Nombre Del Alumno: Toral García Jorge Mario: Cromatografía en Placa Fina y Columna
Nombre Del Alumno: Toral García Jorge Mario: Cromatografía en Placa Fina y Columna
Nombre Del Alumno: Toral García Jorge Mario: Cromatografía en Placa Fina y Columna
Grupo: 2IM09
OBJETIVOS ALCANCES METAS
Interpretación
Seleccionar el Tomar
de los
disolvente o precauciones
resultados.
mezcla de ellos adecuadas y
para efectuar el evitar accidentes.
desarrollo de la
cromatografía
Purificar
compuestos
orgánicos
mediante placas
preparativas
Determinar el Rf
de
las sustancias
separadas
Cromatografía:
La CCF es una técnica analítica y tiene como objetivo el análisis de una mezcla de
componentes.
El proceso es similar a la cromatografía de papel con la ventaja de que se
desarrolla más rápidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir
entre diferentes adsorbentes. La CCF es una técnica estándar en el laboratorio de
química orgánica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo
para monitorizar las reacciones químicas y también para el análisis cualitativo de
los productos de una reacción, puesto que permite conocer de manera rápida y
sencilla cuántos componentes hay en una mezcla
Procedimiento
Una placa de CCF es una lámina de vidrio, metal o plástico recubierta con una
capa delgada de un sólido adsorbente (gel de sílice o alúmina). Se deposita una
pequeña cantidad de la muestra problema en disolución en un punto en la parte
inferior de la placa.
A medida que el eluyente pasa por el lugar donde está la mancha de la mezcla
problema se establece un equilibrio entre las moléculas de cada uno de los
componentes en la mezcla que son adsorbidas y las que se encuentran en
disolución.
Si los compuestos son coloreados se pueden observar las manchas a simple vista.
Si no es así, hay varios métodos para visualizar las manchas correspondientes a
cada componente de la mezcla.
Cuando son visibles, se puede determinar para cada una de las manchas el valor
de Rf (factor de retención), o la distancia que cada compuesto se desplaza en la
placa. Cada compuesto tiene un Rf característico que depende del disolvente
empleado y del tipo de placa de CCF utilizada, pero es independiente del recorrido
del disolvente. De esta manera se puede ayudar a identificar un compuesto en una
mezcla al comparar su Rf con el de un compuesto conocido (preferiblemente
cuando se hacen eluir en la misma placa de CCF).
Cromatografía en columna
Es una técnica de purificación, puesto que permite aislar los compuestos
deseados de una mezcla.
Procedimiento
La polaridad del eluyente afecta las velocidades relativas con las que los
diferentes componentes de la mezcla se mueven en la columna. Los disolventes
polares compiten más eficientemente con las moléculas polares de una mezcla
por los lugares polares del adsorbente. Por lo tanto, un disolvente polar desplazará
las moléculas, incluyendo las más polares, rápidamente a través de la columna. Si
el disolvente es muy polar la elución será muy rápida y generalmente habrá poca
separación de los componentes de la mezcla. Si por el contrario el disolvente es
muy apolar, no eluirán los compuestos de la columna. Por lo tanto, la elección del
eluyente es crucial para el éxito de la cromatografía en columna. A menudo se
utiliza un gradiente creciente de polaridad para la elución. La CCF se utiliza para
determinar y elegir el sistema solvente adecuado para cada separación.
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
CROMATOGRAFIA EN PLACA
MATERIAL A UTILIZAR:
Aplicadores
Porta objetos (placa) - cromatoplaca
Disolventes (A,B,C)
Placas
Cámara cromatografica- frascos de gerber
Vasos de precipitado (3)
CROMATOGRAFIA EN
1.-preparacion de los aplicadores.
Técnicas cromatográficas
3. Cromatografía en Columna.
Se utilizan columnas de vidrio rellenas de Alúmina (Al2O3), Sílica u Oxido
de Magnesio. La fase estacionaria esta constituida por un sólido poroso, el
cual queda soportado en el interior de una columna generalmente fabricada
en plástico o vidrio. La fase móvil se encuentra formada por la solución que
lentamente va atravesando la fase estacionaria. La solución que sale al final
de la columna se reemplaza constantemente por nueva solución que se
suministra desde un contenedor por la parte superior de la columna.
La migración de las sustancias de la mezcla a través de la columna se
encuentra retardada en diferente grado por las interacciones diferenciales
que cada una de ellas pueda ejercer con la fase estacionaria. Las
sustancias se separan gradualmente formando bandas dentro de la banda
total, la separación, y por tanto la resolución, aumenta con la longitud de la
columna. La banda individual de cada sustancia puede ensancharse con el
tiempo debido a procesos difusiónales, disminuyendo por tanto la
resolución.
4. Cromatografía de gases.
Se utiliza para la separación de sustancias gaseosas. La Fase Móvil es un
Gas (llamado Gas Portador) y la Fase Estacionaria puede ser un sólido
(Cromatografía Gas-Sólido) o una Película de líquido de alto punto de
ebullición (Generalmente Polietilén-Glicol o Silicón) recubriendo un sólido
inerte (Cromatografía Gas-Líquido).
El cromatógrafo de gases esta constituido normalmente por un suministro y
una entrada del gas portador, un puerto de inyección, una columna
normalmente localizada en el interior de una cámara termostatizada
(horno), un detector y un sistema computarizado para analizar, registrar e
imprimir el cromatógrama. La muestra se introduce a través del sistema de
inyección dentro de la columna que es el sitio donde ocurre la separación.
La columna de aluminio, acero inoxidable, vidrio o teflón contiene la fase
estacionaria sólida o líquida y esta sujeta a la superficie por un soporte que
es generalmente de sílice.
La fase móvil o gas portador transporta los componentes de la muestra a
través de la columna, por esta razón debe ser inerte para evitar
interacciones con la muestra o la fase estacionaria, y ser capaz de
minimizar la difusión gaseosa.
Al final de la columna existe el detector que permite la detección y
cuantificación de las sustancias, midiendo conductividad térmica y
electronegatividad de las sustancias eluídas. Se produce una señal tipo
eléctrico, que posteriormente se amplifica por un registrador grafico o un
integrador permitiendo indicar el momento en que salen de la columna los
componentes. La salida de la sustancia se registra en un cromatógrama
en forma de picos y se determinan medidas como la altura y el área del
pico.
8. Cromatografía de Afinidad.
La Cromatografía de Afinidad permite la separación de mezclas proteicas
por su afinidad o capacidad de unión a un determinado ligando. En este
caso, las proteínas que se retienen en la columna son aquellas que se unen
específicamente a un ligando que previamente se ha unido covalentemente
a la matriz de la columna.
Conclusiones de la práctica:
Se definió el concepto de cromatografía y se aplicó en la purificación de
compuestos, así como se indicó en qué consiste la cromatografía de
adsorción.
Se estableció la relación y la diferencia que existe entre la cromatografía en
placa fina y la preparativa, también se concretó el conocimiento de la
polaridad en una sustancia y su influencia en la cromatografía, el cual nos
dice que la fuerza con que es absorbido un componente depende de la
polaridad de éste, de la actividad del absorbente y de la polaridad de la fase
móvil. En general, cuando más polar sea un compuesto, es más fácilmente
absorbida.
Se definió y se entendió el concepto y la determinación del Rf de las
sustancias separadas
Se desarrolló la cromatografía en placa y en columna para poder separar
los colores que contenía un colorante.
Conclusión general:
Después de la realización de esta práctica de la interpretación de los resultados
obtenidos, se concluye que por medio de la cromatografía es posible identificar los
componentes de una mezcla, además de que se trabajó con soluciones polar, no
polar y medianamente polar, las cuales nos indican que las soluciones polares son
mejores en el empleo de esta práctica para poder observar los espectros y así
calcular el Rf.
Observaciones:
Al realizar la práctica al utilizar las soluciones pudimos notar que la solución C era
la solución polar, ya que esta pudo desplazar el colorante de manera uniforme en
la placa cromatográfica, la solución B no desplazó nada el colorante, y la Solución
A lo desplazó dejando pequeñas marcas en la placa
El gis al utilizar la solución C desprendió un pequeño color amarillento que se
desplazó hasta el final
Al realizar la cromatografía en columna y al poner el colorante junto con la
solución C, el colorante se separó en 3, dos eran tono de azul muy parecidos y
había uno color morado.
Bibliografía:
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html#simple
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/cromatografa
http://es.wikipedia.org/wiki/Polaridad_(qu%C3%ADmica)
Hernández Luna Heliodoro. (2007). 4° edición, Química orgánica experimental a
escala semi micro y fundamentos de la espectroscopia. IPN, México, Pp. 119-133.