Unamba

CARACTERIZACION DE ACEITE ESENCIAL DE EUCALIPTO

RESUMEN
En el presente informe se caracterizo fsico- mos. qumicamente el aceite esencial de eucalipto extrado por el mtodo de arrastre con vapor, se obtuvieron los siguientes resultados: un uso de 7.5 gramos de sulfato magnesio anhidra, una densidad de 0.915g/cm3; un gasto de etanol para solubilizar el aceite de 16, 2, 1.5, 0.5 ml, para 70, 80, 90, 96,respectivamente de etanol; y residuos de evaporacin de aceite esencial de 0.51 graVolumen 1, n 1 Fecha del boletn:

UNIVERSIDAD NACIONAL MICAELA BASTIDAS DE APURIMAC CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

TECNOLOGIA DE PRODUCTOS AGROINDUCTRIALES III DOCENTE: Ing. Karen Priscila Portarrero M. ALUMNO: Christian Andrew Aguilar M.

INTRODUCCION
Los aceites esenciales son sustancias odorferas de naturaleza oleosa encontradas prcticamente en todos los vegetales; son muy numerosos y estn ampliamente distribuidos en distintas partes del mismo vegetal: en las races, tallos, hojas, flores y frutos. Segn Briga (1962), estos aceites esenciales son componentes heterogneos de terpenos, sesquiterpenos, cidos, steres, fenoles, lactonas; todos ellos fcilmente separables ya sean por mtodos qumicos o fsicos, como la destilacin, refrigeracin, centrifugacin, etc.INTRODUCCION El uso de los aceites esenciales de condimentos y especias tanto en la industria de alimentos como en la industria farmacuticas cada vez ms generalizado, debido en parte a la homogeneidad del aroma y a la minimizacin de las posibilidades de contaminacin microbiana, cuando se compara con el uso directo de tales especias y condimentos. El aceite esencial de eucalipto, es obtenido fundamentalmente por medio arrastre de vapor.

ABANCAYAPURIMAC

Contenido:
RESUMEN, INTRODUCCION, OBJETIVOS

MARCO TEORICO

2 5 5 7 5 6 8 7

OBJETIVO
Conocer los anlisis fisicoqumicos que permiten determinar las caractersticas de los aceites esenciales y establecer la calidad de estos

MATERIALES METODOS RESULTADOS DISCUSIONES CONCLUSIONES DISCUSIONES BIBLIOGRAFIA

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CARACTERIZACION DE ACEITE ESENCIAL DE EUCALIPTO

REVISION BIBLIGRAFICA
Ensayos de reconocimiento para Monoterpe- ampliamente la slica gel como fase estanos y Sesquiterpenos: cionaria. Como fase mvil se emplea solventes apolares puros o mezclados. Sin emDebido a la diversidad de grupos funcionales bargo actualmente se utilizan tcnicas de que pueden estar presentes en los compo- separacin ms eficientes y rpidas como nentes mono- y sesquiterpnicos de un acei- la cromatografa lquida de alta eficiencia te esencial no existe una prueba especfica HPLC, y la cromatografa de gases (GC), as para su reconocimiento. Sin embargo existen como tambin combinaciones online unos pocos procedimientos experimentales HPLC-GC-MS (masas y gases). que permiten reconocer algunos de ellos por Esta ltima tcnica gracias al desarrollo su coloracin con diferentes reactivos, su reciente de columnas capilares de alta reabsorcin de luz UV de 254 nm y su Rf en solucin, permite analizar mezclas complecromatografa en capa fina. Por ejemplo, la jas presentes en aceites esenciales, e idenTabla 1 resume las caractersticas de varios tificar los componentes a partir de los tiemmonoterpenos y su comportamiento al anali- pos de retencin a travs de los denominazarlos por cromatografa en capa fina con dos ndices de Retencin de Kovats (IK). varios agentes reveladores. Por ejemplo, el Estos valores son caractersticos para cada limoneno se reconoce en las placas de TLC componente y existen bases de datos con porque no absorbe luz UV 254 nm, adiciona los ndices de muchos componentes de bromo, no forma un derivado 2,4- aceites esenciales. Los valores IK se deterdinitrofenilhidrazona y produce color pardo minan en dos columnas cromatogrficas con el cido sulfrico. una polar (por ejemplo Carbowax 20M) y Otros reactivos tiles para revelar monoter- una apolar (por ejemplo SE-52, DB-5). penos y sesquiterpenos son anisaldehdo- Adicionalmente, la tcnica acoplada Cromatografa de Gases-Espectrometra de Masas Terpeno UV Ensayo Ensayo Ensa- (GC-MS), permite obtener el espectro de masas de cada componente con el cual se Bromo 2,4=DN yo H2SO4 obtiene el peso molecular e informacin FH Limoneno + Pardo estructural. As mismo existen bases de datos con los espectros de masas de muchos -Pineno + Pardo componentes, por lo cual el ndice de KoPulegona + + + Amari- vats (determinado en dos columnas de diferente polaridad) y el espectro de masas son llo criterios para la asignacin qumica de muGeraniol + Purpuchos componentes de aceites esenciales, ra no solo monoterpenos sino tambin otros Carvona + + + Rosa tipos de sustancias caractersticas de dichos aceites. p-Cimeno + Ms recientemente se han desarrollado + Verde columnas cromatogrficas quirales para la Terpineol separacin de componentes pticamente 1,8-Cineol Verde activos, y se han desarrollado mtodos para TABLA N 1 el anlisis combinado HPLC-MS y HPLCNMR de mezclas de sesquiterpenos. Extraccin y aislamiento de muestra: Como se mencion anteriormente, la mayora de monoterpenos y sesquiterpenos se encuentran presentes en los aceites esenciales de diversas plantas. A partir de dichos aceites es posible realizar su aislamiento mediante la utilizacin de uno o varios mtodos cromatogrficos tales como la cromatografa en columna, en capa fina y HPLC. Para las cromatografas en columna y en capa fina se utiliza Caracterizacin espectral: Los monoterpenos y sesquiterpenos en un buen nmero se pueden caracterizar qumicamente a partir de los datos de cromatografa de gases y los espectros de masas tal como se anot anteriormente, pero cuando existen dudas de tal caracterizacin se recurre a los mtodos espectrales como Infrarrojo, Ultravioleta y Resonancia Magntica Nu-

