LP 2 - Reactia de Aglutinare
LP 2 - Reactia de Aglutinare
LP 2 - Reactia de Aglutinare
AL INFECTIILOR BACTERIENE
RECOLTAREA SI PRELUCRAREA PRODUSELOR PATOLOGICE
DlAGNOSTIC MICROBIOLOGIC
Examen direct preparat proaspat
frotiu fixat si colorat
Izolare in vitro (medii de cultura) sau in vivo (animal de laborator)
Identificare caractere de cultura (pe mediul lichid si pe mediul solid)
caractere morfologice (dimensiuni, forma, gruparea, prezenta sporilor, a capsulei)
caractere metabolice/biochimice (transformarile suferite de glucide, proteine;
actiunea reductoare a bacteriilor-pe mediile politrope MIU, TSI)
Caractere ANTIGENICE
( reactii Atg-Atc)
DIAGNOSTIC IMUNOLOGIC :
Teste de imunitate umorala in vitro sau in vivo
Teste de imunitate celulara in vivo sau in vitro
Identificarea serologica (ex. Identificarea
unei specii sau serotip bacterian) :
Ser standard (Atc)
CULTURA Germen
+
(cu specificitate
Atg ??? cunoscuta de gen,
grup, tip, subtip)
Nr. 1 2 3 4 5
tub/godeu
Nr. 1 2 3 4 5
tub/godeu
Diluent 1 1 1 1 1
(ex.ml) 1 ml 1 1 1
se elimina
Produs 1ml
patol. (ml)
1
Fenomenul de aglutinare depinde de valenta Atc (Atc din clasa Ig M sunt mult mai
aglutinanti decat cei Ig G).
AGLUTINAREA DIRECTA
PRINCIPIU - Aglutinara directa se realizeaza in principal prin reactia dintre
antigenele naturale ale unor particule si anticorpii specifici.
AGLUTINAREA PE LAMA
- o pictur din serul aglutinant standard, n care se emulsioneaz o
poriune din cultura germenului de identificat suspensie omogen AGLUTINAREA IN TUBURI
se imprim lamei o micare de nclinare
se las n repaus 1-2 minute - utilizat fie pentru confirmarea
aglutinri pozitive pe lam
- CORESPONDEN IMUN ntre Atg de identificat i Atc standard grunji (identificarea serologic),
R+ - fie pentru stabilirea titrului de
- cnd suspensia rmne omogen-tulbure R anticorpi din serul bolnavului, n
cadrul serodiagnosticului.
- MARTORUL o picatura ser fiziologic + se suspensioneaza o ansa din
cultura de identificat trebuie sa prezinte un aspect tulbure, fara grunji
In identificarea serologic se efectueaz dilutii succesive din serul
aglutinant cunoscut (de la diluia 1/10 pn la titrul indicat pe fiol) + n
contact cu cantiti constante de Atg necunoscut (reprezentat de cultura
germenului n suspensie) incubarea stabilirea titrului anticorpilor
aglutinani (ultima diluie a serului standard care a mai aglutinat antigenul).
Daca acest titru corespunde cu cel de pe fiol sau este cel puin jumtate
din acesta, se concluzioneaz asupra corespondentei Atg-Atc.
APLICATIILE TEHNICI
- Identificarea serologica a suselor de bacterii utilizand un ser cunoscut ( ex in
identificarea grupei de streptococ, gonococ prin reactia de coaglutinare, folosind un
ser cu Atc anti-streptococ, anti0gonococ fixati pe proteina A stafilococica)
- Cercetarea Atc anti-bacterieni folosind un Atg standard susele germenilor de
referinta + serul bolnavului determinam fata de care suse este imunizat bolnavul
REACTIA DE COAGLUTINARE
- folosit pentru identificarea serologic a streptococilor, gonococilor
- se efectueaz pe lam : o suspensie n bulion din cultura tulpinii de identificat + o
suspensie de stafilococ cu proteina A, cuplat cu anticorpi specifici anti- gonococi,
(seruri polivalente sau monovalente de grup)
REACTIA DE COAGLUTINARE
- folosit pentru identificarea serologic a streptococilor, gonococilor
- se efectueaz pe lam
suspensie de
suspensie n stafilococ cu proteina A,
bulion din cuplat cu
cultura anticorpi specifici anti- gonococi,
tulpinii de (seruri polivalente sau
identificat monovalente de grup)
PRINCIPIUL METODEI const in faptul c fragmentul Fc al Atc din serul imun standard
anti-gonococ este fixat anterior pe proteina stafilococic, iar fragmentul Fab rmas liber
reacioneaz cu determinantul antigenic specific gonococului producnd o reacie de
aglutinare vizibil.
APLICATIILE METODEI
- Evidentierea factorului reumatoid - FR
- proteinei C reactive
- ASLO
- Atg HBs (cu latex HBs)
REACTIV PENTRU IDENTIFICAREA
GONOCOCULUI