H OH O H H OH + OH H OH H H OH CH2OH O H H OH
- H2 O

CH2OH H H OH OH H OH O H H O H

CH2OH O H OH H OH H OH H

-glucoz

-glucoz

celobioz

Lactoza (zahrul din lapte) este o diglucid reductoare neomogen, format dintr-o molecul de -D-galactoz i una de -D-glucoz, unite prin legtur 1,4-,-glicozidic. n stare liber se gsete n laptele mamiferelor, iar n plante n polenul florilor de Forsythia.
CH2OH OH H OH H H OH O H H OH + OH H OH H H OH CH2OH O H OH H
- H 2O

CH2OH OH H OH H H OH O H H O H

CH2OH O H OH H OH H OH H

-galactoz

-glucoz

lactoz

Geniobioza este o diglucid reductoare, neomogen, format din -D-glucopiranoz i -D-glucopiranoz unite prin legtur 1,6-,-glicozidic. Este component a unor glicozide (amigdalina) i se gsete n cantiti mici n rdcinile unor plante. Zaharoza (zahrul de sfecl, de trestie) este o diglucid nereductoare, neomogen, format din -D-glucopiranoz i -D-fructofuranoz, unite prin legtur 1,2-,-glicozidic. Zaharoza se gsete n frunze ca rezultat al fotosintezei i este cea mai rspndit diglucid natural (n rdcinile sfeclei de zahr: 16-20%, n tulpinile trestiei de zahr: 16-27%). Hidrolizeaz n mediu acid sau sub aciunea enzimei zaharaza, elibernd un amestec echimolecular de -D-glucoz i -D-fructoz, denumit zahr invertit, datorit faptului c prezint activitate optic levogir, spre deosebire de glucoz care este dextrogir.
CH2OH H H OH OH H OH
- H 2O

CH2OH O H OH OH H OH O H H H OH O H H

-glucoz
CH2OH H H OH H OH OH CH2OH

CH2OH H H OH

O OH CH2OH H

-fructoz

zaharoz

Trehaloza (zahrul din ciuperci) este o diglucid nereductoare, neomogen, format din -D-glucoz i -D-glucoz unite prin legtura 1,1-,-glicozidic. Se ntlnete n ciuperci i n limfa unor insecte.
CH2OH H H OH OH H OH O H OH H + OH H OH H H OH CH2OH O H H OH
- H2 O

CH2OH H H OH OH H OH O H O H H

OH H O

H OH OH H H CH2OH

-glucoz

-glucoz

trehaloz

2.3.1.2. Triozide (Triglucide) Triglucidele sunt constituite din trei resturi de monoglucide. Mai rspndite n natur sunt: rafinoza rspndit n sfecla de zahar, semine de bumbac, format din: -D-galactoz, -Dglucoz i -D-fructoz i genianoza format din dou molecule de -D-glucoz i una de -Dfructoz.

2.4. POLIOZIDE (POLIGLUCIDE)

Poliozidele (poliglucide) sunt compui macromoleculari care rezult prin policondensarea unui numr mare (n) de monoglucide: n C6H12O6 - (n-1) H2O = (C6H10O5)n Numrul monoglucidelor cuprinse n macromoleculele poliglucidelor i masa molecular, depind de tipul de compus macromolecular, i la plante de specia din care a fost izolat (de exemplu, celuloza din bumbac are M = 1,75 x 106, iar celuloza din lemn are M = 6 x 106). n ceea ce privete tipul de legturi dintre unitile constituente, n cazul poliglucidelor constituite din aldoze, legturile sunt de tip glicozidic: 1,4, sau 1,6, sau 1,3, mai rar 1,2, iar n cazul poliglucidelor constituite din cetoze legturile sunt de tip 1,5-glicozidice.

2.4.1. Proprieti fizice i chimice ale poliglucidelor

Poliglucidele se prezint sub forma unor pulberi albe, amorfe, insolubile sau greu solubile n ap, formnd sisteme coloidale. Poliglucidele care au atomi de carbon asimetrici prezint activitate optic. Toate resturile de monoglucide sunt legate prin intermediul grupei -OH glicozidice, doar la capt de macromolecul existnd o grup -OH glicozidic liber, ceea ce determin un slab caracter reductor. Grupele -OH libere, (cte trei la fiecare unitate de monoglucid), pot reaciona cu formare de eteri i de esteri ai poliglucidelor respective. Prin hidroliz acid sau enzimatic poliglucidele elibereaz monoglucidele componente. Rolul poliglucidelor n organismele vii este foarte complex. Ele servesc ca substane de rezerv n plante (amidonul, inulina etc.), sau n organismele animale (glicogen), ndeplinesc rol plastic structural (celuloza n plante, mureina n bacterii, etc.), rol de protecie (substanele pectice etc.).

2.4.2. Poliozide omogene (homopoliglucide)

Poliozidele omogene, rspndite mai ales n regnul vegetal, sunt compui macromoleculari constituii din monoglucide identice, cu denumiri corespunztoare acestora (pentozani, hexoxani). 2.4.2.1. Reprezentani ai pentozanilor Arabanii sunt polimeri ai arabinozei cu structur ramificat, n care moleculele de arabofuranoz sunt legate 1,5--glicozidic n catena principal i 1,2--glicozidic la nivelul ramificaiilor. Arabanii sunt componeni ai hemicelulozelor, gumelor vegetale, materiilor pectice. Xilanii sunt polimeri care au ca unitate structural xiloza, legat -1,4-glicozidic (ca i celuloza). Ei nsoesc celuloza n toate esuturile plantelor (15% xilan n lemnul angiospermelor i 7-8% n lemnul gimnospermelor). 2.4.2.2. Reprezentani ai hexozanilor (glucanilor) Glucanii (glucozanii) sunt compui macromoleculari larg rspndii n natur, cu formula general (C6H10O5)n, care au ca unitate structural glucoza. n funcie de natura anomerului glucozei ( sau ) i de modul de legare n macromolecul, rezult compui diferii, dintre care cei mai importani, din punct de vedere al funciilor biologice sunt: amidonul i celuloza. Amidonul, produs al fotosintezei, este larg rspndit n regnul vegetal ca glucid de rezerv, sub form de granule (de form i mrime specific speciei vegetale) n tuberculi, semine i pri lemnoase ale plantelor. Nu are o structur unitar, fiind constituit din dou componente: amiloza i amilopectina. Amiloza, care reprezint 20-30% din granula de amidon, este dispus n interiorul acesteia i prezint o structur neramificat. Ea este constituit din mai multe uniti de maltoz (constituite la rndul lor din molecule de -D-glucopiranoz), unite prin legturi 1,4-glicozidice sub forma unei catene macromoleculare cu M = 50000-500000, care este dispus n spaiu sub form de spiral, format din cte 4-6 molecule de -D-glucoz. Amiloza formeaz cu apa sisteme disperse coloidale care prezint cu iodul o coloraie albastr.
Amiloza
CH2OH H H OH O H H 1 O H OH H OH 4 H H OH CH2OH O H H 1 O H OH 4 H H OH CH2OH O H H 1 O H OH 4 H H OH CH2OH O H H 1 O

maltoza

maltoza

Amilopectina, componentul ramificat, reprezint 70-80 % din granula de amidon, este dispus n nveliul acesteia i prezint o structur ramificat. Este constituit ca i amiloza din uniti de -D-glucopiranoz unite prin legturi 1,4--glicozidice (uniti de maltoz), sub

forma unei catene macromoleculare liniare, la care apar ca ramificaii, catene laterale n care unitile 1,4--glicozidice sunt legate 1,6--glicozidic (n medie ramificaiile apar dup 25 de resturi de glucoz). Gradul de polimerizare variaz mult, iar masa molecular a amilopectinei este de ordinul unui milion. i amilopectina formeaz cu apa sisteme disperse coloidale care prezint cu iodul o coloraie roie-brun.
CH2OH H H OH O H H 1 O H OH CH2OH H H OH O H H 1 O H OH H OH 4 H H OH H OH 4 H H OH CH2OH O H O CH2 O H H 1 O H OH H 4 H OH CH2OH O H H 1 O H 1

amilopectina

Proprietile amidonului sunt rezultanta proprietilor individuale ale componentelor sale. Amidonul este insolubil n ap rece. n ap cald, formeaz soluii coloidale, respectiv, granulele se umfl, iar la o temperatur ridicat se sparg i formeaz soluii vscoase sau geluri. La rcire, se transform ntr-un gel omogen (coca sau cleiul de amidon). Prin hidroliz treptat, la cald, n prezena acizilor tari sau a enzimelor specifice (amilaze) care scindeaz doar legturile 1,4--glicozidice, amidonul se transform n poliglucide cu catene mai scurte, denumite dextrine. Legturile 1,6--glicozidice din catenele laterale ale amilopectinei nu sunt hidrolizate de amilaze ci de enzimele 1,6--glicozidaze. Amidonul extras din gru, porumb, cartofi este utilizat n industria alimentar (la obinerea alcoolului etilic, acidului lactic), n industria farmaceutic, textil (apret). Schematic, hidroliza amidonului poate fi prezentat astfel: Amilodextrine Amidon
(nereductoare, cu I2 dau culoare violet)

Eritrodextrine
(slab reductoare, cu I2 dau culoare roie)

Acrodextrine
(reductoare, nu dau reacie cu I2)

Maltodextrine
(reductoare, nu dau reacie cu I2)

Maltoza
(puternic reductoare)

Glucoza
(puternic reductoare)

CURS 5 Glicogenul este cel mai important polizaharid de rezerv din celulele animale. El este depozitat mai ales n ficat (pn la 10% din structura acestuia) i reprezint 1-2% din structura muchilor. n celulele ficatului, glicogenul se gsete sub forma unor granule mari, compuse la rndul lor din agregate de granule mici, constituite din macromolecule foarte ramificate, cu mase moleculare de ordinul milioanelor. Glicogenul este ca i amilopectina un polizaharid al -D-glucopiranozei cu legturi 1,4--glicozidice, dar mai ramificat i mai compact. Ramificaiile apar n medie dup 8-12 resturi de glucoz, sub forma legturilor 1,6--glicozidice. Glicogenul este hidrolizat pn la stadiul de maltoz i glucoz de enzimele amilaze i prezint cu soluia de iod o coloraie rou-violet. Celuloza este poliglucidul cel mai rspndit n natur, aproape exclusiv n regnul vegetal. Este componentul principal al pereilor celulari vegetali, substana de schelet care asigur rezistena mecanic i fizico-chimic ridicat a esuturilor lemnului. Reprezint componentul chimic principal al lemnului (n medie 50%), restul procentelor fiind reprezentate de lignin i hemicelulozele (tot componeni principali) i o serie de componeni chimici secundari (taninuri, materii pectice, gume, mucilagii vegetale etc.). Celuloza prezint structur macromolecular poliglucidic, rezultat prin policondensarea unui numr variabil de uniti de -D-glucopiranoz. La hidroliza menajat a celulozei rezult uniti de celobioz care sunt legate prin legturi 1,4--glicozidice.
CH2OH H H OH O H H H OH H OH O H H OH CH2OH O H H H OH O H H OH CH2OH O H H H OH O H H OH CH2OH O H H O

celuloza

Celuloza nativ const din macromolecule formate din 8000-12000 de uniti de glucoz avnd mase moleculare de 1,3-2,0 milioane. Macromoleculele filiforme sunt dispuse paralel pe o anumit lungime, formnd fibre cu rezisten mecanic deosebit. ntre moleculele dispuse paralel se stabilesc, ntre grupele hidroxil, legturi de hidrogen, formnd astfel fibrile elementare cu diametrul de 3,5 nm (vizibile cu microscopul electronic) (fig. 2.1). n stare pur, celuloza este o substan solid, de culoare alb, cu aspect amorf, fr gust i fr miros. Dei prezint n structur un mare numr de grupe hidroxil, datorit legturilor de hidrogen stabilite ntre acestea, celuloza este insolubil n ap, n acizi diluai sau n solveni organici. n prezena acizilor minerali tari concentrai, moleculele de celuloz se gonfleaz cu aceti reactivi i apoi hidrolizeaz. Celuloza este solubil n reactivul Schweitzer (Cu (NH3)2(OH)2). Datorit prezenei la fiecare unitate structural a celor trei grupe hidroxil libere, celuloza poate fi esterificat (cu acid acetic, acid azotic, acid sulfuric), poate fi eterificat, sau oxidat. Prin fierbere cu soluie de NaOH conc., are loc mbibarea celulozei, proces care decurge cu scurtarea i creterea grosimii fibrei. n anumite condiii, tratamentul cu NaOH concentrat determin apariia unui luciu pe suprafaa celulozei (mercerizare), proces aplicat n industria textil. Cu soluie de 20% NaOH, se obine alcali-celuloza, care combinat cu sulfura de carbon formeaz viscoza (mtasea artificial). Din viscoz se obine i celofanul, iar prin tratarea celulozei cu acid sulfuric rezult pergamentul. Celuloza nu poate fi asimilat de organismul uman, care nu posed enzimele necesare scindrii macromoleculei (celulaze, celobiaza).

10,3 A O HO OH CH2OH O HO OH O O O CH2 O H CH2OH O O HO OH O CH2 O H O HO OH O HO OH O CH2OH O

Fig. 2.1. Legturi de hidrogen n celuloz

Mananii sunt poliglucide formate din uniti structurale de manopiranoz legate ntre ele prin legturi 1,4--glicozidice. Sunt prezente n toate speciile de rinoase (8-12%), foioase (1%), n nveliul dur al seminelor, precum i n unele bacterii, drojdii, ciuperci.
CH2OH H H OH OH H H O OH H H HOH2C O OH H OH O H H H H H H H OH CH2OH O OH H H CH2OH O OH H OH O H H H

manani

Galactanii sunt poliglucide formate din uniti structurale de D-galactopiranoz unite glicozidic prin atomii de carbon C1-C4 i C1-C6. Prezint o structur macromolecular mixt (liniar i ramificat), asemntoare amidonului. Sunt prezente n prile lemnoase ale plantelor, sub form de poliozide mixte, nsoind celulozele i materiile pectice. Cel mai important galactan este agar-agar (geloza), extras din algele roii. Este format ca i amidonul din dou componente: agaroza (asemntoare amilozei) i agaropectina (asemntoare amilopectinei). Se transform n gel chiar i n soluii de 1% i este utilizat ca materie de baz n mediile de cultur.
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O
O

galactani

Fructanii (fructozanii) sunt poliglucide care au ca unitate structural D-fructoza. Cel mai

reprezentativ este inulina n care resturile de -D-fructoz (n medie 30) sunt legate 1,2-glicozidic. Inulina se gsete n rdcinile de dalia, de cicoare, iarb de mare, ppdie, anghinare etc., liber sau sub form de glicozide. Inulina nu prezint proprieti reductoare i nu d reacii de culoare cu iodul. n organismul uman nu se metabolizeaz, eliminndu-se nemodificat, fapt care o recomand regimului alimentar al diabeticilor. Chitina este o poliglucid rezistent la factorii fizico-chimici, care are drept unitate structural N-acetilglucozamina legat 1,4--glicozidic. n regnul vegetal este component a drojdiilor, a ciupercilor, iar n regnul animal, este rspndit n carapacea crustaceelor, n tegumentele insectelor, al molutelor, unde ndeplinete un rol structural i de protecie.
CH2OH O NHCOCH3 O O NHCOCH3 CH2OH
chitin

CH2OH O

NHCOCH3 O O O

O NHCOCH3

CH2OH

2.4.3. Poliglucide (poliozide) neomogene

Poliozidele (poliglucidele) neomogene sunt compui chimici foarte rspndii n natur, predominant n regnul vegetal, nsoind de obicei celuloza. Sunt constituite din monoglucide diferite, cu sau fr acizi uronici (produi de oxidare a monoglucidelor). 2.4.3.1. Poliglucide neomogene fr acizi uronici Acest tip de poliglucide neomogene pot fi constituite din: pentoze diferite: arabo-xilani (n stejar); hexoze diferite: gluco-manani (n plop, mesteacn), galacto-manani (n plop tremurtor, mesteacn alb), galacto-manani, galacto-fructani etc.; pentoze i hexoze: arabo-galactani (n lemn de larice), arabo-glucani, xilo-glucani, xilogalactani. 2.4.3.2. Poliglucide neomogene cu acizi uronici Sunt prezente mai ales n regnul vegetal, reprezentate de: hemiceluloze, materii pectice, gume, mucilagii vegetale. Hemicelulozele constituie substane de constituie i rezerv care sunt dispuse n prile lignificate ale plantelor (lemn, paie, semine), nsoind celuloza i ligninele. n lemn se gsesc preponderent n speciile foioase (17-40%), mai puin n speciile rinoase, concentrate n ramuri i n vrful arborilor. Sunt heteropoliglucide macromoleculare care se deosebesc de celuloz prin structura heterogen, fiind constituite din: pentoze (L-arabinoza, D-xiloza), hexoze: (D-galactoza, D-glucoza, D-manoza), precum i acizi uronici (acid D-galacturonic, D-manuronic) etc. Spre deosebire de celuloz, macromoleculele hemicelulozelor au un grad mai mic de polimerizare (150-200 de uniti monomere de monoglucide) i o structur ramificat a catenei. Ele se deosebesc de celuloz i prin proprietile fizico-chimice, i anume, hemicelulozele sunt solubile n alcalii i hidrolizeaz mai uor n prezena acizilor minerali diluai. Prin prelucrarea fizico-chimic a hemicelulozelor se obine: furfurol, alcool etilic, drojdii furajere etc.

Materiile pectice (pectinele) sunt poliglucide neomogene cu rol n sudura esuturilor celulozice i n reglementarea permeabilitii celulelor vegetale. Sunt prezente n aproape toate organismele vegetale (rdcini, lemnul arborilor, pulpa fructelor), n proporii de 11-12%. Se prezint sub form de substane solide, amorfe, i sunt constituite dintr-o parte insolubil n ap (protopectina) i o parte solubil n ap (pectina). Componenta principal a pectinei este acidul pectic, compus macromolecular constituit din uniti de acid galacturonic, n form piranozic, legate prin legturi 1,4--glicozidice. Grupele carboxilice sunt parial esterificate cu metanol (CH3-OH), i parial transformate n sruri de calciu i de magneziu. Pectinele se ntlnesc de obicei n organele tinere, dar i n alte organe ale plantei (rdcinile sfeclei de zahr etc.). n ap formeaz dispersii coloidale, fiind substane cu mare putere de gonflare, proprietate utilizat la obinerea gelurilor din sucurile de fructe, prin fierbere cu zahr (gem, dulcea etc.). Fructele rscoapte conin pectine nehidrolizabile la acid pectic i nu sunt gelificabile (formarea gelurilor decurge n mediu acid la pH = 2,5-3,5). Alturi de acizii pectici, materiile pectice mai conin galactani i arabani, unii prin legturi glicozidice.
COOH O H OH H H O OH COOH H H H OH H OH O H O H H H HO COOH O H OH H O COOH H H H OH H OH H O

acidul pectic

Gumele vegetale sunt poliglucide care apar sub forma unor exudate cleioase, formate de obicei n urma rnilor care apar la suprafaa cojii arborilor sau a fructelor. Din punct de vedere chimic sunt un amestec de pentoze, metil-pentoze, hexoze i acizi hexuronici, care de obicei se gsesc sub forma srurilor lor de calciu, de magneziu i de potasiu. Prezint o structur macromolecular ramificat, catena principal fiind format din uniti de galactopiranoz legate glicozidic la C1-C3 i C1-C6, iar catenele laterale coninnd acid glucuronic i metilpentoze. Gumele vegetale prezint solubilitate diferit n ap, dar toate sunt insolubile n solveni organici. Una dintre cele mai studiate este guma arabic din diferite specii de Accacia. Ea formeaz soluii apoase vscoase, fiind utilizat ca adeziv, apret, n industria farmaceutic etc. Mucilagiile vegetale sunt poliglucide neomogene, cu structur variabil n funcie de origine, foarte apropiat de cea a gumelor vegetale. Prin hidroliz total se obin: metilpentoze, hexoze (Dglucoz, D-fructoz, D-galactoz) i acizi uronici. Se gsesc n semine de in, lucern, mutar i n algele verzi.

3. LIPIDE
Lipidele sunt compui organici rspndii n organismele vegetale i animale, unde ndeplinesc roluri complexe: rol structural (sunt componente ale celulelor, nucleului, protoplasmei, mitocondriilor etc.), rol de rezerv, constituie surse de energie, asigur protecie mecanic i termic organismelor plantelor i animalelor. Rspndirea lipidelor n plante este variat i neuniform; astfel, coninutul lipidelor n frunze este de 3-10% din materia uscat, n cloroplaste de 33-36%, un coninut ridicat prezint seminele plantelor oleaginoase (floarea soarelui, rapi, in, cnep, soia, msline etc.).

Lipidele se caracterizeaz, din punct de vedere chimic, printr-o larg eterogenitate structural i de compoziie (C, H, O, uneori N, P, S), precum i a proprietilor fizico-chimice. Din punct de vedere chimic, lipidele sunt esteri ai unor alcooli cu acizii grai superiori (excepie, etolidele). Structura lor hidrofob, apolar, le confer insolubilitate n ap i solubilitate n solveni organici (eter, cloroform, benzen, aceton etc.). Pe solubilitatea diferit a lipidelor n diferii solveni, se bazeaz metodele de extracie i separare a lipidelor din diferite materiale vegetale i animale.

3.1. LIPIDE SIMPLE

Lipidele simple sunt substane ternare constituite din elementele C, H, O, care din punct de vedere a structurii chimice sunt esteri ai acizilor grai cu diferii alcooli (monohidroxilici aciclici sau ciclici sau polihidroxilici). Se pot clasifica, n funcie de compoziia lor chimic n: gliceride: esteri ai glicerolului cu acizi grai superiori; ceride: esteri ai alcoolilor superiori cu acizi grai superiori; etolide: compui de condensare intermolecular a hidroxiacizilor; steride: esteri ai sterolilor cu acizi grai superiori. 3.1.1. Gliceride (grsimi, acilgliceroli) Gliceridele sunt cele mai rspndite dintre lipidele din regnul vegetal, ele fiind prezente mai ales n seminele plantelor oleaginoase. Gliceridele se pot diferenia i caracteriza prin coninutul de acizi grai componeni. Plantele oleaginoase conin n proporie mare acid oleic i acid palmitic (80% n uleiul de msline). Uleiul de floarea soarelui conine cca. 55-60% acid linoleic, 33-35% acid oleic i 5-10% acid palmitic. Uleiurile de graminee conin 10-15% acid palmitic, 30-60% acid oleic i 30-60% acid linoleic. Seminele sau organele plantelor pot conine ca substane de rezerv, n afara acizilor grai menionai i acizi grai caracteristici, de exemplu, seminele de rapi conin 45-55% acid erucic, alunele de pmnt conin acid arahic etc. Gliceridele sunt din punct de vedere chimic esteri ai glicerolului (propantriol, glicerina) cu acizii grai superiori. Dup cum sunt esterificate una, dou sau trei grupe hidroxilice ale glicerinei, rezult mono-, di-, sau trigliceride. Dup poziia hidroxilului esterificat, glicerina poate forma, cu acelai acid gras, doi izomeri de poziie: - sau -monoglicerid (monoacilgliceroli). Deoarece monogliceridele au atomul de carbon C2 asimetric, vor exista dou -monogliceride enantiomere.
H2 C HC OH

H2C HC H2C

O CO R OH OH

H2C HC H2C

O CO R O OH CO R

H2C HC H2C

O CO R O O CO R CO R

OH

H2 C

OH

glicerol

monoacilglicerol (monoglicerid)

diacilglicerol (diglicerid)

triacilglicerol (triglicerid)

Dac esterificarea celor dou sau trei grupe OH din glicerol se realizeaz cu acizi grai identici, se obin digliceride, respectiv trigliceride omogene, iar dac esterificarea decurge cu acizi grai diferii, rezult digliceride i trigliceride mixte. Prezena atomului de carbon asimetric n structura digliceridelor i a trigliceridelor, ca i n molecula acizilor grai, determin creterea numrului de izomeri de poziie i a celor optici. Marea majoritate a gliceridelor naturale sunt trigliceride omogene sau trigliceride mixte.

3.1.1.1. Componentele gliceridelor. Acizii grai superiori Majoritatea acizilor grai din grsimile naturale sunt acizi monocarboxilici, cu caten neramificat (normal) i cu numr par de atomi de carbon n molecul. Clasificarea lor se face n funcie de natura restului hidrocarbonat: a) Acizi grai superiori saturai Acizii grai superiori saturai au formula general: CH3-(CH2)nCOOH, n care n = numr par, cu valori ntre 2-30. Principalii acizi grai saturai sunt redai n Tabelul 3.1, n care este indicat i sursa natural de provenien. Tabelul 3.1. Acizi grai superiori saturai
Denumirea Acid butiric Acid capronic Acid caprilic Acid caprinic Acid lauric Acid miristic Acid palmitic Acid stearic Acid arahic Acid behenic Acid lignoceric Nr. atomi carbon C4 C6 C8 C10 C12 C14 C16 C18 C20 C22 C24 Formula molecular CH3(CH2)2COOH CH3(CH2)4COOH CH3(CH2)6COOH CH3(CH2)8COOH CH3(CH2)10COOH CH3(CH2)12COOH CH3(CH2)14COOH CH3(CH2)16COOH CH3(CH2)18COOH CH3(CH2)20COOH CH3(CH2)22COOH Provenien Unt de vac Unt de capr Unt de cocos Unt de cocos Unt de laur Majoritatea grsimilor naturale Idem Idem Ulei de arahide Ulei de mutar Ulei de arahide Sfingomieline i cerebrozide

b) Acizii grai superiori nesaturai Sunt acizi monocarboxilici cu numr par de atomi de carbon care prezint n molecul una sau mai multe duble legturi carbon-carbon. n plante au fost identificai i acizi grai nesaturai cu o tripl legtur ntre atomii de carbon. n Tabelul 3.2 sunt redai principalii reprezentani ai acizilor grai nesaturai. Tabelul 3.2. Acizi grai superiori nesaturai
Denumirea Acid lauroleic Acid miristoleic Acid palmitoleic Acid oleic Acid erucic Nr. atomi carbon C12 C14 C16 C18 C22 Formula molecular CH3-CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH CH3-(CH2)3-CH=CH-(CH2)7-COOH CH3-(CH2)5-CH=CH-(CH2)7-COOH CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)11-COOH Cu dou duble legturi Acid linoleic C18 CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)7COOH Toate lipidele Provenien Lapte de capr Ulei de balen Grsimi animale idem Ulei de conifere

Cu trei duble legturi Acid linolenic Acid arahidonic C18 CH3CH2CH=CHCH2CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH Cu patru duble legturi C20 CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)4-CH2-CH2-COOH n fosfolipide Ulei de in

Cel mai rspndit acid gras nesaturat este acidul oleic (cu cei doi izomeri cis i trans), care se gsete n lipide n proporii de pn la 80%, fiind nsoit adesea de acidul linoleic i de acidul palmitic. Acizii linoleic i linolenic sunt constitueni ai uleiului de in, acizii polinesaturai superiori sunt constitueni ai lipidelor ficatului petilor. Acizii grai superiori nesaturai se numesc i acizi grai eseniali (nu pot fi sintetizai n organismele animale). c) Hidroxiacizi grai superiori saturai Hidroxiacizii grai conin n molecul i o grup hidroxil. Sunt componente ale etolidelor, esterii macrociclici din cerurile coniferelor. n rinile multor conifere se ntlnesc: acidul sabinic (acid hidroxilauric: HO-CH2-(CH2)10-COOH) i acidul iuniperic (acid hidroxipalmitic: HO-CH2-(CH2)14COOH.

CURS 6 3.1.1.2. Denumirea gliceridelor Denumirea gliceridelor ia n considerare poziia din molecula glicerolului la care are loc reacia de esterificare i natura acizilor grai componeni:
H2C HC H2C O CO (CH2)14 CH3 O O CO CO (CH2)14 CH3 (CH2)14 CH3

tripalmitina

H 2C HC H 2C

O CO (CH2)14 CH3 O O CO CO (CH2)7 CH (CH2)16 CH3

(palmito-oleo-stearin)

CH

(CH2)7 COOH

-palmitil--oleil--stearil-glicerol

3.1.1.3. Proprieti fizice ale gliceridelor (acilglicerolilor) Starea de agregare a gliceridelor depinde de tipul de acizi grai superiori care intr n constituia lor: gliceridele cu acizi grai superiori nesaturai sunt lichide (uleiuri vegetale, de exemplu trioleina), gliceridele cu acizi grai superiori saturai sunt solide (tristearina). Gliceridele sunt substane hidrofobe, insolubile n ap, solubile n solveni organici (eter etilic, aceton, benzen, benzin etc.). Grsimile pot forma n ap dispersii coloidale sau emulsii. Acestea sunt stabilizate prin prezena anumitor substane tensioactive, emulgatoare, cum sunt proteinele, spunul etc., n special n mediu slab alcalin. Emulsiile prezint o deosebit importan tehnic; o emulsie natural de grsime, stabilizat cu ajutorul proteinelor, este laptele. Deoarece grsimile naturale sunt amestecuri de trigliceride mixte, nu pot fi caracterizate prin constante fizice nete (de exemplu, nu prezint temperaturi de topire fixe). Cu excepia tributirinei, trigliceridele n stare pur sunt incolore i inodore. 3.1.1.4. Proprieti chimice ale gliceridelor Acilglicerolii (gliceridele) prezint proprieti chimice caracteristice esterilor, completate cu proprieti chimice ale glicerolului i ale acizilor grai superiori constitueni. a) Reacia de hidroliz acid sau enzimatic Reacia de hidroliz poate decurge n prezena acizilor tari, a bazelor tari, sau a enzimelor (lipaze) prezente n organismele vii. Hidroliza poate decurge n etape, cu formarea din triacilgliceroli (trigliceride) a diacilglicerolilor (digliceride) i a monoacilglicerolilor (monogliceride), iar n final, a glicerolului i acizilor grai superiori.
H2 C HC H2 C O CO R
HOH

H2 C HC H2 C

O CO R O OH CO R
HOH - RCOOH

H2 C HC H2 C

O CO R OH OH
HOH - RCOOH

H2 C HC H2 C
glicerol

OH OH OH

O O

CO R
- RCOOH

CO R

triacilglicerol (triglicerid)

diacilglicerol (diglicerid)

monoacilglicerol (monoglicerid)

Hidroliza enzimatic a gliceridelor asigur n organismele vegetale i animale nutriia, deoarece alimentele hidrolizate devin asimilabile. n procesul de ncolire a seminelor plantelor se elibereaz glicerol i acizi grai care sunt utilizai de plante n procese vitale. Hidroliza sub aciunea bazelor tari (reacia de saponificare), decurge la cald i conduce la formarea de glicerol i sruri (cu cationii metalelor din baz) ale acizilor grai (spunuri).
H2C HC H2C O CO R O O CO R + 3 NaOH CO R H2C HC H2C OH OH OH + 3 RCOONa
spun

Indicele de saponificare reprezint numrul de mg KOH necesar saponificrii unui gram de lipid. El este corelat cu mrimea moleculei: un indice de saponificare mic corespunde unei grsimi cu mas molecular mare; un indice de saponificare mare, corespunde grsimilor care conin acizi grai cu caten scurt, deci mas molecular mic. b) Reacii de adiie la dublele legturi din acizii grai superiori Hidrogenarea grsimilor este o reacie specific gliceridelor nesaturate (lichide), care conduce la solidificarea lor, consecin a saturrii dublelor legturi din acizii grai superiori prin adiie de hidrogen. Ea este nsoit de o deschidere a culorii i de modificri ale mirosului i gustului grsimii. n industria alimentar, procesul este utilizat la obinerea margarinei prin hidrogenarea parial a unor uleiuri vegetale (de floarea soarelui, de soia etc.) i amestecarea lor cu gliceride cu punct de topire sczut, cu NaCl, pigmeni carotenoidici etc. Halogenarea grsimilor lichide decurge ca reacie de adiie a halogenilor la dublele legturi din acizii grai nesaturai esterificai, i introduce o nou constant, care caracterizeaz structura nesaturat i anume: indicele de iod care reprezint cantitatea de iod n grame adiionat la 100 g de lipid. Uleiurile cu indice de iod mic se numesc nesicative (uleiul de msline) i nu se usuc la aer; ele sunt cele mai potrivite pentru scopuri alimentare. Cele cu indice de iod mai mare de 120 se usuc repede i se numesc sicative (uleiul de soia, uleiul de in). Indicele de aciditate reprezint cantitatea n mg de KOH necesar pentru neutralizarea acizilor grai liberi dintr-un gram de lipid. Aceast mrime ofer indicaii asupra intensitii procesului de degradare a lipidei. Rncezirea grsimilor. n contact cu oxigenul i vaporii de ap din atmosfer, majoritatea gliceridelor vegetale sufer transformri chimice i biochimice care le imprim gust i miros neplcut (fenomenul de rncezire. Din punct de vedere chimic, rncezirea este cu att mai accelerat, cu ct gliceridele posed un coninut mai mare de acizi grai nesaturai i este influenat de condiiile de obinere i pstrare. Procesul de rncezire const ntr-o prim faz n hidroliza sub aciunea apei i a enzimelor lipaze, i conduce la formarea acizilor carboxilici, proces evideniat prin creterea indicelui de aciditate. Urmeaz oxidarea acizilor grai nesaturai (la dublele legturi) cu formare de acizi -cetonici, hidroperoxizi (R-O-O-H) i peroxizi (R-O-O-R) instabili, care se pot transforma final n alcooli, aldehide, cetone, hidroxiacizi, imprimnd grsimii caracter acid, gust i miros neplcut. Procesul de rncezire se poate reprezenta astfel:
O H2C HC H2C O CO O O CO CO (CH2)n (CH2)n (CH2)n CH3 CH3 CH3 H2C HC H2C O CO O OH CO
+

(CH2)n-1 (CH2)n-1 HOOC

CH3

H
+

C H HCOOH COOH

CH3

(CH2)n

Un alt proces degradativ poate avea loc la nclzirea puternic a grsimilor, ca urmare a deshidratrii glicerolului cu formarea acroleinei (aldehida acrilic), un compus toxic.
H2C OH

O
HC OH
-2 H2O

H2C

CH

OH

H2C

CH

H
acrolein

H2C
glicerol

OH
enol

3.1.2. Ceride
Ceridele sunt esteri naturali ai alcoolilor superiori cu acizii grai superiori, de obicei cu acelai numr de atomi de carbon n molecul. n Tabelul 3.3 sunt redai principalii alcooli superiori i acizii grai corespondeni, din structura ceridelor. Tabelul 3.3. Principalii alcooli superiori i acizii grai corespondeni din structura ceridelor
Denumire Alcool cetilic Alcool stearilic Alcool arahic Alcool carnaubic Alcool cerilic Alcool miricilic Alcooli superiori monohidroxilici CH3-(CH2)14-CH2-OH CH3-(CH2)16-CH2-OH CH3-(CH2)18-CH2-OH CH3-(CH2)22-CH2-OH CH3-(CH2)24-CH2-OH CH3-(CH2)28-CH2-OH Denumire Acid palmitic Acid stearic Acid arahic Acid carnaubic Acid cerotic Acid melistic Acizi grai caracteristici CH3-(CH2)14-COOH CH3-(CH2)16-COOH CH3-(CH2)20-COOH CH3-(CH2)22-COOH CH3-(CH2)24-COOH CH3-(CH2)28-COOH

Ceridele (de exemplu: stearatul de stearil, palmitatul de cetil) sunt substane de culoare albglbuie, cu aspect unsuros, insolubile n ap, solubile n solveni organici. Sunt rezistente la aciunea agenilor chimici, greu hidrolizabile, cu indice de iod sczut i rezistente la rncezire. Cerurile naturale sunt de fapt amestecuri de mai muli esteri (ceride, steride), n care, de obicei, predomin unul dintre esteri, cu cantiti variabile de acizi liberi, alcani, rini etc. Cerurile sunt larg rspndite n regnul vegetal, unde formeaz un strat protector pe flori, frunze, fructe, care le protejeaz mpotriva cldurii, luminii excesive, umiditii, prentmpin pierderea apei i procesul de uscare, precum i atacul microbian. Ceara de trestie de zahr, care apare sub form de bastonae pe tulpinile acestei plante, este caracterizat prin absena acizilor grai superiori care conin C24-C34 i prezena parafinelor (50%). Ceara de Cernauba de pe frunzele palmierului Corypha este cea mai mult studiat i este format preponderent din cerotat de miricil. Ea se ntlnete n bumbac, n cnep i n trestia de zahr i se utilizeaz la fabricarea cremei de ghete, intr n compoziia cerurilor i a masticurilor utilizate n pomicultur pentru ungerea locurilor de altoire sau a rnilor pomilor fructiferi. Ceridele animale sunt secretate de glandele sebacee ale mamiferelor (sebum), de exemplu: ceara lichid, uleiul de spermaceti i ceara solid walratul (secretate de caalot), ceara de albine, lanolina (cu rol de protecie al lnii oilor) etc. Datorit proprietilor plastice i emulsionante, cerurile se utilizeaz la fabricarea de lacuri, paste de lustruit, materiale electroizolatoare, restaurarea tablourilor etc.

3.1.3. Etolide
Etolidele sunt lipide speciale, ntlnite n cerurile unor conifere (pini, jnepeni, ienuperi etc.). Din punct de vedere chimic sunt esteri ciclici ai unor hidroxiacizi superiori: acidul sabinic HOCH2-(CH2)10-COOH i acidul juniperic HO-CH2-(CH2)14-COOH. n structura etolidelor intr dou molecule ale aceluiai acid; una dintre molecule particip la esterificare prin grupa carboxil, iar cealalt prin grupa hidroxil.
H2C OH OH O C (CH2)n (CH2)n C OH OH CH2 O

H2C O
O C

(CH2)14 C
O
(CH2)14 CH2

H2 C O O C

(CH2)10 C O (CH2)10 CH2

hidroxiacizi

etolida juniperic

etolida sabinic

3.1.4. Steride
Steridele reprezint o clas important de lipide simple, rspndite n cantiti mici att n organismele vegetale ct i n cele animal, i anume: fitosteride (n regnul vegetal); zoosteride (n regnul animal); micosteride (n ciuperci). Din punct de vedere chimic sunt esteri ai acizilor grai superiori, acidul palmitic, acidul stearic, acidul oleic, cu monoalcooli policiclici numii steroli. Sterolii sunt compui policiclici care au la baz nucleul ciclopentanperhidrofenantrenic, structur tetraciclic comun (steran) i pentru alte substane importante din punct de vedere biologic i biochimic: hormoni sexuali, acizi biliari, alcaloizi, glicozizi, vitaminele D etc. Sterolii se deosebesc ntre ei prin numrul i poziia legturilor duble i prin catenele laterale grefate pe structura steranului. Cel mai important dintre zoosteroli este colesterolul, care este larg rspndit n toate celulele corpului omenesc, cu precdere n celulele sistemului nervos. 7-Dehidrocolesterolul este o provitamin D, la fel ca i ergosterolul care este rspndit n drojdii.
H3 C CH3 CH3

H 3C CH3 CH3 C2H5

HO (R)

HO (R)

colesterol R + colesterol = colesterid

sitosterol R + sitosterol = sitosterid

Colesterolul are aciune antitoxic, antihemolitic i de reglare a permeabilitii membranelor celulare. n cazul unor perturbri metabolice, contribuie la instalarea aterosclerozei i formarea calculilor biliari. De asemenea, colesterolul constituie compusul de baz pentru sinteza altor steride importante (acizii biliari, hormonii steroidici, vitaminele D etc.).

n regnul vegetal sunt prezeni sub form liber sau sub form de glicozide: sitosterolul i stigmasterolul (n seminele plantelor, n uleiurile extrase din germeni de soia, de gru, de porumb), precum i ergosterolul (provitamina D), izolat din cornul secarei, din levuri etc.
H3C CH3 CH3 C2H5 CH3 H3C CH3 CH3

HO (R)

HO (R)

stigmasterol R + stigmasterol = stigmasterid

ergosterol R + ergosterol = ergosterid

Sterolii sunt substane cristaline, insolubile n ap, solubile n solveni organici, ca i steridele (produii lor de esterificare cu acizii grai), cu care formeaz asociaii. Clasificare lor n zoo-, fito-, micosteroli, nu mai este riguroas, deoarece au fost pui n eviden zoosteroli i n regnul vegetal, ca de exemplu: colesterol n unele alge, estriol n flori de salcie, estron n polenul unor flori etc.

