MACROMOLÉCULAS
MACROMOLÉCULAS
MACROMOLÉCULAS
Objetivo:
-Entender y montar ensayos de degradación de polímeros por enzimas extracelulares
microbianas
La diversidad metabólica que hay entre los microorganismos, incluso entre algunos
cercanos filogenéticamente permite la realización de los ciclos biogeoquímicos. Sin la
intervención de los microorganismos no podrían llevarse a cabo los ciclos del carbono,
nitrógeno, azufre y oxigeno y la atmosfera tendría una composición diferente a la actual.
Agar Almidón
Medio usado para identificar microorganismos productores de amilasas. El almidón esta
compuesto por amilosa y amilopectina. Los polisacáridos como el almidón son demasiado
largos para ser transportados al interior de la célula, entonces los microorganismos excretan
amilasas que hidrolizan estos polímeros hasta monosacáridos que pueden usarse como
sustratos para crecer. La actividad amilolítica es revelada colocando al medio unas gotas de
lugol que forma un complejo con la amilosa y tiñe el almidón de azul y deja un halo claro en
el lugar donde el almidón fue digerido enzimáticamente.
Gelosa Gelatina
Medio usado para poner de manifiesto organismo productores de proteasas. La gelatina es
una proteína que tiene la capacidad de gelificar, cuando es hidrolizada por la gelatinasa de
los aminoácidos que la componen pierde su característica de gelificar.
Gelosa Sangre
Medio enriquecido y diferencial usado para cultivar microorganismos aerobios y anaerobios
y determinar la utilización de fosfolípidos.
Hemolisis alfa: Se produce con una coloración verdosa alrededor de la colonia debido a la
hidrolisis de los enlaces éster-fosfato.
Hemolisis beta: Se pone de manifiesto por un halo transparente alrededor de la colonia
provocada por la lisis completa de los eritrocitos, esto se debe a la hidrolisis de los enlaces
éster.
Hemolisis gamma: No utiliza los fosfolípidos membranales de los eritrocitos. Ausencia halo.
Resultados
Leche Tornasolada
Informe/cuestionario
Llene las tablas siguientes
Hidrólisis de la gelatina en tubo
Crecimiento Hidrólisis
Microorganismo 48 h 48 h
Escherichia coli + -
Bacillus subtilis + +
Pseudomonas aeruginosa + +
Salmonella thypi + -
Proteus vulgaris + -
Klebsiella pneumoniae + -
Shigella flexneri + -
Staphylococcus aureus + +
Hidrólisis de fosfolípidos
Microorganismo Crecimiento Agar yema de huevo Gelosa sangre
Escherichia coli + - hemólisis
Bacillus subtilis + + hemólisis
Pseudomonas aeruginosa + + ó
Salmonella thypi + - ó
Proteus vulgaris + - ó
Klebsiella pneumoniae + - ó
Shigella flexneri + - ó
Staphylococcus aureus + + ó
Las enzimas extracelulares que rompen proteínas se llaman proteasas, las que rompen
polisacáridos glicosidasas y las que rompen lípidos esterasas.
V muchas enzimas extracelulares son hidrolíticas, pero no todas las enzimas hidroliticas son
extracelulares.
V Las peptidasas son enzimas extracelulares que hidrolizan proteínas de lato peso
molecular.
Conclusión:
Si sabemos presuntivamente que tipo de metabolismo tiene los microorganismos que
queremos sembrar e identificar podemos escoger el medio para que su crecimiento sea
favorable y que tenga los nutrimentos y/o sustancias para diferenciarlos.
Bibliografía: