INFORME DE PRÁCTICA #1

PREPARACIÓN DE LA FASE MÓVIL E IDENTIFICACIÓN DEL

ADSORBENTE DE LA FASE ESTACIONARIA EN CROMATOGRAFÍA DE
CAPA FINA.

Angela Pérez; Raquel López; Nombre APELLIDO3

Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Escuela de Ciencias Básicas,
Tecnología e Ingeniería – ECBTI. Cromatografía. Grupo # (1) CEAD: Jose
Acevedo y Gomez. Bogotá - Colombia.
Sesión (1): 03, Marzo de 2018
Entrega informe: 24, Marzo de 2018

Estudiante Correo electrónico Código

Angela
[email protected] 1057591006
Pérez
Raquel
[email protected] 1053584796
López
Nombre
ejemplo @unadvirtual.edu.co
APELLIDO 3

RESUMEN
En cromatografía, la separación de mezclas se logra gracias a su exposición
en un sistema de dos fases (generalmente una es móvil y la otra
estacionaria), la cual puede presentarse como líquido – líquido, gas – líquido,
gas – sólido y líquido – sólido. Por su parte, en cromatografía en capa fina se
emplea como fase estacionaria alúmina (Al2O3) o gel de sílice (ácido silícico,
SiO2•H2O) en diferentes soportes y una fase móvil orgánica; la alúmina y el
gel de sílice actúan del mismo modo, ya que su función es generar la
separación por la retención de los diferentes componentes de una mezcla en
su superficie por la combinación e intensidad con la que actúan los ácidos y
bases de Lewis.
Palabras claves: Cromatografía, Fase Móvil, Fase estacionaria, alúmina, gel
de sílice.

OBJETIVOS móvil orgánica; la alúmina y el gel

de sílice actúan del mismo modo,
GENERAL
 Emplear diferentes solventes ya que su función es generar la
orgánicos como fase móvil en la separación por la retención de los
cromatografía de capa fina, con diferentes componentes de una
el fin de evaluar la separación mezcla en su superficie por la
en diferentes mezclas. combinación e intensidad con la
que actúan los ácidos y bases de
ESPECÍFICOS Lewis.

 Determinar las características El tamaño de la alúmina y el gel de

de separación de diferentes
mezclas al variar la composición
sílice incide en la separación de
de la fase móvil en mezclas; si el adsorbente es muy
cromatografía de capa fina. grande se generará una separación
 Identificar las características más rápida, pero hará que el
de separación de diferentes contacto de la fase móvil sea
mezclas en cromatografía de menor, por lo que se presentarán
capa fina. menos puntos de contacto,
MARCO TEÓRICO impidiendo que se presente un
equilibrio en las fuerzas que
En cromatografía, la separación de efectúan la separación y se
mezclas se logra gracias a su disminuya su eficacia. También es
exposición en un sistema de dos importante considerar el tamaño de
fases (generalmente una es móvil y la placa (fase estacionaria), el cual
la otra estacionaria), la cual puede es proporcional al área de contacto
presentarse como líquido – líquido, que tenga con las fuerzas que
gas – líquido, gas – sólido y líquido actúan en la separación de cada
– sólido. Por su parte, en componente de la mezcla, por lo
cromatografía en capa fina se que a mayor longitud de la placa,
emplea como fase estacionaria se presentará una mejor
alúmina (Al2O3) o gel de sílice separación.
(ácido silícico, SiO2·H2O) en
diferentes soportes y una fase
En cuanto a la fase móvil que fina es que los resultados se
corresponde por lo general a pueden aplicar para análisis en
solventes orgánicos, su efectividad cromatografía de columna; también
radica en la elución que se se destaca el corto tiempo que se
presente en la fase estacionaria, a requiere para un ensayo, el cual
los adsorbentes y a las polaridades, oscila entre los 10 y 30 minutos; y
por lo que los compuestos de la la mejor resolución que se logra
mezcla más polares serán lo que versus la técnica de cromatografía
más firmemente se unan a la fase de columna.
estacionaria y su acción dependerá
del nivel de polaridad de la fase La cromatografía de capa fina
móvil. requiere de pocos materiales como:
placas (fase estacionaria),
El orden de elución de compuestos, aplicador capilar, disolvente o
es inverso a la capacidad que estos mezcla de disolventes (fase móvil),
tengan para unirse con el cámara para el desarrollo de la
placa, cámara de revelado (físico:
adsorbente, por lo que se debe
lámpara de UV; o químico: cámara
tener en cuenta la disminución en
de yodo o ácido sulfúrico).
la fuerza de unión: sales > ácidos
orgánicos > aminas > alcoholes >
compuestos carboxílicos > arenos PARTE EXPERIENTAL
> haluros de alquilo > éteres >
alquenos > alcanos. Por su parte, MATERIALES
el poder eluyente es otro de los Vasos de precipitado; probetas;
aspectos a tener en cuenta al Placas de gel de sílice. Aplicador
momento de realizar una capilar (Tubo capilar). Mechero.
separación: ácido acético > agua > Cámara cromatográfica. Cámara de
alcohol etílico > acetona > acetato revelado con Yodo. Lápiz de grafito.
de etilo > dietiléter > 3 probetas de 10 mL. Erlenmeyer
diclorometano > cloroformo > 25 mL. Lámpara de luz UV. Regla.
tolueno > benceno > hexano > Tijeras. Corcho. Pinzas. Papel filtro.
pentano. 5 Vasos de precipitado de 10 mL.
4 Vasos de precipitado de 25 mL.
Algunas de las ventajas de realizar Gotero. 3 pipetas aforadas de 10
ensayos por cromatografía de capa
mL. Pipeteador. Plancha de
calentamiento. Parte 3 Preparación de las
muestras
REACTIVOS
En el desarrollo de esta práctica se Tabla 2 Muestras
emplearon reactivos de grado Agregar 4 g Agregar 2
analítico comercial como: Tolueno. gotas
Diclorometano. Éter etílico.
Pentano. Vainilla. Benzaldehído. Tubo vainilla Diclorometano
Cloroanilina. Cristales de Yodo. 1