3.2. LIPIDE COMPLEXE

Lipidele complexe sunt compui biochimici componeni ai unor organe i esuturi cu activitate biologic i fiziologic intens, rspndii att n regnul vegetal (semine, fructe) ct i n regnul animal (creier, ficat, inim). Lipidele complexe sunt esteri ai acizilor grai la construcia crora mai particip, pe lng glicerol, i acid fosforic, aminoalcooli, aminoacizi, iar n unele cazuri inozitol i glucide. Din punct de vedere al compoziiei chimice conin alturi de atomi de C, H, O i atomi de P, N, S, i spre deosebire de lipidele simple sunt compui cu structur amfoter. Prezena n aceeai molecul a grupelor hidrofile i lipofile are o deosebit importan pentru proprietile fizico-chimice ale lipidelor complexe (formare de micele, de lamele) care sunt componente de baz ale membranelor celulare. Proporia de lipide complexe n organismele vegetale este relativ mic. Frunzele, fructele i rdcinile plantelor conin cca. 0,1%, seminele de cereale i plante leguminoase 1-2%, seminele de soia (cele mai bogate n lipide) conin maximum 3% lipide complexe. n organismele vii, lipidele complexe mai sunt asociate cu proteinele (lipoproteine). Clasificarea lipidelor complexe dup structura chimic este urmtoarea: fr N: - glicolipide (gliceride + glucide) Lipide complexe fr P cu N: - sfingolipide (sfingozina + acizi grai + glucide) cu S: - sulfatide (sfingozina + acizi grai + glucide) fr N: - glicerofosfolipide (acizi fosfatidici = gliceride + H3PO4) - fosfatidilgliceroli (gliceride + glicerol + H3PO4) - inozitolfosfatide (gliceride + H3PO4 +inozitol) gliceroaminofosfatide: - serinfosfatide (acid fosfatidic + serina) - colaminfosfatide (acid fosfatidic + colamina) - colinfosfatide (acid fosfatidic + colina) sfingofosfolipide (sfingozina + acizi grai + H3PO4 + glucide)

Lipide complexe cu P cu N

3.2.1. Lipide complexe fr fosfor

Sunt constituite dintr-un rest de mono- sau oligoglucid i un rest de glicerid (ester al glicerolului cu acizi grai superiori). 3.2.1.1.Glicolipide Glicolipidele sunt componente ale bacteriilor dar i ale mamiferelor, formate din 1,2diacilglicerol (diglicerid) de care se leag o mono-, sau o diglucid. Din aceast categorie fac parte cerebrozidele i gangliozidele. Cerebrozidele se gsesc preponderent n creier, dar i n esuturi i organe (eritrocite, leucocite, splin, plmni etc.). n structura lor intr un acid gras superior, un aminoalcool superior nesaturat, sfingozina (CH2(CH2)12CH=CH-CHOH-CHNH2-CH2-OH) i o glucid (galactoza, glucoza). Gangliozidele sunt lipide complexe n a cror compoziie intr o ceramid i o aminoglucid (N-acetilglucozamina) i acidul sialic. Gangliozidele pe baz de sfingozin sunt importante deoarece prin intermediul lor se determin grupele sanguine.

3.2.1.2. Sfingolipide
Sfingolipidele conin n molecul n locul glicerolului un aminoalcool: sfingozina, dihidrosfingozina i fitosfingozina. Sfingolipidele din regnul vegetal conin fitosfingozina: CH3CH2-CH2-(CH2)11-(CHOH)2-CH(NH2)-CH2OH care a fost izolat din soia, porumb i alte plante. n sfingolipidele din boabele de soia, 95% din acizii grai sunt acizii palmitic i stearic. 3.2.1.3. Sulfatide Sulfatidele sunt lipide n constituia crora intr i sulf (sub form de esteri ai glicosfingolipidelor cu acidul sulfuric) i uneori i fosfor. Ele sunt asemntoare structural cerebrozidelor i gangliozidelor, iar glucida component este galactoza. Prezena lor (sub form de glicosulfolipide) n esuturile frunzei, fotosintetizante ale plantelor, relev rolul fiziologic important n metabolismul glucidic. Cele mai importante glicolipide vegetale sunt manogalactozilgliceridele i digalactozilgliceridele, n care acidul gras care esterific grupele hidroxil ale glicerolului este acidul linolenic. Ambele glicolipide au fost puse n eviden n gru, n trifoi, ovz verde i n ierburile de furaj.
H2C O SO3H
CH2OH O O CH2 HC O CO R H2C O CO R

CH3

(CH2)12 CH CH CH2 O SO3H

CH OH HC NH2

CH2 HC O CO R

CH2

H2C O CO R

glicolipide

glicosulfolipid

sulfatid

3.2.2. Lipide complexe cu fosfor i fr azot n molecul

3.2.2.1. Acizii fosfatidici Sunt compui biochimici, componeni ai membranelor biologice, care provin dintr-un alcool (glicerol, inozitol, aminoalcoolul sfingozina), acizi grai superiori i acid fosforic. Acizii grai din structura acizilor fosfatidici sunt n special acidul stearic, acidul oleic, palmitic, linoleic i linolenic. Cele mai importante lipide complexe cu P i fr N sunt glicerofosfolipidele (glicerofosfatide) sau acizi fosfatidici, respectiv esterii i ai digliceridelor cu acidul fosforic:
H2C O CO R

H2C

R OH H2C O P O OH acidul -glicerofosfatidic

HC O

CO

HC

H2C

O CO R OH O P O OH O CO R

acidul -glicerofosfatidic

Acizii fosfatidici ndeplinesc n organism funcii metabolice importante, cum ar fi: transformarea acizilor grai sintetizai n ficat n fosfatide, care sunt componente ale lipoproteinelor, form sub care sunt transportate n snge. Tulburri ale biosintezei fosfatidelor n ficat mpiedic transportul acizilor grai, i ca urmare, disfuncii ale ficatului. n plante (spanac, varz) se gsesc att n stare liber ct i sub form de sruri de Ca, Mg, K, predominnd n esuturile fotosintetizante. n cazul n care ambele grupe hidroxil ale glicerolului sunt esterificate cu acid fosforic se obin cardiolipidele, izolate din muchii inimii, componente ale membranelor mitocondriilor. 3.2.2.2. Inozitolfosfatidele Inozitolfosfatidele, componente ale membranelor celulare, sunt esteri ai acizilor fosfatidici cu poliolul ciclic (cu 6 atomi de carbon) inozitol. Dup modul n care se pot biosintetiza (din hidroxoacetonfosfat) i compuii la formarea crora particip (inozitolfosfolipide, serinfosfatide, colaminfofatide, colinfosfatide), rezult rolul important pe care l prezint acizii fosfatidici n metabolism, precum i la realizarea unor corelaii ntre metabolismul glucidic i cel lipidic.
H2C O CO R O O CO P R OH O H2C HC OH OH H H H H OH OH
OH

O CO R O O CO P R OH O OH OH O H OH OH
OH

H2C HC H2C

O O O

CO R CO P R OH O CH2 HC H2C OH OH

HC H2C

H2C

O OH H

O H H H H

H H

poliglicerofosfatida

monofosfoinozitol inozitolfosfatida

difosfoinozitol

3.2.3. Lipide complexe cu fosfor i cu azot n molecul

3.2.3.1. Gliceroaminofosfolipidele Gliceroaminofosfolipidele sunt derivai ai acizilor fosfatidici rezultai prin esterificarea restului de acid fosforic cu hidroxilul alcoolic al bazelor azotate serina, colamina sau colina. Serina este un hidroxiaminoacid, care poate fi biosintetizat din acidul 3-fosfogliceric (produs intermediar din metabolismul glucidic). Serina este strns nrudit cu celelalte baze azotate, dup cum urmeaz:
H2C HC OH NH2
- CO2

H2C H2C

OH NH2

+3 CH3I -2 HI

H2C H2C

OH N CH3 I CH3 CH3

colina

COOH
serina

colamina

Dup tipul de baz azotat gliceroaminofosfolipidele se clasifica n: serinfosfatide; colaminfosfatide (etanolaminofosfolipide); colinfosfatide (lecitine, fosfatidilcoline). 3.2.3.2. Serinfosfatidele Serinfosfatidele se ntlnesc n cantitate mai mic alturi de celelalte fosfolipide n: creier, esut nervos (15% din fosfolipidele totale) ficat, muchi, iar n organismele vegetale n: soia, arahide, bumbac, in etc. Serinfosfatidele sunt esteri ai acizilor fosfatidici cu baza azotat serina. Datorit prezenei celor dou grupe funcionale acide, serinfosfatidele au caracter acid mai pronunat dect celelalte gliceroaminofosfolipide. n esuturi se gsesc sub form de sruri de K. Serinfosfatidele au proprieti fizice asemntoare celorlalte fosfatide, dar sunt mai puin solubile n etanol. Prezint caracter amfionic i ndeplinesc n organism rol de donor i acceptor de acid fosforic, fiind implicate i n fenomenele de permeabilitate celular.
H2C O CO R

HC

CO

H2C

NH2 R O P O CH2 CH OH

COOH

3.2.3.3. Colaminfosfatidele Colaminfosfatidele (cefaline, etanolaminofosfolipide) sunt lipide complexe constituente (alturi de serinfosfatide i lecitine) ale tuturor membranelor esuturilor animale (mai ales ale creierului), dar i ale celor vegetale (soia, germeni de gru, semine de floarea soarelui, de in, de susan etc.). Structural sunt esteri ai acizilor fosfatidici cu baza azotat colamina (etanolamina). Prezena acizilor grai nesaturai determin reactivitatea mrit a cefalinelor.

H2C HC H2C

O O O

CO CO

R O P O CH2 CH2 NH2 OH

3.2.3.4. Colinfosfatidele Colinfosfatidele (lecitine, fosfatidilcoline) sunt esteri ai acizilor fosfatidici cu baza azotat colina. Sunt reprezentanii cei mai rspndii ai fosfogliceridelor. Colinfosfatidele sunt ntlnite n regnul vegetal ca lipide de rezerv n: soia, n embrionul cerealelor i n seminele leguminoaselor, precum i n toate celulele organismelor animale (constitueni ai membranelor creierului, ficatului, mduvei).
H2C HC H2C O CO R O O CO R CH3 O P O CH2 CH2 N CH3 OH CH3

Acizii grai din colinfosfatide sunt: acidul palmitic, stearic, oleic, linoleic, linolenic i arahidonic, ca i acizi grai nesaturai (C18-C24). Proprietile lecitinelor sunt corelate cu structura lor, n special cu natura acizilor grai. Lecitinele prezint caracter amfionic: componenta fosforic este hidrofil, iar restul moleculei este hidrofob. Colinfosfolipidele i colaminfosfolipidele pot pierde sub aciunea unor enzime specifice unul dintre cei doi acizi grai formnd lizocolinfosfolipide, respectiv, lizocolaminfosfolipide, care prezint o puternic aciune hemolitic (lizolecitine). Lizolecitina este prezent n regnul vegetal n orez decorticat, semine de gru, secar, orz, ulei de soia, unele microorganisme. Lecitinele au un rol important n metabolismul lipidic (catabolismul acizilor grai superiori). Lipoproteinele sunt agregate biochimice formate din: lipide (gliceride), fosfolipide, colesterol i esteri ai colesterolului. Se pot clasifica, n funcie de densitate, n trei grupe: lipoproteine cu densitate mic, (LDL), cu densitate foarte mic (VLDL), i cu densitate mare (HDL), care difer prin componentele lipidice i proteice. Ele sunt biosintetizate n ficat i constituie forma de transport a lipidelor insolubile n ap, respectiv n plasma sanguin.

CURS 7 4. PROTIDE
Protidele sunt biomolecule cu structur complex, constitueni universali i indispensabili ai tuturor formelor de via. Este puin probabil s existe n univers alt tip de molecule cu proprieti mai remarcabile dect cele ale protidelor (protos = cel dinti), ele asigurnd organizarea i meninerea structurilor morfologice ale celulelor, precum i manifestarea funciilor i activitilor vitale ale acestora. Proporia protidelor n organismele vii este mai constant dect a lipidelor i glucidelor; n regnul vegetal, coninutul de protide este mai mic i foarte variat, n funcie de specie i organ. Coninutul cel mai mare de protide se gsete n organele de rezerv ale plantelor, n seminele de leguminoase, o cantitate mijlocie se gsete n boabele de cereale, cele mai puine protide gsindu-se n legume, rdcinoase i tuberculifere. Este esenial de remarcat rolul dominant al protidelor n organismele vii, deoarece nu se cunosc forme de via fr protide. Astfel, reaciile chimice din celule depind de combinarea enzimelor de natur proteic cu diferitele substraturi, structuri cum ar fi cele ale muchilor depind de interaciile dintre protide, controlul genetic este determinat de interaciile protideADN, activitatea nervoas implic interacii transmitor-protid, imunoprotecia se bazeaz pe interacii anticorp-antigen. Protidele prezint proprieti fizico-chimice caracteristice care sunt corelate cu un coninut de energie ridicat (entropie ridicat), ceea ce le asigur atribuiile unui sistem dinamic n permanent autorenoire i interaciune cu mediul exterior. Constituind suportul chimic structural i funcional al materiei vii i al fenomenelor specifice acesteia, protidele sunt purttorul material al nsuirilor biologice: diferenierea, creterea, dezvoltarea i reproducerea. Protidele ndeplinesc n organism, datorit naltului grad de organizare i diversitate, roluri multiple: rol structural (plastic), fiind constitueni principali ai protoplasmei i nucleului celular. Ele reprezint: 65-70% din materia uscat a organismului animal, 2-35% din materia uscat a organismului vegetal, 80-90% din materia uscat din microorganisme; rol biocatalitic, deoarece sub form de enzime, catalizeaz selectiv reaciile biochimice din organismele vii; rolul fizico-chimic al protidelor se datoreaz caracterului lor coloidal i amfoter care le ofer posibilitatea de a participa la reglarea presiunii osmotice, a permeabilitii selectiv a membranelor, a echilibrului electrostatic i acido-bazic, precum i la transportul n organism al ionilor de importan vital; rol de anticorpi, participnd la procesele imunologice de aprare a organismelor superioare; rol de represori, prin aptitudinea de a traduce din genomul celular numai mesajul necesar ntr-un anumit moment din viaa celulei sau organismului; rol de reglare fin a proceselor biochimice, prin intermediul hormonilor.

4.1. STRUCTUR CHIMIC. CLASIFICARE

Protidele sunt substane cuaternare, constituite din atomi de C, H, O, N. Protidele cu rol fiziologic important mai conin i atomi de S, P, iar unele conin n proporie mai mic i atomi de metale: Mg, Ca, Zn, Fe, Cu etc., n metalproteide i cromoproteide. Protidele sunt compui macromoleculari, care prin hidroliz pun n libertate aminoacizi (au ca unitate structural fundamental aminoacizii). innd cont de complexitatea structurii lor, protidele se clasific astfel:

Monoprotide (aminoacizi) Oligopeptide Protide Poliprotide inferioare (peptide) Poliprotide superioare (proteide) Polipeptide Holoproteide (proteine) Heteroproteide

Dintre protide, numai proteidele formeaz macromolecule, iar pentru caracterizarea lor calitativ i cantitativ este necesar determinarea aminoacizilor componeni prin hidroliza total a proteinelor.

4.2. AMINOACIZI (MONOPROTIDE)

Aminoacizii reprezint unitile structurale nehidrolizabile ale poliprotidelor. Dei n natur se cunosc aproximativ 200 de aminoacizi, doar 20-22 sunt utilizai pentru biosinteza protidelor i sunt codificai de codul genetic, fiind denumii i aminoacizi proteinogeni (ordinari). Ceilali aminoacizi, mai puin rspndii, sunt numii aminoacizi neproteinogeni (ocazionali). Dintre toate organismele vii, cele vegetale pot sintetiza i deci conine numrul cel mai mare de aminoacizi, rspndii mai ales n seminele fructelor, plante rdcinoase, conifere, etc. Aminoacizii: valin, leucin, izoleucin, treonin, metionin, lisin, fenilalanin, triptofan pot fi sintetizai numai de plante i se numesc aminoacizi eseniali. Lipsa lor n alimentaie provoac grave tulburri ale metabolismului (boli careniale). Aminoacizii care pot fi sintetizai i de organismul uman i animal se numesc aminoacizi neeseniali i sunt reprezentai de: glicocol, alanin, serin, cistein, acid aspartic, acid glutamic, arginin, tirozin, prolin, hidroxipriolin, histidin. Unii dintre aminoacizi pot fi convertii pe cale chimic n glucide i sunt denumii aminoacizi glucoformatori: glicocol, alanin, serin, acid aspartic, acid glutamic, arginin, citrulin.

4.2.1. Structura chimic a aminoacizilor

Aminoacizii sunt compui organici difuncionali, care conin grupele funcionale amino (NH2) i carboxil (-COOH). Caracteristic acestei structuri este grefarea ambelor grupe funcionale pe acelai atom de carbon (poziia ) n cazul aminoacizilor din structura proteidelor (-aminoacizi). Se cunosc i aminoacizi la care grupa -NH2 este legat de al doilea atom de carbon fa de grupa -COOH, (poziia ), al treilea (poziia ) etc. La ali aminoacizi apare legat de atomul de carbon , n afar de grupa funcional -NH2, un rest hidrocarbonat, care poate fi un rest hidrocarbonat alifatic sau aromatic, sau grupe funcionale.

4.2.2. Nomenclatura aminoacizilor

Denumirea tiinific a aminoacizilor este format din prefixul amino i numele acidului de la care provine, cu indicarea poziiei atomului de carbon de care este legat grupa funcional NH2 (, , , , sau 2, 3 etc.) etc., fa de grupa funcional carboxil -COOH. n general nomenclatura raional este mai puin folosit, deoarece sunt utilizate n general, denumiri uzuale, specifice fiecrui aminoacid (glicocol, alanin, serin, triptofan etc.).

4.2.3. Clasificarea aminoacizilor dup structura lor chimic, care cuprinde toi cei
20 de aminoacizi proteinogeni, este urmtoarea:

Neutri

Monoamino-monocarboxilici Tioaminoacizi Hidroxiaminoacizi Monoamino-dicarboxilici Diamino-monocarboxilici

Alifatici

Acizi Bazici

Aminoacizi Aromatici Heterociclici 4.2.3.1. Aminoacizi alifatici

n aceast grup sunt cuprini toi aminoacizii n care R este un rest hidrocarbonat alifatic. a) Aminoacizi monoamino-monocarboxilici (cu caracter neutru): Glicocolul (glicina, acidul aminoacetic), cunoscut i sub denumirea de zahrul gelatinei a fost obinut prin hidroliza acid a gelatinei. Este singurul -aminoacid care nu are atom de carbon asimetric, i deci nu prezint izomerie optic. Majoritatea organismelor vegetale conin glicocol (0,2-1%), dar exist i proteide vegetale mai bogate n glicocol, ca de exemplu edestina (2,5-3,8%), ricinina (6,6%) etc. Glicocolul lipsete complet din zein (porumb) i hordein (orz). L (-) Alanina (acidul -aminopropionic) este nelipsit din proteidele vegetale i animale, i a fost identificat la hidroliza proteinelor din soia. Este prezent n cantitate mare n zein (910%), iar n stare liber a fost identificat n alge i n frunze de tutun. Izomerul -alanina a fost pus n eviden n soia, mere crude, tomate i n structura acidului pantotenic. L (+) Valina (acidul -aminovalerianic) este regsit n cantiti mici n structura multor proteide. Bogate n valin sunt seminele de in (12,7%) i de fasole (6,2%). n stare liber a fost pus n eviden n lucern i germenii de secar. L (-) Leucina (acidul -aminoizocapronic), descoperit n hidrolizatele de ca, este foarte rspndit n organismele vegetale, n special n zein (19,25%) i n edestin. L (+) Izoleucina (acidul -amino--metilvalerianic) este izomera de poziie a leucinei. Prezena n molecul a doi atomi de carbon asimetrici conduce la existena a patru izomeri optici. Leucina i izoleucina se transform n timpul fermentaiei alcoolice (prin decarboxilare i dezaminare) n alcool amilic i alcool izoamilic. CH2 COOH NH2
acid aminoacetic glicin glicocol Gli

CH3

CH COOH NH2

CH3CHCH CH COOH CH3 NH2

acid 2-amino-3-metilpentanoic acid -amino--metilcapronic -izoleucin Ile

acid 2-aminopropanoic acid -aminopropionic -alanin Ala

(CH3)2CH CH COOH NH2

acid 2-amino-3-metilbutanoic acid -amino--metilbutiric acid -aminoizovalerianic -valin Val

(CH3)2CHCH2

CH COOH NH2

acid 2-amino-4-metilpentanoic acid -amino--metilcapronic acid -aminoizocapronic -leucin Leu

b) Hidroxi-aminoacizi L (-) Serina (acidul -amino--hidroxipropionic) se gsete n stare liber n seminele germinate, iar n cantiti mici n numeroase proteide vegetale. n proporie mare se afl n edestina din cnep i n unele proteide din migdale i din algele marine. Sub form de esteri fosforici intr n constituia serinfosfatidelor. L (-) Treonina (acidul -amino--hidroxibutiric) nsoete n proteide serina, n cantiti mai mici, prezentnd proprieti analoage serinei. n proporii mai ridicate se gsete n proteidele din cereale, soia, cartofi, alge marine. Ea intr n constituia antibioticelor actinomicine. Treonina posed doi atomi de carbon asimetrici, deci are patru izomeri optici. HO CH2 CH COOH NH2
acid 2-amino-3-hidroxipropanoic acid -amino--hidroxipropionic serin Ser

CH3

CH CH COOH OH NH2

acid 2-amino-3-hidroxibutanoic acid -amino--hidroxibutiric treonin Tre

c) Tioaminoacizi (aminoacizi cu sulf) L (+) Cisteina (acidul -amino--tiopropionic) se gsete n toate proteidele vegetale (0,54,5%) i animale. Proteidele din cartofi conin 4-4,4%, iar glutelinele din gru, orez, secar conin 2,7% cistein. Cisteina se transform uor, prin oxidare, n cistin, disulfura corespunztoare care, fiind greu solubil, se poate separa. Prin hidrogenare, cistina trece n cistein. Pe baza acestor reacii de oxido-reducere, sistemul cistein-cistin joac n organism rol de sistem redox, fiind implicat n procesele de transport de atomi de hidrogen n ciclul respirator. Gruparea reductoare (-SH) din cistein are rol important n reaciile biocatalitizate de enzimele n structura crora se regsesc astfel de grupe funcionale.

HS CH2 CH COOH NH2

acid 2-amino-3-mercaptopropanoic acid 2-amino-3-mercaptopropanoic acacid -amino--mercaptopropionic id -amino--mercaptopropionic cistein cistein Cis Cis

CH3

S CH2

CH2 CH COOH NH2

acid 2-amino-3-metiltiobutanoic acid 2-amino-3-metiltiobutanoic acid -amino--metiltiobutiric acid -amino--metiltiobutiric mmetionin etionin Met Met

HOOC CH CH2 NH2

S S CH2 CH COOH NH2

acid 2,7-diamino-4,5-ditianoctandionic acid 2,7-diamino-4,5-ditiaoctandioic cistin cistin CisCis-S-S-Cis -S-S-Cis

L (-) Metionina (acidul -amino--metiltiobutiric) este prezent n zein, seminele de tomate, n proteidele din seminele de cereale. Are rol de agent metilant, prin cedarea grupei metil, transformndu-se n homocistein. d) Aminoacizi monoamino-dicarboxilici (cu caracter acid) Acidul L (+) aspartic (asparagic, acid aminosuccinic) se gsete n toate proteidele vegetale, mai ales sub forma amidei sale, asparagina. n stare liber, asparagina apare n seva de sparanghel i a altor plante tinere: mazre, migdale etc. HOOC CH NH2
acid 2-aminobutandioic acid aminosuccinic acid asparagic acid aspartic Asp

CH2 COOH

HOOC CH NH2

CH2 CONH2

monoamida acidului 2-aminobutandioic monoamida acidului aminobutandioic monoamida acidului aspartic asparagin Asn

HOOC CH HOOC CH NH2

acid 2-aminopentandioic acid -aminoglutaric acid glutamic Glu

CH2 CH2 COOH

CH2 CH2 CONH2

NH2
monoamida acidului 2-aminopentanoic monoamida acidului -aminoglutaric monoamida acidului glutamic glutamin Gln

Acidul L (+) glutamic (acidul -aminoglutaric) este foarte rspndit n proteidele vegetale. Amida sa glutamina, ca i asparagina, servete la biosinteza proteidelor din plante. Glutamina se ntlnete n stare liber n alge, n fructe i sfecla de zahr, unde prezena ei, ca i a asparaginei, micoreaz randamentul produciei, deoarece mpiedic cristalizarea zahrului. e) Aminoacizi diamino-monocarboxilici L (+) Arginina (acidul -amino--guanidilvalerianic) a fost identificat n conifere, ricin, cartofi i n hidrolizate proteice. Denumirea provine de la faptul c prezint o reacie caracteristic cu srurile de argint. L (+) Ornitina (acidul ,-diaminovalerianic) este rspndit n stare liber n plantele superioare, dar apare foarte rar n compoziia proteidelor. L (+) Lizina (acidul ,-diaminocapronic) se gsete aproape n toate proteidele, mai puin n zein. Mai bogate n lizin sunt seminele necoapte i cele n curs de germinare. CH2 CH2 CH2 CH COOH NH2 NH2
acid 2,5-diaminopentanoic acid ,-diaminovalerianic ornitin Or

CH2 CH2 CH2 CH2 CH COOH NH2 NH2

acid 2,6-diaminohexanoic acid ,-diaminocapronic lisin Lis

H2N C HN CH2 CH2 CH2 CH COOH HN NH2

acid 2-amino-5-guanidinopentanoic acid -amino--guanidinovalerianic arginin Arg

L (-) Citrulina (acid -carbamino--aminovalerianic) se formeaz intermediar n sinteza argininei. A fost identificat n produii de hidroliz ai cazeinei. f) Aminoacizi aromatici L (-) Fenilalanina (acidul -amino--fenilpropionic) este rspndit n plantele tinere de bostan, bob, lupin i n numeroase proteide (zeina, legumina). L (-) Tirozina (acidul para-hidroxifenilalanina) este ntlnit mpreun cu fenilalanina n toate proteidele. Se gsete n proporie de 10% n proteidele de porumb i de 4-5% n proteidele din smburii de pepene, castravei i bostani. C6H5CH2 CH COOH NH2
acid 2-amino-3-fenilpropanoic acid -amino--fenilpropionic acid -aminohidrocinamic -fenilalanin Fen

HO

CH2 CH COOH NH2

acid 2-amino-3-(4-hidroxifenil)propanoic acid -amino--(p-hidroxifenil)propionic tirosin Tir

g) Aminoacizi cu structur heterociclic conin n molecul un heterociclu cu un atom de azot dintr-un nucleu indolic, imidazolic i pirolic. L (-) Triptofanul (acidul -amino--indolilpropionic, -indolilalanina) intr n compoziia multor proteide naturale. n stare liber se gsete n organele tinere ale plantelor, n fructe, n glutenul de gru, n soia, semine de dovleac, alge (8,8%). Triptofanul este unul dintre aminoacizii eseniali, lipsa sa din organism conduce la grave tulburri. Este precursor n biosinteza vitaminei PP i promotor al sintezei pirolului, component al hemoglobinei. Prin decarboxilarea triptofanului se formeaz triptamina, compus cu activitate biologic. L (-) Histidina (acid -amino--imidazolilpropionic) este rspndit n proteidele de origine vegetal i animal. Se gsete n seminele de tomate, n polen i n edestin (4%). Prin decarboxilare enzimatic trece n histamin. L (-) Prolina (acidul -pirolidincarboxilic) este un iminoacid, solubil n alcool (spre deosebire de restul aminoacizilor), proprietate pe care o imprim i proteidelor n care se gsete n procent mare. Prezint caracter amfoter i este rspndit att n proteinele vegetale (12% n prolaminele din cereale) ct i n cele animale.

HO

COOH N H
acid pirolidin-2-carboxilic acid pirolidin--carboxilic prolin Pro

COOH N H
acid 4-hidroxipirolidin-2-carboxilic acid '-hidroxipirolidin--carboxilic hidroxiprolin Hip

CH2 N

CH COOH NH2

CH2

CH COOH NH2

N H
acid 2-amino-3-(4-imidazolil)propanoic acid -amino--(4-imidazolil)propionic histidin His

N H
acid 2-amino-3-(3-indolil)propanoic acid -amino--(3-indolil)propionic triptofan Trip

4.2.4. Proprieti fizice ale aminoacizilor

Proprietile fizico-chimice ale aminoacizilor sunt determinate de structura lor. Aminoacizii se prezint ca substane solide, cristaline; unii au gust dulce, alii gust amrui sau sunt fr gust. Datorit prezenei grupelor funcionale polare (-NH2 i -COOH) sunt solubili n ap, n acizi diluai i n hidroxizi alcalini. Procesul de dizolvare conduce uneori la distrugerea moleculei de aminoacid; astfel, triptofanul este distrus n mediu acid, iar histidina n mediu bazic. Sunt greu solubili n solveni organici; unii dintre ei sunt solubili n alcool etilic i n alcool butilic, proprietate care servete la separarea lor dintr-un amestec de aminoacizi. 4.2.4.1. Izomeria aminoacizilor Prezena atomului de carbon asimetric n poziia fa de gruparea carboxil, confer moleculelor aminoacizilor (cu exceptia glicocolului), chiralitate i ca urmare, apariia activitii optice (enantiomeria), exprimat prin capacitatea moleculelor lor de a roti planul luminii polarizate spre dreapta (izomerul, enantiomerul dextrogir), sau spre stnga (izomerul, enantiomerul levogir). Asemntor glucidelor, aminoacizii aparin unei anumite serii sterice, D sau L. La stabilirea configuraiei aminoacizilor, s-a pornit de la L-alanin prin comparaie cu L-aldehida gliceric (comparndu-se poziia grupei NH2 din aminoacid cu poziia grupei OH din glucid). Trebuie remarcat faptul c, aminoacizii naturali prezeni n structura proteinelor aparin exclusiv formei sterice L. Ca i n cazul glucidelor, configuraia steric a aminoacizilor este independent de activitatea optic.

4.2.4.2. Structura amfionic Caracterul amfoter al aminoacizilor se datoreaz prezenei concomitente n molecul a grupelor -NH2 (care confer proprieti bazice, acceptoare de protoni) i a grupelor -COOH (care confer proprieti acide, donoare de protoni). n soluiile apoase, moleculele aminoacizilor au structura unor amfioni (ioni dipolari), care pot funciona att ca baz ct i ca acid:
R

H3 N

CH

COO

structura amfiionului

a) comportare de acid (donor de protoni):

R H3N CH COO + HOH H2N R CH COO + H3O

b) comportare de baz (acceptor de protoni):

R H3N CH COO + HOH H3N R CH COOH + HO

n soluie, exist deci permanent, un echilibru ntre cei trei ioni:

R
-H

R
-H

R COO
+H

H3 N

CH
cation

COOH
+H

H3N

CH

H2N

CH

COO
anion

amfiion

n cazul n care catenele laterale (R) ale diferiilor aminoacizi conin i alte grupe funcionale ionizabile, n afara celor ataate la atomul de carbon , sarcina real a moleculei va reflecta prezena lor. Este cazul aminoacizilor monoaminodicarboxilici, (acidul aspartic i glutamic), cu caracter acid sau al celor diaminomonocarboxilici, (arginina, lisina, histidina), cu caracter bazic. Ceilali aminoacizi cu numr egal de grupe funcionale acide i bazice pot fi considerai neutri. Existena amfionului explic utilizarea soluiilor de aminoacizi ca soluii tampon (creeaz i menin constant un anumit pH la adugarea unor cantiti mici de acizi sau de baze tari):
R H3 N CH R H3N CH COO + HO H2 N COO + H3 O H3 N R CH R CH COO + HOH COOH + HOH

Se numete punct izoionic, pH-ul la care soluia apoas a unui aminoacid conine anioni i cationi ai aminoacidului n proporii egale i deci sarcina electric net a moleculei de aminoacid dizolvat n ap este nul. Datorit sarcinii electrice nete (pozitiv sau negativ) aminoacizii manifest la un anumit pH proprieti electroforetice, deplasndu-se sub aciunea unui cmp electric. Astfel, n mediu acid, ca urmare a deplasrii echilibrului existent ntre cei trei ioni spre forma cationic, aminoacidul migreaz spre catod (polul negativ), iar n mediu alcalin, datorit deplasrii echilibrului spre forma anionic, aminoacidul migreaz spre anod (polul pozitiv). La un anumit pH, denumit pH sau punct izoelectric (pHi), amfionul nu migreaz n cmp electric deoarece aminoacidul se afl disociat ca anion i cation n pri egale, solubilitatea fiind redus datorit atraciei electrostatice ntre anionii i cationii existeni. Aminoacizii prezint pHi diferii, n funcie de structura catenelor laterale -R: aminoacizii monoamino-dicarboxilici au pHi n zona acid (pHi = 3,0-3,2); aminoacizii diamino-monocarboxilici au pHi = 7,5-11, deci n zona alcalin; aminoacizii monoamino-monocarboxilici nu au pHi la pH = 7, ci n jur de valoarea 6,0 (grupa -COOH este mai puternic ionizat dect grupa -NH2).

CURS 8 4.2.5. Proprieti chimice ale aminoacizilor

Proprietile chimice sunt determinate de natura grupelor funcionale existente n molecul, respectiv grupa amino (-NH2) i grupa carboxil (-COOH). 4.2.5.1. Reacii datorate grupelor funcionale carboxil a) Reacia aminoacizilor cu hidroxizii cu formare de sruri:
H2N CH2
glicocol

COOH + NaOH

H2N

CH2

COONa + H2O

glicocolat de sodiu

b) Reacia aminoacizilor cu alcoolii cu formare de esteri:

O H2N CH2 COOH + HO R H2N CH2 C O
ester al glicocolului
+ H2O

c) Reacia aminoacizilor (sau a esterilor aminoacizilor) cu amoniac cu formare de amide:

O H2 N CH2 C O H
glicocolamid
+

O HNH2 H 2N CH2 C NH2

+

H 2O

Reacia de formare a amidelor are o mare importan biochimic, reprezentnd una dintre cile de reglare a coninutului de amoniac din organismele vegetale, deoarece o concentraie prea mare de amoniac devine toxic pentru plante. Prin formarea amidelor, plantele realizeaz blocarea amoniacului n exces, prin reacia invers, amoniacul fiind la nevoie, pus n libertate. d) Decarboxilarea aminoacizilor cu formare de amine biogene:
H2N CH2 COOH
glicocol

CO2 + H2N

CH3

metilamina

Decarboxilarea aminoacizilor este biocatalizat n organismele vii de enzime din clasa liazelor (aminoaciddecarboxilaze). Unele dintre aminele biogene rezultate sunt compui toxici, altele sunt precursori ai unor coenzime. Astfel, -alanina rezultat din acid aspartic este component a coenzimei A i a acidului pantotenic, din histidin se formeaz histamina, din aminoacizii diaminomonocarboxilici ornitina i lizina se formeaz heterocicli cu azot (pirol, piridin) prezeni n structura vitaminelor sau a unor alcaloizi cu rol fiziologic.
HS H2C CH
COOH
cistein

NH2

- CO2

HS

CH2

CH2

NH2

cisteamin component a coenzimei A

HOOC

H2C

CH NH2

COOH

- CO2

HOOC

H2C

CH2

NH2

acid aspartic

-alanina component a coenzimei A i a acidului pantotenic

H2N CH2 (CH2)2 CH

ornitin

NH2

- CO2

H2N CH2 (CH2)2 CH2 NH2

putrescein

- NH3

pirolidina

pirol

COOH

H2N CH2 (CH2)3 CH

lizin

NH2

- CO2

H2N CH2 (CH2)3 CH2 NH2

- NH3

piperidin

piridin

COOH
cadaverin

4.2.5.2. Reacii ale aminoacizilor datorate grupei funcionale amino a) Reacia aminoacizilor cu acizii cu formare de sruri Aceast reacie a aminoacizilor se datoreaz caracterului bazic (acceptor de protoni, datorit electronilor neparticipani ai azotului aminic). n funcie de tipul acidului se formeaz sruri numite: clorhidrai, sulfai, azotai etc. ai aminoacizilor.
HOOC CH2 NH2 + HCl [HOOC CH2 NH3] Cl

acid aminoacetic glicocol

clorhidrat de glicocol

b) Alchilarea aminoacizilor Alchilarea aminoacizilor (de exemplu metilarea) cu derivai halogenai, conduce la derivai de amoniu cuaternar, denumii betaine.
HO

CH3 HOOC CH2 N CH3 I CH3

HOOC

CH2

NH2

+ 3 CH3I

- 2HI

betaina glicocolului

Aceti derivai au o mare importan fiziologic, fiind donatori de grupe metilice. n cazul glicocolului, metilarea complet conduce la formarea glicocol-betainei (cu structur amfionic), care se gsete n sfecla de zahr. c) Acilarea aminoacizilor Acilarea aminoacizilor decurge prin tratarea aminoacizilor cu cloruri acide sau cu anhidride acide n mediu bazic i conduce la formarea de N-acilderivai. Astfel, din glicocol i clorur de benzoil (C6H5-CO-Cl) rezult acidul hipuric (benzoilglicocolul). HOOC-CH2-NH2 + Cl-CO-C6H5 HOOC-CH2-NH-OC-C6H5 + HCl

d) Condensarea aminoacizilor cu aldehide cu formare de baze Schiff Aceast reacie prezint importan biochimic deosebit, deoarece reprezint o cale de biosintez a aminoacizilor (transaminarea cetoacizilor rezultai la biodegradarea aerob a glucidelor prin ciclul Krebs).
R CH NH2 + O

C H

R
- H 2O

CH

CH

COOH
aminoacid

COOH
baza Schiff

aldehid

e) Dezaminarea aminoacizilor Dezaminrile aminoacizilor sunt reacii catalizate enzimatic i constau n principiu n eliminarea grupei amino (sub form de NH3 sau de N2) i conservarea grupei carboxil. Se formeaz substane aparinnd unor clase diferite de derivai funcionali. Reaciile de dezaminare au loc n organismele vii vegetale i animale i sunt deosebit de importante n metabolismul aminoacizilor introdui prin alimentaie sau rezultai n metabolismul proteic. Dezaminrile aminoacizilor sunt de mai multe tipuri:
Dezaminarea oxidativ, conduce la formarea, pe lng NH3, a cetoacidului cu acelai numr de atomi de carbon ca aminoacidul:
H3C CH NH2
aminoacid (-alanin)

COOH

enzim -2H

H3C

C NH

COOH

+ H2O -NH3

H3C

C O

COOH

iminoacid

cetoacid (acid piruvic)

Dezaminarea hidrolitic, conduce la obinerea, pe lng amoniac a unui hidroxiacid cu numr de atomi de carbon egal cu cel al aminoacidului iniial:
H3C CH NH2
-alanin

COOH

+ H2O / enzim -NH3

H3 C

CH OH

COOH

acid lactic

Dezaminarea reductiv are ca produs de reacie un acid saturat care pstreaz numrul de atomi de carbon:
+2 H / enzim

H3C

CH NH2
-alanin

COOH

-NH3

H3C

CH2

COOH

acid propionic (acid saturat)

Dezaminarea desaturant (intramolecular) conduce la formarea unui acid nesaturat cu acelai numr de atomi de carbon:

H3C

CH NH2
-alanin

COOH

enzim -NH3

H2C

CH

COOH

acid acrilic (acid nesaturat)

4.2.5.3. Proprieti chimice ale aminoacizilor care implic participarea ambelor grupe funcionale

a) Reacia aminoacizilor cu ionii metalelor (Cu, Ni, Pb, Ca, Mg, etc.) cu formare de compleci de tip chelatic:
O C H2C OH Cu2+ NH2 H2N HO CH2 C O O C H2C O Cu N H2 O H2 N CH2 C O
+ + 2H

glicocol

glicocol

glicocolat de cupru

Compuii chelatici sunt combinaii stabile, nedisociabile, frumos colorate, utilizate n chimia analitic. b) Reaciile de condensare ale aminoacizilor pot fi de mai multe feluri:
condensarea intermolecular cu formarea de legturi peptidice -CO-NH-, implic eliminarea apei ntre o grup -COOH a unui aminoacid i grupa NH2 a altui aminoacid. Se formeaz astfel: di-, tri-, tetra-, ..., polipeptide. Trebuie precizat n cazul legturii peptidice, caracterul de legtur dubl a legturii covalente C-N, datorat conjugrii electronilor neparticipani de la atomul de azot cu electronii de tip ai legturii carbonil (conjugare p-), ceea ce se poate reprezenta prin structuri de rezonan.
CH3 O H2N CH C O OH + HNH CH2 C - H2O HOH2C OH + HNH CH - H2 O O C OH CH3 O H2N CH O HOH2C O

C HN CH2 C

HN CH C OH

alanin

glicin

serin

alanil-glicil-serin (tripeptid)

Datorit mpiedicrii sterice a rotaiei libere, impus de caracterul parial de legtur dubl C=N, apare posibilitatea apariiei izomeriei sterice geometrice (cis-trans, sau E-Z), evideniat prin existena n proteinele naturale doar a izomerului trans (E).
H C O N R
O C N R H

condensarea intermolecular a dou molecule de aminoacizi care implic ambele grupe funcionale ale acestora, conduce la compui cu ciclu dicetopiperazinic.

OH + HNH O C CH2

H2 C C O
- H2O

NH O C CH2

CH2 C NH O

NHH + HO
glicin

dicetopiperazin

condensarea intramolecular implic grupele funcionale -COOH i -NH2 ale aceluiai aminoacid, aflate cel puin, n poziie una fa de alta; se formeaz compui denumii lactame. 4.2.5.4. Proprieti ale aminoacizilor datorate radicalului R

Aminoacizii liberi, peptidele i proteidele prezint i reacii chimice care depind de natura radicalului R i a grupelor funcionale grefate pe el.
Reacii ale nucleelor aromatice

Acidul azotic concentrat acioneaz asupra nucleului aromatic al aminoacizilor cu structur aromatic: triptofan, fenilalanin, tirozin etc. sau al aminoacidului cu structur heterociclic histidin, formnd nitroderivai de culoare galben (reacia xantoproteic de recunoatere a proteinelor).
Reacii ale grupelor funcionale grefate pe radicalul R

Acest tip de reacii pot fi de exemplu, reacii de formare de legturi hidrofobe n care sunt implicate catenele hidrocarbonate sau reacii de esterificare a grupelor hidroxil din hidroxiaminoacizi cu formare de fosfoproteide. n medii puternic bazice grupa -SH a cisteinei i grupa -OH fenolic a tirozinei pot disocia elibernd protoni. Grupele funcionale polare din catenele laterale ale aminoacizilor contribuie la formarea de legturi de hidrogen ntre diferitele pri ale lanului peptidic, stabiliznd molecula proteinei.

4.3. PEPTIDE (POLIPROTIDE INFERIOARE)

Peptidele sunt poliprotide inferioare, constituite dintr-un numr relativ mic de aminoacizi (monoprotide) unii prin legturi peptidice -CO-NH-. Acestea se stabilesc ntre grupa amino de la carbonul al unui aminoacid i grupa carboxil a altui aminoacid, prin eliminare de ap. Dup numrul unitilor structurale de aminoacizi coninui, peptidele se mpart n: oligopeptide; polipeptide; peptone; albumoze.