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clear. Espectro infrarrojo: El espectro infrarrojo permite detectar la presencia de grupos hidroxilo, carbonilo, anillos aromticos, enlaces dobles C=C cis y trans, etc. Para determinar el espectro basta con colocar una gota del componente en una celda de NaCl. Espectro ultravioleta: El espectro UV de los monoterpenos y sesquiterpenos permite el reconocimiento de grupos funcionales y grupos cromforos. Por ejemplo el limoneno presenta un mximo de absorcin en 262 nm (E=6400). En general, la espectrofotometra ultravioleta tiene una utilidad limitada en el estudio de la gran mayora de los aceites esenciales terpnicos, ya que pocos terpenos tienen grupos cromforos. Sin embargo, en la fraccin no voltil de los aceites esenciales ctricos se encuentran componentes carotenoides o con ncleos heterocclicos oxigenados (cumarinas, furocumarinas sustituidas y polimetoxiflavonas), lo que da a estas esencias un comportamiento caracterstico en el UV. Esta particularidad se ha utilizado para la puesta a punto de mtodos que permite evaluar la calidad y la genuinidad, identificar el origen geogrfico de una muestra, la tecnologa empleada para su extraccin o la poca de produccin del aceite. Espectro de Resonancia Magntica Nuclear: Gracias a los desarrollos de la NMR se cuenta con bases de datos de los espectros, especialmente de 13C-NMR para los monoterpenos y sesquiterpenos ms frecuentes. En las siguientes figuras del costado se presentan los desplazamientos qumicos de los carbonos de varios monoterpenos y varios sesquiterpenos. Por otra parte, el desarrollo reciente de los mtodos bidimensionales homo- y heteronucleares, han permitido la determinacin estructural fina de los terpenoides y dems sustancias naturales, eliminando la ambigedad en la asignacin de las seales observadas. Espectrometra de Masa: En relacin con el estudio de aceites esenciales el acoplamiento del HRGC a la Espectrometra de Masa (GC-MS) es el que ha recibido mayor atencin desde su introduccin. La tcnica acoplada GC-MS permite obtener el espectro de masas de cada componente eludo.

Se obtiene el dato de su peso molecular e informacin estructural. Existen bases de datos con los espectros de masas de muchos componentes, por lo cual el ndice de Kovats (determinado en dos columnas de diferente polaridad) y el espectro de masas son criterios para la identificacin qumica de muchos de los componentes de un aceite esencial, sean monoterpenos u otros tipos de sustancias caractersticas de dichos aceites. En el acoplamiento de GC-MS, la tcnica de ionizacin ms utilizada es la de impacto electrnico (EI). Sin embargo la tcnica de ionizacin qumica (CI) tiene cada vez ms aplicaciones, por la mayor informacin que permite obtener. Ensayos de reconocimiento para Fenilprapopanos: Extraccin y aislamiento de muestra: Los fenilpropanos presentes en aceites esenciales se extraen con la misma metodologa descrita anteriormente para mono y sesquiterpenos. Sin embargo, debido a su anillo aromtico presentan ventajas en su deteccin por TLC y HPLC pues absorben luz ultravioleta (254 nm) y no requieren ser revelados con agentes qumicos, ni necesitan ser derivatizados, y por lo tanto pueden aislarse y analizarse ms fcilmente. Ensayos de reconocimiento: Existen ensayos de reconocimiento para el anillo aromtico como la reaccin con formaldehdo y cido sulfrico. As mismo en el caso de fenilpropanos con hidroxilos fenlicos estos pueden reconocerse por el ensayo del cloruro frrico, el cual produce coloraciones verdes y azules con sustancias fenlicas en general. La tabla 2 presenta los valores Rf y coloraciones con dos reactivos reveladores para varios fenilpropanos, se conoce tambin la utilidad del reactivo Cloramina-T para la deteccin de varios compuestos fenlicos. Caracterizacin espectral Espectro infrarrojo: Por tratarse de sustancias con anillo aromtico, sus espectros infrarrojo muestran las seales caractersticas de estos compuestos y dan informacin sobre el tipo de sustitucin del anillo aromtico adems de los grupos funcionales presentes en la molcula. Por ejemplo, el espectro IR del eugenol muestra entre otras bandas en 3500 (ancha) debida al grupo hidroxilo, 1510 caracterstica de aromticos, y tres

DESPLAZAMIENTOS QUMICOS DE LOS CARBONOS DE VARIOS MONOTERPENOS Y VARIOS SESQUITERPENOS.

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Compuesto Safrol Estragol Anetol Miristicina Apiol

Pie de imagen o grfico.

Rf en benceno Rf en n-hexano Color con Vainilla- Color con CHC13 (3:2) H2SO4 Gibbs 0.74 0.72 0.69 0.50 0.39 0.38 0.20 0.29 0.86 0.71 0.41 0.31 0.27 0.42 0.42 0.27 Rosado Rojo Pardo Pardo Rojo Pardo Rojo Gris Pardo Pardo Pardo

R.

de

Timol Eugenol Isoeugenol Metileugenol Metilisoeugenol Elimicina

Amarillo Rojo pardo Prpura Amarillo TABLA N 2

bandas en 990, 920 y 938 cm.-1 caractersti- -MS. cas de un grupo vinilo monosustitudo. El espectro IR del cinamaldehdo muestra bandas en 3330 (dbil), 3050, 2820, 2750, 1660 (intensa, debida al grupo carbonilo), 975, 740 y 695 cm.-1 entre otras.
Incluya aqu una frase o una cita del artculo para captar la atencin del lector.

Espectro ultravioleta: A diferencia de la mayora de mono- y sesquiterpenos, los fenilpropanos absorben luz UV con mximos alrededor de 254nm dependiendo de los grupos cromforos presentes en la molcula. Por ejemplo el isoeugenol muestra mximos en 260 (15850) y 305 (7000), el safrol en 286nm, la miristicina en 276nm, el isosafrol en 264 nm, el cido trans-cinmico en 273nm y el cido cis-cinmico en 264nm. Espectro de Resonancia Magntica Nuclear: Los espectros de 1H-NMR de los fenilpropanos muestran seales de protones aromticos alrededor de 6-8 ppm cuyas multiplicidades y constantes de acoplamiento permiten realizar una asignacin estructural clara an con espectros de baja resolucin. Espectrometra de Masa: Debido tambin a su anillo aromtico, los fenilpropanos presentan espectros de masa con iones moleculares intensos, lo que facilita la determinacin de su peso molecular. En el caso de compuestos con grupos carboxilo e hidroxilo es conveniente derivatizarlos para obtener sustancias ms volatilizables y trmicamente ms estables, ya que esto facilita por ejemplo su anlisis en mezclas mediante GC o GC

Pie de imagen o grfico.