PROCEDIMIENTO
Tubo Benzaldehído Diclorometano
Parte 1 Preparación de placas y
2
capilares
1. Cortar placas de gel de sílice
2. Preparar aplicaciones
1. Preparar muestra problema
1cm
Agregar 0.5 ml
AL2O3 Tubo 3 Hexano
0,5 cm (Agitar al
Parte 2 Preparación de la fase finalizar)
móvil
Diclorometano
Tabla1 Mezcla de solventes
Disolvent Vaso1 Vaso Vaso Vaso 4
e (ml) ensay 2 3 Ensayo
o1 ensa ensa 4
yo 2 yo 3
Parte 4 Aplicación de las muestras
Tolueno 5 2,5 1

Diclorome 2,5 2,5

tano

Éter 2,5 4 Benzaldehído

etílico
Vainilla Muestra problema
Parte 5 Preparación cámara Método Químico: Revelado con
Cromatografica cristales de yodo
Ensayo1 Para el revelado de las placas se
opta por el método químico
1. Adicionar dos cristales de
Placa Fase estacionaria yodo en un vaso de
Puntos de aplicación de muestras precipitados.
2. Tapar el recipiente con vidrio
Fase móvil 5 ml Tolueno
reloj.
Ensayo 2 3. Esperar hasta ver un color
visible en el vaso.
4. Destapar el recipiente
Placa Fase estacionaria 5. Introducir placa
cromatografíca y tapar con
Puntos de aplicación de muestras vidrio reloj.
Fase móvil 2.5 ml Tolueno, 2.5 diclorometano 6. Retire placa cuando se
observe una coloración
Ensayo 3
oscura sobre estas.
7. Tapar inmediatamente.
8. Marcar con lápiz la posición
Placa Fase estacionaria
de las muestras
Puntos de aplicación de muestras
Parte 7 Cálculo del factor de
Fase móvil 2.5 ml diclorometano, 2.5 éter etílico retención.
Ensayo 4 Y= Recorrido de la fase móvil
X= Recorrido de la muestra
Placa Fase estacionaria 𝑋
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑡𝑒𝑛𝑐𝑖ó𝑛(𝑅𝐹 ) =
𝑌
Puntos de aplicación de muestras
Fase móvil 1 ml Tolueno, 4ml éter etílico 𝑅𝐹 (Optimo)= 0.3-0.7
RESULTADOS Y CÁLCULOS
Parte 6 Revelado de las placas
Calculo de Factor de la retención
Método físico: Lámpara de la luz
UV. Ensayo 1 Tolueno
Datos:
y=4,5cm x1=5,0cm
x1=0,5cm x2=5,1cm
x2=no hay ascenso x3=5,1cm
x3=2,7cm Factor de retención:
Factor de retención: 5,0𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥1 = = 0,90
0,5𝑐𝑚 5,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥1 = = 0,1
4,5𝑐𝑚
5,1𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥2 = = 0,92
2,7𝑐𝑚 5,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥3 = = 0,6 5,1𝑐𝑚
4,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥3 = = 0,92
5,5𝑐𝑚
Ensayo 2 tolueno +diclorometano
Ensayo 4 Tolueno+éter etilico
Datos:
Datos:
y=4,5cm
y=4,5cm
x1=0,7cm
x1=4,0cm
x2=1,6cm
x2=3,1cm
x3=1,0cm
x3=3,8cm
Factor de retención:
0,7𝑐𝑚 Factor de retención:
𝑅𝐹𝑥1 = = 0,15 4,0𝑐𝑚
4,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥1 = = 0,88
4,5𝑐𝑚
1,6𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥2 = = 0,35 3,1𝑐𝑚
4,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥2 = = 0,68
1,0𝑐𝑚 4,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥3 = = 0,22 3,8𝑐𝑚
4,5𝑐𝑚
𝑅𝐹𝑥3 = = 0,84
4,5𝑐𝑚
Ensayo 3 diclorometano+éter
etílico
Datos: ANÁLISIS DE RESULTADOS
y=5,5cm Ensayo 1 Tolueno
El factor de retención o también optimo, esto se debe a la polaridad
llamado factor de Capacidad de la fase móvil está por debajo de
describe las velocidades de la polaridad de los eluyentes
migración de los solutos en las (muestras) y para la realización de
columnas. Para este ensayo este tipo de análisis la polaridad de