4.3.1. Oligopeptide
Sunt constituite dintr-un numr mic de aminoacizi (convenional 2-10) i denumite n consecin: di-, tri-, tetra-, ..., decapeptide. Datorit naturii aminoacizilor constitueni, a succesiunii (secvenei) i conformaiei lor, peptidele se pot prezenta sub forma unui numr foarte mare de izomeri (de exemplu, o pentapeptid format din 5 aminoacizi diferii, prezint 120 de izomeri). Existena unei asemenea

diversiti de forme izomere, explic enorma variabilitate structural, configuraional i funcional a diferitelor forme de proteine din organismele vegetale i animale. Orice peptid se caracterizeaz prin prezena legturilor peptidice, n care sunt implicate toate grupele carboxil i amino grefate la C, cu excepia unei grupe carboxil i a unei grupe amino care rmn la capetele catenei peptidice (polipeptidice). Aceste dou grupri funcionale neimplicate n formarea legturilor peptidice sunt denumite grupare carboxil C-terminal (aminoacid C-terminal), respectiv, grupa amino N-terminal (aminoacid N- terminal). Prin convenie, aminoacidul N-terminal dintr-un lan peptidic (polipeptidic) se consider a fi primul aminoacid din structura respectiv. Numele peptidelor se stabilete prin indicarea succesiv a denumirii fiecrui aminoacid component, cu adugarea sufixului il i terminnd cu numele ntreg al aminoacidului care are gruparea carboxil intact. Denumirea poate fi acordat i prin utilizarea prescurtrii numelui aminoacidului, respectiv primele trei litere din denumire: H2N-Ala-Ala-Glu-Arg-Val-Ser-Arg-COOH
aminoacid N-terminal aminoacid C-terminal heptapeptida alanil-alanil-glutamil-arginil-valil-seril-arginin

Pentru a preciza faptul c este vorba de o molecul de sine stttoare, se scrie: H-Ala-Ala-Glu-Arg-Val-Ser-Arg-OH ceea ce nseamn c, atomul de hidrogen din grupa -NH2 a primului aminoacid i grupa -COOH a ultimului aminoacid nu particip la formarea altor legturi peptidice. Datorit grupelor funcionale terminale (-NH2 i -COOH), peptidele manifest caracter amfoter. Prin hidroliz acid sau enzimatic (cu enzimele peptidaze), peptidele sunt scindate n aminoacizii componeni.
4.3.1.1. Proprieti fizico-chimice ale oligopeptidelor

Peptidele sunt rspndite att n regnul vegetal ct i n cel animal, unde ndeplinesc un anumit rol fiziologic, sau se formeaz n metabolism ca faze intermediare, sau intr n compoziia unor hormoni, antibiotice etc. Ciupercile i bacteriile produc antibiotice care conin i peptide. Se cunoate un mare numr de oligopeptide i polipeptide cu funcii fiziologice importante: hormonal, endorfine i encefaline din sistemul nervos central etc. Peptidele prezint proprieti intermediare ntre cele ale aminoacizilor i cele ale proteinelor. Peptidele cu mas molecular mare sunt solubile n ap i insolubile n alcool, solubilitatea scznd odat cu creterea masei moleculare. Sub aciunea cldurii nu coaguleaz i nu sunt denaturate. Hidroliza enzimatic a peptidelor (sub influena enzimelor peptidaze) conduce, n cazul homopeptidelor, la aminoacizii din care s-au format, iar n cazul heteropeptidelor, se obine, pe lng aminoacizi, i o component neproteic (component prostetic). Proprietile chimice ale peptidelor sunt determinate de prezena grupelor funcionale amino i carboxil libere, de la capetele sistemului, manifestndu-se sub forma reaciilor specifice acestor grupe funcionale. Legtura peptidic se caracterizeaz i prin mobilitatea atomului de hidrogen aminic care poate fi substituit cu halogeni sau cu metale.

4.3.1.2. Reprezentani naturali ai oligopeptidelor

Glutationul, un reprezentant important al oligopeptidelor este o tripeptid, i anume, glutamil-cisteinil-glicina, cu rspndire universal.

n regnul vegetal, glutationul se gsete n special n semine, unde coninutul su crete n timpul ncolirii. In embrionul de gru i n esuturi, glutationul se gsete att sub form redus, ct i sub form oxidat.
HOOC CH CH2 CH2 CO NH CH CO NH CH2 COOH NH2 CH2 SH
glutamil-cisteinil-glicina

Glutationul, prezent n semine, drojdie de bere, ficat, este o substan solid, de culoare alb, solubil n ap, alcool. Prezint activitate optic i un pronunat caracter acid, datorat celor dou grupe carboxil libere. Importana biologic a glutationului deriv din uurina cu care se poate oxida grupa funcional -SH (tiol). Oxigenul molecular, n prezena urmelor de metale cu rol catalitic (de exemplu, Fe), determin oxidarea formei R-SH, iar reducerea formei R-S-SR este biocatalizat de glutation-reductaz, enzim prezent n toate organismele vii.
2 Glutation SH
oxidare reducere

Glutation

S S Glutation

2 Glutation

SH

glutation redus

diglutation (glutation oxidat)

glutation redus

Glutationul ndeplinete n organism roluri biochimice complexe: rol de sistem redox neenzimatic, rol antioxidant, de protejare a unor substraturi (de exemplu, acid ascorbic) fa de procesele de oxidare, component al coenzimei donatoare de atomi de hidrogen n procese redox etc.
Neuropeptidele reprezint o grup de peptide ntlnite n sistemul nervos central. Un interes deosebit prezint endorfinele, deoarece se leag de receptori care pot lega i morfina. Cel mai simplu reprezentant este grupul pentapeptidelor denumite encefaline.

Insulina i proinsulina sunt hormoni peptidici care joac un rol foarte important n reglarea metabolismului glucidic. Insulina a fost prima protid a crei secven de 51 de aminoacizi a fost clarificat n 1953, constituind din punct de vedere tiinific un pas foarte important n cercetarea biochimic.
Antibiotice peptidice. Din aceast clas fac parte substane produse de ciuperci sau microorganisme care conin tipuri de aminoacizi neproteinogeni. Una dintre cele mai cunoscute substane din aceast serie este penicilina (care are n structur aminoacizii valin i cistein). Gramicidina este o peptid ciclic format din 10 aminoacizi, printre care fenilalanina. O structur complicat (un colorant legat de o pentapeptid) prezint actinomicina, care manifest proprieti antibiotice i citostatice. Otrvuri. O serie de otrvuri de origine vegetal sau animal sunt de natur peptidic. Amanitina i faloidina secretate de ciuperci sunt peptide ciclice formate din 7 aminoacizi. Veninul de arpe conine neurotoxine de origine peptidic.

4.3.2. Polipeptide
Polipeptidele sunt peptide n compoziia crora intr peste 10 aminoacizi, (pn la 100 de aminoacizi). Delimitarea ntre oligopeptide i polipeptide, ca i fa de proteine este relativ, fiind greu de stabilit, pe baza unor reacii chimice specifice. O astfel de reacie este de exemplu

reacia biuretului (reacie de culoare ntre peptide i o soluie alcalin de CuSO4). Oligopeptidele se coloreaz roz-rou, poliprotidele se coloreaz violet, iar aminoacizii nu dau aceast reacie. Biuretul este compusul rezultat din dou molecule de uree, care n reacia cu Cu din CuSO4 prezint o coloraie albastr.

H2N-CO-NH2 + H2N-CO-NH2 H2N-CO-NH-CO-NH2 + NH3

4.3.2.1. Substane intermediare ntre peptide i proteide

Prin hidroliza menajat a proteinelor, sau la biosinteza acestora, se formeaz ca substane intermediare, albumozele i peptonele.
proteine albumoze peptone peptide aminoacizi

Albumozele i peptonele sunt substane cu mase moleculare situate ntre cele ale peptidelor i proteinelor, cu structur asemntoare peptidelor. Albumozele formeaz cu apa soluii coloidale, precipit sub aciunea acizilor, a sulfatului de amoniu, coaguleaz la temperaturi ridicate, asemnndu-se mai mult cu proteinele, n timp ce peptonele, care nu prezint aceste proprieti se aseamn mai mult cu peptidele.

POLIPROTIDE SUPERIOARE (PROTEIDE)

Protidele (poliprotidele superioare) sunt compui organici macromoleculari, biopolimeri, cu structur complex i importan vital deosebit, care se pot clasifica n: holoproteide, poliprotide constituite numai din aminoacizi; heteroproteide, poliprotide care pe lng aminoacizi mai cuprind i componente de alt natur (prostetic) (glucide, lipide, acid fosforic, pigmeni vegetali, acizi nucleici). Proteidele se deosebesc de celelalte componente ale organismelor vii, att prin proprieti ct i prin funciunile importante pe care le ndeplinesc n organism. Astfel, sunt proteide: enzimele, biocatalizatori ai tuturor procesele biochimice din organism, pigmenii respiratori i cei nerespiratori ct i numeroi hormoni. Masa molecular depinde de tipul i numrul de aminoacizi componeni si este considerat ncepnd cu limita inferioar de aproximativ 10000, avnd ca limit superioar valori pn la zeci de milioane. Cantiti mari de proteide sunt biosintetizate n plante din cei 20 de aminoacizi proteinogeni, la care se adaug dou amide: glutamina i asparagina. n solul arabil se gsesc proteide provenite din resturile organismelor vegetale i animale moarte, cea mai mare parte a azotului din sol fiind azot organic, de natur proteic. El reprezint rezerva de azot n procesul de nutriie a plantei, devenind accesibil numai dup transformarea de ctre microorganisme n azot amoniacal i azotai.

Holoproteide (Proteine)
Compoziia i structura proteinelor Holoproteidele sau proteinele sunt biopolimeri alctuii dintr-un numr foarte mare, care variaz mult de la protein la alta, de aminoacizi legai prin legturi peptidice. Deoarece prin hidroliza total a proteinelor rezult aminoacizi (unitatea structural) se impune ca pentru cunoaterea structurii proteinelor s se determine (prin hidroliz, urmat de separare i dozare cromatografic) n primul rnd, numrul i natura aminoacizilor componeni, precum i succesiunea lor de legare n macromolecul (secvena lor). Se impune apoi analiza configuraiei catenei polipeptidice, care are mrimi i structuri interne specifice, ce imprim proteinei configuraii cu diferite orientri i interaciuni. Pornind de la aceste consideraii, Lindenstrom i Lang au stabilit urmtoarele nivele de organizare a structurii complexe a proteinelor: structura primar, structura secundar, structura teriar, i structura cuaternar. Structura primar a proteinelor reprezint organizarea catenei macromoleculare, respectiv numrul i secvena aminoacizilor legai prin legturi peptidice. inndu-se seama c fiecare caten polipeptidic posed la una dintre extremiti o grup amino liber, s-a putut stabili, prin hidroliz enzimatic, numrul lanurilor polipeptidice, prin determinarea numrului acizilor N-terminali sau C-terminali. Secvena aminoacizilor n lanul polipeptidic se stabilete pe cale genetic i are caracter ereditar. Modificarea unei singure secvene (nlocuirea unui singur aminoacid, de exemplu n globina hemoglobinei) poate altera sau modifica complet funcia biologic a macromoleculei proteice. Cunoaterea doar a structurii primare nu permite aprecierea modului n care structura proteinei determin activitatea biologic. Structura secundar a proteinelor. Acest tip de structur tridimensional ia n considerare aranjamentul spaial, conformaiile posibile ale catenei macromoleculare proteice. Deoarece catena macromolecular are grupe funcionale polare, capabile s formeze legturi

de hidrogen (ntre grupele CO i NH) cercetrile lui Pauling i Corey au condus la propunerea a dou modele structurale: modelul helicolidal (-helix) i modelul straturilor pliate. Modelul spiralat, helicoidal sau -helix, presupune rsucirea n spiral a lanului polipeptidic (grilajului peptidic). Acesta este format din catene polipeptidice ntre care se stabilesc legturi de hidrogen (ntre grupa C=O) a unei legturi peptidice dintr-o caten i grupa NH a legturii peptidice din catena vecin) n jurul unui cilindru imaginar.
R CH N H O C CH R C O H N C O H N CH R R CH N H O C N H O C CH R R CH C O H N

Numele de -helix a fost utilizat de Pauling care a recunoscut prima dat aceast structur n -keratin. Sensul de orientare a -helixului poate fi spre dreapta sau spre stnga, ns toi aminoacizii participani n ambele cazuri aparin seriei L, iar resturile R ale aminoacizilor sunt proiectate spre exteriorul spiralei (-helixului). n cazul L-aminoacizilor din proteinele naturale, rsucirea spre dreapta a helixului confer structurii mai mult stabilitate dect rsucirea spre stnga. Elicea are forma unei scri n spiral, n care fiecrei trepte i corespunde un aminoacid. nlimea unei trepte este de 1,5 i fiecrei spire i corespund 3,6 aminoacizi (trepte), iar distana dintre spire este de 5,4 . (3,6 1,5). Stabilitatea deosebit a -helixului i deci a proteinelor se datoreaz legturilor de hidrogen stabilite ntre grupele -C=O ale unei catene i grupele -NH- ale catenei vecine. Catenele laterale n modelul -helix sunt orientate n afar, putnd reaciona cu moleculele solventului sau cu alte catene polipeptidice. Natura radicalului -R legat la C influeneaz formarea -helixului, favoriznd sau nu, rsucirea lanului peptidic. De exemplu: valina, izoleucina, i treonina, datorit substituenilor voluminoi, nu favorizeaz rsucirea catenei polipeptidice iar prolina este un ntreruptor al helixului, datorit faptului c neavnd atom de H la atomul de N nu poate forma legturi de hidrogen. Modelul structurilor -pliate (pleated sheets) se bazeaz pe formarea legturilor de hidrogen ntre grupele -C=O i -NH- de la dou catene polipeptidice, care pot fi dispuse n dou moduri: conform modelului paralel, caracteristic -keratinei i modelului antiparalel, caracteristic fibroinei din mtase. n modelul paralel, lanurile peptidice sunt situate paralel, cu resturile -R orientate n acelai sens, iar n modelul antiparalel, lanurile peptidice sunt fa n fa (antiparale), cu resturile -R orientate n direcii opuse. Legturile de hidrogen n aceast structur sunt aproape perpendiculare pe axa lanului peptidic (n contrast cu structura -helix). n modelul paralel al structurilor pliate fiecare structur cuprinde catene paralele situate la intervale de 4,6 , intervale care permit formarea legturilor de hidrogen intercatenare. n cazul -keratinei, perioada de identitate de-a lungul lanurilor peptidice este de 6,5 , iar n cazul fibroinei este de 7,2 .

R C H R C H C O C O HN HN H C R H C R O C O C NH NH R C H R C H C O C O
modelul paralel

R C H C O HN H C R O C NH R C H C O

C C HN H C C

H O R R O

H HN

C C C H NH

R O

C C HN H C C

H O R

O R

O R

NH C C H O

C H HN C R C

NH H C O

modelul antiparalel

Structura teriar a proteinelor reprezint un alt nivel de organizare structural, exprimnd gradul de mpachetare a lanului polipeptidic (cu diferite structuri: -helix sau straturi -pliate) pentru realizarea unei conformaii compacte (de protein globular) ct mai avantajoas energetic. Aceasta reprezint rezultatul interaciilor dintre resturile R ale aminoacizilor din catenele polipeptidice, interaciuni care apar deja n cazul lanurilor polipeptidice mai lungi, cu structur secundar proprie. Aceast suprastructur se realizeaz i se menine datorit forelor de atracie ntre catenele laterale ale lanurilor peptidice, care pot s formeze urmtoarele tipuri de legturi: legturi de hidrogen (altele dect cele peptidice) ntre grupele OH ale hidroxiaminoacizilor i restul imidazolic (de exemplu, al histidinei) sau grupa OH fenolic a tirozinei i un rest carboxilic (-COOH); legturi covalente de tip disulfurice stabilite la nivelul grupelor -SH din tioaminoacizii cistein, metionin;
CH2 R1 SH + R2 HS CH2
[O] - H2O

CH2 R1

CH2 R2

legturi fosfodiesterice, stabilite la nivelul grupelor -OH esterificabile ale hidroxiaminoacizilor (de exemplu, serina) cu acid fosforic:
R C HC R NH O OH + HO O P OH O OH + HO C CH HN R R
- H2O

C HC

O O

O P OH

O O

C CH HN

NH

legturi ionice ntre resturile carboxilat (-COO-) de la aminoacizii dicarboxilici (acidul aspartic, acidul glutamic) i gruprile amoniu (NH3+) ale aminoacizilor diaminici (lisin, arginin); legturi apolare prin fore van der Waals (legturi hidrofobe) realizate ntre catenele laterale ale valinei, leucinei, izoleucinei, fenilalaninei. Legturile hidrofobe apar i acioneaz mai ales n interiorul moleculelor proteice, minimaliznd interaciile prilor hidrofobe cu apa i maximaliznd forele van der Waals ntre grupele hidrofobe. Tipurile de legturi implicate n structura teriar sunt mai puin stabile dect legturile chimice obinuite, ceea ce determin labilitatea proteinelor (denaturarea lor) sub influena

diferiilor factori fizico-chimici (pH, temperatur, reactivi chimici etc.), proces care poate fi nsoit de pierderea proprietilor biologice. Structura cuaternar a proteinelor reprezint cel mai nalt grad de organizare a acestora i rezult din interaciunea lanurilor polipeptidice independente, care au deja o structur primar, secundar, i teriar bine definit. Suprastructura cuaternar are specific asocierea unor catene polipeptidice individuale (protomeri) ntr-un agregat denumit oligomer (multimer sau proteine multisubunitare). n funcie de numrul protomerilor constitueni, agregatele structurii cuaternare sunt: dimeri, trimeri, tetrameri. Poriunile funcionale ale proteinelor oligomere i catenele polipeptidice sunt asamblate prin alturarea unor poriuni din suprafaa protomerilor i realizarea unor legturi de hidrogen i electrostatice la suprafaa fiecrei polipeptide sau oligomer. Ansamblul oligomer va avea geometria spaial deformat din cauza complementaritii suprafeelor de contact, ca urmare a existenei unor grupri hidrofile, radicali polari sau grupri cu sarcini opuse. Principiul complementaritii subunitilor asigur, datorit preciziei i exactitii cu care se realizeaz asamblarea, specificitatea i stabilitatea configuraiei proteice oligomere. Un exemplu tipic de astfel de structur cuaternar este structura hemoglobinei, un agregat tetramer format din patru lanuri polipeptidice, fiecare cu structura sa primar, secundar i teriar, legate ntre ele prin legturi de hidrogen, legturi van der Waals, legturi polare. Astfel de structuri cuaternare pot fi dezorganizate uor, cu formarea monomerului, mai ales prin modificarea pH-ului soluiei n care se gsete proteina. Restabilirea condiiilor iniiale este nsoit de reasamblarea resturilor i de refacerea structurii cuaternare.

Proprieti fizice ale proteinelor Proteinele izolate din diferite surse sunt substane solide, n general amorfe, care prin purificare avansat pot fi obinute n stare cristalin. Solubilitatea proteinelor n ap este foarte diferit: proteinele globulare sunt mai mult sau mai puin solubile, pe cnd cele fibrilare sunt insolubile. Solubilitatea n ap depinde de mai muli factori: natura, numrul i aezarea n caten a aminoacizilor care compun macromolecula, de existena grupelor funcionale hidrofile (carboxil, hidroxil), de pH i de concentraia n sruri a soluiei. Prezena grupelor funcionale polare (-OH, -NH2, -COOH,-SH) favorizeaz dizolvarea n ap, deoarece moleculele polare ale apei sunt atrase electrostatic de grupele funcionale polare ale proteinei, ceea ce duce la legarea moleculelor solvatului de moleculele solventului, adic la fenomenul de solvatare (hidratare n cazul apei) indispensabil dizolvrii. Natura solventului are un rol mare n procesul de solubilitate a proteinelor. Solvenii organici produc o scdere a constantei dielectrice a mediului apos i n consecin, fenomenul de hidratare se reduce odat cu solubilitatea. O cantitate prea mare de solvent organic poate produce pierderea sarcinilor electrice i o deshidratare a proteinei care poate produce denaturarea ei (modificarea structurii i proprietilor iniiale). Solubilitatea proteinelor este influenat i de pH-ul mediului. La pH izoelectric, moleculele proteinelor devin perfect neutre, nu mai leag moleculele polare ale apei n jurul lor, n consecin, nu mai are loc fenomenul de hidratare i dizolvare. La pHi, solubilitatea proteinei devine minim i din aceast cauz proteina precipit uor, particulele proteice gsinduse sub form de amfioni. Prezena ionilor de semn contrar influeneaz solubilitatea proteinelor, deoarece macromoleculele posed la suprafa grupri ionizate i rein selectiv diferite substraturi cu molecule mici.

Masa molecular a proteinelor variaz de la cteva mii la cteva milioane, n funcie de numrul catenelor polipeptidice i a aminoacizilor componeni. Determinarea masei moleculare a proteinelor este dificil deoarece ele formeaz prin dizolvare soluii coloidale, astfel c nu pot fi aplicate metodele obinuite de determinare a masei moleculare, ci metode speciale. Starea coloidal a proteinelor n soluie le confer proprietile caracteristice sistemelor coloidale: presiune osmotic mic, putere de difuziune redus, ultrafiltrare, efectul Tyndall etc. Din cauza dimensiunilor mari ale macromoleculelor, proteinele nu difuzeaz prin membrane ale cror pori sunt de ordinul milimicronilor (membrane de celofan, pergament, colodiu etc.), proprietate pe care se bazeaz separarea lor de srurile prezente n soluie i ai cror ioni trec prin membranele de dializ. Soluiile proteice pot forma geluri n care proteina i solventul formeaz o mas omogen, cu particulariti specifice substanelor solide. Fenomenul este important pentru realizarea reelei tridimensionale a scheletului protoplasmei, care este insolubil n ap, pe care o reine datorit procesului de imbibiie. Imbibiia gelului, nsoit de creterea considerabil a volumului este utilizat n industria alimentar (gelifierea alimentelor prin adugare de gelatin, imbibiia proteinelor din fin la prepararea aluatului etc.). Precipitarea proteinelor poate fi: reversibil, n prezena soluiilor concentrate de electrolii tari (sruri ale metalelor alcaline, alcalino-pmntoase, (NH4)2SO4 sau a solvenilor miscibili cu apa (alcool, aceton). Precipitarea reversibil se explic prin fenomenul de salifiere, care const n deshidratarea parial a proteinelor, datorit competiiei pentru moleculele de ap dintre ionii electroliilor folosii la precipitare i grupele polare sau ionice ale proteinelor. Macromoleculele proteice deshidratate parial, se aglomereaz i precipit. La adugarea unui exces de ap, precipitatul se dizolv, ceea ce dovedete c la precipitarea reversibil, proteinele sufer unele modificri fizico-chimice, dar nu se produce denaturarea structurilor moleculare. Precipitarea ireversibil se produce n prezena srurilor metalelor grele (Cu, Pb, Hg, Fe, Ni etc.), a acizilor tari (HCl, HNO3, H2SO4), a bazelor alcaline (NaOH, KOH), a acidului picric, sau cu unii acizi anorganici compleci (acid fosfomolibdenic, acid fosfowolframic etc.). Ea mai poate avea loc la nclzire puternic (coagulare), sub aciunea razelor X, UV, etc. La ncetarea aciunii agenilor precipitani, proteinele nu revin la forma iniial, deoarece structura spaial a proteinelor (secundar, teriar) sufer o depliere, o dezorganizare, care ns nu afecteaz i structura primar. Precipitarea ireversibil a proteinelor este nsoit de transformri chimice mai profunde ale proteinelor (denaturarea proteinelor). Un proces de precipitare este i coacervarea, proces lent de separare a coloizilor din soluie, ca urmare a modificrilor lente ale condiiilor soluiei coloidale proteice. Caracterul amfoter al proteinelor se datoreaz prezenei n molecula lor a gruprilor acide (-COOH) sau bazice (-NH2) libere ale resturilor aminoacizilor dicarboxilici sau diaminici din constituia proteinelor. Caracterul amfoter al proteinelor este influenat i de resturile unor aminoacizi cu grupri ionizabile (-OH din tiroxin, resturile bazice ale histidinei, argininei). Datorit sarcinilor electrice, proteinele migreaz n cmp electric spre anod n soluie bazic i spre catod n soluie acid. Fenomenul st la baza separrii i purificrii proteinelor prin metoda numit electroforez. Proteinele prezint activitate optic, datorit att aminoacizilor constitueni care conin atomi de carbon asimetrici, ct i asimetriei ntregului agregat macromolecular. Orice modificare a structurii proteinei este nsoit de schimbarea rotaiei specifice, care indic denaturarea proteinei.

Proprieti chimice ale proteinelor Proprietile fizice i chimice generale ale proteinelor sunt determinate de structura molecular, natura legturilor intra- i intermoleculare, natura grupelor funcionale. Proteinele prezint (asemntor aminoacizilor) reacii chimice corespunztoare grupelor funcionale: -NH2 i -COOH libere, precum i reacii al radicalilor -R pe care i conin. Sunt caracteristice de asemenea o serie de reacii de culoare, care servesc la identificarea lor (reacia biuretului, reacia xantoproteic, reaciile: Millon, Liebermann, Sakaguchi etc.). Hidroliza. Sub influena acizilor, bazelor sau a enzimelor proteolitice catena polipeptidic se scindeaz cu formarea unor fragmente polipeptidice, care n final hidrolizeaz, punnd n libertate toi aminoacizii constitueni. Denaturarea. Sub aciunea unor ageni fizici i chimici proteinele sunt modificate structural, cu pstrarea masei moleculare, fenomen cunoscut sub numele de denaturare, care este nsoit de pierderea activitii fiziologice a proteinelor. Agenii denaturani pot fi clasificai astfel: ageni fizici: temperaturile ridicate, radiaii UV, razele X, ultrasunetele etc.; ageni chimici: soluii concentrate de acizi i baze tari, srurile unor metale grele (Hg, Pb, Cd etc.), compui ai arsenului, solveni organici etc. Denaturarea proteinelor reprezint un proces complex, care implic modificri ale structurii secundare i teriare a proteinelor (desfacerea sau modificarea legturilor de hidrogen, a legturilor disulfurice, ionice etc.), nsoite de deplierea catenelor i modificarea arhitecturii moleculare. n funcie de natura agenilor chimici, denaturarea poate fi reversibil sau ireversibil. Denaturarea determin scderea solubilitii i a capacitii proteinelor de a absorbi apa, modific viscozitatea, presiunea osmotic, activitatea optic i gradul de hidroliz, ca i activitatea fiziologic. Denaturarea ireversibil a proteinelor joac un rol important n fenomenele vitale, de exemplu, mbtrnirea seminelor i pierderea capacitii de germinare, fenomenul de mbtrnire la oameni, animale etc. n industria alimentar denaturarea proteinelor este utilizat la prepararea produselor alimentare prin coacere, uscarea legumelor, fabricarea laptelui praf etc.

Proprieti biochimice ale proteinelor Organismele vii prezint proprietatea specific de a putea sintetiza proteine proprii din aminoacizii preluai prin alimentaie sau rezultai la hidroliza enzimatic a proteinelor alimentare. Proteinele au proprietatea de a fi organ-specifice, deoarece fiecare organ al aceleiai plante sau al aceluiai animal conine proteine specifice, diferite de proteinele altor organe ale aceluiai individ. Proteinele sunt totodat i specie-specifice, deoarece acelai organ de la diferite specii, animale sau vegetale, conine proteine specifice, diferite de ale aceluiai organ al unui individ din alt specie. Specificitatea proteinelor se manifest i prin proprietile lor imunologice: inocularea unei proteine strine n organismul unui animal provoac apariia n serul acestuia a unei substane capabile s precipite numai proteina care a fost inoculat. Substanele inoculate se numesc antigeni i pot fi: proteine, poliglucide, asociaii complexe glucide-lipide-poliprotide, care sunt strine pentru organismul n care au ptruns i declaneaz n consecin biosinteza unor

proteine specifice de aprare, denumite anticorpi. Antigenul reacioneaz cu anticorpii formai, determinnd reacia antigen-anticorp, prin care este anihilat aciunea nociv a antigenului. Formarea anticorpilor coincide cu instalarea n organism a unei rezistene specifice (imunitate) fa de agentul patogen. Reaciile imunologice stau la baza preparrii i utilizrii serurilor i vaccinurilor n vederea imunizrii organismelor contra infeciilor microbiene. Clasificarea proteinelor. Reprezentani La baza clasificrii proteinelor au fost propuse dou criterii: - forma particulelor (globulare i fibrilare); - constituia chimic. Deoarece forma particulelor nu reprezint un criteriu suficient de difereniere, iar structura majoritii proteinelor nu este elucidat complet, clasificarea lor se face dup mai multe criterii: complexitatea structurii, mrimea masei moleculare, unele proprieti fizico-chimice i proveniena proteinelor. Astfel, proteinele pot fi clasificate n grupe neomogene, care reprezint de fapt amestecuri de holoproteide cu proprieti asemntoare. Nu exist pn n prezent o clasificare unanim recunoscut a proteinelor, dei unii autori propun clasificarea n trei clase: histone, albumine i globuline, ncadrnd protaminele ca polipeptide i nerecunoscnd glutelinele i prolaminele drept clase independente. Proteine globulare sau sferoproteine Sunt proteine solubile n ap sau n soluii diluate de sruri, ale cror macromolecule cu structur tridimensional sunt nfurate, rezultnd o form compact, aproape sferic a lanului polipeptidic. Au un rol metabolic important deoarece se gsesc n interiorul celulelor i n lichidele din organism i intr n constituia unor enzime (ca parte proteic), a unor pigmeni (cloroglobinele, hemoglobina). n funcie de solubilitate, caracter chimic, proprieti biologice, proteinele globulare se difereniaz astfel: Albuminele sunt caracterizate printr-o mare solubilitate n ap i uurina de a fi precipitate cu o soluie saturat de electrolii (sulfat de amoniu). Au mas molecular mic i caracter slab acid. Prin nclzire la 70 0C coaguleaz ireversibil. Deoarece albuminele sunt asociate cu globulinele, de care se separ pe baza diferenei de solubilitate, ele se ntlnesc mpreun n proteine. Albuminele sunt rspndite n toate organele plantelor, mai frecvent n semine. Cele mai cunoscute sunt: leucozina (n gru, secar, ovz), legumelina (n mazre, linte, soia), ricinina (semine de ricin), faseolina (n fasole). Albuminele care conin aminoacizi eseniali au valoare nutritiv deosebit. Ele conin aminoacizi cu sulf, dar puin glicocol. Se cunosc i albumine toxice, de exemplu: crotina din seminele de Croton tiglium i folina din ciupercile otrvitoare, albumina din ricin, care au proprietatea de a aglutina globulele roii. Albuminele sunt prezente i n plasma sanguin (serumalbumina), lapte (lactalbumina), albuul de ou (ovalbumina) etc. Globulinele formeaz mpreun cu albuminele masa principal a protoplasmei celulare. Globulinele se gsesc ca substane de rezerv, alturi de albumine mai ales n semine. Sunt insolubile sau greu solubile n ap i solubile n soluii diluate de sruri. Precipit uor cu soluie de sulfat de amoniu 50%. Prezena n structura lor a acidului aspartic i glutamic le imprim caracter acid. n regnul vegetal, 50% din totalul proteinelor l constituie globulinele din seminele de leguminoase i oleaginoase, cu rol de substane de rezerv pentru aceste plante.

Din seminele de legume au fost izolate: faseolina (din fasolea alb), glicina (din soia), legumina (din mazre i linte). n seminele plantelor oleaginoase se gsesc: edestina (n cnep), amandina (n migdale), corilina (n alune) etc. Globuline se mai ntlnesc n cartofi, spanac i tomate. Dintre globulinele de origine animal mai importante sunt serumglobulina i lactoglobulina. Prolaminele sau gliadinele se gsesc numai n regnul vegetal i conin cantiti mari de prolin i acid glutamic, care le imprim caracter acid. Au valoare alimentar redus, deoarece sunt srace n triptofan i lizin. Reprezentani ai prolaminelor sunt: zeina (din porumb), hordeina (din orz) i avenina (din ovz). Datorit coninutului redus n triptofan i lisin, folosirea porumbului ca aliment unic, conduce n organism la grave tulburri. Glutelinele sunt rspndite n seminele cerealelor i n prile verzi ale plantelor. Sunt insolubile n ap i n alcool, dar se dizolv n soluii diluate de baze sau de acizi. Glutelinele conin acid glutamic i prezint caracter acid. Au valoare alimentar deosebit, jucnd un rol important n procesul de panificaie. Dintre gluteline sunt importante: glutenina (din seminele de gru) care alturi de gliadin este componenta glutenului care confer finii proprietatea de a putea fi panificat (n lipsa glutenului pinea nu crete) i orizenina (din boabele de orez). Histonele sunt rspndite preponderent n regnul animal i mai puin n regnul vegetal. Conin cantiti mari de arginin i de histidin, aminoacizi care le imprim caracter bazic. Proteine fibrilare (scleroproteine) Proteinele fibrilare (scleroproteine) au aspect filiform, fiind compuse din catene polipeptidice individuale lungi, sub form de filamente, unite lateral prin legturi ncruciate, formnd o structur stabil. Sunt insolubile n ap i constituie substane de schelet i de protecie. Prezint o mare rezisten la aciunea hidrolizant a factorilor chimici i a enzimelor. Se gsesc preponderent n organismele animale i sunt reprezentate prin: colagene - n esutul conjunctiv, piele, tendoane, cartilagii, ligamente; keratine - proteine constituente ale epidermei, prului, penelor i formaiilor cornoase (unghii, coarne, copite); miosina - proteina din muchi; elastine - participante la structura fibrelor elastice din artere i tendoane; fibrinogenul - constituie 4% din proteinele plasmei sanguine cu rol esenial n coagularea sngelui; fibroina - proteina din mtasea produs de viermii de mtase. n plante s-au identificat proteine fibrilare n stratul aleuronic al seminelor.

Heteroproteide
Heteroproteidele (proteide sau proteine conjugate) sunt poliprotide superioare care la hidroliz total pun n libertate o component proteic i o component neproteic (prostetic). Clasificarea heteroproteidelor se face n funcie de natura gruprii prostetice astfel: glicoproteide (componenta prostetic este o glucid); lipidoproteide (componenta prostetic este o lipid);

 fosfoproteide (componenta prostetic este acidul fosforic); cromoproteide (componenta prostetic este un colorant); metalproteide (componenta prostetic este un metal); nucleoproteide (componenta prostetic este un acid nucleic). Metalproteide Metalproteidele sunt heteroproteide care au drept grupare prostetic un metal (Fe, Mg, Mn, Cu, Zn, Co etc.) legat covalent-coordinativ sub forma de chelai, care confer proteinelor proprieti speciale, enzimatice, hormonale etc. Metalproteidele reprezint forme de depozitare i de transport ale diferitelor metale n organismele vii. Dintre metalproteidele cu fier (ferproteide) de o deosebit importan este ferredoxina, prezent n cloroplaste cu rol important n procesele de oxido-reducere i feritina, rspndit n ficat, n splin, care conine 25% Fe trivalent legat de protein i care constituie rezerva de fier pentru hemoglobine i hemenzime. Dintre metalproteidele cu cupru, cele mai importante sunt hemocianinele care reprezint pigmenii respiratori din sngele molutelor i artropodelor i ceruloplastina implicat n transportul cuprului n snge. Exist i metalproteide cu zinc ntlnite ntr-o serie de enzime, de exemplu, anhidraza carbonic, carboxipeptidaza, precum i metalproteide cu mangan, magneziu i vanadiu.

cis S Fe S cis Fe

cis S Fe S cis

cis S Fe S cis

proteina

proteina

Modelul Blmstrom al ferredoxinei

Fosfoproteide

Fosfoproteidele sunt heteroproteide care au drept component prostetic acidul fosforic esterificat cu grupele -OH din hidroxiaminoacizi (serina, treonina). Restul fosforic este de obicei neutralizat i se gsete sub forma srii de K sau de Ca. Fosfoproteidele joac un rol important n organismele tinere vegetale i animale. Sunt rspndite n special n lapte i ou, sub form de cazein (45% din proteinele laptelui uman i 80% din cele ale laptelui de vac) i ovovitelin (0,9% coninutul de fosfor n glbenuul de ou). Cazeina nu coaguleaz la cald, (ceea ce permite fierberea laptelui), ci numai la pH acid, cnd este pus n libertate radicalul fosforic.
R CO C NH2 OH HO OH P OH O
- H2 O

R CO C NH2 O

OH P OH O
Ca

R CO C NH2 O

O P O O Ca

hidroxiaminoacid

fosfoproteid

sarea de calciu a fosfoproteidei

Glicoproteide (mucoproteide)

Sunt heteroproteide care au drept grupare prostetic monoglucide (glucozamina, galactoza, xiloza, ramnoza, acizi uronici) i poliglucide (acizi poliuronici). Se clasific, n funcie de raportul protein/glucid n: glicoproteide propriu-zise, n care componenta de baz este proteina, iar componentele glucidice sunt sub 4%. Din aceast clas fac parte albuminele din ou i din ser i unele globuline din ser care conin glucide. mucoproteide (mucoide), n care predomin glucidele (peste 4%). Sunt proteide caracteristice mediului animal, dintre care cele mai importante sunt: antigenele de grup sanguin, glicoproteidele cu rol hormonal, glicoproteidele din membranele celulare etc.
Lipoproteide

Sunt heteroproteide care conin drept grupare prostetic lipide (gliceride, cefaline, lecitine) i acizi grai. Sunt rspndite n organismele vii, animale i vegetale, mai ales n esuturile cu activitate fiziologic intens (nucleu, mitocondrii, cloroplaste). Complexele lipoproteice au caracter macromolecular i intr n constituia unor structuri subcelulare (membrane celulare, mitocondrii). Dintre cele mai importante fiziologic se pot aminti: lipoproteidele din lapte (cu rol energetic), lipoproteidele din ou (cu rol n dezvoltarea embrionului), lipoproteidele plasmatice i membranare care asigur transportul substanelor liposolubile (vitamine, hormoni, medicamente). n lipoproteidele din boabele de soia, componenta lipidic este legat de resturi de acid fosforic i de arginina din proteid. Uneori, lipoproteidele din fina de porumb, din soia i din morcov sunt impurificate cu xantofile i caroteni.
Cromoproteide

Cromoproteidele sunt heteroproteide a cror grupare prostetic este o substan colorat (pigment). Sunt rspndite n toate organismele vegetale i animale, unde ndeplinesc roluri complexe. Se clasific n funcie de gruparea prostetic i de funcia biologic pe care o ndeplinesc n dou mari clase: cromoproteide porfirinice (cu structur tetrapirolic) i cromoproteide neporfirinice.
Cromoproteide porfirinice

Cromoproteidele porfirinice sunt cele mai rspndite dintre cromoproteide. Componenta prostetic este un inel porfirinic, format din patru nuclee pirolice, legate prin puni metinice (=CH-). Structura porfirinic rezult prin substituirea atomilor de hidrogen de la atomii de carbon din poziiile 1-8, cu diferii radicali. Protoporfirina, component a hemoglobinelor, cea mai rspndit dintre cromoproteidele porfirinice, se caracterizeaz prin prezena urmtorilor radicali: metil (CH3) la: C1, C3, C5, C8; vinil (-CH=CH2) la: C2, C4; propionil (-CH2 CH2-COOH) la: C6, C7. n structura porfirinic pot exista i metale, cum ar fi: Mg, Fe, Cu, Zn etc. Cromoproteidele se deosebesc ntre ele prin:

 natura componentei proteice; natura radicalilor grefai pe nucleul porfirinic. Structura porfirinic reprezint o grupare prostetic comun unei serii de heteroproteide cu funcii biologice foarte importante, cum ar fi: cloroglobinele, hemoglobinele, citocromii, catalaza, peroxidaza, fitocromul etc.
CH 2 1 A N N H pirol NH 8 C 7
inel porfinic

CH2

CH3

3 B HN N D 6 CH2 CH2 COOH CH2 CH2 COOH 5 H3C 4 H3C N NH HN N CH3 CH CH2

protoporfirin

a) Cromoproteide porfirinice fr rol respirator Cloroplastinele (cloroglobinele) sunt cromoproteide prezente n toate celulele i esuturile plantelor verzi. Sunt localizate n cloroplaste i au drept component proteic globina plastina, i ca grupare prostetic pigmentul clorofila, care imprim culoarea verde esuturilor plantelor. Cele dou componente (proteina i gruparea prostetic) se separ uor prin uscarea frunzelor i extracia pigmentului colorat cu eter sau alcool etilic. Cloroplastele celulare mai conin n afar de clorofil i carotenoide, lipide, acizi nucleici, microelemente. Clorofilele, pigmenii colorai ai frunzelor verzi, au o structur magnezio-porfirinic, n care atomul central magneziul este legat prin dou legturi covalente i dou legturi coordinative de atomii de azot ai nucleelor pirolice. Clorofilele a i b, au fost separate de savantul vet (1906) de pigmenii galbeni carotenoidici (carotina i xantofila) care Ie nsoesc, prin metode cromatografice. Coninutul n clorofile al frunzelor verzi este de 0,1-0,3%; n majoritatea plantelor, cele dou clorofile se gsesc n raportul 3/1 n cloroplastele celulelor. Proporia celor dou clorofile variaz de la o specie la alta i de la un anotimp la altul. n plantele superioare se gsesc clorofila a i clorofila b, iar n alge i bacterii sunt rspndite i clorofilele c i d. Clorofila a este cel mai important pigment de pe planet, deoarece este implicat n transformarea energiei luminoase n energie chimic. Clorofila a are o structur porfirinic, pe care sunt grefai: patru radicali metil n poziiile: C1, C3, C5, C8; o grup vinil la C2; un radical etil la C4; un rest de acid propionic la C6 legat ntr-un ciclu pentagonal exterior, de atomul de carbon de la gruparea metinic a nucleului pirolic, a crei grup carboxil este esterificat cu metanol; un rest de acid propionic la C7, esterificat cu fitol (un alcool nesaturat cu catena

ramificat cu 20 de atomi de carbon). Prezena fitolului n molecul confer clorofilei un caracter amorf, ceros, care ngreuneaz separarea clorofilelor n stare pur. Saturarea dublei legturi C=C din inelul D ca i formarea noului ciclu legat de inelul C, conduce la apariia n molecula clorofilelor a trei atomi de carbon asimetrici, care confer moleculei activitate optic, clorofilele fiind puternic levogire.
CH CH2 CH3

CH

CH2

CHO

H3C N N

CH2 CH3

H3C N N

CH2 CH3

Mg
N H3C H H CH2 CH2 CH C COOCH3 O N CH3

Mg
N H3C H H CH2 HC CH2 C COOCH3 O N CH3

COOC20H39

COOC20H39

clorofila a

clorofila b

H3C CH H3C (CH2)3

CH3 CH (CH2)3

CH3 CH
fitol

CH3 (CH2)3 C CH CH2 OH

Clorofila b nsoete clorofila a, n raport de 3/15/1, diferind de la o specie la alta. Se difereniaz structural de clorofila a, prin nlocuirea radicalului metil din poziia C3 a inelului pirolic B cu gruparea formil (-CH=O). Nu poate transforma energia luminoas n energie chimic ci doar o transfer clorofilei a. Clorofila c nu conine radicalul fitil, iar clorofila d are un radical formil la C2. Bacterioclorofila din bacteriile verzi are n structur, la C2, un radical acetil (-CO-CH3), iar n inelul pirolic B o singur legtur dubl. Rolul de fotoreceptori le este conferit clorofilelor a i b de structura polienic care absoarbe puternic n domeniul vizibil al spectrului. Acizii organici slabi (acid oxalic) produc scindarea magneziului din molecula clorofilelor, pe care le transform n feofitine a i b. Sub aciunea acizilor concentrai, se elimin att Mg ct i radicalul fitil, rezultnd feoforbide a i b. Aceast comportare explic de ce clorofila nu poate exista cu resturi acide libere, cele dou grupe carboxil fiind esterificate cu metanol i cu fitol. b) Cromoproteide porfirinice cu rol respirator Hemoglobinele (A, A2, A3, F) sunt cromoproteide cu structur feroporfirinic, de culoare roie, prezente n sngele tuturor vertebratelor. Componenta proteic (96%), este o globin (asemntoare histonei, cu caracter bazic), iar componenta neproteic (prostetic) este hemul (4%). n timp ce proteina globina difer de la o hemoglobin la alta, imprimnd hemoglobinelor

specificitatea, structura porfirinic a hemului este comun tuturor speciilor vertebratelor i este ntlnit i n: citocromi, peroxidaza, catalaza, fitocrom etc. Componenta proteic, globina este o protein organ-specific. Structura chimic a hemului este urmtoarea:
CH CH2 CH3

H3C N Fe N H3C N N

CH

CH2

CH3

CH2 CH2 COOH

hem

CH2 CH2 COOH

Hemul are o structur identic cu a protoporfirinei, n centrul creia se afl ionul Fe2+ legat hexacoordinativ. Dintre cele ase legturi coordinative pe care le stabilete fierul, patru sunt legate (n acelai plan) de cele patru nuclee pirolice ale protoporfirinei, una este legat de proteina globina, iar ultima poate fixa molecula de ap, molecula de oxigen sau pe cea de dioxid de carbon. Molecula de ap legat coordinativ de fier n complexul chelatic, poate fi substituit cu O2, ceea ce explic rolul de transportor de oxigen, sau poate lega alte molecule, cu formare de compui nedisociabili. Hemoglobina se combina cu O2 (la presiunea din alveolele pulmonare) formnd oxihemoglobina, compus disociabil la presiunea mai mic din capilarele tisulare. n aceleai condiii, hemoglobina poate reaciona reversibil cu CO2, (produs de biodegradare metabolic) cu formarea carbhemoglobinei, care este transportat spre locul unde CO2 poate fi nlocuit cu O2. Funcia transportoare de O2 i CO2 esenial n respiraie, nceteaz cnd hemoglobina reacioneaz ireversibil cu CO cu formarea carboxihemoglobinei, nedisociabil, care blocheaz funcia hemoglobinei, producnd asfixia (intoxicarea) organismului. Afinitatea hemoglobinei pentru CO este de aproximativ 210 ori mai mare dect afinitatea pentru O2, astfel nct n prezena CO n aerul respirat, hemoglobina nu mai leag oxigenul ci monoxidul de carbon. De remarcat faptul c, n toate aceste transformri, cationul Fe2+ din structura feroporfirinic nu i modific starea de oxidare.
N N Fe2+ N O2 N N
+O2 -O2

N N Fe2+ N H2O N N N

CO2

N Fe2+ N CO2

CO

N Fe2+ N CO N

oxihemoglobina carboxihemoglobina

hemoglobina

carbhemoglobina

Leghemoglobina este o cromoproteid de culoare roie prezent n nodozitile rdcinilor plantelor leguminoase, cu rol n activarea bacteriilor fixatoare de azot atmosferic. Componenta prostetic este reprezentat de o porfirin cu fier. Citocromii, rspndii n frunzele verzi ale plantelor, reprezint o clas de cromoproteide ferporfirinice, a cror component prostetic este asemntoare hemului din hemoglobine. Se cunosc mai muli citocromi, dintre care cei mai importani sunt citocromii a, b, c, care intr n structura unor enzime (monooxigenaze) care conin ca i grupare prostetic hemul, legat coordinativ prin cationul Fe2+ de componenta proteic. Citocromii sunt implicai n fenomenele de oxido-reducere, prin transfer de electroni, datorit capacitii cationului metalic de a trece reversibil de la forma Fe2+ la forma Fe3+. Citocromii joac un rol deosebit n fenomenul respiraiei tisulare. Fitocromul este o cromoproteid cu structur tetrapirolic liniar, cu rol de fotoreceptor n toate reaciile din plantele superioare. Indeplineste i un rol regulator al creterii i dezvoltrii plantelor, (ncepnd cu germinarea i terminnd cu nflorirea), intervine n sinteza pigmenilor vegetali antocianici, n biosinteza unor enzime, biosinteza fitohormonilor gibereline, precum i n procesele de reglare hormonal a metabolismului plantelor.
PROTEINA

O OOC C O O

PROTEINA

O OOC C O

N H

N H

N H

O
PROTEINA

N H

N H

Cromoproteide neporfirinice Flavinenzimele sunt cromoproteide care nu conin n molecul, drept component prostetic nucleul porfirinic, ci un compus din clasa flavinelor, care ndeplinete n organism rol enzimatic. Carotenoproteidele au componenta prostetic din clasa carotenoidelor. Din aceast clas fac parte pigmenii vizuali, cu rol important n procesul vederii. Nucleoproteide

Nucleoproteidele sunt cele mai importante i complexe heteroproteide, n care component prostetic sunt acizi nucleici, iar partea proteic este reprezentat de proteine cu caracter bazic din clasa histonelor i protaminelor. Nucleoproteidele au un rol esenial n activitatea vital a organismelor, deoarece sunt constituente ale tuturor celulelor (ndeosebi ale nucleelor celulelor animale i vegetale), localizate cu precdere n zonele organismului care reprezint sediul de multiplicare a celulelor, de sintez a proteinelor. Nucleoproteidele intr i n constituia bacteriilor, iar virusurile filtrante sunt acizi nucleici aproape puri. Dei sunt componente eseniale ale nucleelor celulare, nucleoproteidele apar n cantiti mici i n sucuri sau n secreii ale organismelor animale i vegetale. n esuturile vegetale se gsesc deseori asociate cu lipide. Nucleoproteidele sunt prezente n citoplasm i n ribozomi, avnd rol n diviziunea celular i n sinteza proteidelor. Studiul acestor compui biochimici cu rol deosebit de important n organismele vii, impune

elucidarea structurii i a proprietilor celor dou componente: componenta proteic i componenta prostetic (acizii nucleici). Dintre holoproteide mai frecvente sunt: protaminele, histonele, albuminele i globulinele. Prin hidroliz total, din componenta proteic vor rezulta aminoacizi, iar din componenta prostetic acizi nucleici (polinucleotide macromoleculare) vor rezulta, ntr-o prim etap mononucleotide, apoi acid fosferic i nucleozide care se scindeaz n acid fosforic, componente glucidice (pentoze) i baze azotate (purinice i pirimidinice).
Nucleoproteide Componenta prostetic = acizi nucleici (polinucleotide) Mononucleotide Nucleozide Componente glucidice Baze azotate Pirimidinice purinice deoxiriboza riboza citozina uracil timina adenina guanina

Componenta proteic

H3PO4

Acizii nucleici (polinucleotide macromoleculare) Compoziia i structura acizilor nucleici. Acizii nucleici se caracterizeaz printr-un coninut de aproximativ 15% azot i prin procentul ridicat de acid fosforic (10%). Structura acizilor nucleici este complex, macromolecular, a crei unitate structural de baz este o mononucleotid. Acizii nucleici sunt deci polimeri ai mononucleotidelor (polinucleotide). Mononucleotidele se pot scinda la hidroliz, cu eliberare de acid fosforic i nucleozide, care sunt constituite dintr-o pentoz i o baz azotat. Componentele acizilor nucleici a) Componentele glucidice ale acizilor nucleici sunt pentozele deoxiriboza i riboza:
H C O H C H H C OH H C OH H2C OH H OH H CH2OH H O H H OH

H C O H C OH H C OH H C OH H2C OH

CH2OH H H OH

O H

OH

H OH

deoxiriboza

riboza

Dup natura chimic a componentei glucidice nucleoproteidele se clasific n:

deoxiribonucleoproteide (localizate n nucleul celulelor, cromozomi, mitocondrii); ribonucleoproteide (rspndite n citoplasma celular, ribozomi, nucleul celular).

b) Componentele baze azotate din structura acizilor nucleici sunt compui heterociclici derivai de la purin i pirimidin, pe al cror nucleu sunt grefate grupe funcionale: -NH2 i OH. n clasa derivailor hidroxilici i aminici ai pirimidinei este posibil tautomeria lactam-

lactimic: pentru derivai aminici:

HN C NH

H2N C N

pentru derivai hidroxilici: O C NH

HO C N

n condiiile de pH fiziologic, este favorizat n cazul hidroxipirimidinelor forma lactamic (O=C-NH-), iar n cazul aminopirimidinelor forma lactimic (N=C-OH). Grupele NH2, respectiv NH-, imprim caracter bazic; grupele OH imprim caracter acid, ceea ce explic posibilitatea de a forma sruri prin nlocuirea atomului de hidrogen cu atomi de metale. Bazele azotate pirimidinice ntlnite frecvent n structura acizlior nucleici sunt: citozina, uracilul i timina. Ele pot fi reprezentate prin urmtoarele forme izomere:
NH2 N
citozina

NH HN N N H OH CH3 N O OH N N N H HO N H CH3 HO

NH2

N H O

N OH N HO OH N CH3

N
timina

HN N O N H O HN
uracil

nucleu pirimidinic

N H

Caracteristic celor trei baze azotate pirimidinice este faptul c la structura acizilor dezoxiribonucleici (ADN) particip citozina (C) i timina (T), iar n structura acizilor ribonucleici (ARN) particip citozina i uracilul (U), respectiv, n ARN uracilul nlocuiete timina. Pe lng bazele pirimidinice constituente universale ale ARN i ADN, s-au identificat i alte baze pirimidinice ocazionale: 5-metil-citozina n germenii de gru i n anumite bacterii, 5hidroximetil-citozina i 5-hidroximetil-uracilul n acizii nucleici ai unor bacteriofagi. Bazele purinice care particip la structura acizilor nucleici sunt adenina (6-aminopurina) i guanina (2-amino-6-hidroxipurina). i n cazul bazelor azotate purinice, tautomerii ntlnii n acizii nucleici sunt cei n care atomul de oxigen se afl sub form cetonic, iar cel de azot sub form amidic.

NH2 N N N N N N N H2N

OH N

N H

N H
adenina

N H
guanina

nucleu purinic

n ADN-ul unor bacteriofagi a fost identificat i 6-metil-amino-purina. Deoarece forma lactamic este predominant la formarea de nucleotide, bazele azotate stabilesc legturi covalente de tip N-glicozidic cu hidroxilul semiacetalic de la C1 al deoxiribozei sau ribozei. Acidul fosforic (H3PO4) esterific componenta glucidic imprimnd caracter acid mononucleotidelor i acizilor nucleici. El contribuie la formarea macromoleculelor polinucleotidice ale acizilor fosforici prin legturile fosfodiesterice pe care le formeaz, n urma reaciei cu grupele OH ale componentei glucidice de la dou mononucleotide vecine. Esterificarea poate avea loc n poziia 5, 3 sau 2 din molecula ribozei sau n poziia 5 i 3 din molecula deoxiribozei.
mononucleotida 1 mononucleotida 1 O OH P OH OH O P HO OH + HO CH2
- 2 H2O

OH + H O

O P HO

O O CH2 O mononucleotida 2

mononucleotida 2

A. Nucleozide

Nucleozidele sunt componente structurale ale mononucleotidelor, constituite din componenta glucidic i o baz azotat. Din punct de vedere structural, nucleozidele sunt Nglicozide, rezultate n urma reaciei de condensare dintre atomul de hidrogen legat de atomul de azot al bazei azotate (N3 de la bazele pirimidinice i N9 de la bazele purinice) i hidroxilul OH glicozidic de la C1, aflat n poziia a glucidei.

N NH2 N
3

NH2 N N
9

CH2OH

OH

CH2OH

H OH

N H

N H

citozin azotat

adenin

glucid

baza

Nucleozidele sunt compui intermediari rezultai la hidroliza acizilor nucleici i se pot clasifica n nucleozide pirimidinice i nucleozide purinice. Tinnd seama i de componenta

glucidic, se deosebesc: pirimidindeoxiribozide, pirimidinribozide, purindeoxiribozide i purinribozide. Pentru formarea numelui nucleozidelor se utilizeaz terminaia idin pentru nucleozide care conin ca baz azotat o baz pirimidinic: citozina citidina; timina timidina; uracilul uridina. Pentru nucleozidele care conin o baz azotat purinic se utilizeaz terminaia ozin: adenina adenozina; guanina guanozina. Deoxiribozidele ataseaz la denumire prefixul deoxi sau d: deoxicitidina, deoxiuridina, deoxitimidina, deoxiadenozina, deoxiguanozina.
NH2 N HN O HN CH2OH H H OH OH H OH OH O H H O CH3

citozina
CH2OH H H OH OH O O H H H N CH2OH H O O H N

uracil
O

timina
N

citidina

uridina

timidina

NH2 N N N

OH N

adenina
CH2OH H H OH OH N O H H H OH OH N CH2OH H N O H H N

guanina
NH2

adenozina

guanozina

Nucleozidele se gsesc n natur i n afara acizilor nucleici: guanozina n plantele tinere, adenozina n compoziia unor coenzime (Co-dehidrogenaza, Co-fosforilaza, Co-fosforilaza, Coenzima A) iar uridina este component a coenzimei uridindifosfatglucoza (UDPG).
B. Nucleotide

Nucleotidele sunt unitile monomere, structurale ale acizilor nucleici (polinucleotide macromoleculare). Prile componente ale mononucleotidelor sunt unite prin dou tipuri de legturi: N-glicozidic - ntre pentoz i atomul de azot din poziia 3 sau 9 de la bazele azotate. Tip ester, rezultate prin condensarea uneia dintre grupele OH cu caracter acid de la acidul fosforic cu una dintre grupele OH de la C3 sau C5 ale deoxiribozei, respectiv, C2, C3 sau C5 ale ribozei. n structura organismelor vii sunt predominante nucleotidele care posed radicalul fosforic n poziia C5. Din punct de vedere chimic, mononucleotidele sunt esteri mono-, di-, trifosforici ai nucleozidelor. n funcie de componenta glucidic i de baza azotat, se deosebesc ribonucleotide i dezoxiribonucleotide (pirimidinice i purinice).

Denumirea nucleotidelor se formeaz utiliznd sufixul ilic ataat numelui derivat de la baza azotat i prefixul acid (care semnific prezena restului de acid fosforic n molecul). Un alt mod de denumire este cel care ataeaz prefixului acid la numele nucleozidului i indic numrul i poziia grupei (grupelor) fosforice legate de componenta glucidic (acid adenozin-5trifosforic, acid citidin-3-monofosforic etc.).
NH2 N O HO P OH H OH OH O CH2 H O O H H
H OP OH N O O H H N NH2

NH2 N CH2OH H H OH OP O H H N

CH2OH H

acid citidin 5'-monofosforic acid citidilic

acid citidin 3'-monofosforic acid citidilic

acid citidin 2'-monofosforic acid citidilic

NH2

N O HO P OH O O

P OH

CH2 H H OH

O O H

OH

H OH

acidul citidin 5'-trifosforic acid citidilic

Similar cu acizii citidilici, se denumesc acizii uridilici, acizii timidilici ca i acizii adenilici i guanilici, att ca acizi monofosforici, ct i ca produi macroergici.
NH2 N N O CH2 H H OH OH N N HO H H O P OH H OH H O CH2 H O H H N N NH2 N N

O HO P OH O

acid adenozin 5'-monofosforic acid adenilic

acid deoxiadenozin 5'-monofosforic acid deoxiadenilic

NH2 N O HO P OH O O N O P N N

P OH

CH2 H H OH

O H H OH

OH

acid adenozin 5'-trifosforic acid adenilic

n afara de monofosfonucleozide sunt importante pentru metabolism i difosfonucleozidele, rezultate din monofosfonucleozide prin condensarea unei grupe -OH libere a restului fosforic din ester cu o grupa -OH din alt molecul de acid fosforic i respectiv trifosfonucleozidele, rezultate din fosfodinucleozide prin mecanism analog, cu a treia molecul de acid fosforic. Trebuie remarcat faptul c, a doua i a treia legtur esteric sunt, spre deosebire de prima legtur (realizat ntre OH glucidic i prima molecul de acid fosforic), legturi chimice de tip anhidric, cu un coninut mai ridicat de energie dect prima legtur esteric. Ele au fost denumite legturi macroergice i sunt simbolizate prin semnul ~ (Lipmann), spre a le deosebi de legturile covalente obinuite. La scindarea unei legturi macroergice P~O~P se elibereaz aproximativ 7000 cal/mol, comparativ cu aprox. 2000-3000 cal/mol n cazul legturilor covalente obinuite de tip baza azotat-O-P. De aceea, difosfonucleotidele i trifosfonucleotidele prin formarea i scindarea lor, joac rolul unor acumulatori de energie chimic n organism, i fac parte din clasa aa-numitelor substane (molecule) macroergice.
Importana biochimic a nucleotidelor Acidul citidilic a fost obinut prin hidroliza acizilor nucleici din drojdii i din germenii de gru. Acidul uridilic este component a multor coenzime i a fost separat prin hidroliza acizilor nucleici din drojdii i germeni de porumb. Acidul adenilic (AMP) se gsete n drojdia de bere, iar acidul guanilic intr n structura ARN din organismele vegetale i animale. Hidroliza nucleotidelor n prezena enzimei 5-nucleotidaza conduce la eliberarea acidului fosforic i a unei cantiti de energie corespunztoare fiecrei legturi macroergice, cu pstrarea legturii N-glicozidice dintre baza azotat i componenta glucidic. Unele difosfonucleotide acioneaz drept coenzime, activnd unele glucide participante la biosinteza diglucidelor i poliglucidelor. De exemplu: Adenozinmonofosfatul (AMP) este component a coenzimei NAD (nicotinamidadenindinucleotida) mpreun cu nicotinamidnucleotida. Nucleotida UTP (uridintrifosfatul) activeaz glucoza n vederea biosintezei diglucidelor maltoza i zaharoza. Acidul cidintrifosforic (CTP) activeaz bazele azotate participante la biosinteza lipidelor complexe. ATP (acidul adenozintrifosforic) este unul dintre cei mai importani compui macroergici, care elibereaz la hidroliz o mare cantitate de energie, necesar bunei desfurri a proceselor metabolice. Refacerea ATP este un proces endergonic, care se realizeaz cu aport de energie.

Energetica sistemului ATP ADP + Pi implic dou aspecte fundamentale: a) conservarea energiei chimice rezultate din metabolism prin formarea ATP din ADP i fosfat anorganic (Pi):
ADP + Pi ATP

b) eliberarea i utilizarea energiei chimice stocate n ATP pentru nevoile biologice ale organismului (procese chimice, electrice, osmotice, mecanice). ATP ADP + Pi Sistemul ATP ADP + Pi poate fi considerat purttorul material al mesajului energetic specific organismelor vii. Acidul adenozintrifosforic (ATP) reprezint forma de captare i utilizare treptat, controlat a energiei solare, acumulat sub forma legturilor macroergice.
C. Acizii nucleici

Acizii nucleici sunt biomolecule cu caracter informaional, avnd rolul de a stoca i transmite informaia genetic. Acizii nucleici sunt componente importante ale tuturor celulelor, reprezentnd aproximativ 15% din coninutul n substan uscat a acestora. Din punct de vedere chimic, acizii nucleici sunt polinucleotide macromoleculare, respectiv, acizii ADN (DNA) sunt polideoxiribonucleotide, iar acizii ARN (RNA) sunt poliribonucleotide. Structura acizilor nucleici se aseamn mult cu structura proteinelor datorit naturii macromoleculare. Spre deosebire de proteine, unde unitatea structural o reprezint aminoacizii unii prin legturi peptidice, la acizii nucleici unitatea structural este reprezentat de cele cinci tipuri de mononucleotide: acizii citidilic, uridilic, timidilic, adenilic, guanilic, unite prin legturi fosfodiesterice, stabilite ntre o grup -OH din poziia C3 a deoxiribozei (n ADN sau ribozei n ARN) dintr-o mononucleotid i grupa -OH din poziia C5 a ribozei sau deoxiribozei dintr-o mononucleotid nvecinat. Secvena mononucleotidelor n lanul polipeptidic este de o deosebit nsemntate, fiind suficiente (ca i n cazul proteinelor), diferenieri extrem de mici pentru a individualiza un anumit acid nucleic, cu caracteristici biologice difereniate. Dei numrul bazelor azotate care particip la structura acizilor nucleici este de numai patru (A, C, T, G pentru ADN i A, C, G, U pentru ARN), variaia secvenei celor patru mononucleotide (dou pirimidinice i dou purinice) n macromolecula acizilor nucleici ofer suficiente posibiliti de difereniere structural pentru a asigura existena numeroilor acizi nucleici prezeni n natur, specifici fiecrei specii biologice. De exemplu, o caten format din 2500 de mononucleotide poate prezenta teoretic 101500 de izomeri care difer prin secvena mononucleotidelor n macromolecula acidului nucleic respectiv. Acizii nucleici prezint n molecul: o parte constant, nespecific (comun tuturor mononucleotidelor i catenei polinucleotidice), reprezentat prin componenta glucidic i legtura fosfodiesteric; o parte variabil, specific, reprezentat prin bazele azotate (pirimidinice i purinice) componente ale unitilor structurale mononucleotidice. n Tabelul 4.1 sunt redate principalele deosebiri structurale i funcionale dintre acizii ADN i ARN.

Tabelul 4.1. Elemente structurale ale acizilor nucleici ADN i ARN

Elemente de structur Acizii ADN Componenta glucidic Deoxiriboza Bazele azotate a) pirimidinice a) citozina i timina b) purinice b) adenina i guanina Masa molecular 106 Acizii ARN Riboza a) citozina i uracilul b) adenina i guanina 3,5 104 rARN 25 106 mARN 20-30 103 tARN rARN - monocatenar, pliat mARN - monocatenar, liniar tARN - monocatenar, parial elicoidal rARN - sediul sintezei proteinelor mARN - transmiterea mesajului ARN pe ribozomi tARN - transferul specific individual al aminoacizilor

Structura general a macromoleculei Funcia biochimic

Structur primar, secundar, teriar Sediul mesajului genetic

Structura chimic a acizilor nucleici ADN

Acizii deoxiribonucleici sunt polinucleotide macromoleculare, constituente ale nucleului celular, reprezentnd materialul genetic al cromozomilor. ADN extracelular a fost identificat n cantiti mici n cloroplaste i n mitocondrii. Nucleele celulelor animale conin n jur de 2 mg ADN/gram de esut proaspt, ceea ce revine la 4-8 1012 g ADN/nucleu. Aceste valori sunt constante pentru fiecare tip de celul i sunt practic independente de starea fiziologic a animalului. Celulele bacteriene i virusurile conin cantiti mult mai mici de ADN, de ordinul a 4 1015 g, respectiv 2 1018 g. Coninutul n ADN al nucleelor celulelor este cu att mai ridicat cu ct specia este mai evoluat filogenetic. Structura primar a acizilor nucleici ADN Molecula acizilor deoxiribonucleici este un polimer liniar alctuit din sute de mii, uneori milioane de mononucleotide, a cror secven este caracteristic fiecrei specii, legate esteric prin intermediul acidului fosforic care esterific gruprile hidroxil din poziiile C3 i C5. Structura primar a acizilor ADN se refer la natura, proporia i secvena bazelor azotate constituente ale macromoleculei de ADN, respectiv succesiunea celor patru mononucleotide principale unite prin legturi fosfodiesterice: dCMP ......................... dTMP ......................... dAMP .......................... dGMP
deoxicitidinmonofosfat deoxitimidinmonofosfat deoxiadenozinmonofosfat deoxiguanozinmonofosfat

Cele patru mononucleotide constituente se gsesc n cantiti i proporii care difer n funcie de specia de la care provin i care nu se modific de-a lungul vieii unui individ. Dispunerea bazelor azotate n mononucleotide, ntr-o anumit secven i proporie proprie fiecrui tip de acid ADN (evideniat de Chargaff), determin manifestarea anumitor particulariti structurale i funcionale ale organismului (informaia genetic). Datorit masei moleculare mari, macromoleculele de ADN conin o cantitate uria de informaie genetic, n timp ce secvena diferit a mononucleotidelor constituente (respectiv a bazelor azotate) conduce la o impresionant diversitate structural a acizilor nucleici, ceea ce explic marea variabilitate genetic existent n natur. Aranjarea bazelor azotate ntr-o anumit secven proprie fiecrui tip de acid ADN

determin particulariti structurale i funcionale. Astfel, un acid ADN care prezint n structur secvene de mononucleotide bogate n guanin i citozin, are o stabilitate mai mare comparativ cu un ADN n care predomin secvene de mononucleotide care conin bazele azotate adenin i timin. Aceast comportare se datoreaz numrului diferit de legturi de hidrogen care se stabilesc ntre perechile de baze azotate complementare, n structura secundar a acizilor nucleici, respectiv cte trei legturi de hidrogen ntre guanin i citozin i cte dou ntre adenin i timin. Succesiunea mononucleotidelor, cu bazele azotate corespunztoare, n lanul polinucleotidic al ADN este determinat ereditar, confer acizilor nucleici ADN caracter de biomacromolecul informaional i asigur exprimarea, pstrarea i transmiterea caracterelor ereditare la urmai. n figura 4.1 este redat structura primar a acizilor nucleici ADN:
CH2OH H H O P HO O CH2 H H O O P HO O CH2 H H O O P HO O CH2 H H O O P HO O H H H O H H
Guanina Adenina

O H H H

Citozina

O H H

Timina

O H H

Fig. 4.1. Structura primar a acizilor nucleici ADN

Structura secundar a acizilor nucleici ADN

Structura secundar (nivelul secundar de organizare) a acizilor ADN se refer la dispunerea spaial, tridimensional a macromoleculelor de ADN. Watson i Crick (1953) au elaborat aa-numitul model al dublei spirale, sau structur plectonemic (plectos = mpletit, nema = fir), rezultat prin rsucirea unei perechi de catene polipeptidice (cu o anumit structur primar) sub forma unei spirale duble, n jurul unui ax comun imaginar, de la stnga la dreapta.

Aceast structur are forma unei scri n spiral, la care cele dou pri laterale sunt reprezentate de legturile fosfodiesterice, iar treptele scrii de legturile de hidrogen care se stabilesc ntotdeauna ntre aceleai perechi de baze azotate complementare: adenina- timina (legate prin dou legturi de hidrogen) i guanina-citozina (legate prin trei legturi de hidrogen).
O H3C N H NH O HNH N N N N H N H NHH N O HN HHN N O N N H

timina - adenina

citozina - guanina

Aceast regul a complementaritii, formulat de Watson i Crick, condiioneaz ca secvena bazelor azotate dintr-o caten polinucleotidic s determine secvena bazelor azotate din cealalt caten polinucleotidic. Din punct de vedere structural, o baz azotat dintr-o caten polinucleotidic trebuie s fie purinic, iar cealalt baz, din catena polinucleotidic paralel, pirimidinic. Datorit perechilor de baze azotate complementare, fiecare dintre catene este replica complementar a celeilalte, ceea ce asigur transmiterea informaiei genetice nealterate de-a lungul generaiilor. Complementaritatea bazelor azotate face ca raportul dintre bazele purinice si pirimidinice s fie egal A = T; G = C, respectiv, suma bazelor azotate purinice i suma bazelor azotate pirimidinice s fie egal: A + G = C + T, respectiv A + G/C + T = 1. Acest raport, denumit raport de disimetrie este variabil n general, dar constant n cadrul aceleiai specii, indiferent de organ i este utilizat pentru a caracteriza ADN. Cele dou catene polinucleotidice au o dispoziie antiparalel, legturile fosfodiesterice avnd ntr-o caten sensul C3-O-P-O-C5, iar n cealalt C5-O-P-O-C3 (Fig. 4.2). Orientarea bazelor azotate spre interiorul structurii dublei spirale, confer structurii tridimensionale a acizilor ADN stabilitate fizico-chimic, care are drept consecin stabilitatea remarcabil a informaiei genetice, respectiv stabilitatea diferitelor specii i organisme vegetale i animale. Stabilitatea structurii spaiale a acizilor ADN este asigurat i prin posibilitatea formrii de legturi ionice ntre polianionul macromolecular (format prin disocierea grupelor OH din radicalul fosforic) i proteinele bazice (histone), sau ali cationi, cum ar fi Mg2+, ca i prin formarea de legturi intermoleculare (van der Waals, hidrofobe etc.). n cazul denaturrilor reversibile (produse de temperatur, scderea pH-ului) structura secundar este dezorganizat, ca urmare a desfacerii legturilor de hidrogen dintre bazele azotate. Revenirea la condiiile iniiale conduce la refacerea legturilor de hidrogen i deci la remperecherea lanurilor polipeptidice. n cazul denaturrilor ireversibile (sub influena unui agent fizic sau chimic) se produce modificarea secvenei mononucleotidelor sau chiar a raportului A + T/G + C, ceea ce determin apariia unor caractere noi pentru specie sau individ (mutaii genetice). Structura teriar a acizilor nucleici ADN Structura teriar a acizilor ADN reprezint modul de aranjare a macromoleculelor n cromozomi. Este o structur pliat i rsucit n mod specific, n care legturile de hidrogen au de asemenea un rol important, astfel nct, ntr-un cromozom s poat fi cuprins o cantitate ct mai mare de acid nucleic ADN.

O H NH O N O CH2 P OH O H H O O CH2 P OH O H H H NH O C O H H O O P OH O H N O HN H N N H O O H OH CH2 P O O N HN O H N G N N NH H O N O NH N HNH O H H H O O N H H H OH CH2 P O H O H O N A N O N HN T N O CH3 H H H O O O P O H H OH CH2 P O O

H H

H H O O P

CH2 OH H H

Fig. 4.2. Structura secundar a acizilor nucleici ADN

Acizii ribonucleici ARN

Acizii nucleici ARN (acizii ribonucleici) sunt poliribonucleotide macromoleculare, localizate n protoplasm. Structura primar a acizilor ARN este asemntoare structurii primare a acizilor ADN fiind constituit dintr-un singur lan polinucleotidic. Deosebirea esenial dintre ARN i ADN, este structura primar a acestora, n care deoxiriboza (din ADN) este nlocuit cu riboza (n ARN), iar timina este substituit de uracil. Spre deosebire de ADN, n ARN legturile fosfodiesterice sunt posibile i la C2, ca urmare a existenei unei grupe -OH i n aceast poziie. Ca i n cazul acizilor nucleici ADN, succesiunea diferit a mononucleotidelor constituente i proporia molar a bazelor azotate, confer marea varietate de compoziii chimice ale acizilor ARN. AMP ...... GMP ...... CMP ...... UMP
adenozinmonofosfat guanozinmonofosfat citidinmonofosfat uridinmonofosfat

n figura 4.3 este redat structura primar a acizilor nucleici ARN.

Structura secundar a acizilor ARN este reprezentat de un lan polinucleotidic care, pe anumite poriuni, prezint structur dublu spiralat, ca rezultat al plierii lanului monocatenar i formrii legturilor de hidrogen ntre bazele azotate complementare (citozin-guanin i adenin-uracil). Stabilitatea crescut conferit macromoleculeleor de ARN datorit formrii poriunilor dublu spiralate, este determinat de pH-ul soluiei, de fora ionic i de temperatur. Deoarece n structura ARN, catena macromolecular pereche lipsete, raporturile bazelor azotate complementare (A/U i C/G) nu vor mai fi egale cu unitatea ca n cazul ADN. Acizii nucleici ARN se clasific dup valorile maselor moleculare, structura chimic, funcia biologic i rolul lor n biosinteza proteinelor n trei clase: acizi ribonucleici mesageri, matriciali sau informaionali (mARN, iARN); acizi ribonucleici de transport sau solubili (tARN, sARN); acizi ribonucleici ribozomali (rARN).
NH2 N N HO H H O O P OO H H O O P OO H H O O P OO H H O O P OFig. 4.3. Structura primar a acizilor nucleici ARN

N N O

O H H OH N N

NH N NH2 NH2

O O

H H OH N

N O O H H OH N NH O

O O

O O

H H OH O-

a) Acizii ribonucleici mesageri, matriciali sau informaionali

Acizii mARN reprezint o fraciune mic (3-5%) din cantitatea total de acizi ARN din celule. Au mase moleculare de ordinul a 20 000-300 000. Secvena bazelor azotate din structura polipeptidic monocatenar, liniar, a acizilor mARN este complementar cu cea a bazelor azotate din acizii ADN care au servit drept matri la formarea acizilor mARN. Pe baza respectrii regulii complementaritii se realizeaz transcrierea (transcripia) mesajului genetic de pe ADN pe mARN. Acesta, la rndul sau, ca purttor al mesajului genetic (al informaiei) din nucleu la suprafaa ribozomilor (n citoplasm), unde are loc biosinteza proteinelor, servete ca matri n procesul de biosintez a proteinelor, determinnd secvena aminoacizilor n lanul polipeptidic. ntr-un cromozom sunt mii de gene diferite. O molecul de mARN este codificat pentru o singur gen (sau n procariote, pentru un mic grup de gene). De aceea, se formeaz n celule un mare numr de molecule de mARN diferite, puin stabile, cu viaa de la cteva minute (2 minute n bacterii) pn la 20 de minute sau ore, n eucariote. Destrucia mARN reprezint cauza principal a ncetinirii sintezei proteinelor. Odat ndeplinit rolul esenial, de participant activ la biosinteza macromoleculelor proteice, mARN dispare printr-o reacie de hidroliz, urmnd a fi resintetizat.
b) Acizii nucleici de transport sau solubili (tARN)

Cele mai mici molecule de ARN (cu cele mai mici grade de polimerizare) sunt reprezentate de acizii nucleici de transport sau solubili (tARN). Sunt localizai n citoplasm, reprezentnd 10-15% din cantitatea total de acizi ARN i au dimensiuni mici (73-93 de nucleotide) i masa molecular de ordinul 25 000-30 000. Rolul de baz al tARN este transportul specific al aminoacizilor la ribozomi i identificarea codonului complementar de pe ARN, prin intermediul anticodonului, proces n urma cruia este poziionat aminoacidul n catena polipeptidic. Fiecare acid tARN poate forma cu aminoacizii complexe aminoacid-tARN. Deoarece numrul speciilor de tARN (cca. 60) este mai mare dect numrul aminoacizilor proteinogeni (20), rezult mai multe specii de acizi tARN (cte 2-3) pentru fiecare aminoacid. Astfel moleculele de tARN, avnd posibilitatea de a se combina specific cu diferii aminoacizi, sunt implicai n traducerea (translaia) i ndeplinirea mesajului genetic, respectiv alegerea i includerea aminoacizilor n catena polipeptidic, n ordinea dictat de mARN. Acizii tARN au o structur monocatenar, parial dublu elicoidal. Caracteristic este faptul c, dei speciile de tARN difer prin secvena bazelor azotate, toate conin la captul C5 terminal al catenei polinucleotidice restul nucleotidic GMP (guanozin monofosfat), iar la captul C3 (la grpa -OH) al catenei polipeptidice, o aceeai secven de trinucleotide: CCA (acid citidilic, acid citidilic, acid adenilic), dup cum este ilustrat n figura 4.4. La aceast trinucleotid terminal, se leag fiecare aminoacid care urmeaz s fie transferat la nivelul ribozomilor, prin reacia de esterificare a grupei carboxil (-COOH) a aminoacidului cu grupa hidroxil liber (-OH) de la C3 al acidului adenilic terminal din secvena CCA. Se formeaz astfel complexul aminoacil-tARN, care este transferat enzimatic la captul catenei polipeptidice n curs de formare, de la suprafaa ribozomilor.

Fig. 4.4. Structura spaial tip frunz de trifoi a tARN

Locul de introducere a fiecrui aminoacid n catena macromolecular, este dictat de anticodonul tARN (format din trei nucleotide) care recunoate un anumit codon mARN fixat pe ribozomi (format din trei nucleotide cu baze azotate complementare celor din anticodon). Diferitele tipuri de tARN se difereniaz prin anticodon. Structura spaial a tARN, care corespunde proprietilor i funciilor sale, este cea lobat, tip frunz de trifoi (vezi figura 4.4). Acidul nucleic ARN are o structur parial bicatenar, format prin plierea n form de ac de pr a unei catene macromoleculare i formarea legturilor de hidrogen ntre bazele azotate. Captul C3 terminal este monocatenar i este situsul de legare a aminoacidului. Primul lob particip la legarea de enzim a aminoacidului activat sub forma complexului AMP-aminoacid. Acest lob conine 7 nucleotide nepereche i constituie situsul de recunoatere ribozomal, care asigur legarea tARN ncrcat cu aminoacizi de ribozomi. Semnificaia lobului II, cu dimensiuni variabile, nu este nc elucidat. Lobul III, reprezint lobul anticodonului, constituit tot din 7 nucleotide, ale cror baze azotate sunt nemperecheate. Aici se gsete anticodonul ntre o purin la captul C3 i uracil la captul C5. Lobul IV are rol n legarea complexului aminoacil-tARN la suprafaa ribozomului. Un rol esenial n structura tARN prezint anticodonul, o triplet de baze complementare unui codon de pe mARN. Astfel, dac codonul de pe mARN este UUU (corespunztor fenilalaninei), anticodonul corespunztor acestuia pe molecula tARN va fi AAA. Important este c, molecula de tARN va accepta doar fenilalanina. Deoarece sunt cunoscui doar 61 de codoni, fiecare reprezentnd cte un aminoacid, pentru a-i translata, este de ateptat s existe 61 de molecule de tARN diferite, fiecare cu

anticodonul sau, complementar cte unui codon, corespunztor unui aminoacid. De fapt sunt mai puin de 61 de specii de tARN, cel puin cte una pentru fiecare din cei 20 de aminoacizi, dei unele molecule de tARN pot recunoate mai muli codoni. Locul de introducere n catena polipeptidic este dictat de anticodonul t-ARN care recunoate un anumit codon de pe mARN fixat pe ribozomi.
c) Acizii nucleici ribozomali (rARN)

Majoritatea acizilor ARN (pn la 80%) este reprezentat de acidul ARN ribozomal (rARN), prezent n ribozomii citoplasmei celulare. Acidul nucleic rARN nu se gsete n stare liber, ci combinat cu proteine sub forma unor complexe ribonucleoproteice, constituind componente ale ribozomilor, la suprafaa crora are loc biosinteza proteinelor. Ribozomii sunt particule mici, prezente n numr mare n celule, implicai n biosinteza proteinelor. Numele lor provine de la coninutul n acid ribonucleic ARN (60% din coninutul n solide). Ribozomii se leag reversibil att de mARN ct i de tARN. Acizii nucleici rARN au mas molecular mare (600 000-1 200 000), datorit gradului de polimerizare ridicat i o structur monocatenar, parial dublu helicoidal (prin plierea catenei macromoleculare), caracterizat prin formarea de legturi de hidrogen ntre bazele azotate complementare. Acizii rARN au aceeai compoziie indiferent de celulele din care provin, vegetale sau animale.
Virusurile

Virusurile sunt complexe cu structur nucleoproteidic constituite din acizi nucleici ADN sau ARN (ca material genetic) i proteine specifice. Virusurile prezint o structur extrem de simplificat, care nu le poate asigura un metabolism propriu, virusurile situndu-se la limita dintre viu i neviu. Din aceast cauz, un virus existent n stare pur (virion) nu se poate reproduce singur (autoreproducere). Pentru reproducere, virusurile trebuie s ptrund n interiorul unei celule specifice a unui organism viu, i s declaneze mecanismul de a se autoreplica prin intermediul celulei gazd. Virusurile se clasific, n funcie de tipul acidului nucleic coninut n virusuri ADN i virusuri ARN. Acidul nucleic specific fiecrui tip de virus prezint dou caracteristici: este purttorul potenial al proprietilor infectante; este purttorul informaiei genetice, deci este responsabil pentru autoreplicarea virusului n celula infectat. Ptrunse n celule, virusurile deturneaz biosinteza celular proprie, cu precdere spre sinteza componentelor moleculare ale virusului. Acizii ARN i ADN virali se ataeaz de ribozomii celulei gazd manifestnd prioritate fa de acizii nucleici celulari i astfel se biosintetizeaz acizii nucleici virali.