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MATERIALES Y REACTIVOS
Sulfato magnesio anhidra. Papel filtro. Embudo. Balanza analtica. Picnmetro. Tubos de ensayo. Pera de decantacin. Etanol (70, 80, 90 y 96). Vaso de precipitados.
Sulfato anhidra

PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTO 1: Preparacin de la esencia para los anlisis Luego limpiar el picnmetro Multiplicar el valor obtenido por la densiLlenar la pera de decantacin y esperar dad relativa del agua a la misma tempeque se separe por diferencia de densida- ratura (20C) de la densidad relativa del des la mezcla de agua y aceite. liquido a T. Separar el aceite del agua. Eliminar el agua residual de la muestra de EXPERIMENTO 3: Solubilidad en etanol aceite, mediante la adicin de sulfato de magnesio anhidra, mas o menos al 10) del Pipetear 1ml de aceite esencial en beapeso del aceite esencial. ker. Filtrar con un embudo y ayudados por el Adicionar progresivamente al aceite papel filtro. esencial una solucin acuosa de etanol Recoger la muestra. de concentraciones conocidas (70, 80, 90 y 96). EXPERIMENTO 2: Determinacin de la den- Incrementar la adicin del etanol de 1ml sidad de aceite esencial en 1ml hasta que el aceite se disuelva totalmente, agitando frecuente y vigoroObtener el peso del picnmetro completasamente durante al diccin del solvente , mente limpio y seco (Pv). cuando la solucin se perfectamente claLlenar completamente con agua destilada ra, se anota el volumen de la solucin de a 20C. Colocar la tapa, observado la au- etanol aadido. sencia de burbujas en el interior el tubito de la tapa. Secarlo muy bien y pesar- EXPERIMENTO 4: Residuo de evaporalo de nuevo (Pa). cin Vaciar el picnmetro y secarlo cuidadosamente. Se pesa 1g de muestra en una capsula Llenar el picnmetro con el liquido problede porcelana previamente tarada. ma a la misma temperatura del agua (20). Se evapora en bao mara sin interrupTaparlo y limpiar el exterior. Pesar cin a la temperatura y el tiempo adecuade nuevo (Px). do para aceite esencial. Calcular el peso especfico (Pe) aplicando Se deja enfriar la capsula y luego se colola siguiente formula: can un desecador y se pesa.
Pera de decantacin

Pesado del picnmetro

Adicin de Etanol

Pesado de Aceite

Pe =

Px Pv Pa Pv

Bao mara

Filtrado del aceite

Pesado sulfato anhidra

Balanza

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RESULTADOS
Experimento 1: Volumen total de Aceite extrado: 73ml.
Agua absorbida por el sulfato de magnesio anhidra, despus de la purificacin.

Cantidad de Sulfato de Magnesio Anhidro: 7.8 gramos. Experimento 2: Material Picnmetro vaco (Pv) Picnmetro + agua (Pa) Picnmetro + muestra (Px) Experimento 1 18.82 28.84 27.98 Experimento 2 18.83 28.87 28.06 x 18.325 28.855 28.020

Pe =

Px Pv Pa Pv

Pe =

28.020 18.825 28.855 18.825

Pe = 0.9167

Aceite esencial purificado.

aceite = Pe 20 C 20 C relativa

aceite = 0.9167 0.998 g / cm3

aceite = 0.915 g / cm 3
Experimento 3: Grado del Etanol 70C 80C Volumen del etanol 16 ml. 2 ml. 1.5 ml. 0.5 ml.

Aceite esencial disuelto completamente por etanol.

90C 96C Experimento 4: Material Capsula Aceite Capsula + aceite

Peso 52.18 g. 1 g. 53.18 g. 52.69 g. 0.51g. 60 C.

Peso residual + capsula

Peso de la capsula mas el residuo del aceite esencial por evaporacin

Peso residual Temperatura bao mara

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Discusiones
fue la mas optima, pues con esta se pudo obtener el color cristalino transparente que se deseaba y con un Segn L. Hernndez Ochoa 2003, menciona que la gasto menor. densidad se encuentra entre 0.896 a 0,956 , como se puede notar que los resultados obtenidos en la practica Con respecto a la prueba del residuo por evaporason verdaderos o coherentes ya que se encuentra en cin: los rangos que los autores dicen que deben de estar el aceite esencial. Segn L. Hernndez Ochoa 2003, menciona que la cantidad residual es a causa de la resinas existentes Con respecto a la prueba de la solubilidad en etanol: presentes en el aceite esencial que van desde el 455 Se pudo observar y reiterar que los aceites esenciales al 50% , en la practica se obtuvo el 51% del peso del son solubles en etanol y mucho mas cuando estos se aceite esencial esto nos indica que la practica estuvo encuentran en mayo concentracin, ya que de acuerdo dentro de los limites. a las pruebas realizadas con las distintas concentraciones se pudo observar que la de concentracin al 90% Con respecto a ala densidad:

CONCLUSIONES
La densidad del aceite extrado fue de 0.915g/cm3. El aceite esencial contiene en 50% de residuos de La solubilidad del aceite aumenta con la concentraevaporacin, en su mayora son resina.

cin del alcohol.