teniendo como fase móvil el la fase móvil debe ser más alta que
tolueno se observa que el factor de la del eluyente (muestra).
retención de la muestra 3 es de 0,6
Ensayo 4 Tolueno+éter etilico
lo que quiere decir es un factor
optimo, dando a entender que la Para este ensayo se puede deducir
velocidad de migración del soluto que la muestra 2 tiene un factor de
es la deseada, mientras que para retención optimo dando a entender
las muestras 1 y 2 el factor de que la polaridad de la fase móvil es
retención es menor a 0,3 lo que más alta que la del eluyente
nos indica que la velocidad de (muestra 2), mientras que las
migración de estas muestras no es muestras 1 y 3 tienen un factor de
la esperada o que la fase móvil no retención alto dando a entender
es la ideal para este tipo de que la polaridad de la fase móvil es
muestras. menor que la del eluyente
(muestras 1 y 3).
Ensayo 2 tolueno +diclorometano
Podemos concluir que la retención
Para este ensayo se encuentra que
se puede explicar en base a la
la muestra 2 tiene un factor de
competencia que se establece entre
retención optimo mientras que las
el soluto a separar y la fase móvil
muestras 1 y 3 se encuentra con
por adsorberse a los centros
factor de retención bajo lo que
activos polares de la fase
indica que la polaridad de la fase
estacionaria. Así, las moléculas de
móvil no es la adecuada para este
soluto se encuentran adsorbidas en
tipo de muestras, dado que la
la fase estacionaria y a medida que
polaridad de la fase móvil debe ser
se produce la elución van siendo
mas alta que la polaridad del
desplazadas por la fase móvil y por
eluyente (muestras).
tanto los solutos más polares
Ensayo 3 diclorometano+éter quedarán más retenidos puesto
etilico que se adsorben más firmemente a
los centros activos de la fase
Pata este ensayo se encuentra que
estacionaria, mientras que los no
todas las muestras tienen un factor
de retención por encima del
polares se eluirán con mayor
facilidad.
La naturaleza del disolvente
también es un factor determinante
dado que para un mismo
compuesto, un aumento en la
polaridad del disolvente facilita su
desplazamiento en la placa.
CUESTIONARIO
¿Cuáles son los factores se deben
tener en cuenta para tener una
separación cromatográfica exitosa?
¿Qué es un cromóforo?
¿Por qué la cámara cromatográfica
se debe cubrir con papel filtro?
¿Qué es polaridad y qué relación
tiene con los ensayos de
cromatografía de capa fina?
Clasifique las muestras analizadas
de la más polar a la menos polar.
CONCLUSIONES
 Generalmente, las
conclusiones son la respuesta
al cumplimiento de los
objetivos.

ANEXOS
(Adicionar las fotos del laboratorio)
BIBLIOGRAFÍA
Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo
Cromatografía (pp. 8-27). Bogotá, Colombia: UNAD - Universidad Nacional
Abierta y a Distancia. Recuperado de http://hdl.handle.net/10596/9904
- Mora, J., Gras, L., Maestre, S., & Todolí, J. L. (2005). Separación de los
Componentes de una Mezcla. En: TD, Textos Docentes. Introducción a la
experimentación en química analítica (pp. 146-152). Alicante, España:
Publicaciones de la Universidad de Alicante. Recuperado
de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2081/ps/i.do?p=GVRL&sw=w&u=unad&v=2.1&it=r&id
=GALE%7CCX1834000020&asid=1436d7e16957eaf025288bfe0e3e5c49