CURS 11 VITAMINE
Vitaminele, alturi de enzime i hormoni se gsesc n organism n cantitate mic i contribuie la biocataliza i reglarea proceselor metabolice, prezena lor fiind esenial pentru existena organismelor vegetale i animale. Vitaminele au n organism un rol funcional important, de factori coenzimatici, deoarece un numr nsemnat de vitamine (mai ales dintre cele hidrosolubile) sunt coenzime, iar altele ndeplinesc rolul de activatori enzimatici. Unele vitamine sunt constituente ale unor importante sisteme de oxido-reducere, implicate n procesele metabolice ale glucidelor, lipidelor i protidelor, regleaz potenialul redox celular, contribuie la transportul hidrogenului pe cale neenzimatic (vitaminele C, E, K etc.). Prima vitamin a fost descoperit de Funk (1911), care a izolat din trele de orez o substan capabil s vindece boala beri-beri (vitamina B1), pe care a numit-o vitamin (amin vital). Vitaminele sunt rspndite n forme direct asimilabile n: frunze, fructe, semine (mai ales n stare de germinare), polen, drojdie de bere, ou, carne, lapte; alte vitamine se gsesc n compui chimici cu structur premergtoare vitaminelor (provitamine) care acioneaz c vitamine numai n urma unor transformri chimice. De exemplu, vitaminele A rezult din provitaminele caroteni, vitamina D2 din provitamina ergosterol. Se cunosc i compui naturali, care fr s fie vitamine, manifest aciune similar lor, i poart numele de substane vitagene, cum ar fi: diferii aminoacizi eseniali, acizi grai eseniali, colina, betaina etc.). Pe de alt parte sunt cunoscui i analogi structurali ai vitaminelor, dar cu aciune antagonic, care anihileaz total sau parial aciunea vitaminelor, substane denumite antivitamine. Vitaminele sunt substane organice care se gsesc n cantiti mici n alimente i sunt indispensabile pentru creterea i dezvoltarea normal a organismelor. Vitaminele sunt biosintetizate preponderent de organismele vegetale i numai n mic msur i de cele animale, care preiau vitaminele din hran, fie n stare liber, fie sub form de provitamine. Lipsa (carena) sau insuficiena vitaminelor n organism determin tulburri metabolice i apariia unor boli careniale cunoscute sub numele de hipovitaminoze sau avitaminoze. Hipervitaminoza este mai rar i se instaleaz doar n cazul unei dozri necorespunztoare a vitaminelor (mai ales a celor liposolubile), n vitaminoterapie. Sub aspect chimic, vitaminele sunt substane micromoleculare cu structur chimic foarte heterogen. Ca element comun se poate semnala prezena unor grupri funcionale esterificabile n molecula lor. n prezent, se poate sintetiza majoritatea vitaminelor cunoscute, care se utilizeaz n medicin ca factori profilactici i curativi.

NOMENCLATUR I CLASIFICARE
Denumirea de vitamine (amine vitale) atribuit de Funk acestei grupe de substane se menine i n prezent, dei unele vitamine nu conin n molecula lor azot. Nomenclatura vitaminelor se poate stabili dup trei criterii:

 nomenclatura veche; rolul fiziologic; structura chimic. Conform vechii nomenclaturi, vitaminele continu s se denumeasc i n prezent cu ajutorul literelor mari din alfabetul latin (A, B, C, D, E, F etc.). n cadrul aceleiai clase, vitaminele se denumesc cu ajutorul indicilor (A1, A2, B1, B2, B6, D2, D3 etc.) Dup rolul fiziologic ndeplinit n organism, vitaminele se denumesc: vitamina antixeroftalmic (vitamina A), vitamina antiscorbutic (vitamina C), vitamina antirahitic (vitamina D) etc. Dup structura chimic se denumesc: tiamina (vitamina B1), riboflavina (vitamina B2), acid ascorbic (vitamina C), piridoxina (vitamina B6) etc. Deoarece, datorit structurii lor heterogene, nu exist un criteriu structural de clasificare a vitaminelor, se recurge la clasificarea vitaminelor pe baza solubilitii lor: vitamine liposolubile, insolubile n ap, solubile n solveni organici, grsimi; vitamine hidrosolubile, solubile n ap, insolubile n solveni organici.

VITAMINELE LIPOSOLUBILE
Vitaminele liposolubile sunt n cea mai mare parte substane termostabile, rezistente fa de aciunea acizilor i bazelor i care pot fi depozitate n organism, i utilizate ulterior, n cazul n care cantitatea lor n alimente este mai mare dect cea necesar. Din categoria vitaminelor liposolubile fac parte vitaminele: A, D, E, K.

Vitaminele A
Vitaminele A sunt din punct de vedere al structurii chimice alcooli primari nesaturai, care conin n molecul un nucleu -iononic i o caten cu duble legturi conjugate, pe care sunt grefai cinci radicali metil. Vitaminele A sunt biointetizate numai de ctre plante, sub form de provitamine cu structur carotenoidic, n organismele animale fiind scindate hidrolitic, sub influena enzimei carotenaz. Surse de vitamine A sunt: ficatul, glbenuul de ou, laptele, untul, precum i salata, spanacul, ceapa verde, vegetale de culoare galben-portocalie (morcovi, tomate). Carotenii sunt sintetizai de toate plantele, cu excepia plantelor parazite i saprofite. Cele mai importante provitamine A sunt: -carotenul, -carotenul, -carotenul i criptoxantina. -Carotenul este cel mai bine reprezentat n masa carotenoizilor separai din frunzele plantelor, unde nsoete clorofilele. Vitamina A1 (retinol, vitamina antixeroftalmic, antiinfecioas, vitamina creterii) se formeaz n organism prin scindarea oxidativ a carotenilor care conin cel puin un ciclu iononic. Din -caroten, principala provitamin A, se obin dou molecule de vitamin A1, pe cnd din restul carotenilor (care conin un singur inel -iononic), se obine numai cte o molecul de vitamin A1. Scderea coninutului de proteine din organism mpiedic transformarea provitaminelor n vitamin. Se presupune c n faza primar produsul oxidrii este o aldehid a vitaminei A (retinalul),

care este redus la alcoolul corespunztor, denumit retinol sau vitamina A1. Retinolul poate fi esterificat i depozitat n ficat sub form de ester retinol palmitat. Este probabil ca forma activ a vitaminei A s fie forma acid, denumit acid retinoic. Funcia specific a vitaminei n procesul vederii este ndeplinit de forma aldehidic a vitaminei A1, denumit retinal. Vitamina A2 (care se gsete frecvent n petii de ap dulce) are n inelul -iononic dou duble legturi i se mai numete dehidroretinol.
H3C CH3 CH3 CH3 H3C CH3

CH3

-caroten
H3C 2 CH3 CH3

CH3

CH3 H3C

CH3

CH3 CH2OH

vitamina A1 (retinol)

Conversia carotenilor la retinol este sub 100%, aa nct coninutul n vitamina A al diferitelor alimente este exprimat sub form de echivaleni de retinol (1 RE = 1 mg retinol, 6 mg -caroten i 12 mg alte carotenoide). Rolul biochimic al vitaminelor A este foarte complex: -carotenul are un rol antioxidant pronunat, reducnd riscul formelor de cancer, iniiate de ctre radicalii liberi i ali oxidani puternici; retinolul i acidul retinoic, convertii n organism n retinil fosfat sunt implicai n sinteza unor glicoproteine i mucoplizaharide care au aciune protectoare asupra esuturilor epiteliale, prevenind keratinizarea lor, proces care favorizeaz, prin predispoziia la fisuri, instalarea infeciilor microbiene; retinolul i acidul retinoic stimuleaz eritropoieza (formarea globulelor roii) prin participarea la biosinteza proteinelor transportoare de fier; forma aldehidic a vitaminelor A (cis-retinalul) este legat reversibil de proteinele vederii (opsina i rodopsina). Lumina iniiaz n retin schimbri biochimice complexe, cu generarea unui impuls nervos datorat transformrii cis-retinalului n trans-retinal i disocierea de pe proteina vederii (rodopsina). Regenerarea pigmenilor vizuali necesit izomerizarea retinolului n forma cis. Hemeralopia nocturn (pierderea acuitii vizuale pe timp de noapte) este un simpton al deficienei n vitamina A, forma sever conducnd la keratinizarea corneei (xeroftalmie). Hipervitaminoza A (peste 50 000 RE/zi) conduce la acumularea ei n ficat, cu apariia unor efecte toxice (mrirea volumului ficatului, splinei, dermatite etc.).

Vitaminele D
Vitaminele D (calciferoli, vitamine antirahitice), dintre care cele mai importante sunt: vitaminele D2 i D3 pot fi considerate datorit aciunii biochimice, mai degrab hormoni dect vitamine. n natur se gsesc att libere ct i sub form de provitamine (steroli). n prezent se cunosc ase vitamine D (notate de la D2 la D7), care pot fi obinute din diferite provitamine. Toate vitaminele D sunt nrudite prin structura chimic de sterol, pe care sunt grefate; o grup hidroxil la C3, un ciclu deschis (B) cu trei legturi duble conjugate, un nucleu indanic i o caten lateral caracteristic fiecrei vitamine. Catenele laterale se deosebesc ntre ele prin numrul atomilor de carbon i prin prezena sau absena unei duble legturi. Transformarea sterolilor n vitamine D se face sub aciunea energiei solare, a radiaiilor ultraviolete, printr-un proces fotochimic cu consum de energie. Din ergosterol, sub influena radiaiilor UV, se formeaz ca produs intermediar lumisterol, i apoi tahisterol i ergocalciferol (vitamina D2).
H3C CH3 CH3 A HO B C D CH3 CH3 CH3
UV

Tahisterol H3C Lumisterol CH2 CH3 CH3 CH3 CH3

ergosterol

HO

vitamina D2 (ergocalciferol)

Colecalciferolul (vitamina D3) este produs n piele prin iradierea cu raze UV a 7-dehidrocolesterolului, provenit din colesterolul preluat n organism prin alimentaie.
H3C CH3 CH3 CH3 CH3
h

H3C CH3 CH2 CH3

HO

HO

dehidrocolesterol

vitamina D3 (colecalciferol)

Atta timp ct corpul este expus luminii solare nu se impune suplimentarea vitaminei D. Cea mai bun surs de vitamine D o constituie petii de ap srat (sardine, heringi, somoni), ficatul, glbenuul de ou, laptele, untul, drojdia de bere. Vitaminele D se exprim sub form de mg de colecalciferol (1 mg colecalciferol sau de ergocalciferol = 40 UI). Aciunea biochimic: vitaminele D regleaz absorbia intestinal a calciului i fosforului. Nivelele ridicate ale calciului i fosforului seric cresc viteza de mineralizare a oaselor (favorizeaz depunerea de calciu n sistemul osos). Cnd n organism, nivelul calciului i fosforului sunt sczute se produce demineralizarea oaselor pentru a menine nivelul seric normal de calciu i fosfor. Simptomele n cazul deficienei de vitamine D sunt rahitismul (la

copii) i osteomalacia (la aduli). Hipervitaminoza (hipercalciurie) se manifest prin formarea calculilor renali, hepatici. Vitaminele D sunt stabile n absena oxigenului i a luminii (pot fi stabilizate cu antioxidani, de exemplu, cu tocoferoli.

Vitaminele E (tocoferoli)
Vitaminele E se mai numesc tocoferoli (tokos = natere; fero = a purta), vitaminele antisterilitii sau vitaminele de reproducere. Ele sunt sintetizate numai de plante i se gsesc n cantitate mare n plantele verzi (salat, legume), germenii cerealelor, uleiuri vegetale, esuturi de organe animale (ficat, rinichi, muchi), ou, lapte. Din punct de vedere chimic, vitaminele E reprezint un amestec de compui chimici nrudii care au la baz tocolul, format dintr-un nucleu benzopiranic (cromanic) pe care sunt grefate o grup hidroxil la C6, o caten lateral derivat din fitol i radicali metil n diferite poziii (n funcie de reprezentant: , , , , etc.).
CH3 HO CH3 H3C CH3 O (CH2)3 CH3 CH (CH2)3 CH3 CH (CH2)3 CH CH3 CH3

-tocoferol

Tocoferolii sunt substane uleioase, termostabile, optic active, oxidabile uor n prezena oxigenului din aer. Prin transformarea reversibil a hidroxilului de la C6 n grupare cetonic, vitaminele E funcioneaz n organism ca sisteme redox. Pe aceast proprietate se bazeaz rolul lor antioxidant, protectori ai altor substane uor oxidabile (vitaminele: A, D, C, E, a biotinei, carotenilor, acizilor grai etc.). Datorit caracterului lipofilic, se acumuleaz n lipoproteine, n membranele celulare i depozitele de grsimi, unde reacioneaz rapid cu O2 i radicalii liberi, protejndu-le de reacii de oxidare i asigurnd o absorbie mai bun a grsimilor. Vitaminele E joac rol n respiraia celular (stabiliznd coenzima Q sau transfernd electroni pe aceasta) i n sinteza hemoglobinei. Favorizeaz reaciile de fosforilare i formarea compuilor macroergici. Fiind implicat n reducerea colesterolului seric, joac rol benefic n controlul afeciunilor cardiace (conform cercetrilor recente, o suplimentare a dietei cu 100 mg/zi de vitamina E, reduce riscul de infarct). Particip la diferite sisteme enzimatice, stimuleaz ritmul de cretere i protejeaz organismul de infecii. Fiind o vitamin liposolubil, ar putea avea un potenial toxic, care ns nu a fost pus pn acum n eviden (este cea mai puin toxic dintre vitaminele liposolubile).

Vitaminele K
Vitaminele K se mai numesc vitamine antihemoragice sau vitaminele coagulrii, menaftone, filochinone. Vitaminele K sunt sintetizate numai de plante (din fitol, component a clorofilei) i microorganismele din tubul digestiv al animalelor. Sunt rspndite n cantitate mare n frunzele de lucern, trifoi, spanac, soia, varz, cloroplaste i n fina de pete.

Din punct de vedere chimic sunt derivai ai 2-metil-para-naftochinonei, pe catena creia se gsete la C3 o grup metil, iar la C2 o caten lateral care difer de la o vitamin la alta.
O CH3 CH3 CH2 CH O
vitamina K1

CH3 (CH2)3 CH
3

CH3

Vitamina K1 (R = radical fitil) este rspndit n plantele verzi, iar vitamina K2 (R = radical farnesil) este biosintetizat de bacteriile intestinale. Particip activ la procesele de oxidare celular i la procesele de fosforilare oxidativ. n organismele vegetale, vitaminele K au un rol important n procesele de oxido-reducere, n procesele de fosforilare i n respiraia tisular. Datorit reaciei reversibile dintre forma oxidat i forma redus, vitaminele K asigur transportul atomilor de hidrogen de la un substrat la altul, pe cale neenzimatic.
O CH3
+2H -2H

OH CH3

R O
vitamina K1 (forma oxidat)

R OH
vitamina K1 (forma redus)

Vitaminele K determin coagularea sngelui prin transformarea fibrinogenului n fibrin. Carena de vitamine K conduce la creterea timpului de coagulare a sngelui i poate fi un factor favorizant al osteoporozei. Deoarece vitaminele K sunt sintetizate de bacteriile din intestine, deficienele sunt rare, dei recent s-a descoperit faptul c vitaminele K sintetizate intestinal nu sunt absorbite total. Deficiena de vitamine K a fost semnalat n cazul malabsorbiei grsimilor ca i dup tratamentele ndelungate cu antibiotice, care pot distruge vitaminele K sintetizate intestinal.

Vitaminele F
Vitaminele F se mai numesc vitamine antidermatitice, deoarece n lipsa lor apar tulburri metabolice la nivelul pielii. Vitaminle F sunt formate dintr-un amestec de acizi grai eseniali, care conin mai multe duble legturi n molecul i care sunt rspndii n organismele vegetale (n special uleiuri vegetale) i nu sunt biosintetizai de animale. Dintre acetia cei mai importani sunt acidul linolenic i acidul arahidonic. Administrate omului, vitaminele F contribuie la procesul de vindecare a unor dermatite. Vitaminele F sunt implicate n procesul de biosintez a lipidelor complexe.

VITAMINELE HIDROSOLUBILE
Vitaminele hidrosolubile sunt substane foarte diferite din punct de vedere structural, reprezentate de vitaminele din aa-numitul complex B (B1, B2, B6, B12 etc.), vitaminele PP, vitamina C, acidul lipoic, acidul pantotenic, acidul folic, vitaminele P etc. Ele difer fa de vitaminele liposolubile n multe aspecte importante, astfel ele sunt solubile n ap i insolubile n solveni organici, sunt mai termolabile, dar mai fotostabile, stabile n mediu acid, dar instabile n mediu bazic etc. Multe dintre vitaminele hidrosolubile sunt rapid eliminate, (de aceea hipervitaminozele sunt rare), iar carenele apar relativ rapid n cazul unei diete srace n aceste vitamine. Deoarece vitaminele hidrosolubile sunt coenzime ale multor enzime cu rol important n metabolism, sunt implicate n etapele generatoare de energie sau n hematopoez. De obicei, ele particip n att de multe reacii biochimice nct este imposibil de stabilit exact cauza biochimic a unui simptom anumit. Totui, se poate generaliza faptul c, datorit rolului important jucat de aceste vitamine n metabolismul energetic, deficienele se observ prima dat n esuturile cu cretere rapid. Simptomele tipice includ: dermatite, glosite (umflarea limbii), diaree, depresii, pierderea coordonrii micrii.

Vitamina B1
Vitamina B1 (tiamina, aneurina, vitamina anti beri-beri) este larg rspndit n regnul vegetal n seminele cerealelor i leguminoaselor, n cojile de orez, frunze, flori, polen, drojdie de bere etc. Din punct de vedere chimic, este constituit dintr-un nucleu pirimidinic i unul tiazolic, legate printr-un radical metilen.
CH2 CH3
H3C N N CH2 N S CH3 O NH2 CH2 CH2O P OH O O P OH OH

N H3C N

N S

NH2

CH2 CH2OH

tiamina

tiaminpirofosfat

Sub form de clorhidrat, este o substan solid, cristalin, solubil n ap i insolubil n solveni organici. Este distrus la fierbere i sub aciunea razelor ultraviolete. Tiamina este rapid transformat prin fosforilare n coenzima tiaminpirofosfat (TPP), care este implicat n: metabolismul cii pentozofosfat (singura surs de biosintez a ribozei necesar sintezei acizilor nucleici i sursa major de NADPH pentru biosinteza acizilor grai), decarboxilarea cetoacizilor etc. Avitaminoza, se manifest la om prin tulburri ale sistemului nervos, iritabilitate, oboseal, depresie, tulburri gastro-intestinale, simptome neuromusculare asociate cu tulburri cardiace (boala beri-beri). Necesarul de tiamin este proporional cu coninutul caloric al dietei (1,0-1,5 mg/zi) i poate fi mrit n cazul excesului de carbohidrai sau al creterii vitezei metabolice (datorit febrei, traumatismelor, graviditii). Vitamina B1 stimuleaz creterea esuturilor i a rdcinilor plantelor cultivate n soluii artificiale.

Vitamina B2
Vitamina B2 (riboflavina, lactoflavina), este sintetizat n plante, bacteriile de fermentaie anaerob i drojdia de bere. Din punct de vedere al structurii chimice este format dintr-un nucleu izoaloxazinic metilat (care confer formei oxidate o culoare galben-verzuie), pe care este grefat un radical ribitil, provenit de la pentaalcoolul ribitol.
CH2 H3C N (CHOH)3 N NH N O
O H3C N NH N R N O +2 H -2 H H3C N R N H H3C H N NH O O

CH2OH O

H3C

H3C

vitamina B2 (forma oxidat)

vitamina B2 (forma redus)

Vitamina B2 este sensibil la aciunea luminii, care n mediu bazic o transform n compui fr activitate vitaminic. Vitamina B2 prezint n organism rol complex. Ea intr n constituia enzimelor dehidrogenaze FMN i FAD, implicate n reaciile de oxidoreducere din metabolism, deoarece poate fixa reversibil atomi de hidrogen. Stimuleaz creterea organismelor tinere i particip alturi de vitamina A n procesul vederii. Alimentele bogate n riboflavin sunt: laptele, carnea, oule, cerealele. Doza recomandat este de 1,2-1,7 mg /zi pentru un adult (mai mare n cazul alcoolicilor i a hipotiroidismului). Simptomele caracteristice deficienei de riboflavin se manifest prin: dermatite, cderea prului, glosit, slbirea rezistenei la infecii.

Vitaminele B6
Vitaminele B6 (adermine, piridoxol, piridoxal, piridoxamina) sunt rspndite n: semine de cereale, drojdie de bere, unt, carne, lapte, ou. Din punct de vedere structural sunt derivai ai 2-metilpiridinei, care apar de obicei mpreun, i se pot transforma una n alta.
CH2OH HO CH2OH HO CHO CH2OH HO CH2NH2 CH2OH

H3C

H3C

H3C

piridoxol

piridoxal

piridoxamina

Prin fosforilarea piridoxalului i a piridoxaminei se obin coenzimele piridoxalfosfat i piridoxaminofosfat, care biocatalizeaz decarboxilarea i transaminarea aminoacizilor. Piridoxalfosfatul este necesar sintezei neurotransmitorului serotonina i a sfingolipidelor necesare formrii mielinei. Vitaminele B6 constituie factori de cretere pentru unele microorganisme. Carena n vitamine B6 produce la om tulburri nervoase, iritabilitate, depresii, insomnii, astenie. Necesarul de vitamine B6, pentru un organism adult este proporional cu coninutul proteic al dietei (pentru 100 g proteine/zi sunt necesare 1,4-2,0 mg/zi).

Vitamina B12
Vitamina B12 (cianocobamida) este puin rspndit n regnul vegetal. n organismele animale se gsete n ficat, rinichi, snge, lapte, reprezentnd factorul absolut necesar creterii unor microorganisme. Vitamina B12 este indispensabil pentru viaa organismelor vegetale i animale, fiind implicat n procesul de cretere, hematopoez i buna funcionare a celulei nervoase. Din punct de vedere a structurii chimice, vitamina B12 este format dintr-un nucleu porfirinic care conine central un atom de cobalt i o grup cian, grupe metilice i amidice legate de nucleele pirolice, un nucleu dimetilbenzoimidazolic, riboz, acid fosforic i alcool izopropilic. Vitamina B12 este o substan cristalin, de culoare roie, solubil n ap, insolubil n solveni organici. Ea stimuleaz biosinteza nucleoproteidelor i este un factor antianemic. In avitaminoz, se ntrerupe diviziunea celular i se produce anemia pernicioas. Deoarece este larg rspndit n alimentele de origine animal, iar ficatul pstreaz timp de 6 ani suplimentul de vitamina B12, deficienele sunt rare (la persoane n vrst i la cele vegetariene).

Vitamina PP
Vitamina PP (niacina, nicotinamida, pelagropreventiv) este rspndit n embrioni de gru, tre, alune, drojdie de bere, lapte, carne (mai puin n porumb, cartofi). Din punct de vedere structural, niacina (nicotinamida) este amida acidului nicotinic, component a coenzimelor oxidoreductaze anaerobe NAD i NADP, implicate n reacii redox prin transfer de atomi de hidrogen de la un substrat la altul, n condiii anaerobe.
O C OH N
N C NH2 O

acid nicotinic
O C NH2 N +2 H -2 H

nicotinamida
O C NH2 N H

nicotinamida (forma oxidat)

nicotinamida (forma redus)

Niacina poate fi sintetizat din aminoacidul triptofan (1 mg de niacina din 60 mg de triptofan), dar biosinteza are loc numai dup ce necesarul organismului n triptofan a fost asigurat i cu aportul altor vitamine din complexul B. Carena pronunat conduce la boala numita pelagra (pella agra = piele groas) sau boala celor trei afeciuni cu "d": dermatit, diaree i demen). Simptomele neurologice sunt asociate cu degenerarea esutului nervos. Necesarul pentru un adult este de: 13-19 mg/zi de niacin.

Acidul folic (vitamina B9)

Aceast vitamin este prezent n frunzele plantelor verzi (spanac, salat), fructe verzi, drojdie de bere, carne, lapte, ou. Din punct de vedere chimic este acidul pteroilglutamic, constituit din acid pteridinic, rest de acid p-aminobenzoic i acid glutamic.
CH2 OH O N N CH2 HN C H N CH2 C H COOH COOH

H 2N

nucleul pteridinic acid para-aminobenzoic 2-amino-4-oxo-6-metilpteridina

acid glutamic

Acidul folic ndeplinete rol de coenzim n biosinteza aminoacizilor (colina, serina, glicina), a bazelor azotate purinice, a nucleotidei dTMP. Cel mai pronunat efect al deficienei este inhibarea sintezei ADN datorit lipsei de purine i dAMP, ceea ce cauzeaz forme grave de anemie.

Acidul paraaminobenzoic (PAB)

Acidul paraaminobenzoic (PAB) se numete i vitamina H i este rspndit att n organismele vegetale ct i n cele animale. Este un factor de cretere pentru numeroase microorganisme. Este sintetizat de flora intestinal n cantiti suficiente pentru om. PAB este component a acidului folic i a coenzimei tirozinaza. Are o aciune antiinfecioas general, previne depigmentarea pielei i a prului.
H2N COOH

Acidul lipoic
Acidul lipoic (tioctic) este prezent n plantele verzi, sub forma de lipotiamidpirofosfat, coenzim participant la carboxilarea acidului piruvic (metabolismul glucidic). Trebuie evideniat de asemenea rolul de acceptor de atomi de hidrogen n prima faz a fotosintezei i de activator al radicalului metil.

CH2 CH2
S

CH (CH2)4 COOH

+2 H -2 H

CH2
SH

CH2

CH (CH2)4 COOH
SH

S
acidul lipoic (forma oxidat)

acidul lipoic (forma redus)

Acidul pangamic
Acidul pangamic (vitamina B15, D-gluconodimetilaminoacetat) a fost pus n eviden n organisme vegetale, smburi de caise, plantule de orez, levuri, sngele de bovine etc. Acidul pangamic este un compus sintetizat n organism din componente care sunt produse normale ale metabolismului: acidul D-gluconic i dimetilglicina. Pe cale sintetic au fost obinui i derivai ai vitaminei B15 care conin n molecul 4, 8 i 12 grupe metil.
COOH (CHOH)3 CH2 O CO CH2 N(CH3)2

acidul pangamic vitamina B15

Acidul pangamic intervine n procesele de metilare i transmetilare, datorit grupelor metil, labile, pe care le conine. Este implicat n biosinteza unor substane biologic-active (donor de grupe metil), cum ar fi: metionina, colina, creatinina, adrenalina, metionina, ARN, hormoni steroizi, n activitatea respiratorie a celulei i procesele de detoxifiere. Acidul pangamic este un factor lipotrop, fiind utilizat la vindecarea hepatitei i tratamentul cirozelor hepatice.

Inozita
Inozita (inozitolul, Bios I) sub forma izomerului mezoinozitol (hexahidroxiciclohexan) este un poliol ciclic, rspndit n toate esuturile vegetale (frunze, rdcini, polen) i animale, sub form liber sau ca ester fosforic (acidul fitinic), ca atare, sau sub forma srurilor de calciu:
OH OH OH OH OH OH OP OP OP OP OP OP P
=

OH P O OH

mezoinozitol

acid fitinic

Acidul fitinic este principala surs de fosfor din semine. In timpul germinrii se elibereaz prin hidroliz enzimatic: ioni de calciu, acid fosforic i final mezoinozitol liber. n organismele animale (nu i n cel uman) inozita este factor lipotrop, prentmpin fixarea grsimilor). Aceeai aciune manifest i colina.

Biotina
Biotina (vitamina H, Bios II) este prezent n: drojdie de bere, muguri de plante, ou, alune, ciocolat. Se gsete liber sau combinat cu proteine, peptide, aminoacizi. Se cunosc dou biotine: -biotina i -biotina. Ambele au o structur biciclic, rezultat prin condensarea formal a unui nucleu tetrahidroimidazolic cu unul tiofenic, avnd drept caten lateral un rest de acid valerianic sau izovalerianic.
O HN NH HN O NH

CH2 CH2 CH CH3

biotina a

COOH

CH2 CH2 CH2 COOH

biotina b

Biotina constituie gruparea prostetic a unor enzime, de exemplu a piruvatcarboxilazei implicat n reacii de carboxilare a cetoacizilor (sinteza acidului oxalilacetic din ciclul Krebs), a acetil-coenzimei A, (biosinteza acizilor grai) i a propionil-coenzimei A (biosinteza aminoacizilor). Biotina stimuleaz creterea esuturilor merismatice prin intensificarea diviziunii celulare. Biotina poate fi sintetizat de bacteriile intestinale. Avitaminoza se manifest prin descuamarea pielei, cderea prului, lipsa poftei de mncare, oboseal etc.

Acidul pantotenic
Acidul pantotenic (Bios III) este rspndit n toate organismele vegetale i animale. n cantitate mare se afl n lptiorul de matc, fasole, soia, drojdia de bere etc. Acidul pantotenic este format din -alanin i acid ,-dihidroxi--dimetilbutiric.
COOH CH2 OH CH2 CH3 OH C CH3 CH O C CH2 NH

Acidul pantotenic este o substan uleioas, de culoare galben, solubil n ap i sensibil la aciunea oxidanilor n mediu bazic. Intr n structura coenzimei A, implicat n metabolismul glucidic i lipidic. Este un factor de cretere pentru numeroase microorganisme i factor de stimulare a metabolismul celular. Cu toat importana acestor reacii, nu exist deficit de acid pantotenic, deoarece acesta este foarte rspndit (panthotem = peste tot) n alimentele de origine vegetal i animal, iar simptomele deficienei sunt vagi, asemntoare, n general, deficienei de vitamine B.

Vitamina C (acidul ascorbic)

Vitamina C (acidul ascorbic) este una dintre vitaminele cele mai rspndite n regnul vegetal n fructe de ctin, mce, coarne, coacze, mere, citrice etc.), att n stare liber ct i asociat cu proteinele sub forma de ascorbinogen. Din punct de vedere al structurii chimice este lactona unui acid cetohexonic, acidul 2,3endiol-L-gulonic.
COOH HO HO H HO C C C C OH H OH O O O H HO C C C C C H OH O
+2 H -2 H

O HO HO H HO

C C C C C H OH
acid treonic acid oxalic

H2C O
O

OH OH OH + COOH COOH

H H

C C

COOH

H2C

H2C

H2C

acid gulonic acid dehidroascorbic

acid ascorbic

Datorit structurii endiolice, acidul ascorbic aparine sistemelor redox biochimice; el poate, prin oxidare, trece reversibil n acid dehidroascorbic. Este un activator general al metabolismului celular fiind implicat n sinteza protocolagenului i deci n meninerea strii de sntate a esuturilor, n vindecarea rnilor, n combaterea fragilitii capilare. Rolul sau reductor (enzimatic) se manifest n absorbia fierului n stomac (prin reducerea Fe3+ la Fe2+ ) precum i la protejarea altor vitamine (A, E, D) fa de procesul de oxidare. Rolul su important de antioxidant biologic recomand vitamina C, alturi de -caroten n dieta preventiv a cancerului. Este necesar un aport continuu de vitamina C (60 mg/zi), deoarece organismul uman nu sintetizeaz i nu acumuleaz aceast vitamin, care este sensibil la lumin, temperatur, O2 din aer, contactul cu metalele (Fe, Cu). Avitaminoza se manifest sub forma bolii numit scorbut (anemie pronunat, hemoragii, osteoporoz).

Vitaminele P
Vitaminele P (citrine, bioflavonoide, vitaminele permeabilitii) se gsesc n cantiti apreciabile n citrice, ardei etc. Sunt substane cu activitate vitaminic, cu rol asupra pereilor vaselor capilare. Din punct de vedere chimic sunt amestecuri de glicozide (conin o component glucidic i un aglicon). Agliconii sunt reprezentai de: pigmeni din clasa flavonelor reprezentai de: hesperitin, rutin, quercetin. Prin oxidare formeaz flavochinone, funcionnd ca sisteme redox. Acioneaz sinergic cu vitamina C n prevenirea i combaterea scorbutului, mresc tonusul miocardului, mresc rezistena la rupere a vaselor sanguine, scad tensiunea arterial.

OH

O O RAMNOZA OH OH
GLUCOZA O

HO

OCH3 OH
hisperitina

quercitina

OH

O O GLUCOZA - RAMNOZA OH OH
rutina

HO

Antivitamine
Antivitaminele sunt substane cu structur chimic asemntoare vitaminelor, dar cu aciune opus acestora. Diferena de comportare este consecina diferenelor structurale, chiar dac acestea nu sunt mari. Antivitaminele prezint n general o structur molecular asemntoare vitaminelor, sau cu unele fragmente din molecula lor. Efectul antivitaminic se explic prin afectarea activitii enzimatice, datorit modificrii structurii enzimei prin nlocuirea coenzimei (vitaminei) cu antivitamina corespunztoare, sau prin inhibiie competitiv a aciunii biocatalitice enzimatice de ctre noua structur a antivitaminei. In prezent se cunosc numeroase antivitamine care au o structur analoag riboflavinei, piridoxinei, tiaminei, biotinei, acidului foilc, precum i vitaminelor K i E. Se cunosc de asemenea, n afar de antivitamine, substane cu au o structur chimic diferit mult de cea a vitaminelor, de natur proteic, care au proprietatea de a se combina cu vitaminele, anihilndu-le astfel activitatea vitaminic. De exemplu, n albuul de ou s-a identificat proteina avidina, care se combin cu biotina, anihilndu-i activitatea vitaminic. Aciunea antivitaminelor se explic prin perturbarea unor procese metabolice care sunt stimulate de aciunea vitaminelor. n tabloul sintetic de mai jos, sunt prezentate n paralel, structurile unor vitamine i cele ale antivitaminelor corespunztoare.

VITAMINE
N H 3C N CH2 N S CH3

ANTIVITAMINE
H2 C N
CH2 CH2OH

CH3 N CH2 CH2OH S

NH2

H3C

Tiamina (Vitamina B1)

O NH2
N
N

Piritiamina
O CH3 N S O O NH2

Nicotinamida (Vitamina PP)

COOH

Acetilpiridina
COOH OH

Piridinsulfonamida
SO2 NH2

NH2

NH2

NH2

Acidul para-aminobenzoic (PAB)

COOH CH2 OH CH2 CH3 OH O C CH3 CH C CH2 NH

Acidul para-aminosalicilic (PAB) Sulfanilamida

SO3H CH2 OH CH2 CH3 OH O C CH3 CH C CH2 NH

Acid pantotenic

Pantoiltaurina
O C C C C C C H 2C H OH OH O

O HO HO H HO

C C C C C H2C H OH O

HO HO H HO H

Acidul ascorbic (Vitamina C)

Acidul glucozascorbic

CURS 12 si 13 ENZIME
Enzimele sunt compui macromoleculari de natur proteic, produi i prezeni numai n organismele vii, cu rol de biocatalizatori ai tuturor transformrilor biochimice caracteristice metabolismului. Necesitile plastice i energetice ale organismelor vii sunt acoperite, pe de o parte, din substanele nutritive, relativ stabile chimic, iar pe de alt parte de o serie de reacii de ardere la care particip oxigenul. Apariia i evoluia fiinelor vii organizate a fost nsoit de selecionarea i perfecionarea unor mecanisme capabile s asigure o vitez mare de desfurare a proceselor biochimice, n condiii de activitate relativ menajate (soluii apoase, temperaturi joase, mediu neutru etc.). Aceast problem, a fost rezolvat n decursul evoluiei, prin apariia catalizatorilor biologici care sunt enzimele. Enzimele au rol esenial n biosinteza i biodegradarea substanelor din materia vie. In lipsa enzimelor, majoritatea reaciilor chimice din organism nu s-ar putea produce i deci nu ar mai exista procese metabolice i nici fenomene de via. Bogate n enzime sunt plantulele, frunzele tinere, esuturile meristematice, seminele n stare de germinaie, fructele. In general, plantele tinere au un coninut mai ridicat de enzime dect plantele adulte. Activitatea catalitic a enzimelor din organismele n cretere este mai mare dect a celor din organismele adulte. Dup locul unde acioneaz, se pot evidenia: endoenzime (enzime intracelulare); exoenzime (enzime extracelulare). Endoenzimele, acioneaz n celulele n care s-au sintetizat. Ele sunt lioenzime (legate mai slab n celul) i desmoenzime (legate mai puternic n celule). Exoenzimele, dup etapa de formare n celule, sunt eliminate n lichidele din organism, unde i exercit activitatea catalitic. Astfel, acioneaz de exemplu, enzimele din lichidele interstiiale, din diferite caviti, din seva elaborat etc. Substana asupra creia acioneaz enzimele se numete substrat.

STRUCTURA CHIMIC GENERAL A ENZIMELOR

Enzimele se pot clasifica, din punct de vedere chimic n dou clase: enzime monocomponente (holoproteice); enzime bicomponente. a) Enzimele monocomponente (holoproteice, proteine biocatalitice) sunt constituite numai din proteine. Aciunea lor biocatalitic se datoreaz anumitor fragmente din catena polipeptidic, care includ grupe funcionale componente ale catenelor laterale ale aminoacizilor (-OH, -NH2, -SH, -COOH etc.), constituind centrul activ sau situsul catalitic. Prin acest centru activ enzima fixeaz substratul (l recunoate) sub forma unui complex enzim-substrat, simbolizat E-S, i biocatalizeaz transformarea substratului. Pentru recunoaterea i formarea complexului E-S, geometria centrului activ trebuie s fie complementar cu cea a substratului. Blocarea sau inactivarea centrului activ (de exemplu denaturarea proteinei) conduce la pierderea activitii catalitice a enzimei holoproteice. In schimb, denaturarea unei pri a proteinei, care nu cuprinde centrul activ, nu modific activitatea catalitic a enzimei.

b) Enzimele bicomponente (heteroproteice) sunt constituite din: componenta proteic (apoenzim, apoferment), care determin specificitatea enzimei (o anumit secven a aminoacizior prin care enzima recunoate substratul i l fixeaz), este caracterizat prin mas molecular mare, termolabilitate etc.; componenta neproteic (prostetic, coenzim, cofactor), care determin mecanismul i viteza reaciei enzimatice poate fi: o vitamin, un hormon, un colorant, nucleotide, metale. Ea este caracterizat prin mas molecular mic, termostabilitate. n majoritatea cazurilor, aciunea catalitic a enzimelor se manifest numai n prezena unor substane speciale, denumite cofactori, care se clasific n trei grupe: coenzime sau cofermeni specifici, sunt substane organice cu mas molecular mic, termostabile i care dializeaz uor din soluiile enzimei. Coenzimele se caracterizeaz prin nsuirea lor de a reaciona reversibil cu proteina care intr n structura enzimei (apoenzima sau apofermentul); gruprile prostetice, substane combinate mult mai strns cu apoenzima, se disociaz greu i, n general, rmn fixate pe o singur apoenzim; activatorii, denumii uneori i cofactori anorganici, sunt substane nespecifice (diferite metale, ageni reductori etc.), care mediaz trecerea enzimei ntr-o stare catalitic activ. Este greu de precizat o demarcaie clar ntre cele trei grupe de cofactori, clasificai dup natura i raportul lor fa de apoenzim. Multe dintre coenzime i grupri prostetice sunt de fapt derivai ai vitaminelor hidrosolubile. O mare parte dintre coenzime i grupri prostetice identificate n componena unor enzime sunt nucleotide sau derivai ai acestora. Dei n cazul enzimelor bicomponente, componenta care particip efectiv la realizarea procesului biocatalitic enzimatic este coenzima, totui, pentru manifestarea activitii enzimatice, prezena apoenzimei de natur proteic este absolut obligatorie, deoarece gruparea prostetic luat separat are slabe proprieti catalitice. In complexul format de apoenzim i coenzim (holoenzim) activitatea catalitic crete de 1000 de ori, comparativ cu activitatea catalitic a coenzimei libere. Legturile dintre apoenzim i coenzim sunt de natur diferit, variind de la o enzim la alta i pot fi: legturi covalente, legturi van der Waals etc. Datorit structurii proteice macromoleculare, enzimele au o mas molecular mare i formeaz soluii coloidale. Starea coloidal a enzimelor prentmpin difuzia lor dintr-o celul n alt celul, condiionnd o localizare strict a reaciilor biochimice n organism la nivelul diferitelor organe, esuturi, celule.