BIBLIOGRAFIA

Hernndez-Ochoa LMedina-Gonzlez Y., Thiebaud-Roux S., De Caro P., ., Mouloungui Z. 2006. The role of co-additive on epoxy resin pre-polymers solubilization in super critical CO2. J. of Superctrical Fluids. 38,13 -17 http://www.alambiques.com/practica_extraccion_aceites.htm

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CUESTIONARIO
1.Que otros anlisis fisicoqumico se pue- car para medir en los siropes la concentracin den realizar para controlar la calidad de de azcares, en ptica para manipular la polalos aceites esenciales? rizacin, en qumica para caracterizar sustancias en solucin acuosa, y en medicina est 1. determinaciones fsicas siendo evaluado en la actualidad como un 1.1. aroma mtodo de determinacin de la concentracin 1.2. peso especfico de azcar en sangre en casos de personas 1.3. ndice de refraccin que sufren la diabetes. 1.4. desviacin ptica (poder rotatorio) 1.5. solubilidad en mezclas alcohol-agua Aquellas sustancias que producen un giro en (alcoholes rebajados) el plano de la luz polarizada se denominan 2. determinaciones qumicas pticamente activas. La luz, de una longitud 2.1. ndice de acidez libre de onda definida, al pasar a travs de un pris2.2. ndices de saponificacin y ster ma de Nicol se polariza, dando lugar a rayos 2.3. Determinacin de aldehdos y cetonas que vibran en un solo plano. Este prisma divi2.3.1. formacin de fenilhidrazonas de la luz (que vibra en muchos planos). en 2.3.2. formacin de oximas dos rayos, de los cuales uno se refracta y el 2.3.3. formacin de semicarbazonas otro atraviesa el prisma sin desviarse, vibran2.3.4. mtodo del bisulfito do cada uno en planos perpendiculares. 2.4. ndice de acetilo Cuando un haz de luz polarizada atraviesa 2.5. tcnicas cromatogrficas: TLC, TLC/ una solucin de la sustancia que se estudia el AgNO3, HRGC, HPLC plano de aquel, girara a la derecha o a la iz2.6. mtodos espectroscpicos: UV, IR, GC quierda. Si la sustancia hace girar al citado -MS, 1H-, 13C-NMR plano hacia la derecha, se dice que es dextrgira, y si lo hace a la izquierda ser levgira. Los ismeros pticos, como, por ejemplo, la 2.A que se conoce ndice de Ester? dextro y levoepinefrina hacen girar el plano de El ndice de ster comprende el nmero la luz polarizada en direcciones opuestas. de miligramos de hidrxido de potasio necesarios para neutralizar los cidos grasos Para medir la rotacin ptica, en grados, se de un gramo de grasa combinada en for- emplea el polarmetro. En la figura siguiente estn esquematizadas las partes principales ma de ster. de este aparato. Cuando el tubo, situado enSe calcula restando el ndice de acidez del tre los dos prismas, esta vaco, la luz que atrade saponificacin. viesa el primero de aquellos, o polarizador, y que sale polarizada, puede ser anulada comClculo: pletamente al hacer girar 90 grados, con respecto a la posicin del polarizador, el prisma I.E. = ndice de ster = I.S. - I.A posterior o analizador. El prisma Nicol de penumbra, que intercepta la mitad del haz de luz que sale del polarizador, origina distinta ilumi3.Que es rotacin ptica? nacin en las dos mitades del campo circular La rotacin ptica o actividad ptica es la que se observa desde el ocular, y estos dos rotacin de la polarizacin lineal de la luz semicrculos solo presentaran igual intensidad cuando viaja a travs de ciertos materia- luminosa para una determinada posicin del les. Suele ser un fenmeno que ocurre en analizador, la cual coincidir con el cero de la soluciones que presentan molculas qui- escala del aparato. Cuando el tubo se llena rales tales como la sacarosa (azcar), sli- con una solucin de una sustancia pticamendos con planos cristalinos rotados, tales te activa, ser preciso girar el analizador hascomo el cuarzo, y la polarizacin circular ta alcanzar igual intensidad de iluminacin en de gases atmicos o moleculares. Se em- los dos campos. El numero de grados que ha plea en la industria de elaboracin de az- sido necesario girar el analizador, medido en

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la escala del polarmetro, representa la rotacin ptica de la sustancia que se examina.

4.Que entiende usted por ndice de rotacin ptica? Son los grados que da la luz con respecto a un refraccin ptica.