CARACTERISTICI ALE ACTIVITII ENZIMATICE

Enzimele, asemntor catalizatorilor chimici obinuii, biocatalizeaz numai acele reacii metabolice posibile din punct de vedere termodinamic (care se desfoar spontan, avnd energia liber G < 0). Rolul enzimelor, ca i al catalizatorilor chimici, este de a reduce energia de activare (nu modific echilibrele chimice, dar grbete atingerea lor). Energia de activare n cazul enzimelor este ns mult mai mic. De exemplu, energia de activare la descompunerea apei oxigenate conform reaciei: 2 H2O2 = O2 + 2 H2O este diferit, n funcie de tipul de catalizator utilizat: fr catalizator: 18 kcal/mol; cu catalizatorul chimic FeCI3: 11,7 kcal/mol; cu biocatalizatorul catalaz: 5,5 kcal/mol

Viteza reaciei enzimatice este mult mai mare dect n cazul reaciei catalizat de catalizatori chimici. De exemplu, enzima catalaza realizeaz descompunerea H2O2 de 10 miliarde de ori mai repede dect FeCI3 (ambii catalizatori au n structur cationul Fe3+). Sensibilitatea reaciei enzimatice este foarte mare, astfel o molecul de catalaz descompune 5 milioane de molecule de H2O2 ntr-un minut, la 0 0C i la pH = 6,8. Enzimele catalizeaz reacii de desfacere i formare de legturi n condiii fiziologice compatibile cu viaa. Aceleai reacii ar necesita n laborator condiii de temperatur, presiune, pH, improprii vieii. Spre deosebire de catalizatorii chimici, enzimele se caracterizeaz prin specificitate (absolut sau relativ) de substrat sau de aciune. Specificitatea de substrat absolut este proprietatea enzimelor de a aciona asupra unui singur substrat (de exemplu, ureaza catalizeaz numai descompunerea ureei). Acest tip de specificitate este determinat de o anumit secven a aminoacizilor componeni ai apoenzimei. Specificitatea de substrat relativ este proprietatea enzimelor de a aciona asupra unui grup de substraturi cu structur chimic apropiat. De exemplu, maltaza catalizeaza hidroliza poliglucidelor n care componentele glucide sunt legate -glicozidic. Specificitatea de substrat poate fi: stereochimic, dac enzima catalizeaz transformarea doar a unui singur izomer din mai muli posibili (de exemplu: a izomerului trans, sau a izomerului cis; a izomerului dextrogir, sau a celui levogir). Specificitatea de substrat poate fi specificitate de legtur, dac enzima catalizeaz formarea sau scindarea unui anumit tip de legtur (peptidic, glicozidic, eteric, esteric etc.), indiferent de natura substanei care o conine. De exemplu: lipazele catalizeaz hidroliza gliceridelor indiferent de natura acidului gras component. Specificitatea de aciune absolut este caracteristica enzimelor de a cataliza o singur reacie, dintre multiplele reacii posibile. Specificitatea de aciune relativ este proprietatea enzimelor de a cataliza un anumit tip de reacie, dat de un grup de substraturi nrudite. Acest tip de specificitate a enzimelor este determinat mai ales de natura cofactorilor (gruparea prostetic, coenzima) i mai rar de natura apoenzimei.

MECANISMUL DE ACIUNE A ENZIMELOR. CINETICA REACIILOR ENZIMATICE

Mecanismul de aciune a enzimelor este analog cu cel al catalizatorilor chimici. Enzimele sunt capabile s accelereze viteza de desfurare a diferitelor reacii (micoreaz energia de activare), absolut necesare pentru meninerea i reproducerea materiei vii. Enzimele catalizeaz numai reacii termodinamic posibile, care se pot produce i fr participarea lor, dar ntr-un timp mai ndelungat i uneori n condiii incompatibile cu materia vie. Spre deosebire de catalizatorii nebiologici, enzimele au un randament mult mai ridicat, care asigur mersul reaciei biochimice, n majoritatea cazurilor ntr-un singur sens, fr reacii secundare. Ele prentmpin descompunerea unor substane instabile n anumite condiii i permit realizarea unor procese chimice complexe, cu o cantitate minim de energie. Enzimele particip activ la procesele catalitice, parcurgnd urmtoarele etape: activarea moleculelor substratului (S), prin scderea energiei de activare a acestuia, i formarea complexului intermediar disociabil, enzim-substrat (ES), mai activ dect substratul ca atare; transformarea complexului enzima-substrat (ES) n produsul de reacie (procesul catalitic

efectiv), mai nti legat de enzim (EP), i n final, prin eliberarea enzimei, obinerea produsului de reacie, (P). Schematic, mecanismul catalizei enzimatice, conform teoriei etapelor intermediare, poate fi reprezentat astfel: E + S = ES ; sau considerat ca echilibru: ES EP ; EP P+E

E+S

k1 k -1

ES

k2 k -2

PE

k3 k -3

P+E

innd cont c transformarea ES EP este practic instantanee iar reacia de transformare P + E EP este nul (enzima fiind specific pentru substrat nu i pentru produs), sistemul de ecuaii de mai sus devine:

E+S

k1 k-1

ES

k2

P+E

i poart denumirea de echilibrul Michaelis-Menten.

Factorii care influeneaz viteza reaciilor enzimatice

Reaciei de formare i de descompunere a compusului enzim-substrat i se poate aplica legea aciunii maselor i se poate determina astfel constanta de echilibru. Viteza reaciilor enzimatice depinde n mare msur de concentraia enzimei i de concentraia substratului.
a) Influena concentraiei enzimei asupra vitezei reaciei enzimatice

Viteza reaciei enzimatice este direct proporional cu concentraia enzimei prezente n mediul de reacie (figura 6.1):

v mol/s

[E] mol/L Fig. 6.1. Influena concentraiei enzimei asupra vitezei reaciei enzimatice

n unele cazuri, de obicei cnd sunt prezeni n sistem i ali factori, curba care reprezint

dependena vitezei de concentraia enzimei, este deviat fa de cea normal. Abaterile de la aceast comportare se pot datora prezenei inhibitorilor, folosirea unei concentraii de substrat sub limita de saturare a enzimei etc.
b) Influena concentraiei substratului asupra vitezei reaciei enzimatice

S-a constatat c dac se pleac de la o cantitate fix de enzim i se mrete treptat concentraia substratului, se va forma o cantitate mai mare de complex enzim-substrat, viteza reaciei va crete treptat, pn cnd toat enzima s-a combinat cu substratul. Acest stadiu reprezint momentul de saturare a enzimei, iar viteza va fi maxim (vmax). Dac se mrete n continuare concentraia substratului, viteza de reacie nu se va mri, deoarece nu exist enzim liber care s intre n reacie cu substratul. Momentul de saturare a enzimei este dificil de stabilit, deoarece acesta variaz n funcie de concentraia enzimei i de concentraia substratului. n practic, activitatea enzimatic se apreciaz dup concentraia substratului, cnd jumtate din cantitatea de enzim este combinat cu substratul sub form de complex enzim-substrat. n acest caz, viteza reaciei este jumtate din valoarea sa maxim. Acest punct reprezint constanta Michaelis (KM) i reprezint concentraia substratului pentru care viteza de reacie este jumtate din viteza maxim. Deci, pentru v = vmax/2, rezult KM = [S] (vezi figura 6.2).
v mol/s vmax

vmax/2

KM

[S] mol/L

Fig. 6.2. Influena concentraiei substratului asupra vitezei reaciei enzimatice

Constanta Michaelis are valorile unor concentraii i se exprim n moli/L. Constanta Michaelis se poate utiliza pentru a determina afinitatea enzimei fa de substrat. Cu ct KM va avea o valoare mai mare, cu att afinitatea enzimei fa de substrat va fi mai mic i invers. Relaia cantitativ dintre viteza reaciei enzimatice, concentraia substratului i valoarea KM, care exprim viteza reaciei enzimatice n fiecare moment, este dat de ecuaia MichaelisMenten:

v=

v max [S] K M + [S]

Constanta lui Michaelis este o mrime important nu doar din punct de vedere al cineticii enzimatice ci i pentru msurtorile cantitative ale activitii enzimatice din esuturi. Cercetri recente au pus n eviden importana medical a constantei KM. Unele cazuri de leucemie (n

care are loc o cretere enorm a numrului de leucocite) pot fi regresate prin administrarea intravenoas a enzimei asparaginaza care catalizeaz reacia de hidroliz a asparaginei la acid aspartic i amoniac. Prin injectarea intravenoas a asparaginazei (factor de cretere a leucocitelor), fenomenul de cretere a leucocitelor este stopat. Cercetrile asupra surselor de asparaginaz au demonstrat ca enzima are valori diferite ale KM n funcie de provenien (bacterii, plante, animale). Deoarece concentraia de asparagin din snge este foarte mic, cantitatea de asparaginaz injectat va avea efect terapeutic, doar dac valoarea KM va fi suficient de mic pentru a hidroliza rapid asparagina aflat n concentraii mici n snge. Activitatea enzimatic se exprim prin unitatea enzimatic, respectiv cantitatea de enzim care poate cataliza transformarea unui micromol de substrat n timp de un minut. Activitatea enzimatic n cazul enzimelor pure se determin prin numrul de molecule de substrat care pot fi metabolizate ntr-un minut de o singur molecul de enzim. Aceast mrime se numete raport de transformare (turnover number).
c) Influena temperaturii asupra vitezei reaciei enzimatice

Activitatea enzimelor este foarte mult influenat de temperatur. Asemntor celor mai multe dintre reaciile chimice, viteza reaciei enzimatice crete cu creterea temperaturii (se dubleaz la creterea temperaturii cu 10 0C). Pentru fiecare enzim exist o temperatur la care activitatea enzimatic este maxim, numit temperatur optim (n general, cuprins ntre 20-40 0C. Pn la atingerea temperaturii optime, activitatea enzimatic crete proporional cu creterea temperaturii. Dup atingerea acestei temperaturi, activitatea enzimatic scade rapid cu creterea temperaturii, datorit denaturrii prii proteice a enzimei, acelai fenomen avnd loc la scderea temperaturii sub cea optim (fenomene utilizate n practic la pstrarea alimentelor prin fierbere sau congelare). Cele mai multe enzime sunt inactivate la temperaturi peste 55-60 0 C, cu excepia enzimelor din bacteriile termofile (din izvoarele termale), active i peste 85 0C. Influena temperaturii asupra vitezei reaciei enzimatice este redat n figura 6.3.
v mol/s
Temperatura optim

40

Temperatura 0C

Fig. 6.3. Influena temperaturii asupra vitezei reaciei enzimatice

Unele enzime, cum ar fi ribonucleazele, i pierd activitatea la nclzire, dar i-o regsesc rapid la rcire, fapt care indic refacerea conformaiei iniiale a catenelor polipeptidice desfcute. Temperatura critic a unei enzime este temperatura la care enzima pierde jumtate din activitatea sa, n timp de o or. Temperatura optim a enzimelor variaz cu durata de expunere a acestora la o anumit temperatur. Pentru o durat de timp mai scurt, temperatura optim are valori mai mari dect pentru o perioad de timp mai lung. Aceast comportare este important deoarece reprezint un mod de adaptare a enzimelor la condiiile de mediu.

Legarea enzimei de substrat mrete rezistena acesteia la temperaturi ridicate. Enzimele n stare uscat sau sub form cristalin rezist la nclzire pn la temperaturi de 100 0C (bobul de cereal uscat suport temperaturi mai ridicate dect acelai bob n stare umed). Temperaturile joase nu distrug activitatea enzimelor ci numai o micoreaz sau o opresc n mod reversibil. Soluiile enzimatice diluate (1%) prin congelare, urmat de topire, i mresc activitatea enzimatic, datorit eliberrii de noi centri activi din molecula enzimei, n urma proceselor de nghe-dezghe. n cazul soluiilor concentrate, activitatea enzimatic se micoreaz dup nghe, datorit formrii unor agregate moleculare care blocheaz centrii activi. Fiecrei enzime i se poate stabili o temperatur minim (ncepnd cu 0 0C) la care ncepe activitatea enzimatic, o temperatur optim, la care activitatea enzimatic este maxim, i o temperatur maxim la care activitatea enzimatic nceteaz.
d) Influena valorii pH asupra activitii enzimatice

Activitatea enzimelor este influenat n mod accentuat i de concentraia ionilor de hidrogen din mediul de reacie, deci de pH. Enzimele i manifest activitatea numai ntre anumite limite de pH (limite inferioare i limite superioare). Cele mai multe enzime manifest activitate maxim la valori caracteristice ale pH-ului (pH optim). Valoarea pH-ului optim depinde de natura i de originea enzimei, de mediul de reacie, de proprietile acido-bazice ale enzimei i de factorii biologici. Influena valorii pH asupra activitii enzimatice este redat n figura 6.4.
v mol/s
Interval de pH optim

pH

Fig. 6.4. Influena valorii pH asupra activitii enzimatice

n general, pH-ul optim coincide cu pH-ul lichidelor din organism, unde enzimele i exercit activitatea. Astfel, pH-ul optim al pepsinei din stomac este cuprins ntre 1,4-1,5; pH-ul optim al tripsinei din pancreas ntre 7,8-8,7; al amilazei din mal ntre 4,7-5,2 etc. Majoritatea enzimelor vegetale au un pH optim cuprins ntre 5,3-7,6. n afara limitelor de pH stabilite, enzimele devin inactive. Valori prea mari ale pH-ului (alcalinitate mrit) sau prea mici (aciditate mrit), afecteaz activitatea enzimatic prin denaturarea prii proteice sau perturbarea echilibrelor de disociere ale grupelor funcionale ale centrului activ al enzimei, ca i modificarea geometriei centrilor activi. Valoarea pH-ului optim este influenat de temperatur, de ionii din soluie, de natura i de concentraia substratului, de originea enzimei, de factorii biologici etc. Aciunea pH-ului asupra activitii enzimatice se explic prin influena ionilor de hidrogen asupra gradului de ionizare a enzimei i a substratului. Unele enzime au activitate maxim sub form nedisociat, altele sub form disociat.

e) Influena activatorilor enzimatici

Activatorii sunt compui chimici care mresc activitatea enzimelor (intervin n mecanismul aciunii enzimatice), fie prin stimularea direct a acestora, fie prin ndeprtarea unor inhibitori din sistem. Activatorii se clasific dup efectul produs n: Activatori care acioneaz prin deblocarea centrilor activi din molecula enzimelor. Unele enzime, denumite proenzime, sunt secretate sub form inactiv, cu gruprile active blocate (mascate) de polipeptide sau de alte substane. Proenzimele se transform n enzime active sub influena unor enzime kinaze, care ndeprteaz substanele inhibitoare. Activatori care acioneaz asupra enzimei prin nlturarea din sistem a unor inhibitori ai enzimei. Substanele, adugate unei soluii enzimatice pentru protejarea enzimei mpotriva factorilor care o inactiveaz sau o denatureaz, se numesc protectori. De exemplu, proteinele activeaz ureaza prin captarea ionilor inhibitori din sistem (de exemplu, ionul cianur (CN) nltur efectul inhibitor al Cu2+ asupra ureeazei, prin formarea cianurii complexe de cupru, stabil). Activatori care sunt componente ale enzimelor sau care stimuleaz direct activitatea acestora. Sunt activatori specifici pentru anumite enzime o serie de cationi metalici i anioni, astfel, fosforilaza este activat de Mg2+, fosfoglucomutaza de Mg2+, i de Mn2+, fosfataza de Ca2+ i de Mn2+, amilaza salivar este activ numai n prezena ionilor de clor, proteazele vegetale sunt activate de glutationul redus etc.

f) Inhibitori ai enzimelor
Inhibitorii sunt substane care acionnd asupra enzimelor, influeneaz negativ desfurarea activitii enzimatice pn la anularea ei, reversibil sau ireversibil. Studiul inhibitorilor furnizeaz informaii utile asupra specificitii de substrat, tipului de grupe funcionale i mecanismului de aciune enzimatic. Inhibitorii ireversibili modific profund structura moleculelor enzimatice, provocnd denaturarea proteinei i deci anularea activitii catalitice a enzimei. Complexul enzim-inhibitor format, este nedisociabil, iar prin ndeprtarea inhibitorului, enzima nu-i mai recapt funcia catalitic, partea proteic fiind distrus. Astfel de inhibitori ireversibili sunt: compuii cu Pb2+, Hg2+, CN, cu CO, compuii cu arsen etc. Inhibitorii reversibili acioneaz asupra cineticii reaciei enzimatice, fr a produce modificri la nivelul structurii enzimei. Inhibiia produs de aceti inhibitori poate fi (n funcie de natura i de specificul ei) de tip: competitiv, necompetitiv i alosteric. Inhibiia competitiv rezult dintr-o competiie (pentru ocuparea situsului activ al enzimei), ntre substrat i inhibitorul care are o structur molecular asemntoare cu a substratului. Deoarece o parte din enzim se combin cu inhibitorul, se micoreaz cantitatea de enzim care se combin cu substratul i scade astfel viteza de reacie. Influena inhibitorului se poate micora prin mrirea concentraiei substratului. Exemple de inhibiie competitiv: acidul malonic HOOC-CH2-COOH, care prezint analogie structural cu acidul succinic HOOC-CH2-CH2-COOH, poate fi inhibitor competitiv n reacia de dehidrogenare a acestuia cu succinatdehidrogenaza (reacie din ciclul Krebs):

HOOC CH2 CH2 COOH + FAD

acid succinic

HOOC CH CH COOH + FADH2

acid fumaric

n afar de acidul malonic, i ali acizi dibazici (acidul oxalic, acidul oxalilacetic, acidul pirofosforic) pot fi inhibitori competitivi ai succinatdehidrogenazei. Inhibiia competitiv se produce i n cazul vitaminelor de ctre antivitamine, hormoni-antihormoni, enzime-antienzime. Inhibiia necompetitiv se caracterizeaz prin faptul c inhibitorul nu are o structur asemntoare cu substratul. n inhibiia necompetitiv, inhibitorul reacioneaz cu enzima, cu complexul enzim-substrat i foarte rar cu substratul, formnd complexe inactive enzim-inhibitor (EI), sau enzim-substrat-inhibitor (ESI). Prin formarea acestor complexe inactive (EI, ESI), care nu conduc la formare de produs de reacie (P), viteza reaciei enzimatice este micorat, deoarece chiar dac se mrete concentraia substratului (S), inhibitorul nu poate fi nlturat din complexul EI.
S E I S EI ESI ES P+E

Inhibiia necompetitiv se poate realiza n mai multe moduri: Inhibiia prin blocarea sau transformarea grupelor funcionale tiolice (-SH), centrii activi ai enzimelor, prin reacii cu metale grele (Hg, Pb, Ag, As etc.) cu formare de mercaptide, prin reacii de oxidare sau reacii de alchilare. Inhibiia prin blocarea metalului din componena enzimei sau a activatorilor din mediul de reacie. De exemplu, fluorurile i oxidanii extrag ionii de Mg2+ i de Ca2+ din molecula enzimei, iar cianurile, H2S i CO scot fierul din enzimele feroporfirinice. Inhibiia prin combinarea inhibitorului cu substratul se datoreaz scderii concentraiei substratului. Tipul de inhibiie se poate determina dac se menine constant concentraia inhibitorului i se modific concentraia substratului. Dac se constat creterea vitezei de reacie cu creterea concentraiei substratului, are loc o inhibiie competitiv, n caz contrar inhibiia este necompetitiv. Inhibarea enzimelor se produce i prin agitare ndelungat, sub aciunea diferitelor radiaii ionizante (UV, X etc.), la presiuni ridicate i sub influena substanelor care determin precipitarea proteinelor (acid tricloracetic, tanin etc.).

NOMENCLATURA I CLASIFICAREA ENZIMELOR

Denumirea enzimelor s-a acordat iniial, innd cont de numele substratului asupra cruia acioneaz, sau de numele reaciei catalizat, la care se adaug sufixul aza. De exemplu, enzima care biocatalizeaz descompunerea amidonului se numete amilaza cea care acioneaz asupra zaharozei se numete zaharaza etc., enzimele care biocatalizeaz reacii de hidroliz se numesc hidrolaze, cele care catalizeaz reacii de oxido-reducere se numesc oxido-reductaze etc. Odat cu creterea numrului de enzime izolate i caracterizate, pentru prevenirea confuziilor n stabilirea numelui enzimelor, innd cont c ele pot manifesta specificitate relativ (pot aciona asupra mai multor substraturi) i c asupra unui substrat pot aciona enzime

diferite, a fost adoptat noua nomenclatur i sistemul de clasificare (Congresul Internaional de Biochimie, Moscova, 1961). Sistemul de clasificare i numerotare a enzimelor, precum i noua nomenclatur sistematic se bazeaz pe reacia chimic catalizat de enzim, unicul criteriu care permite deosebirea enzimelor ntre ele. n acest sistem enzimele sunt mprite n clase, dup tipul reaciei catalizate, iar acestea sunt mprite n subclase care definesc mai exact caracterul reaciei enzimatice respective. Numele fiecrei enzime se definete printr-un termen alctuit din trei pri: denumirea substratului asupra cruia acioneaz enzima; denumirea tipului de reacie catalizat de enzim; sufixul aza. De exemplu, enzima care catalizeaz dehidrogenarea acidului lactic se numete lactatdehidrogenaza, cea care catalizeaz decarboxilarea acidului piruvic se numete piruvatdecarboxilaza. Denumirea transferazelor se formeaz din prefixul trans, numele substratului i sufixul aza (transaminaze, transmetilaze, transfosfataze etc.). Noua clasificare prin sistemul zecimal prezint avantajul c reaciile chimice catalizate de enzime pot fi grupate ntr-un numr mic de tipuri de reacii. Conform acestui sistem zecimal de clasificare, fiecare enzim este caracterizat printr-un cod format din patru cifre. Prima cifr precizeaz clasa din care face parte enzima. Enzimele cunoscute n prezent sunt grupate n 6 clase principale: 1. Oxidoreductaze 2. Transferaze 3. Hidrolaze 4. Liaze 5. Izomeraze 6. Ligaze (Sintetaze).
A doua cifr a codului definete subclasa, furniznd informaii asupra tipului de grup funcional, respectiv asupra tipului de legtur chimic implicat n reacie. De exemplu, din clasa hidrolazelor fac parte subclasele esteraze (hidrolizeaz legtura esteric), glicozidaze (hidrolizeaz legtura glicozidic), amidaze (hidrolizeaz legtura amidic) etc. n cazul transferazelor, a doua cifr indic natura grupelor funcionale transferate; la ligaze i liaze, tipul de legturi chimice care se formeaz i se degradeaz; la oxidoreductaze se specific natura chimic a grupei funcionale supus oxidrii (alcoolic, aldehidic, cetonic etc.) iar la izomeraze se indic tipul reaciilor de izomerizare. Cifra a treia precizeaz subdiviziunile din cadrul unei subclase (de exemplu, natura unei grupe funcionale transferate, natura acceptorului etc.). Astfel, n subclasa esterazelor exist mai multe grupe de enzime care acioneaz asupra anumitor substraturi. De exemplu: fosfolipazele acioneaz numai asupra fosfolipidelor, clorofilazele numai asupra cloroglobinelor etc. n cazul oxidoreductazelor, cifra a treia indic natura acceptorului care ia parte la reacie (NADPH+, citocromi, oxigen molecular etc.). Cifra a patra din cod reprezint numrul de ordine al enzimei n subdiviziunea din interiorul subclasei. De exemplu: enzima ATP: D-fructozo-6-fosfotransferaza, are cifrul 2.7.1.4. dup care se identific drept o transferaz (2, clasa 2), care transfer reziduu fosfat (cifra 7, subclasa 7), la gruparea alcoolic (cifra1, subdiviziunea 1 a subclasei 7) i are numrul de ordine 4. Pentru unele dintre enzime se mai pstreaz denumirile vechi, conferite cu mult nainte de stabilirea regulilor referitoare la noua nomenclatur (pepsina, tripsina, papaina, emulsina, chimozina etc.). Este prezentat n continuare, la nivelul clasificrii n clase i subclase:

Cheia codului de numerotare i clasificare a enzimelor

1. OXIDOREDUCTAZE 1.1. Acioneaz asupra gruprilor CH-OH ale donorilor 1.2. Acioneaz asupra gruprilor aldehidice sau cetonice ale donorilor 1.3. Acioneaz asupra gruprilor CH-CH ale donorilor 1.4. Acioneaz asupra gruprilor CH-NH2 ale donorilor 1.5. Acioneaz asupra gruprii C-NH a donorilor 1.6. Acioneaz asupra NAD+ i NADP+ n form redus, ca donori 1.7. Acioneaz asupra altor compui cu azot, ca donori 1.8. Acioneaz asupra gruprilor sulfurice ale donorilor 1.9. Acioneaz asupra gruprilor hemului ca donor 1.10. Acioneaz asupra difenolilor i substanelor asemntoare lor 1.11. Acioneaz asupra H2O2 ca acceptor 1.12. Acioneaz asupra H2 ca donor 1.13. Acioneaz asupra unui singur donor cu ncorporare de oxigen (oxigenaze) 1.14. Acioneaz asupra unei perechi de donori cu ncorporarea oxigenului ntr-un singur donor (hidrolaze) 2. TRANSFERAZE 2.1. Transfer grupri care conin un singur atom de carbon 2.2. Transfer resturi aldehidice sau cetonice 2.3. Aciltransferaze 2.4. Glicoziltransferaze 2.5. Transfer grupri alchil sau nrudite 2.6. Transfer grupri cu azot 2.7. Transfer grupri care conin fosfor 2.8. Transfer grupri care conin sulf 3. HIDROLAZE 3.1. Acioneaz asupra legturilor esterice 3.2. Acioneaz asupra compuilor glicozilici 3.3. Acioneaz asupra legturilor eterice (tiolice) 3.4. Acioneaz asupra legturilorilor peptidice (peptidhidrolaze) 3.5. Acioneaz asupra legturilor C-N, altele dect cele din legturile peptidice 3.6. Acioneaz asupra legturii acidoanhidridice din acizi 3.7. Acioneaz asupra legturii C-C 3.8. Acioneaz asupra legturii halogenilor 3.9. Acioneaz asupra legturii P-N 4. LIAZE 4.1. C-C liaze 4.2. C-O liaze 4.3. C-N liaze 4.4. C-S liaze 4.5. C-halogen liaze 5. IZOMERAZE 5.1. Racemaze i epimeraze 5.2. Cis-trans izomeraze

5.3. Oxidoreductaze intramoleculare 5.4. Transferaze intramoleculare 5.5. Liaze intramoleculare 6. LIGAZE (SINTETAZE) 6.1. Particip la formarea legturilor C-O 6.2. Particip la formarea legturilor C-S 6.3. Particip la formarea legturilor C-N 6.4. Particip la formarea legturilor C-C

REPREZENTANI AI PRINCIPALELOR CLASE DE ENZIME Oxidoreductaze

Oxidoreductazele sunt enzime care biocatalizeaz reaciile de oxidoreducere din organismele vegetale i animale. Ele au un rol important deoarece, prin reaciile de oxidoreducere, organismele i procur cea mai mare parte din energia necesar activitilor fiziologice. Reaciile de oxidoreducere se realizeaz prin transfer de electroni i prin transfer de atomi de hidrogen. Dup mecanismul de aciune, oxidoreductazele se clasific n trei subgrupe: dehidrogenaze; transelectronaze; oxidaze. Dehidrogenaze

Oxidrile biologice decurg preponderent n absena oxigenului, fiind de fapt dehidrogenri, care au loc prin transfer de atomi de hidrogen de pe o molecul (care se oxideaz) pe alt molecul (care se reduce). Enzimele care catalizeaz transferul atomilor de hidrogen de la un substrat la altul sunt dehidrogenazele. Coenzimele lor particip continuu la oxidri i reduceri, fr s se consume n timpul reaciei. Atomii de hidrogen nu rmn legai n mod permanent pe molecula coenzimei, ci sunt transferai printr-o nou reacie redox pe o alt molecul. Dup natura acceptorului de atomi hidrogen, dehidrogenazele pot fi: dehidrogenaze anaerobe; dehidrogenaze aerobe.
a) Dehidrogenaze anaerobe Dehidrogenazele anaerobe sunt oxidoreductaze care transport hidrogenul n interiorul celulelor, de la un substrat donor la altul acceptor (cu excepia O2 atmosferic). Coenzimele care realizeaz aceast transformare sunt codehidrazele de natura piridinnucleotidic: codehidraza I (Co I): NAD nicotinamidadenindinucleotida; codehidraza II (Co II): NADP nicotinamidadenindinucleotida fosfat.

Structura chimic a NAD

Codehidrazele piridinnucleotidice au o structur dinucleotidic. n compoziia lor intr nicotinamida (vitamina PP), dou molecule de riboz, acid pirofosforic i adenin. NADP-ul are n plus fa de NAD un rest de acid fosforic la atomul C2 al ribozei legate de adenin.

O C NH2 N CH2 O P P O CH2 O

NAD+

NH2 N N O N N
+2H -2H

O C NH2 N CH2 O P P O CH2 O

NADH

NH2 N N O N N

n condiii anaerobe mecanismul transferului de hidrogen este urmtorul: S

substrat donor forma redus

H2

NAD+
coenzima forma oxidat

NADH
coenzima forma redus

H+

substrat donor forma oxidat

NADH +
coenzima forma redus

H+

S'

NAD+ +
coenzima forma oxidat

S'
substrat acceptor forma redus

H2

substrat acceptor forma oxidat

Ambele coenzime (NAD i NADP) se pot prezenta n dou forme: o form redus i o form oxidat. Mecanismul reaciei de oxidoreducere implic transformarea reversibil a structurii bazei azotate nicotinamidice (NAD, respectiv NADP) din forma oxidat n forma redus, prin transferul reversibil al atomilor de hidrogen, astfel:
H2 C
NAD+
+2 H+ + 2 e- 2H - 2 e-

H2 C
NADH + H+

N R

N R

N + H+ R

n transportul hidrogenului, rolul principal revine nucleului piridinic. Codehidraza oxidat preia de pe substrat doi atomi de hidrogen, pe care i fixeaz unul la C4 i unul la atomul de N1 (structur de ion cuaternar de amoniu). Se formeaz un produs instabil, care prin eliminarea unui proton de la N1 se transform n forma redus. Deoarece formele oxidate au la atomul de azot sarcina pozitiv, este corect s se scrie formula acestor coenzime NAD+ i NADP+, iar pentru formele reduse NADH+H+ (nu NADH2 i NADPH2). Codehidrazele I i II pot suferi reacii de interconversiune n prezena ATP-ului i sub aciunea fosfatazei: NAD + ATP
+

NADP + ADP

Exemple de enzime dehidrogenaze anaerobe care au n structur NAD+ sau NADP+: alcooldehidrogenaza (implicat n fermentaia alcoolic), aldehiddehidrogenaza, izocitricdehidrogenaza (implicat n ciclul Krebs) etc.

b) Dehidrogenaze aerobe Dehidrogenazele aerobe sunt enzime oxidoreductaze care transport hidrogenul de la un substrat donor la oxigenul liber (acceptor), formnd apa oxigenat, care va fi descompus ulterior de peroxidaze sau catalaze. Coenzimele componente care realizeaz aciunea biocatalitic sunt de natur flavinnucleotidic: FMN flavinmononucleotida FAD flavinadenindinucleotida.
Ambele coenzime au ca i component principal vitamina B2 cu structur izoaloxazinic. Componenta proteic (apoenzima) este de obicei o albumin. Legtura dintre apoenzim i coenzim se desface uor n mediu acid i n prezena sulfatului de amoniu. Flavinmononucleotida (FMN) este format dintr-un nucleu izoaloxazinic, din ribitol i acid fosforic.
O H3C H3C N N CH2 HC OH HC OH HC OH O H2C O P OH OH N NH O

Legtura dintre FMN i apoenzim se poate realiza la nivelul nucleului izoloxazinic i la nivelul acidului fosforic. Dintre flavinenzimele mononucleotidice se pot meniona: fermentul galben respirator, L-aminoacidoxidaza etc.

Flavinadenindinucleotida (FAD) este format dintr-un nucleu izoloxazinic, ribitol, acid pirofosforic i adenin. FAD are o structur de dinucleotid, fiind format prin unirea a dou mononucleotide: FMA i AMP.
O H3C H3C N N CH2 HC OH HC OH HC OH O H2C O OH O N NH O N N CH HC OH HC OH HC P O P O CH2 OH O
+ 2H - 2H

NH2 N N H3 C H3C

H N N CH2

O NH N H O N N CH

NH2 N N

HC OH HC OH HC OH O H2C O OH O

HC OH HC OH HC P O P O CH2 OH O

n condiii aerobe mecanismul transferului de hidrogen este urmtorul:

S
substrat donor forma redus

H2

FAD
coenzima forma oxidat

FADH2
coenzima forma redus

substrat donor forma oxidat

FADH2
coenzima forma redus

O2
substrat acceptor

FAD + H2O2
coenzima forma oxidat catalaza

H2O + 1/2 O2

Mecanismul transferului de atomi de hidrogen n condiii aerobe este posibil datorit transformrii reversibile a structurii nucleului izoaloxazinic (vitamina B2) din structura FAD. Nucleul izoaloxazinic se poate prezenta sub o form oxidat, cu duble legturi conjugate i o form redus, fr legturi duble la atomii de azot N1 i N10. Forma oxidat a flavinenzimelor este colorat, iar forma redus este incolor.
O H3C N NH N R N O +2 H -2 H H3C N R N H H3C H N NH O O

H3C

Dintre flavinenzimele cu FAD se pot meniona: xantinoxidaza, D-aminoacidoxidaza, succindehidrogenaza, glucozoxidaza, aldehidoxidaza etc. Glucozoxidaza acioneaz asupra substratului glucoz, pe care o oxideaz la acid gluconic: RCH=O + FAD
RCOOH + FADH + H+

FADH + H+ + O2

FAD + H2O + O2

Aldehidoxidaza acioneaz asupra acetaldehidei, pe care o oxideaz la acid acetic:

CH3CH=O + FAD + H2O

CH3COOH + FADH + H+
FAD + H2O + O2

FADH + H+ + O2
Transelectronaze

Transelectronazele sunt enzime care catalizeaz reacii de oxido-reducere care decurg prin transfer de electroni de pe un donor pe un acceptor. Dac donorul este: Oxigenul, enzimele sunt transelectronaze aerobe; Nu este oxigenul, enzimele sunt transelectronaze anaerobe. Transelectronazele sunt reprezentate prin cromoproteidele citocromi, constituii dintr-o parte proteic (apoenzima cu caracter bazic) i o coenzim cu structur feriporfirinic (citocromul propriu-zis). Transportul de electroni se realizeaz prin modificarea cifrei de oxidare a fierului:
Fe
2+

-e +e

Fe

3+

Fierul porfirinic se leag prin dou legturi coordinative de atomul de azot imidazolic al aminoacidului histidina din catena polipeptidic a enzimei. Citocromii sunt prezeni numai n celulele aerobe i particip la realizarea procesului de respiraie. Cantitatea lor n celule depinde de capacitatea respiratorie a celulei. Se cunosc mai multe tipuri de citocromi care se deosebesc ntre ei prin substituenii nucleelor pirolice, potenialul redox etc. Eliberarea i transportul de electroni se realizeaz prin trecerea citocromului din starea feroas (Cit. Fe2+) n starea feric (Cit. Fe3+), n prezena O2 i a citocromoxidazei. Citocromii dein, ca transportori de electroni, un rol important n catena de respiraie celular (lanul respirator). Ei particip, ca intermediari, la procesul de formare a apei, produs final al metabolismului glucidic. Energia eliberat n procesele de oxidare (H - e = H+) este stocat n moleculele de ATP care se sintetizeaz. Transferul de electroni de la un tip de citocrom la altul se face n ordinea potenialelor redox: citocrom b citocrom c1 citocrom c citocrom a citocrom a3 n toate organismele vegetale i animale s-au identificat citocromii a1, a3, b, b1, b5, c1 etc. Citocromii b3, b6, b7, f, s-au identificat numai n plante, iar citocromii c2, c3, b4 numai n microorganisme.
Oxidaze

Oxidazele sunt enzime oxidoreductoare care catalizeaz reaciile dintre diferite substraturi i oxigenul molecular sau cel peroxidic. Oxidazele se clasific n: oxigenaze;

 hidroxilaze; oxidaze transportoare de electroni. a) Oxigenazele determin combinarea direct a substratului cu oxigenul molecular. Ele catalizeaz reacii de tipul:

AH + O2

AOOH

sau

A + O2

AO2

Exemple de enzime oxigenaze: lipoxidaza, care catalizeaz oxidarea acizilor nesaturai din esuturilor vegetale, indoloxidaza, triptofanoxidaza etc.
b) Hidroxilazele (monooxigenaze) sunt enzime care catalizeaz oxidarea substratului cu formarea concomitent a apei. Din oxigenul molecular, un atom va servi la oxidarea substratului iar cellalt la formarea apei:

AH2 + O2 + S

H2O + SO + A

sau

AH2 + 1/2 O2

A + H2O

Reaciile au loc n prezena unui donor de hidrogen (AH2) care poate fi: NADH + H+, NADPH + H+, FADH2 etc. Cele mai importante dintre enzimele hidroxilaze sunt: fenilalaninhidroxilaza, lizinhidroxilaza, steroidhidroxilaza etc.

c) Oxidazele transportoare de electroni conin n molecul ioni metalici (Cu, Fe) i catalizeaz reacia de oxidare a substratului cu ajutorul oxigenului atomic foarte reactiv.
Enzimele care conin atomi de cupru se numesc cuproxidaze, cele care conin atomi de fier se numesc feroxidaze. Dintre cuproxidaze fac parte fenolazele (fenoloxidaze, rspndite n regnul vegetal), enzime care catalizeaz oxidarea fenolilor la chinone, ascorbicoxidaza, care catalizeaz oxidarea acidului ascorbic la acid dehidroascorbic, tirozinaza etc. Dintre feroxidaze, cele mai importante sunt peroxidazele i catalazele. Peroxidazele descompun apa oxigenat numai n prezena unui acceptor de oxigen sau a unui donor de hidrogen: H2O2 + AH2 H2O2 + A 2 H2O + A AO + H2O

Peroxidazele catalizeaz i reacii de polimerizare, cum ar fi, formarea melaninei i a ligninei. Ele sunt rspndite preponderent n plante, n organite denumite peroxizomi. Catalazele descompun apa oxigenat cu degajare de oxigen:

H2O2

H2O + 1/2 O2

Ca i peroxidazele, catalazele sunt rspndite n celulele vegetale unde acioneaz prin descompunerea apei oxigenate, substan toxic pentru organismele vii, care se formeaz sub aciunea unor flavinenzime sau a radiaiilor. Ca donatori de atomi de hidrogen pot funciona: metanolul, etanolul, fenolii, aminoacizii etc.

Transferaze
Sunt enzime care biocatalizeaz reaciile de transfer de atomi sau grupe de atomi de la o molecul donor la una acceptor. Coenzimele care realizeaz aciunea catalitic a transferazelor sunt foarte diferite din punct de vedere chimic, iar energia de legtur a gruprii transferate este pstrat. n funcie de natura gruprii transferate deosebim urmtoarele tipuri de enzime transferaze: metiltransferaze (transmetilaze), enzime care transfer grupe metil (-CH3); transaminaze, care transfer grupa amino (-NH2); transfosfataze, care transfer resturi de acid fosforic (-H2PO3); transaldolaze, transfer grupe carbonil aldehidice (RCH=O); transcetolaze, transfer grupe carbonil cetonice (R2C=O); transacilaze, transfer grupe acil (R-C=O) etc. Dintre substanele donatoare de grupe metil se pot meniona: colina, diferite betaine, nicotina etc. Aceste substane donatoare au, n general, grupa metil legat de un atom de azot sau de sulf. Dintre acceptorii de grupri metilice fac parte: colamina, cisteina, nicotinamida, glicina. Dintre coenzimele transaminazelor importan deosebit au piridoxalfosfatul i piridoxaminfosfatul.
CH2OH HO H3C N CH2 O PO3H2 HO H3C N CHO CH2 O PO3H2 HO
H3C N
piridoxaminfosfat

CH2NH2 CH2 O PO3H2

piridoxolfosfat

piridoxalfosfat

Transferul diferiilor radicali acil (provenii din acizi organici) este catalizat de coenzima A (HS~CoA), care particip la numeroase procese biochimice. Coenzima A este un precursor important n biosinteza colesterolului, a acizilor grai, de care se leag printr-o legtur macroergic (~). Partea activ a coenzimei A este gruparea tiolic (-SH) din cisteamin, de aceea coenzima se noteaz prescurtat HSCoA. Formarea acil-CoA din acizii organici, se realizeaz cu consum de energie i decurge n prezena ATP-ului i a enzimelor tiokinaze: RCOOH + HS~CoA + ATP
RCO~SCoA + AMP + P P

Coenzima A este format din adenin, riboz fosforilat, acid pirofosforic, acid pantotenic i cisteamin. Structura chimic a coenzimei A este:

NH2 N N N N HC O HC OH HC O HC CH2 O P O P OH
adenozin-3,5-difosfat cisteamina COENZIMA A (HSCoA)

OH O OH O O P OH O CH2 CH3 C CH3

acid pantotenic

SH CH2 OH CH O C NH CH2 CH2 O C CH2 NH

Legtura dintre coenzima A i radicalul acil este o legtur macroergic, care elibereaz la hidroliz 8 Kcal/mol. Coenzima A i acetilcoenzima A (CH3-CO~SCoA) apar frecvent, n organismele vii, la ncruciarea unor ci biochimice, contribuind la stabilirea unor corelaii metabolice ntre glucide i lipide. Este un precursor important n biosinteza acizilor grai, a fitolului (component al clorofilei), n biodegradarea aerob a glucidelor etc.
Transfosfatazele (fosfotransferaze) sunt enzime care catalizeaz transferul de radicali fosfat -H2PO3 de pe un donor pe un acceptor, fr formare de acid fosforic liber (H3PO4). Transfosfatazele poart denumiri caracteristice, n funcie de natura donorului i a acceptorului: - fosfomutaze (transfosfataze), dac transferul grupei fosfat se produce n aceeai molecul, de la o poziie la alta:
6 6

CH2OH H
4 5

CH2O O O
1

P O H
2

P
fosfomutaza
4

OH
1

OH
3

H
2

OH
3

OH

OH

H OH
glucozo-6-fosfat

H
glucozo-1-fosfat

OH

- fosfokinaza catalizeaz transferul restului de acid fosforic sau pirofosforic de pe ATP pe un acceptor A, conform reaciei: ATP + A ATP + A A- P + ADP AMP + A- P - P

H2C OH O
5

CH2O OH
3 2

P
fosfokinaza + ATP

H2C O
5

P O

CH2O OH
3 2

H
4

H
4

OH

OH

OH
fructozo-1-fosfat

OH

H
fructozo-1,6-difosfat

Transglicozidazele catalizeaz biosinteza i biodegradarea oligoglucidelor, poliglucidelor i a unor glicozide, reacii care decurg cu transfer de radicali glicozil. - Nucleozidfosforilazele catalizeaz reaciile reversibile de biosintez, respectiv biodegradare a nucleozidelor prin transferul bazelor purinice pe riboz sau deoxiriboz. - Nucleotidfosforilazele catalizeaz reaciile de biosintez i biodegradare a nucleotidelor. - Polizaharidfosforilazele catalizeaz reaciile de transfer de resturi glicozil de pe un ester fosforic pe o poliglucid acceptoare, cu formarea unei poliglucide superioare.

Hidrolaze
Sunt enzime care catalizeaz scindarea legturilor chimice din compuii biochimici cu implicarea ionilor apei. Hidrolazele au un rol important n procesul de germinare a seminelor i n procesul de digestie. Ele determin hidroliza unor substane compuse care conin n molecul legturi covalente: C-O, C-N, C-S, C-C, P-N etc. n general, reaciile de hidroliz sunt reversibile, nsoite de variaii de energie, mai ales n cazul hidrolizei tioesterilor cu coenzima A. Unele dintre cele mai importante hidrolaze sunt: C-O hidrolazele (esteraze i glicozidaze); C-N hidrolazele (amidaze i peptidaze).
a) Esterazele sunt enzime care scindeaz legturi esterice i anume: fosfoesteraze, care catalizeaz scindarea hidrolitic a monoesterilor i diesterilor acidului fosforic cu formarea acidului ortofosforic i a unui alcool:
O R CH2 O P OH OH + HOH O R CH2 OH + HO P OH OH

Fosfodiesterazele scindeaz hidrolitic legtura fosfodiesteric dintre nucleotide. Din clasa esterazelor fac parte i lipazele, lecitinazele, colesterolesterazele, clorofilazele, pectinazele, sulfatazele etc. carboxilesterazele scindeaz legturile din esterii acizilor carboxilici:
O R C O + R
'

O HOH R C OH

R'

OH

ester carboxilic

acid carboxilic

Din aceast subclas a hidrolazelor fac parte: - lipazele (glicerolesterhidrolazele), care catalizeaz hidroliza gliceridelor cu formare de glicerol i acizi grai superiori; - fosfolipazele, care elibereaz acizii grai superiori din - i -glicerofosfatide; - tioesterazele, enzime care catalizeaz scindarea moleculelor tioesterilor. R CO S R' + HOH R COOH + R' SH

De exemplu, acil-SCo A hidrolazele scindeaz legtura tioesteric din acil-coenzima A:

R CO~SCoA + HOH

R COOH + HS CoA

b) Glicozidazele (carbohidrazele) sunt hidrolaze care catalizeaz scindarea legturilor glicozidice din oligo- i poliglucide, conform reaciei generale:

G1 O G2
diglucid

+ HOH

G1 OH
monoglucid 1

G2 OG

monoglucid 2

Glicozidazele prezint specificitate fa de: tipul de glucid (glicozidaze, galactozidaze etc.), natura legturii (-sau -glicozidic), tipul de stereoizomer (D sau L). Exemple de glicozidaze:
Substrat maltoza celobioza zaharoza amidon Enzima maltaza (oligoglucozidaza) celobiaza (oligoglucozidaza) zaharaza (oligofructozidaza) amilaza (poliglicozidaza) Legtura scindat glicozidic C1-C4 glicozidic C1-C4 fructozidic C1-C2 glicozidic C1-C4 i C1-C6 Produs de reacie glucoza glucoza glucoza + fructoz dextrine; maltoz; glucoz

c) Amidazele sunt hidrolaze care scindeaz legtura C-N din amide. De exemplu, ureeaza catalizeaz descompunerea ureei n CO2 i amoniac:
O C NH2 NH2 + HOH 2NH3 + CO2

Amidazele catalizeaz i transformarea amidelor n amoniac i acizii corespunztori; de exemplu, amidaza glutaminaza catalizeaz scindarea glutaminei n acid glutamic i amoniac.
d) Peptidazele sunt hidrolaze care acioneaz asupra legturilor peptidice -CO-NH- din interiorul moleculelor peptidice sau proteice (endopeptidaze), sau de la capetele catenelor peptidice (exopeptidaze), elibernd aminoacizii componeni. Endopeptidaze mai importante sunt: pepsina, tripsina, catepsina, chimozina etc. Exopeptidazele (enzimele care elibereaz aminoacizii terminali din catena peptidelor sau proteinelor) se clasific n: aminopeptidaze, sunt exopeptidaze care catalizeaz scindarea hidrolitic a legturii peptidice de la extremitatea catenei care posed un aminoacid terminal cu grupa -NH2 liber; carboxipeptidaze, sunt exopeptidaze care catalizeaz scindarea hidrolitic a legturii

peptidice de la extremitatea catenei care posed un aminoacid terminal cu grupa -COOH liber.

Liaze
Liazele sunt enzime care catalizeaz reaciile de scindare de legturi chimice i ndeprtarea unor grupe din substrat, printr-un mecanism care decurge fr implicarea proceselor redox sau hidrolitice. Liazele determin scindarea legturilor C-C, C-N, C-O, C-S, C-X etc. Dintre liazele mai importante fac parte: decarboxilazele (C-C liaze); dehidratazele (C-O liaze); dezaminazele (C-N liaze); desulfhidrazele (C-S liaze). a) Decarboxilazele sunt liaze care catalizeaz reaciile de decarboxilare a substraturilor cetoacizi i aminoacizi, conform reaciilor:
O R C COOH
cetoacid amin
decarboxilaza - CO2

O R C H
aldehid

NH2 R C COOH H
aminoacid
decarboxilaza - CO2

NH2 R CH2

Enzima liaza implicat n decarboxilarea aminoacizilor are drept grupare prostetic piridoxalfosfatul (derivat al vitaminei B6), iar liaza care catalizeaz decarboxilarea cetoacizilor are drept grupare prostetic tiaminpirofosfatul (derivat al vitaminei B1).
b) Aldehidliazele catalizeaz scindarea legturii C-C cu formare de produi carbonilici. De exemplu, o enzim implicat n metabolismul glucidic este aldolaza (fructozo-1,6-difosfatliaza), care scindeaz fructozo-1,6-difosfatul n dou trioze: aldehida fosfogliceric i hidroxoacetonfosfatul. c) Dehidratazele catalizeaz scindarea legturilor C-O cu formare de ap. Exemple de dehidrataze sunt: aconitaza, fumaratdehidrataza care catalizeaz transformarea acidului malic n acid fumaric (reacie din ciclul Krebs de biodegradare aerob a glucidelor):
HO CH H2C
acid malic

COOH COOH
- H2O

HOOC

CH HC COOH
acid fumaric

Dehidrataza enolaza catalizeaz transformarea acidului fosfoenolpiruvic (vezi biodegradarea anaerob a glucidelor).

2-fosfogliceric

acid

d) Dezaminazele sunt liaze care catalizeaz reaciile de dezaminare intramolecular cu formarea acizilor nesaturai. De exemplu, aspartaza, catalizeaz dezaminarea acidului aspartic cu formare de acid fumaric:

HOOC CH CH2 COOH NH2

acid aspartic

aspartaza - NH3

HOOC CH CH COOH
acid fumaric

Izomeraze
Izomerazele sunt enzime care catalizeaz reaciile de izomerizare ale diferitelor substraturi. Dup natura reaciei de izomerizare catalizat se pot clasifica astfel: racemaze; epimeraze; izomeraze cis-trans; oxidoreductaze intramoleculare. a) Racemazele acioneaz asupra substraturilor cu un singur centru de simetrie, cataliznd interconversia formelor D i L ale aminoacizilor, hidroxiaminoacizilor, monoglucidelor etc. De exemplu, alaninracemaza izomerizeaz izomerul steric L-alanina la D-alanina:

CH3 H2N C H H

CH3 C NH2

COOH
L-alanina

COOH
D-alanina

b) Epimerazele acioneaz asupra substraturilor cu mai multe centre de simetrie, cataliznd reaciile de epimerizare ale monoglucidelor. Importan biologic au racemazele i epimerazele care intervin n metabolismul glucidic. De exemplu, epimerizarea UDP-glucozei n UDP-galactoz sub aciunea UDPglucozoepimerazei:
6 6

CH2OH H
4 5

CH2OH O O UDP
1

epimeraza
4

OH

O OH H
2

O UDP
1

OH OH
3

H
2

OH

OH

UDP-glucoza

UDP-galactoza

c) Izomerazele cis-trans catalizeaz interconversia celor doi stereoizomeri. Izomerazele cis-trans sunt larg rspndite n natur, la procesul de interconversie participnd i glutationul. De exemplu, maleatcistransizomeraza catalizeaz transformarea acidului maleic n acid fumaric:

HC HC

COOH COOH

HOOC

CH HC COOH

acid maleic izomer cis

acid fumaric izomer trans

d) Oxidoreductazele intramoleculare catalizeaz reaciile de interconversiune a aldozelor i cetozelor, care implic reducerea concomitent a grupei aldehidice la alcool primar i oxidarea grupei alcool secundar la ceton. De exemplu, sub aciunea fosfotriozizomerazei, aldehida 3fosfogliceric se izomerizeaz la hidroxoacetonfosfat:
H H C C H2C O OH OP H H2C C H2C OH O OP

aldehida 3-fosfogliceric

hidroxoacetonfosfat

e) Transferazele moleculare catalizeaz reaciile de transfer intramolecular a unor grupe acil, fosfat, amino etc. De exemplu, transferul grupei fosfat de la un atom de carbon al unei glucide la alt atom de carbon din molecula glucidei respective.

Ligaze
Ligazele sunt enzime care catalizeaz formarea de legturi chimice noi ntre dou substraturi. Deoarece formarea noilor legturi se realizeaz cu consum de energie, aceste reacii sunt cuplate cu hidroliza unor legturi din compuii macroergici (n special din nucleotidele trifosforilate, ATP, UTP, CTP, GTP):
ligaza

S1 + S2 + ATP
substrat

S1

S2 + AMP + P - P

n funcie de tipul de legturi chimice noi formate liazele pot fi:

carboxilaze (C-C ligaze); aminoacilsintetaze (C-O ligaze); aminoacidamidsintetaze (C-N ligaze); acilcoenzima A sintetaze (C-S ligaze). a) Carboxilazele sunt enzime care catalizeaz fixarea CO2 pe un substrat. De exemplu: piruvatcarboxilaza catalizeaz transformarea acidului piruvic n acid oxalilacetic (vezi biodegradarea aerob a glucidelor):
H CH2 CO COOH + ATP + CO2 (activat) HOOC CH2 CO COOH + ATP + H2PO4

Carboxilazele au ca i coenzim vitamina biotin i sunt rspndite n regnul vegetal.

b) Aminoacidsintetazele catalizeaz activarea aminoacizilor din citoplasm n vederea participrii lor la biosinteza proteinelor, prin intermediul tARN (vezi biosinteza proteinelor). c) Aminoacidamidsintetazele catalizeaz formarea legturilor C-N n reacia de sintez a amidelor unor aminoacizi. De exemplu: asparaginsintetaza catalizeaz formarea asparaginei din acidul asparagic (aspartic):

O HOOC CH CH2 C OH + NH3 NH2

acid aspartic (asparagic)

asparaginsintetaza

O HOOC CH CH2 C NH2 + H2O NH2

asparagina (amida)

d) Acil-CoA-sintetazele catalizeaz reaciile de activare a acizilor grai din metabolismul lipidic:

O
R CO OH + HS~ CoA + ATP

C ~SCoA + AMP + P

SISTEME MULTIENZIMATICE
n organism, alturi de enzimele bine individualizate, cu structur specific, care prezint specificitate de substrat i de aciune, sunt prezente i sisteme enzimatice sau complexe multienzimatice constituite din dou sau mai multe enzime, care catalizeaz reacii succesive sau cuplate, a cror aciune catalitic este interdependent. Reaciile succesive se pot reda prin urmtoarea schem de reacii:
A
E1

E2

E3

Enzimele E1, E2, E3, care acioneaz asupra substraturilor A, B, C, sunt dependente funcional, se intercondiioneaz. Produsul de reacie obinut prin aciunea enzimei E1 formeaz substratul de aciune pentru enzima E2, iar asupra produsului su de reacie va aciona enzima E3 etc. Interdependena funcional a sistemelor enzimatice se bazeaz pe un suport morfologic comun, respectiv, enzimele au o distribuie spaial dependent de structura organitelor celulare. Un asemenea sistem multienzimatic este cel din mitocondrii, care catalizeaz reaciile care decurg n procesul de respiraie, sistemul format din enzimele participante la biosinteza i biodegradarea acizilor grai, sistemul multienzimatic format din cinci componente: hexakinaza, izomeraza, fosfohexokinaza, aldolaza, glicofosfodehidrogenaza, care acioneaz n metabolismul glucidic, n procesul glicolizei etc.

ENZIMELE ALOSTERICE (EFECTUL ALOSTERIC)

Enzimele alosterice sunt constituite din mai multe uniti proteice, care pe lng situsul catalitic, mai posed i un situs alosteric la care se poate lega efectorul alosteric (activator sau inhibitor). Controlul alosteric al enzimelor este foarte important n reglarea metabolismului. Prefixul alo se refer la existena pe moleculele enzimelor a unuia sau mai multor centrii de legtur (situs alosteric), alii dect cei ai situsului activ, de care se leag efectorii alosterici, modificnd structura spaial a enzimei. Pentru o concentraie de substrat dat, un efector pozitiv crete activitatea enzimatic, cnd se leag la centrul alosteric, pe cnd un efector negativ scade activitatea enzimatic. O enzim poate, datorit unui efector alosteric, s se modifice att de mult, nct s nu mai poat cataliza o reacie dect n prezena activatorului alosteric (efectul vitezei maxime). Un exemplu l constituie piruvatcarboxilaza care este practic inactiv n absena efectorului acetilcoenzima A. Se poate concluziona c, n general, un efector alosteric stabilizeaz o anumit conformaie a unei enzime (fie ea cea activ sau cea inactiv). Inhibiia alosteric are o importan fiziologic deosebit i se desfoar prin mecanism de inhibiie feed-back sau retroinhibiie), aflat sub control genetic. De exemplu, la biosinteza ferporfirinelor sau a colesterolului, produsul final al reaciei enzimatice acioneaz ca inhibitor alosteric asupra produsului de la nceputul lanului de reacii. Creterea concentraiei lui stopeaz practic reacia; dac produsul este utilizat n ntregime, sinteza se reia, deoarece efectul alosteric este reversibil. Enzimele alosterice reflect capacitatea organismelor vii, vegetale i animale, de a coordona activitile lor celulare, astfel nct s se realizeaz un echilibru ntre procesele anabolice i catabolice eseniale pentru via.

CURS 14 BIOCHIMIA DINAMIC

Biochimia dinamic studiaz ansamblul transformarilor chimice i fizico-chimice ale substanelor constituente ale materiei vii, nsoite de schimbri n coninutul de energie (metabolism). Metabolismul, cu cele dou laturi, anabolismul i catabolismul, constituie alturi de alte caracteristici eseniale (ereditatea, variabilitatea, autoreproductibilitatea, etc.), trstura esenial a materiei vii. Anabolismul cuprinde procesele de sintez i cretere a complexitii biomoleculelor i este asociat cu consumul de energie (reacii endergonice). In organismele autotrofe (celule clorofiliene, bacterii nitrificante, organisme vegetale superioare), substanele organice sunt sintetizate (prin fotosintez) din substane minerale (n primul rand CO2), folosind ca surs de energie, energia luminoas. Organismele heterotrofe nu-i pot sintetiza substanele organice din cele de natur mineral, ci triesc pe seama substanelor sintetizate de organismele autotrofe, folosind ca surs de energie, energia chimic. Catabolismul cuprinde reaciile de biodegradare a biomoleculelor cu structur complex n biomolecule cu structur simpl (CO2, NH3, H2O), procese biochimice care decurg cu eliberare de energie (reacii exergonice). Transformrile metabolice se desfoar n organismele vii (vegetale i animale) n condiii fiziologice (la temperatur normal, pH caracteristic fiecrei pri a organismului), n mod continuu, ntr-o strns interdependen, sub aciunea biocatalizatorilor enzime, i prin reglarea fin, mediat de hormoni.

METABOLISMUL GLUCIDELOR Biosinteza (anabolismul) glucidelor Biosinteza monoglucidelor Biosinteza monoglucidelor poate fi exprimat printr-o reacie global, pornind de la CO2 i H2O, substanele precursoare, practic inepuizabile n natur:
n CO2 + m H2O CnH2mOm + n O2

Energia necesara biosintezei poate fi realizata prin: (a) chimiosintez, (b) fotosintez. a) Chimiosinteza furnizeaz energia necesar biosintezei compuilor organici prin oxidarea unor compui anorganici: H2, H2S, FeCO3, NH3, etc., cu ajutorul hidrogenobacteriilor, sulfobacteriilor, ferobacteriilor, bacteriilor nitrificante, etc. Importana biologic a chimiosintezei const n faptul c se demonstreaz posibilitatea eliberrii energiei necesare sintezei materiei vii, de ctre celulele autotrofe, n medii minerale. b) Fotosinteza, procesul de asimilare a CO2 de ctre plantele verzi, este calitativ si cantitativ, cel mai important proces biochimic de pe planet, deoarece reprezint: principala surs de materie organic (se transform C mineral din CO2 n C organic); unica surs de oxigen singurul proces celular care folosete drept surs energetic lumina, pe care o transform n energie chimic.

Locul de desfurare a fotosintezei l reprezint cloroplastele, produse de organite specializate ale celulelor plantelor verzi. Acestea posed ADN propriu, care codific partea proteic i un tip special de membran, denumit tilacoid, care conine pigmenii clorofilieni i sistemele transportoare de electroni. In cloroplaste, se gsesc alturi de clorofile (a, b, c, d) i pigmeni carotenoidici, care absorb energia luminoas i o cedeaz clorofilei a, singura capabil s o transforme n energie chimic. Moleculele clorofilelor sunt dispuse n plantele verzi sub forma unor uniti funcionale denumite fotosisteme, astfel nct, la absorbia luminii s se produc rapid un transfer de energie de rezonan. Fotosinteza reprezint n esen, un proces biologic de oxido-reducere, n care lumina este direct implicat n transferul electronilor i n generarea de ATP. Fotosinteza se realizeaz n dou etape greu de delimitat, datorit rapiditii cu care se succed foarte rapid: fotoreacia (etap care necesit prezena luminii) scotoreacia (etap care nu necesit implicarea luminii la transformarea CO2 i H2O n moleculele de glucide) Fotoreacia, prima etap a fotosintezei, este condiionat de prezena energiei luminoase, necesar fotoactivrii pigmenilor (clorofile, carotenoide) din cloroplaste. Fotosistemele n care decurge absorbia luminii, reacia cu clorofila i eliberarea electronilor, deci a poteialului reductor, sunt implicate n dou procese foarte importante: fotoliza apei i reducerea NADP depozitarea energiei chimice n compusul macroergic ATP. Schematic acest proces complex, poate fi reprezentat astfel: a) fotoactivarea pigmenilor din cloroplaste (reacie de oxidare) clorofila + h (cuante de lumin) clorofila fotoactivat+ + eb) fotoliza apei
2H2O 2H+ + 2e2H+ + 2OH2H 2H + S CH2 CH2 S C H (CH2)4 COOH HS HS CH2 CH2 C H (CH2)4 COOH

acid lipoic (tioctic) - forma oxidat c) fotooxidarea

2 HO- + clorofila fotoreactivata+ (fotooxidare)

acid lipoic (tioctic) - forma redus

2 OH + clorofila dezactivata 1/2 O2 + H2O 2 OH

d) fosforilarea fotosintetic a ADP (transformarea energiei luminoase n energie chimic)

ADP + H3PO4 + energie luminoasa ATP

nsumnd reaciile pariale, se poate scrie ecuaia global a fotoreaciei (ecuaia lui Hill):
2H2O + 2NADP+ + ADP + H3PO4 = 2NADPH + H+ + 1/2O2 + ATP
produsele fotoreaciei

Scotoreacia, a doua etap a fotosintezei, poate decurge i n absena luminii i cuprinde: reacia de asimilare fotosintetic a CO2 absorbit prin frunze din atmosfer, sau rezultat din alte procese biochimice obinerea celor mai simple monoglucide (triozele aldehida fosfogliceric i hidroxoacetonfosfatul), prin participarea produselor fotoreaciei, ATP ca activator energetic, NADPH +H+ ca agent reductor. obinerea primei hexoze (fructozo-1,6-difosfat) de la care se pot biosintetiza oligoglucide i poliglucidele, sau care poate participa la regenerarea ribulozei-1,5- difosfat, necesar asimilrii CO2. Succesiunea de reacii ale scotoreaciei constituie ciclul Benson-Calvin. Dac aspectul fundamental diferit al fotosintezei, fa de alte procese biochimice, l constituie folosirea energiei luminoase pentru a scinda fotolitic apa, a reduce NADP i pentru a stoca energia luminoas sub form de energie chimic n ATP, reaciile scotoreaciei ncepnd de la metabolitul acid-3-fosfogliceric sunt asemntoare celor produse n ficatul organismelor animale. Singura etap caracteristic organismelor vegetale este formarea metabolitului acid 3fosfogliceric, care implic asimilarea CO2 de ctre pentoza ribulozo-1,5-difosfat, prin intermediul celei mai rspndite proteine de pe planeta-ribulozo-1,5-difosfatcarboxilaza. ase molecule de ribulozo-1,5-difosfat (30 de atomi de C n total) i ase molecule de CO2 (6 atomi de C) reacioneaz formnd 12 molecule de acid 3-fosfogliceric (36 de atomi de C). Dintre acestea, 2 molecule (2 C3) sunt utilizate pentru a stoca glucide hexoze (C6). Cele 10 molecule de acid fosfogliceric rmase (30 atomi de C) produc 6 molecule de ribulozo-1,5difosfat (30 atomi de C). Secvena de reacii este complex i implic glucide pentoze, trioze, hexoze, care se transform prin reacii de aldolizare, de transcetolizare, etc, biocatalizate de enzime specifice.

H2C C OH HC OH HOOC C O Aldehida 3-fosfoglicerica HC OH P CH2 O O P Acidul 2-carboxi- H2C Esterul 3-cetopentozo 1.5-difosfat 3-ceto pentozo- Acidul 3-fosfo1.5 difosfat gliceric (APG) H H2C C P HC P HC CH2 HO CH OH OH O P Fructoza 6-fosfat O ATP ADPHO OH HC O H C H2C CH OH H2C O O Xilulozo-5-fosfat Eritrozo-4-fosfat H2C OH O O P Zaharoza H C HC HC HC OH OH OH P Fructoza Glucoza 6 fosfat C P H2C C ADP OH OH OH - ATP HO O O CH2 HC H CH2 H2C C HO HC P HC HC CH O OH O C OH O P CH2 O P HC OH OH O OH CH OH HO + C H OH C O H2C C CH HC HC OH OH CH2 O P Fructoza 1,6-difosfat O O P P CH2 O P HC OH HC OH O C COOH COOH CO2 H C O H2C C OH OH OH O C HC P forma dienolica CH2 O C HC OH HC OH C O

OH

H2C P O P O

CH2 P

H2C

H2C

CH2

CH2

CH2

HC

OH Dihidroxiacetonfosfat

HC CH2 O

OH ATP HC OH -ADP OH HC OH

H2C

OH

RIBULOZA A Esterul ribulozoAT DP 1.5-difosfat P OH H2C C O OH O

H2C

HC

CH2

Ribulozo-5-fosfat

H OH OH OH O

Glucoza

HC

HC

HC

H2C

Ribozo -5-fosfat

Ciclul BENSON CALVIN

H2C O P H2C O P Sedoheptulozo - 7-fosfat Sedoheptulozo - 1,7-fosfat

Biosinteza pentozelor Pentozele, glucide deosebit de importante pentru organismele animale i vegetale (riboza este component a acizilor nucleici i a multor coenzime, iar ribuloza este acceptorul primar la asimilarea fotosintetic a CO2), se pot forma prin dou ci metabolice: calea (ciclul) pentozofosfailor (degradarea glucozo-6-fosfatului rezultat prin izomerizare din fructozo-6-fosfat) combinarea triozelor cu aldehida acetic sau aldehida glicolic.
H H H C C H2C O H OH O + H P CH2 H C H2C OH O P H C H2C OH OH C O H C OH C CH2 ADP O ATP H H C CH2 C OH O

Aldehida 3-fosfogliceric

Ester deoxirobozo-5-fosfat
H C C C C H2C O OH ADP H H OH OH O P ATP

Deoxiriboza
H H H H C C C C H2C O OH OH OH OH

H H

C C H2C

O H OH O + H2C P OH C O aldolaza

Aldehida 3-fosfogliceric

Ester ribozo-5-fosfat
H2C OH O ADP OH OH O P ATP H H

Riboza
H2C C C C H2C OH O OH OH OH

H2C C H2C

OH H O O + H2C P O P H C O H

C C C H2C

Hidroxiaceton-3-fosfat

Ester ribulozo-5-fosfat

Ribuloza

Biosinteza oligoglucidelor Biosinteza oligoglucidelor reprezint un proces secundar al fotosintezei, respectiv transformarea hexozelor formate n diglucide, triglucide, etc. Legturile glicozidice dintre moleculele de monoglucide pot fi realizate enzimatic prin dou reacii diferite: transglicozilare (cazul biosintezei amilopectinei i glicogenului) cuplarea unor resturi de glucide activate n prealabil cu compui macroergici (UTP, GTP).

Zaharoza (zahrul) este prima diglucid aprut n procesul de fotosintez i este uor asimilat de plante. Zaharoza se poate biosintetiza n cantiti mici din ester glucozo-1-fosfat i fructoz, sub influena biocatalitic a enzimei zaharozofosforilazei, prin elimi-narea unei molecule de acid fosforic. n cantiti mari, zaharoza se biosintetizeaz prin activarea uneia dintre componente (glucoza) cu compusul macroergic acid uridintrifosforic (UTP).
OH CH2OH H H OH OH H OH O H O H O P OH OH + HO O O P~ OH O P~O OH O P OH H O CH2 H OH O O H H OH N N

Glucozo-1-fosfat

Acid uridintrifosforic (UTP)

OH

CH2OH H H OH OH H OH O H O H O P ~O OH O P OH H O CH2 H OH O O

N N O O P OH OH

+
H H OH

HO

P OH

Uridin difosfatglucoza (UDPG)

OH CH2OH H H OH OH H OH O H O H O P~O OH O P OH H O CH2 H OH O O H H OH N HO + H OH H CH2 H OH O OH CH2 O P N

Uridin difosfatglucoza (UDPG)

CH2OH H OH H HO CH2 H H OH OH O H H OH O + HO O H OH H O P~ O OH O P~O OH O P H

Fructozo-1-fosfat
OH N O O N

OH

CH2 O H H H H OH OH

Zaharoza

Acid uridindifosfat (UDP)

Diglucida maltoza se biosintetizeaz dup un mecanism asemntor zaharozei, n care esterul glucozo-1-fosfat este transformat n uridindifosfatglucoza (UDPG) pentru a reaciona cu glucozo-1-fosfat, cu formarea maltozei-1-fosfat.

Biosinteza poliglucidelor Biosinteza poliglucidelor de rezerv glicogen (regnul animal) i amidon (regnul vegetal) decurge cu mare vitez i ncepe cu transformarea glucozo-6-fosfat n glucozo-1-fosfat, reacie catalizat de enzima fosfoglucomutaza. Primul pas n sinteza glicogenului n organismele animale este reacia cu compusul macroergic UTP, cu formarea uridindifosfatglucozei (UDPG), care este apoi transferat pe resturile de glucoz sau pe un fragment poliglucidic cu formarea glicogenului, sub influena enzimei glicogensintetaza. Glicogensintetaza necesit drept starter o caten poliglucidic de cel puin 4 resturi de glucoz, la care s se lege succesiv alte molecule de UDPG. Ramificarea prin legturi C1 - C6 pe catena glicogenului este catalizat de o enzim de ramificare denumit glucanaza. n plante i n multe bacterii, sinteza amidonului decurge asemntor glicogenului, fiind catalizat de enzima amidonsintetaza.
CH2O P CH2O P O CH2O P CH2O P O CH2OH O

OH

OH

OH

Fructozo-1,6-difosfat
CH2OH O

Fructozo-6-fosfat

Glucozo-6-fosfat

AMILOZA AMILOPECTINA O P

AMIDON

Glucozo-1-fosfat

Biodegradarea (catabolismul) glucidelor Biodegradarea glucidelor n organismele vii, vegetale i animale, este un proces oxidativ, generator de energie (exergonic), care const n transformarea moleculelor de glucide (poliglucide, oligoglucide, monoglucide) n compui mai simpli, cu mas molecular mai mic. Biodegradarea glucidelor poate decurge, n funcie de condiii, n dou etape: biodegradarea (catabolismul) anaerob biodegradarea (catabolismul) aerob Catabolismul anaerob decurge n organismele vii n absena oxigenului, pe dou ci metabolice: biodegradarea glicolitic (glicoliza), un ciclu de reacii prin care glucoza este transformat n acid piruvic i se formeaz ATP. Biodegradri fermentative: (a) fermentaia anaerob de diferite tipuri (alcoolic, lactic, butiric, etc.) avnd ca produs final: alcoolul etilic, acidul lactic, acidul butiric i CO2, respectiv, fermentaia aerob. Biodegradarea glicolitic a glucidelor (glicoliza)

Glicoliza, una dintre cile metabolice care demonstreaz universitalitatea proceselor biochimice, a fost complet elucidat pn n anul 1940 (mai ales datorit savanilor G. Embden, O. Meyerhoff, J, Parnas, de unde i denumirea ciclului de transformri ciclul Embden - Meyerhoff - Parnas. Toate reaciile glicolizei decurg n citosolul celulelor. Procesul de biodegradare a poliglucidei amidon decurge prin parcurgerea urmtoarelor etape: scindarea legturilor C1 C6 glicozidice din amiloz pe cale hidrolitic (sub aciunea enzimei amilaza), sau pe cale fosforolitic (sub aciunea enzimei transglucozidaza), cu eliberarea unei molecule de ester glucozo-1-fosfat; legturile C1C6 glicozidice din amilopectina sunt scindate hidrolitic de ctre enzima amilo-1,6-glucozidaza; n cazul n care glicoliza pornete direct de la glucoz este necesar fosforilarea prealabil cu ATP n prezena enzimei hexokinaza (activat de prezena ionilor de Mg2+ sau Mn2+) cu formarea esterului glucozo-1-fosfat; esterul glucozo-1-fosfat (ester Cori) este izomerizat la ester glucozo-6-fosfat (ester Robinson) sub aciunea fosfoglucomutazei; urmtoarea etap a glicolizei const n izomerizarea glucozo-6-fosfatului la fructozo-6fosfat (ester Neuberg). Aceasta este o reacie de conversie a unei aldoze ntr-o cetoz, sub aciunea enzimei fosfohexozizomeraza; are loc a doua reacie de fosforilare (sub aciunea ATP i a fosfofructokinazei) a fructozo-6-fosfatului cu formarea fructozo-1,6-difosfatului (ester Harden-Young), ultima glucid cu ase atomi de carbon din ciclul glicolizei; sub aciunea biocatalitic a enzimei aldolaza, esterul fructozo-1,6-difosfat este scindat n aldehida 3-fosfoglicerica i dihidroxiacetonfosfat. Toate celelalte etape ale glicolizei decurg numai cu uniti formate din cte 3 atomi de carbon; glicoliza decurge n continuare prin intermediul aldehidei-3-fosfoglicerice, la care este convertit i dihidroxiacetonfosfatul, sub aciunea fosfotriozizomerazei.In etapele precedente, glicoliza a decurs cu scindarea unei molecule de glucoz n dou molecule de aldehid 3-fosfogliceric, cu consumarea a doi moli de ATP: urmeaz o etap foarte important din punct de vedere al producerii de energiefosforilarea oxidativ a aldehidei-3-fosfoglicerice n acid 1,3-difosfogliceric, care decurge n prezena enzimei fosfogliceroaldehiddehidrogenazei avnd drept coenzim NAD. Energia eliberat n aceast reacie de oxido-reducere se nmagazineaz n ATP prin legtura macroergic aprut ntre ADP si H3PO4; n ultima etap a glicolizei se formeaz acidul piruvic i o a doua molecul de ATP printr-o secven de reacii care implic: - o reacie de defosforilare (n prezena ADP, a fosfoglicerokinazei i a ionului Mg2+) a acidului 1,3-difosfogliceric la acid 3-fosfogliceric (ester Nilson). - izomerizarea acidului 3-fosfogliceric la acid 2-fosfogliceric, reacie catalizat de enzima fosfogliceromutaza. - transformarea acidului 2-fosfogliceric n acid 2-fosfoenolpiruvic, sub aciunea enolazei. - defosforilarea acidului 2-fosfoenolpiruvic sub aciunea piruvatkinazei, n prezen de ADP, Mg2+ i K+, cu formarea acidului piruvic i a ATP. Acidul piruvic este unul dintre cei mai importani metabolii, finalul biodegradrii anaerobe i compusul de la care ncepe biodegradarea aerob a glucidelor. El reprezint, de asemenea, o punte de legtura cu protidele i cu lipidele. Reacia total care reprezint transformarea glucozei n acid piruvic i 2 moli de ATP este: Glicoliza este reprezentat n schema de reacii urmtoare:

AMIDON
CH2
O

P
OH

1 3
H H

P CH2OH
O

CH2

CH2

CH2 O

P CH2O P
OH C

CH2

H OH

4
ALDOLAZA

2
H

OH

GLUCOZA

OH H ester glucozo 6-fosfat

ester fructozo 6-fosfat ester fructozo 1,6-difosfat

ADP ADP

5
OH

7
Enz
HS-Enz

COOH

HC

HC

H2C
O

OH

6
C O
HC OH

HC
NADP NADPNH+
+

OH Acid lactic

HC

OH O

CH3

NADP

H2C

H2C

OP

H2C

OP

NADPNH

aldehida 3-fosfoglicerica dihidroxiacetanfosfat

COOH

ATP
O
C HC

Acid piruvic

S Enz
OH

H3PO4 HSEnz

C HC

O
OH

CH3

H2C

H2C

P
acidul 1,3-difosfogliceric

COOH

OH

ENZIME:

CH2
ADP

acid enolpiruvic

ADP

11
COOH

O
P

C HC

OH
O

O
P

OH

C O

10
- H2O

9
OH

HC H2C

OH

1 Fosforilaza 2 Glucokinaza 3 Fosfohexozizomeraza 4 Fosfofructokinaza 5 Aldolaza 6 Fosfotriozizomeraza 7 HS - Enzima 8 Fosfoglicerokinaza 9 Fosfogliceromutaza 10 Enolaza 11 Piruvatkinaza
H2C

CH2

acidul 2-fosfoenolpiruvic acidul 2-fosfogliceric acidul 3-fosfogliceric

SCHEMA EMBDEN - MEYERHOF - PARNAS (EMP)

Biodegradarea aerob a glucidelor (ciclul acizilor tricarboxilici, ciclul acidului citric sau ciclul Krebs) Biodegradarea aerob a glucidelor reprezint etapa de desvrire a biodegradrii glucidelor i decurge prin transformarea acidului piruvic, produsul final al glicolizei, n acetilcoenzima A, care va fi, n final, oxidat total la CO2 i H2O. Ciclul acidului citric (sau ciclul Krebs, sau ciclul acizilor tricarboxilici) reprezint calea metabolic comun de descompunere oxidativ a glucidelor, lipidelor i aminoacizilor. Principiul de funcionare a metabolismului poate fi enunat astfel: moleculele organice complicate sunt scindate n uniti C2 (acid acetic activat) biodegradarea unitilor C2 conduce la formarea a doi moli de CO2 i 2 atomi de H produsul final H2O apare n lanul respirator din atomii de hidrogen de pe coenzime i oxigen, cu depozitarea unei pri din energie sub forma compusului ATP spre deosebire de glicoliz, care decurge n citosol, reaciile ciclului Krebs decurg n mitocondrii biodegradarea aerob a glucidelor este precedat de 2 reacii importante: o decarboxilarea acidului piruvic cu formarea acetilcoenzimei A, compus macroergic o carboxilarea acidului piruvic la acid oxalilacetic, care prin reacia cu acetilcoenzima A va forma acidul citric. Decarboxilarea acidului piruvic reprezint etapa de legtura ntre glicoliz i ciclul acidului citric. Reacia este catalizat de enzima piruvatdehidrogenaza i poate fi reprezentat astfel :
O CH3 C COOH + HSCoA NAD+ H3C NADPH O C ~SCoA + CO2

Decarboxilarea se produce printr-o succesiune de reacii intermediare, catalizate fiecare de cte o enzim din sistemul multienzimatic al piruvatdehidrogenazei, cu participarea coenzimelor specifice: tiaminpirofosfatul (TPP), NADP+, HSCoA, acidul lipoic, Mg2+. Prima etap const n decarboxilarea acidului piruvic, cu producerea CO2 i a unei grupe hidroxietil ataat tiaminpirofosfatului. Grupa hidroxietil este transformat n acetilcoenzima A, cu reducerea NAD+, proces denumit decarboxilare oxidativ. Conversia acidului piruvic la acetilcoenzima A este ireversibil, ca urmare acizii grai superiori nu pot fi transformai n glucoz n organismele animale, dei bacteriile i plantele o pot face, printr-un mecanism special. Atomii de H fixai de NADP+ si FAD n etapa de decarboxilare oxidativ i rezultai i din alte etape ale ciclului, se vor combina cu oxigenul, cu formarea apei (n aa numitul ciclu respirator). Carboxilarea acidului piruvic este o etap n care are loc fixarea CO2 activat cu biotinilenzima i cu ATP la acidul piruvic, cu formarea acidului oxalilacetic.
O C COOH + CO2 activat O C COOH COOH +

biotinilenzima
AMP

H2CH

H2C

Acid piruvic

Acidul oxalilacetic

Biosinteza acidului citric decurge ireversibil, prin condensarea aldolic a acetilcoenzimei A cu acidul oxalilacetic, sub influena enzimei citratsintetaza. Energia necesar reaciei este furnizat prin hidroliza legturii macroergice din acetilcoenzima A. deshidratarea acidului citric la acid cis-aconitic i hidratarea la acid izocitric (ambele etape ) sunt catalizate de enzima aconitaza. urmeaz prima din cele patru reacii de oxido-reducere din ciclul Krebs i anume, dehidrogenarea acidului izocitric cu ajutorul enzimei izocitricdehidrogenaza, avnd drept coenzima NADP+ i formarea acidului oxalilsuccinic. prima decarboxilare din ciclu, decurge la acidul oxalilsuccinic, un -acid instabil, care se decarboxileaz cu ajutorul izocitricdehidrogenazei, cu formarea acidului cetoglutaric. a doua decarboxilare oxidativ din ciclu, a acidului cetoglutaric la succinilcoenzima A, care prin hidroliz formeaz acidul succinic, decurge cu participarea aceluiai sistem enzimatic ntlnit la etapa de decarboxilare a acidului piruvic la acetilcoenzima A (cetoglutaricdehidrogenaza) ultimele reacii ale ciclului constau n transformarea n trei etape a acidului succinic n acid oxalilacetic: o oxidarea (dehidrogenarea cu FAD) a acidului succinic la acid fumaric o hidratarea acidului fumaric la acid malic o oxidarea (dehidrogenarea cu NAD+) a acidului malic la acid oxalilacetic Acidul oxalilacetic regenerat poate asigura continuarea aceleiai succesiuni de reacii, cu eliberare de energie stocata sub forma de FADH i NAD+. Bilantul general al ciclului Krebs poate fi reprezentat astfel :
CH3 CO~SCoA + 3H2O + 3NADP+ + FAD + ADP + P = 2CO2 + 3NADPH + 3H+ + FADH2 + ATP + HSCoA

Sensul metabolic al ciclului const n : oxidarea restului acetil (CH3CO-) din acetilcoenzima A rezultat din acid piruvic, la CO2 , substan n care carbonul este complet oxidat la C4+ . din cele patru reacii de oxidare rezult 8 atomi de H, legai de coenzimele NAD+ i FAD, care sunt participani la lanul respirator, unde de-a lungul unui sistem enzimatic specific, sufer reacii de oxidare la H+, form sub care reacioneaz cu O2-, formnd H2O i elibernd energie. Procesul de respiraie tisular ( lanul respirator ) poate fi reprezentatat, sumar, astfel:
2RH sistem enzimatic 2H+ + 2e- + 2R(substrat oxidat) 2e- + 1/2O2 2H+ + O2O2H2O + energie

Ciclul Krebs opereaz n sens unic datorit celor trei reacii care decurg ireversibil: sinteza acidului citric din acetilcoenzima A i acid oxalilacetic decarboxilarea acidului izocitric la acid -cetoglutaric dehidrogenarea acidului -cetoglutaric Energia eliberat treptat, n cursul reaciilor este nmagazinat sub forma legturilor macroergice ale compuilor macroergici GTP, ATP i eliberat treptat n funcie de nevoile organismului (procese de biosintez, energie osmotic, electric, mecanic, caloric, etc.). n urmtoarea schem este reprezentat succesiunea reaciilor din ciclul Krebs.

acetil - CoA

H3C

Co~SCoA + HOH

H2C O C H2C COOH COOH HO C HC COOH COOH HO C HC COOH HO COOH H2C C

COOH COOH COOH

forma cetonica

forma enolica

acid citric

acidul oxalilacetic
O CH3 C COOH + HSCoA
NAD+

CO2 H3C

O C ~SCoA

C CH2H

COOH + CO2

C H2C

COOH COOH

HSCo H2C HO C H2C

COOH COOH COOH

11
HO H C H2C
+ H 2O

Acidul oxalilacelic

COOH
NADP NADPH

Acidul citric 2
HC C H2C COOH COOH COOH

COOH
- H 2O

Acidul malic 10
HOOC CH HC COOH

Acidul cisaconitic Acidul fumaric 9

H2C H2C COOH COOH
HSCoA

3
H

CICLUL KREBS

HO

C HC H2C

COOH COOH COOH

NADP

Acidul succinic 8
O

H2O
C ~SCoA

Acidul izocitric 4
NADPH

CH2 O H2C COOH HC H2C COOH COOH C COOH

Succinil CoA
NADPH

NADP

Acidul oxalilsuccinic 5

7
O C CH2 COOH

CO2

6
HSCoA

CO2 H2C COOH Acidul alfa-cetoglutaric

Enzime: 1-citrat sintetaza, 2-acinitaza, 3-cisaconitaza, 4-izocitricdehidrogenaza, 5-oxalilsuccincarboxilaza, 6,7-complex enzimatic (-cetoglutaricdehidrogenaza), 8-complex enzimatic, 9-succindehidrogenaza, 10-fumaraza, 11-L. Maliccodehidrogenaza.

Importana ciclului Krebs decurge din faptul c, constituie o cale comun de biodegradare a glucidelor, a lipidelor si protidelor (prin substanele intermediare provenite din acestea). Cetoacizii rezultai n ciclul citric, pot servi la biosinteza aminoacizilor (corelaie ntre glucide i protide), iar prin intermediul acetilcoenzimei A se stabilete corelaia metabolic dintre glucide i lipide. Se poate concluziona c, prin interrelaiile metabolice stabilite ntre glucide-lipide-protide, ciclul Krebs reprezint o surs de substrat i de energie necesar tuturor proceselor metabolice. Biodegradarea fermentativ a glucidelor Biodegradrile fermentative sunt procese de descompunere, predominant anaerob, ale glucidelor datorate activitii fiziologice a unor microorganisme. Au o importan practic deosebit, contribuind la circuitul elementelor n natur, la fertilizarea solului, la obinerea unor compui utilizai n industria alimentar, chimic, farmaceutic.

Fermentaiile anaerobe (n absena oxigenului )

Se pot clasifica, dup natura substanelor finale n: - fermentaia alcoolic - fermentaia lactic - fermentaia butiric - fermentaia propionic a) Fermentaia alcoolic a glucidelor decurge sub influena drojdiilor Saccharomices cerevisiae. Mecanismul este identic cu cel al glicolizei, pn la acidul piruvic. n continuare, acidul piruvic este decarboxilat la acetaldehid, (n prezena catalizatorului piruvatdecarboxilaza, avnd drept coenzim tiaminpirofosfatul. Acetaldehida este apoi redus la etanol cu enzima alcooldehidrogenaza i NADH + H+.
CH3 CO
COOH - CO2 CH3 CHO
NADPH + H+ - NADP+

CH3

CH2

OH

Acid piruvic

Acetaldehid

Etanol

n decursul fermentaiei alcoolice rezult i produi secundari: acetaldehid, acid lactic, alcool amilic, acid succinic, etc., care trebuiesc separai prin distilare fracionat. b) Fermentaia lactic este ntlnit n mod normal n diferite microorganisme, dar i n muchi la efort intens depus in condiii de concentraii de reduse de oxigen. Mecanismul fermentaiei lactice este analog glicolizei, pn la acidul piruvic. Mai departe, acidul piruvic se transform printr-un proces de reducere enzimatic n acid lactic sub aciunea enzimei lactatdehidrogenaza avnd drept coenzima NADH+H+.
CH3 CO COOH
NADPH + H+ - NADP+

CH3

CH OH

COOH

Acid piruvic

Acid lactic

Fermentaia lactic se aplic n industria alimentar la prepararea iaurtului, murturilor, panificaie, etc.).

c) Fermentaia propionic este un proces de degradare anaerob a glucidelor, care decurge sub aciunea unor bacterii specifice, n urma cruia se obine, comparativ cu fermentaia alcoolic i cea lactic, o cantitate mai mare de ATP, respectiv, cte 2 moli de ATP/mol de glucoz.
3 C6H12O6 4 H3C CH2 COOH + 2 CH3 COOH + 2CO2 + H2O

Fermentaia propionic este utilizat, alturi de fermentaia lactic, n industria alimentar la fabricarea brnzeturilor, pentru activarea unor procese biochimice din sol, etc. d) Fermentaia butiric const n bioegradarea glucidelor de ctre anumite microorganisme, cu formarea acidului butiric.
C6H12O6 CH3 CH2 CH2

COOH + CO2 + H2O

Decurge cu descompunerea unei mari cantiti de substan organ, n soluri mltinoase, n nmoluri, n bli, cu degajare de miros neplcut.

Fermentaia aerob (n prezena oxigenului)

Fermentaia aerob este un proces biochimic care decurge n prezena oxigenului. Mecanismul de reacie este similar cu cel al fermentaiei alcoolice, pn la etapa de formare a aldehidei acetice, dup care, n urma procesului de oxidare, se formeaz acid acetic. Acidul acetic poate fi biodegradat pn la CO2 i H2O.
hexoze EMP acid piruvic aldehida acetica etanol [O] CH3 COOH CO2 + H2O

METABOLISMUL LIPIDELOR Biosinteza (anabolismul) lipidelor simple gliceride Biosinteza lipidelor (simple i complexe) reprezint procese metabolice importante n organism, deoarece lipidele (sub forma trigliceridelor) prezint importan biologic ca substane de nmagazinare a energiei n organism (cldura de ardere = 39 kcal/g, n comparaie cu cea a glucidelor = 17 kcal/g), iar lipidele complexe (fosfolipide, glicolipide, lipoproteine) intr n structura membranelor celulare sau au importan biologic deosebit, de reglare a funciilor celulare, reglarea colesterolului, a steridelor etc. Biosinteza (anabolismul) lipidelor ncepe n cea de-a doua etap a fotosintezei, scotoreacia, prin formarea acidului 3-fosfogliceric, compus implicat att n biosinteza lipidelor simple gliceride, ct i a celor complexe Pentru biosinteza gliceridelor se biosintetizeaz n prezena enzimelor caracteristice elementele componente, glicerol i acizii grai superiori, etap urmat apoi de biosinteza propriu-zis a lipidelor simple gliceride. Biosinteza glicerolului Biosinteza glicerolului decurge n strns corelaie cu metabolismul glucidic. Aldehida 3fosfogliceric i hidroxoacetonfosfatul, cele dou trioze fundamentale rezultate la glicoliz

(biodegradarea anaerob a glucidelor), sau la plante, n a doua etap a fotosintezei (scotoreacia) sunt reduse la 3-fosfoglicerol, din care, prin defosforilare rezult glicerolul liber.
H H C C H2C O OH O P
NADP NADPH ATP

H2C H C H2C

OH
ADP

H2C H C H2C

OH OH OH

OH O P

H2C C H2C

OH
NADPH

NADP

ATP

H2C H C H2C

OH
ADP

H2C H C H2C

OH OH OH

O O P

OH O P

Triozofosfai

3-Fosfoglicerol

Glicerol

Biosinteza acizilor grai superiori Principalele locuri de biosintez a acizilor grai n organism sunt ficatul i celulele adipoase. Urmrind etapele metabolismului (relaiile dintre reaciile de oxidare a glucidelor, lipidelor, aminoacizilor pentru producerea de energie) se poate observa c precursorul biogenetic al acizilor grai superiori este acetilcoenzima A (CH3CO~SCoA). Transformarea acizilor grai n acetilcoenzima A poate fi parcurs i n sens invers, ca transformare a acetilcoenzimeiA n acizi grai. Faptul c acizii grai sunt biosintetizai din acetilcoenzima A, explic numrul par de atomi de C din catena lor. Excesul de glucide conduce la depunerea de grsimi, deoarece glucoza este transformat n acid piruvic, iar acesta, n final n acetilcoenzima A. Deoarece aceast etap este ns ireversibil, acetilcoenzima A nu se poate transforma n acid piruvic, deci grsimile nu pot fi convertite n glucoz n organismele animale (spre deosebire de plante i bacterii). Biosinteza acizilor grai superiori are loc atunci cnd necesarul energetic al organismului este acoperit i acetilcoenzima A nu mai intr n ciclul Krebs, furnizor de energie. Biosinteza acizilor grai se poate realiza pe dou ci metabolice : a) calea malonilcoenzimei A (calea citoplasmatic) b) calea mitocondrial

Biosinteza acizilor grai superiori pe calea mitocondrial (calea elongaiei)

Biosinteza acizilor grai pe aceast cale decurge la nivelul mitocondriilor, pornind de la acizi grai cu catena scurt. Drept partener de reacie al componentei iniiale - radicalul hidrocarbonatcoenzima A, este n acest mecanism acetil-coenzima A (n locul malonil-coenzimei A). Reaciile sunt aceleai ca la procesul de -oxidare, cu o singur excepie, reducerea legturii duble decurge cu NADPH + H+ n loc de FADH+H+. Se pare c aceast cale de biosintez este mai scurt pentrul acidul acetic, comparativ cu calea malonil-coenzimei A. Etapele prin care se realizeaz creterea catenei acizilor grai sunt aceleai cu cele ale cii malonil - coenzimei A, respectiv, (a) formarea cetoacidului gras activat, (b) formarea

hidroxoacidului gras activat, (c) biosinteza acidului gras nesaturat activat, (d) biosinteza acidului saturat cu doi atomi de carbon in plus n caten.
O R CH2 CH2 C~SCoA O

+ H3C

CH2

C~SCoA - HSCoA

Acid saturat activat (Cn)

O R CH2 CH2 C

Acetil-coenzima A (C2)
O CH2 C~SCoA NADPH + H+ NADP

Cetoacid activat (Cn+2)

OH NADPH + H+ NADP R CH2 CH2 C H CH2 O C~SCoA

Hidroxiacid activat (Cn+2)

O R CH2 CH2 C H H C C~SCoA NADPH2

- H2O

Acid nesaturat activat (Cn+2)

O NADPH2 R CH2 CH2 H2 C H2 C C~SCoA

Acid saturat activat (Cn+2)

Biosinteza acizilor grai nesaturai

Organismul are nevoie de acizi grai nesaturai pentru producerea lipidelor polare constituente ale membranelor celulare i pentru alte necesiti. Acetia rezult din acizi grai saturai, prin dehidrogenare catalizat de enzime specifice. De exemplu, un sistem enzimatic din ficat poate introduce o singur legtur dubl, n mijlocul catenei acidului stearic, genernd acidul oleic. Sistemul enzimatic nu poate introduce i alte legturi duble, de aceea acidul linoleic cu dou duble legturi i acidul linolenic (cu trei duble legturi) nu pot fi sintetizai n organism ci sunt preluai numai prin alimentaie.
CH3 (CH2)7

CH2

CH2

(CH2)7

COOH

CH3

(CH2)7

C H

C H

(CH2)7

COOH

Acid stearic

Acid oleic

n plante, creterea indicelui de iod, odat cu avansarea spre coacere, dovedete posibilitatea transformrii acizilor grai saturai n acizi grai nesaturai. Biosinteza acizilor fosfatidici i a gliceridelor (acilglicerolilor) Acizii grai rezultai prin biosintez vor fi stocai n organism sub form de esteri cu glicerina, sub forma aa numitelor grsimi neutre, sau gliceride.

Legtura esteric nu se formeaz pornind de la glicerol, ci de la glicerolfosfat, forma activat energetic (cu ATP) i implicnd acizii grai activai cu acetil-coenzima A. Enzima care biocatalizeaz procesul este glicerinkinaza din ficat, care reacioneaz rapid cu acizii grai, dar care lipsete practic n esuturile grase i n muchi. n prima etap rezult acizi fosfatidici (monoacil- i diacilfosfatidici). Prin defosforilare cu o enzim fosfataz i esterificare cu un alt mol de acil-coenzim A, se formeaz triacilglicerol (triglicerida), care se depoziteaz ca grsime neutr.
H2C HC OH OH 2R O H2C C~SCoA HC OH HC O CO R O CO R H2C O CO R

2 HSCoA CH2O P

CH2O P
ADP ATP

CH2O P
ADP ATP

H2C HC CH2

O OH OH

CO

H2C HC CH2

O O OH

CO CO

R R

RCO~SCoA

Monoglicerida

Diglicerida
RCO~SCoA

H2C HC CH2

O O O

CO CO CO

R R R

Triglicerida

Biosinteza lipidelor complexe Lipidele complexe sunt componente de baz ale membranelor celulare. Din punct de vedere chimic sunt gliceroaminfosfatide, compui care prezint o legtur esteric la radicalul fosforil format cu un alcool polar (baz azotat), conform formulei generale:
H2C HC H2C O O O CO CO P R R O O OH NH2 CH2 CH COOH H2C HC H2C O O O CO CO P R R O O OH

CH2

CH2

NH2

Serinfosfatide

Colaminfosfatide (cefaline)

H2C HC H2C

O O O

CO CO P

R R O O OH CH2 CH2 N CH3 CH3 CH3

Colinfosfatide (lecitine)

Biosinteza bazelor azotate (serina, colamina, colina) Biosinteza bazelor azotate se realizeaz pornind de la acidul 3-fosfogliceric, dup urmtoarea schem de reacii:
H2C H C O OH P
NAD NADH

H2C C

O O

P
transaminare

H2C H C

O NH2

P
ADP

ATP

H2C H C

OH NH2

COOH

COOH

COOH

COOH

Ac. 3-glicerofosforic

Ester al acidului hidroxipiruvic

OH H2C

Ester fosforic al serinei

Serina

H2C H C

OH NH2

NH2 - CO2 H2C

CH3I

H2C H2C

OH + N CH3 CH3 CH3

COOH

Serina

Colamina

Colina

Biosinteza gliceroaminfosfatidelor Lipidele cele mai rspndite n membranele celulelor eucariote sunt colaminfosfatidele i colinfosfatidele. Biosinteza lor se realizeaz prin parcurgerea urmtoarelor etape: - biosinteza acizilor fosfatidici - activarea bazei azotate cu compuii macroergici ATP i CTP - esterificarea acizilor fosfatidici (sau a gliceridelor) cu baza azotat activat.
H2C H2C O NH2 P P-P-P O CH2 citozina O

Fosfocolamina

CTP

H2 N

CH2

CH2

P-P

CH2

citozina O

+ P-P
diglicerida 1
- CMP

2 acid fosfatidic
- CDP

H2C HC CH2

O O O

CO CO P

R R CH2 CH2 NH2

Colaminfosfatida (Cefalina)

Biodegradarea (catabolismul) lipidelor Biodegradarea gliceridelor Hidroliza enzimatic a trigliceridelor (triacilgliceroli) decurge sub aciunea enzimelor lipaze, care le scindeaz n etape, n diacil-, monoacilgliceroli (di- i monogliceride). Aceste enzime sunt controlate hormonal de ctre adrenalin i glucagon, care actioneaz lipolitic. Hidroliza grsimilor alimentare decurge n intestinul subire biocatalizat de lipaza pancreaza, activat de srurile acizilor biliari. Produii hidrolizei grsimilor, glicerolul i acizii grai superiori, urmeaz n metabolism ci diferite. Biodegradarea lipidelor complexe Catabolismul lipidelor complexe se realizeaz n etape, prin hidroliz enzimatic, cu eliberarea tuturor componentelor structurale: baze azotate, acizi fosfatidici, acid ortofosforic. Cu exceptia acidului fosforic (ortofosforic) fiecare dintre componente se biodegradeaz specific. a) Biodegradarea bazelor azotate Decurge sub aciunea enzimelor specifice :
H2C HC OH H2C NH2 -CO2 H2C OH NH2 H2C CH3I HI H2C OH N(CH3)3 [O] HC H2C O

[O]

N(CH3)3

COOH

Serina

Colamina
HO C H2C O N(CH3)3 HO

Colina
C H2C O

Aldehida betainei

[O]

CO2 NH2

H3C

NH2

Betaina

Glicin

Metilamin

b) Biodegradarea acizilor fosfatidici decurge sub aciunea enzimelor din clasa hidrolazelor, numite lipaze (fosfolipaze), care elibereaz acidul fosforic, di- i monogliceridele, iar n final glicerolul.
H2C HC CH2 O O O CO CO P R R H2O H3PO4 CH2 OH
Diglicerid

H2C HC

O O

CO CO

R R Lipaza - 2 RCOOH

H2C HC H2C

OH OH OH
Glicerol

Acid Fosfatidic

c) Biodegradarea glicerolului este corelat cu metabolismul glucidic. Glicerolul poate fi fosforilat sub aciunea fosfokinazei i a ATP (n ficat) la fosfoglicerol, care prin oxidare (cu fosfogliceroldehidrogenaza i ATP) se transform n aldehida fosfogliceric. Aceasta poate participa la biosinteza poliglucidelor sau se poate biodegrada de-a lungul ciclului E.M.P (pn la acid piruvic) i ciclului Krebs pn la CO2 i H2O, cu eliberare de energie.
H2C HC H2C OH OH OH
Fosfokinaza ATP

H2C HC H2C

OH OH O P NADP+ NADPH2

HC HC H2C

O OH O
Glicoliza

CH3
Krebs

CO2

+
H2O

COOH

Glicerol

3- Fosfoglicerol

Aldehida fosfoglicerica

Acid piruvic

H2C C H2C

OH O O P

Fructoza 1,6-difosfat

Oligo-, Poliglucide

d) Biodegradarea acizilor grai superiori Biodegradarea acizilor grai superiori decurge n mitocondrii, n prezena sistemelor enzimatice specifice. Deoarece acizii grai sunt relativ ineri chimic, ei trebuie activai prin transformare n tioesteri, cu ajutorul coenzimei A, a compusului macroergic ATP, a Mg2+ i a enzimei acil-coenzima A-sintetaza (tiokinaza). Printr-o succesiune de reacii inverse celor de la biosinteza acizilor grai superiori, catena de acid gras superior este scindat n uniti de 2 atomi de C, sub form de acetil-coenzime A (CH3 CO~SCoA). Deoarece reaciile decurg la atomul de carbon din poziia (fa de grupa carboxil, descompunerea se numete calea -oxidrii (spirala Knoop-Lynen). Acizii grai saturai cu numr impar de atomi de C se biodegradeaz dup acelai mecanism al -oxidrii, dup o prealabil reacie de carboxilare n prezena coenzimei A, a biotinei, a ATP i Mg2+ (conversie la acid gras cu numr par de atomi de carbon).

Produsul biodegradrii acizilor grai superiori cu numr impar de atomi de carbon este ns acidul propionic, nu acetil-coenzima A.
O R CH2 CH2 C OH ATP R CH2 CH2 O HSCoA C O PMA AMP

P-P

Acid gras superior neactivat

O HSCoA AMP R CH2 CH2 C~SCoA NADP+ NADPHH+ R C H C H O C~SCoA HOH

Acid gras superior saturat activat

OH HOH R C H CH2 O C~SCoA NADP+ NADPHH+

Acid gras superior nesaturat activat

O R C CH2 O C~SCoA

- Hidroxiacil coenzima A
O R' CH2 C OH

- Cetoacil coenzima A
O

H3C

C~SCoA

Biodegradare ciclica O H3C C~SCoA Biodegradare aeroba ciclul Krebs CO2

+
H2O

METABOLISMUL PROTIDELOR Cele mai multe dintre protidele organismelor superioare sunt continuu biodegradate i biosintetizate. La om si animale, timpul de njumtire biologic a albuminelor din plasm este de 20-25 de zile, cnd jumtate din cantitatea de albumin este biodegradat i nlocuit cu una nou sintetizat. Chiar i proteinele intracelulare (enzimele) sunt supuse unor procese de biodegradare i biosintez continu n perioade de timp de la cteva ore la mai multe zile. De aceea, pentru un adult, necesarul de aminoacizi este de 1 g/zi/kg corp, deoarece organismul uman nu poate sintetiza dect jumtate din cei 20 de aminoacizi proteinogeni. Biosinteza (anabolismul) protidelor Etapa de biosintez a protidelor (anabolismul) ncepe cu biosinteza aminoacizilor, urmat de biosinteza protidelor, n ordinea complexitii lor: aminoacizi peptide peptone albumoze proteine proteide (holoproteide) (heteroproteide) Biosinteza aminoacizilor Biosinteza aminoacizilor se realizeaz n principal pe dou ci metabolice:

aminare reductiv a cetoacizilor transaminare

Aminarea reductiv a cetoacizilor reprezint o cale principal de biosintez a aminoacizilor, direct din amoniac i cetoacizii formai n organism prin degradarea aerob a glucidelor (ciclul Krebs). Aminarea cetoacizilor decurge n prezena enzimei glutamatdehidrogenaza care are drept coenzim NAD+ sau NADP+. Reacia decurge cu formarea intermediar a unui iminoacid, care va fi redus enzimatic, conform reaciei:
NAD

R C O

NADH + H+

R HC NH2

NH3

C - H2O

NH

COOH

COOH

- Cetoacid

COOH

Iminoacid

Aminoacid

Se biosintetizeaz prin acest mecanism aminoacizii: alanina, acid aspartic, acid glutamic din cetoacizii respectivi: acid piruvic, acid oxalilacetic, acid cetoglutaric.
CH3 C O CH3 HC NH2

C H2C

COOH COOH

H2N

H C H2C

COOH COOH

COOH

COOH

Acid piruvic

- Alanina

Acid oxalilacetic

Acid aspartic

C CH2 H2C

COOH

H2N

CH CH2

COOH

COOH

H2C

COOH

Acid - cetoglutaric

Acid Glutamic

Transaminarea

Transaminarea const n transferul grupei amino -NH2 de la un aminoacid la un cetoacid, dup un mecanism care cuprinde ca etape intermediare formarea unor baze Schiff:
R1
HC NH2

R2 +
C O

R1
C O

R2 +
HC NH2

COOH

COOH

COOH

COOH

R1
HC NH2 O

R2
C - H2O

R1
HC N

R2
C COOH

R1 + 2[H]
HC H N

R2
CH

- 2[H]
COOH COOH COOH

COOH

COOH

Aminoacid 1

Cetoacid 2
R1 - 2[H]
C N

Baza Schiff 1
R2
CH COOH + H2O C O

R1 +

R2
HC NH2

COOH

COOH

COOH

Baza Schiff 2

Cetoacid 1

Aminoacid 2

Transaminarea este catalizat de o enzim specific transaminaza care are drept coenzim piridoxalfosfatul (vitamina B6). Importana deosebit a reaciilor de transami-nare, reacii biochimice reversibile, const n realizarea corelaiei dintre metabolismul glucidic i cel protidic. Aminoacizii sunt intermediari la obinerea altor biomolecule importante, cum ar fi: peptide, proteine, antibiotice (gramicidina), hormoni (adrenalina, noradrenalina). Biosinteza proteinelor (poliprotidelor) Proteinele (holoproteide superioare) se sintetizeaz din aminoacizi printr-un proces continuu i complex, care decurge cu vitez mare, la nivelul ribozomilor din celule, cu implicarea acizilor nucleici i a compuilor macroergici ATP, GTP care furnizeaz energia necesar proceselor biochimice. Aminoacizii se unesc n catene macromoleculare, prin legturi peptidice, ntr-o anumit succesiune, conform codului genetic coninut n ADN. Succesiunea bazelor azotate din ADN este transcris (cu respectarea principiului complementaritii) ntr-o anumit structur a acizilor mARN i tradus cu ajutorul acizilor t ARN din codonii mARN pe anticodonii tARN n noua structur proteic (limbajul bazelor azotate din acizii nucleici este tradus n limbajul aminoacizilor proteinei). Proteinele sunt sintetizate din cei 20 de aminoacizi proteinogeni, iar secvena bazelor azotate din mARN reprezint secvena amionacizilor din protein. Fiecare aminoacid este reprezentat pe mARN printr-o triplet de baze azotate numit codon (cu cele 4 baze azotate exist 64 codoni (triplete) diferii. Etapele necesare sintezei proteinelor sunt: reduplicarea ADN, const n desfacerea legturilor de hidrogen dintre bazele azotate complementare, urmat de desfurarea spiralei bicatenare, cu formarea celor dou catene polipeptidice simple de ADN; transcrierea (transcripia) mesajului genetic, respectiv o anumit succesiune a bazelor azotate de pe ADN (matria) pe catena polinucleotidic a mARN, care este sintetizat cu respectarea riguroas a complementaritii bazelor azotate din ADN, cu deosebirea c timina din ADN este nlocuit n mARN cu uracil traducerea (translaia) este o etap important n determinarea caracterului i nsuirilor unui organism, deoarece limbajul bazelor azotate din acizii nucleici (o anumit secven, respectiv codul genetic) este tradus n limbajul aminoacizilor constitueni ai proteinei (o anumit secven a aminoacizilor).

Fiecare secven de 3 baze azotate din structura acizilor nucleici constituie un codon, iar fiecrui codon i corespunde un anumit aminoacid. Conform principiului complementaritii bazelor azotate, unui anumit codon de pe ADN i corespunde un anumit codon de pe mARN i apoi un anticodon de pe tARN. Reprezentarea acestor etape este redat schematic n figura urmtoare.
ADN

Structura secundara: dubla catena spiralata

REDUPLICARE

IN NUCLEU

ADN

Structura primara: catena polinucleotidica simpla - sediul mesajului genetic - matrita pozitiva a originalului

TRANSCRIERE

ATGCAGCTA

ARNm

Catena polinucleara simpla: - purtatorul mesajului genetic - matrita negativa a originalului Repozitivarea (realizarea) mesajului genetic

1'

2'

3'

UACGUCGAU

IN CITOPLASMA

TRANSLATIE

AUGCAGCUA
AA1 AA2 AA3
leucina Metionina glicina

1''

2''

3''

PROTEINA

CO R1 NH CO R2 NH CO R3 NH

Din punct de vedere biochimic, etapa de traducere (translaie) reprezint biosinteza propriu-zis a macromoleculelor proteice i cuprinde mai multe etape: a) activarea enzimatic a aminoacizilor din citoplasm const n aciunea ATP asupra aminoacizilor, n prezena enzimei amionoacil- ARN sintetaza i a ionilor Mg2+, cu formarea complexului aminoacil-AMP- enzima.
O
R CH NH2 C + P ~P ~ P

Mg2+
r

O R CH NH2 C

A + Enz

Enz + P ~ P
P r A

OH

ATP

Aminoacid

Aminoaciladenilat

Enz = aminoacil ARN - sintetaza b) formarea complexului aminoacil-tARN, prin transferul restului aminoacil de la complexul aminoacil-AMP-enzima la capatul C3 -OH al tARN (se formeaz o legtur esteric la C3-OH de la secvena terminal a tARN a trinucleotidei CCA. Trinucleotida terminal CCA a tARN are braul flexibil i poate adapta grupa aminoacil la poziia reactiv determinat de pe ribozom.

O R CH NH2 C
Enz

ARNt

CH2

ADENINA O

ARNt

CH2

ADENINA O
+ P

O~ P

O OH OH
R

Tib

A + Enz

AMP CH C ~ OH OH

a.a. AMP Enz aminoaciladenilat-Enz

partea terminala a t.RNA

NH2 complexul aminoacil t.RNA

Evidenierea modului n care tARN este capabil s identifice poziia de legare a aminoacidului n lanul peptidic, poate fi realizat cu ajutorul modelului trifoi al tARN:
Codon mRNA

C anticodon al tRNA

CH2

ADENINA O

A 3` Aminoacid activat OH OH adenina riboza P O O C NH2 CH R

Capatul tRNA t RNA C C P CH2 ADENINA O

A 3` Complexul aminoacil RNA O O C HC R NH2 OH

Legarea corect a aminoacidului cu tARN corespunztor se datoreaz specificitii absolute a enzimei aminoacil-ARN-sintetaza. Se asigur astfel, recunoaterea codonului de ctre anticodon (i nu de ctre aminoacidul activat). c) formarea legturii peptidice decurge pe ribozomi (particule coninnd rARN, prezente n toate celulele) i se realizeaz ntre aminoacizii transportai fiecare de tARN corespunztori (aflai pe codonii dictai de mesajul genetic nscris pe mARN). Ribozomii posed pe suprafaa lor dou situsuri catalitice: - situsul P (donor), pe care se va gsi complexul aminoacil 1-t1ARN - situsul A (acceptor), pe care se afl complexul aminoacil 2 t2ARN. ntre cei doi aminoacizi alturai, legtura peptidic -NH-CO- se realizeaz ntre grupa carbonil a aminoacidului 1, de pe poziia donor a ribozomului (corespunzator codonului 1 de pe mARN) i grupa amino (-NH2) a aminoacidului 2 de pe poziia acceptor a ribozo-mului (corespunznd codonului 2 de pe mARN).

n urma formrii legturii peptidice ntre cei doi aminoacizi, molecula de t1 -ARN este eliberat din complexul aminoacid 1-t1 ARN i poate fi din nou utilizat.
R1 R2 HC
** ARNt ~ C

HC * NHH + ARNt ~ C

NH2 O

O
** ARNt ~ C

R2 CH NH CO

R1 CH NH2

- ARNt

acceptor donor RIBOZOM

dipeptida

Prin deplasarea ribozomilor de-a lungul mARN (sau deplasarea mARN pe suprafaa ribozomilor), codonii de pe mARN trec succesiv prin dreptul situsului A de pe ribozomi, dictnd natura complexului aminoacil-tARN care urmeaz s fie fixat pe acest situs. Dipeptida format, sub forma complexului aminoacid 1-aminoacid 2t2ARN, trece pe poziia donor a ribozomului, lsnd liber poziia acceptor, corespunzator codonului 3 de pe mARN. d) elongaia (creterea lungimii lanului polipeptidic) se realizeaz dup un mecanism identic cu cel implicat n cazul biosintezei dipeptidei. Situsul P al ribozomului este ocupat cu complexul dipeptidil-t2ARN, iar situsul A este vacant i se poziioneaz la al treilea codon de pe mARN, formnd complexul aminoacil 3-t3ARN. Dup formarea noii legturi peptidice ntre grupa carbonil legat de complexul dipeptidil-t2ARN i grupa amino de la complexul aminoacil 3-t3ARN, are loc deplasarea tripeptidei formate (sub forma complexului AA1-AA2-AA3-t3ARN) pe situsul donor (situs P) al ribozomului cu eliberarea concomitent a situsului acceptor (situs A) al ribozomului, care se va poziiona n dreptul codonului 4 de pe mARN, n vederea formrii complexului aminoacil-4-t4 ARN.Dac proteina care urmeaz a fi sintetizat are, de exemplu, 200 de aminoacizi, etapa final implic transferul peptidei coninnd 199 de aminoacizi spre aminoacidul final, legat n complexul cu tARN, cu formarea unui complex protein-tARN. Captul N-terminal al proteinei este sintetizat primul, captul C-terminal, ultimul. e) Terminarea biosintezei lanului polipeptidic al proteinei Lungimea lantului polipeptidic este determinat genetic, prin transcrierea pe mARN a unui codon stop (nu codeaz nici un aminoacid): UAG, UAA, AGA (pentru care nu exist nici un tARN cu anticodoni corespunztori). Aceti codoni "non-sens" sunt ns recunoscui de proteine citoplasmatice specifice, denumite factori de eliberare (protein release factors), care desprind proteina de pe tARN. Lanul polipeptidic este eliberat de pe situsul P al ribozomului i de pe tnARN printr-o reacie de hidroliz. Ribozomul se detaeaz de pe mARN i este apt pentru o nou etap de iniiere. Lungimea lanului proteic este determinat genetic, prin transcrierea pe mARN a unui codon stop.Proteinele sintetizate (holoproteide) particip la biosinteza heteroproteidelor, a enzimelor, la ndeplinirea unor funcii specifice organismului. Concomitent se desfor i un proces invers, de biodegradare a proteinelor. Biodegradarea (catabolismul) protidelor Biodegradarea proteinelor Proteinele (holoproteidele) libere sau rezultate din biodegradarea heteroproteidelor se scindeaz pe cale enzimatic n aminoacizii componeni. Enzimele proteolitice (proteinazele) sunt alturi de amilaze cele mai cunoscute i importante enzime hidrolitice (C-N hidrolaze).

Biodegradarea aminoacizilor Aminoacizii rezultai prin biosinteza sau prin biodegradarea proteinelor pot fi utilizati n continuare la: - biosinteza proteinelor noi - biosinteza altor compui cu azot n molecul - sinteza de aminoacizi (prin transaminare, aminare reductiv) - biodegradare total pn la: NH3, CO2, H2O. n organismele animale i vegetale biodegradarea aminoacizilor decurge preponderent prin: - dezaminri - decarboxilri simple sau nsoite de dezaminri - transaminri. a) Biodegradarea aminoacizilor prin dezaminare Dezaminrile sunt reactii catalizate enzimatic, care constau n eliminarea unor grupe amino (-NH2), sub form de amoniac (NH3) cu formarea unor compui ternari (C, N, O) care pot constitui punct de plecare pentru alte transformri biochimice. Dezaminarea oxidativ const n eliberarea a doi atomi de hidrogen, cu formarea unui iminoacid instabil, care n prezena apei hidrolizeaz cu formare de NH3 i cetoacid. Enzimele implicate fac parte din clasa oxidoreductazelor i pot fi: glutamatdehidrogenaza n prezena NAD+ sau NADP+, alanindehidrogenaza n prezena FAD, etc. Cetoacizii rezultai pot fi metabolizai (biodegradai) la CO2 i H2O, sau pot fi transformai n monoglucide care vor parcurge n sens invers ciclul de biodegradare EMP (glicoliza). Aminoacizii care se pot transforma n cetoacizi se numesc aminoacizi cetogeni, iar cei care se pot transforma n glucoz se numesc aminoacizi glucoformatori.
CH3 HC NH2 FAD FADH2 CH3 C NH +H2O CH3 NH3 + C O

COOH

COOH

COOH

Alanina

Iminoalanina

Acid piruvic

Dezaminarea hidrolitic a aminoacizilor conduce la obinerea NH3 unui hidroxiacid.

CH3 CH NH2 COOH HOH NH3 + CH3 CH OH COOH [O] CH3 C O COOH

- Alanina

Acid lactic

Acid piruvic

Hidroxiacidul poate fi transformat, n prezena dehidrogenazelor n cetoacid, care poate fi metabolizat n continuare prin ciclul Krebs sau poate fi retransformat n aminoacizi. Dezaminarea reductiv a aminoacizilor conduce la obinerea NH3 i a acidului saturat cu acelai numr de atomi de carbon:
CH3 CH COOH

[H]

NH3 + CH3

CH2

COOH

- Alanina

NH2

Acid propionic

Acidul propionic format, sub forma propionil-coenzimei A este implicat n biosinteza acizilor grai superiori cu numr impar de atomi de carbon, pe calea malonil-coenzimei A. Dezaminarea desaturant (biocatalizat de enzime din clasa liazelor) are drept produs de reacie, pe lng NH3, un acid carboxilic nesaturat cu acelai numr de atomi de carbon n molecul:
CH3 CH NH2 COOH NH3 + CH2 CH COOH

- Alanina

Acid acrilic

b) Decarboxilarea aminoacizilor Decarboxilarea aminoacizilor este o cale de biodegradare important, biocatalizat de enzime specifice, aminoaciddecarboxilaze, care au drept coenzima piridoxalfosfatul (vitamina B6). Ca produi de reacie, pe lng CO2, se formeaz amine primare, denumite amine biogene. Mecanismul reaciei de decarboxilare este urmtorul:
R CH NH2 COOH + O C H -H2O R CH N COOH CH -CO2

Aminoacid
R -CO2

Enz-piridoxalfosfatul
CH2 N CH H2O R CH2

Enz-iminoacid

NH2 + O

Enz-imin

Amin

Piridoxal-fosfat

Unele dintre aminele biogene rezultate prezint activitate farmacologic, altele sunt componente ale coenzimelor sau contribuie la sinteza unor heterociclii cu azot (pirol, piridina) care intr n structura unor alcaloizi.
H2C CH2 NH2 (CH2)2 CH NH2 COOH -CO2 H2N (CH2)4 NH2
-NH3

CH2 CH2 N H
-4H

HC HC N H

CH CH

H2C

Ornitina

Putresceina

Pirolidin
H2 C H2C CH2 CH2 N H

Pirol
H C HC HC N CH CH

CH2 NH2

(CH2)3

CH NH2

COOH

-CO2

H2N

(CH2)5

NH2 H2C

Lizina

Cadaverin

Piperidin

Piridin

Prin natura compuilor rezultai, reaciile de biodegradare a aminoacizilor reflect corelaiile dintre metabolismul proteic - glucidic - lipidic. Metabolismul amoniacului Amoniacul rezultat prin dezaminare ca i cel preluat de ctre plante din sol n decursul procesului de nutriie, este o substan toxic; nivele ridicate prezente n snge impiedic funcionarea creierului, provocnd com. De aceea, amoniacul nu este transportat liber de-a lungul esuturilor la ficat ci este transformat nti n amide netoxice. Cile de metabolizare a amoniacului sunt urmtoarele: fixarea sub forma de amide (ndeosebi ale acidului glutamic i aspartic) participare la biosinteza aminoacizilor, prin aminarea reductiv a cetoacizilor formarea de sruri de amoniu ale acizilor organici (oxalic, citric, malonic, fumaric, etc.) din metabolism. a) Fixarea amoniacului sub forma de amide
O R C O R C OH + HNH2 - H2O R OH + HNH2 R O C O C NH2 amida ONH4 sare de amoniu

acid organic amoniac

COOH H C CH2 O C OH O NH2

COOH HC CH2 C O P O NH2

COOH HC CH2 C NH2 NH2

Acidul asparagic
COOH H C NH2

Asparaginfosfat
COOH HC NH2 COOH HC NH2

Asparagina

(CH2)2 O C OH O

(CH2)2 C O P O

(CH2)2 C NH2

Acidul glutamic

Glutaminfosfat

Glutamina

Glutamina este unul din cei 20 de aminoacizi constitueni ai proteinelor i este implicat n biosinteza multor altor metabolii (este utilizat ca surs de azot). b) Metabolizarea amoniacului prin aminare reductiv (transaminare) Peste 30% din amoniacul rezultat n muchi la biodegradarea proteinelor este trimis n ficat, sub form de alanin (sau glutamin). Alanina formeaz prin transaminare acid piruvic, care este convertit n ficat la glucoz, care trece apoi n snge i din nou n muchi. Secvena de reacii constituie ciclul glucozo-alaninic. Toate aceste reacii, n care amoniacul este utilizat

la sinteza amidelor sau a unor noi aminoacizi, reprezint ci de corelaie a metabolismului protidic cu cel glucidic (ciclul acidului glutamic, ciclul acidului aspartic). c) Metabolizarea amoniacului prin ciclul ureeogenetic (ciclul ornitinic sau ciclul Krebs-Henseleit) Plantele superioare, mamiferele, pestii, ciupercile i bacteriile pot transforma amoniacul n uree, alt form netoxic de pstrare i de transport n organism. In organismele vii, formarea ureei decurge printr-o transformare ciclic complex, denu-mit ciclul ureogenetic (ciclul ornitinic sau ciclul Krebs-Henseleit).

Ciclul KREBS HENSELEIT

dezaminari AMP ATP NH3 + CO2 H2O ureaza NH2 uree C O NH2 H2C -PPC O ~P -H3PO4 NH2 H2C C NH O + NH2 carbamilfosfatul O NH2 H2N COOH CH CH2 COOH Acid aspartic HO COOH CH din ciclul KREBS CH2 COOH Acid malic

(CH2)2 HC NH2

(CH2)2 HC NH2

COOH NH2 izouree C OH NH NH2 C H2C NH NH H2C ORNITINA

COOH CITRULINA

NH2 C NH N

COOH CH CH2 COOH

(CH2)2 HC NH2

(CH2)2 HC NH2

COOH ARGINA

COOH Acid arginsuccinic (suaccinil orginina)

HOOC

H C

CH

COOH Acid fumaric

Ureea este produs n ficat prin scindarea hidrolitic a argininei la ornitin. Amoniacul de la catabolismul aminoacizilor poate fi utilizat pentru a reface arginina din ornitin, atomul de carbon provenind de la CO2 din metabolismul glucidic. La realizarea biosintezei ureei particip i un alt aminoacid, citrulina. Dioxidul de carbon activat enzimatic cu enzima carbamilfosfatsintetaza i cu aportul energetic al ATP, reacioneaz cu NH3 formnd carbamilfosfatul care reacioneaz cu ornitina formnd citrulina. Citrulina reactioneaza cu acidul aspartic (provenit prin trans-aminare din acid oxalilacetic, format n ciclul Krebs), n prezena enzimei argininsuccin-sintetaza, a ATP i ionilor Mg2+, cu formarea acidului argininsuccinic. Acesta este scindat de ctre

argininsuccinliaza n arginin i acid fumaric (care poate conduce la acid aspartic, n ciclul Krebs). Arginina rezultat este scindat de ctre hidrolaza arginaza n ornitin i izouree, care se izomerizeaz la uree, scindabil sub aciunea ureeazei n CO2 i NH3, compui care pot iniia biosinteza aminoacizilor, glucidelor, etc. Ciclul ornitinic (ciclul KrebsHenseleit) reprezint i el o cale de corelaie a metabolismului proteic, prin aminoacidul ornitina, cu metabolismul glucidic. Corelaii biochimice se pot stabili i ntre compuii fundamentali, glucide, lipide, protide i enzime, hormoni, acizi nucleici, etc. Abordarea complez a fenomenelor biochimice impune ca, pe lng studiul transformrilor diferitelor substane, s se ia n considerare i aspectele energetice ale acestor procese, cu evidenierea corelrii biosintezei, consumatoare de energie, cu biodegradarea, generatoare de energie. Trebuie, n acelai timp, acordat importana cuvenit influenei factorilor de mediu n care triesc organismele vegetale i animale, condiiilor n care i procur materia prim (H2O, CO2, O2, substane minerale, etc.), ct i energia necesar biotransformrilor, precum i influenei factorilor de mediu (clima, diferite radiaii, etc.), asupra evoluiei normale a diferitelor organisme.