GLUTICID BioproductoABaseDePseudomonaAeruginosa EN TOMATE

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ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN

Efecto de un bioproducto a base de Pseudomona aeruginosa


en el cultivo del tomate (Solanum licopersicum Mill)

The effect of a Pseudomona aeruginosa-based bioproduct


on a tomato crop (Solanum licopersicum Mill)

Elein Terry Alfonso1, Josefa Ruiz Padrón2, Tamara Tejeda Peraza3

Resumen

El uso de bioproductos se incrementa gradualmente en la agricultura de países que propugnan un cambio ha-
cia un modelo en armonía con el medioambiente. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la respuesta
del cultivo del tomate a la aplicación del bioproducto Gluticid®, obtenido a partir de metabolitos activos de
Pseudomona aeruginosa. Los experimentos se desarrollaron en áreas experimentales del Instituto Nacional de
Ciencias Agrícolas (INCA) de Cuba, y se estudiaron cinco tratamientos, cuatro con la aplicación de Gluticid®
y un tratamiento testigo (sin aplicación del producto). Los tratamientos con Gluticid® (5 g.L-1), se realizaron
imbibiendo las semillas con el producto (15 y 30 min) y a su vez se realizó una segunda aplicación foliar
del bioproducto. En el cultivo se evaluaron algunas variables de crecimiento y desarrollo, y se determinó el
rendimiento agrícola. Los resultados mostraron la efectividad del bioproducto, destacándose el tratamiento
que recibió la aplicación de Gluticid® una sola vez con 30 min de imbibición, confirmándose la efectividad
de este bioproducto en la obtención de plantas más vigorosas, así como un estímulo en el crecimiento y de-
sarrollo de las plantas con la consiguiente obtención de rendimientos aceptables.
Palabras clave: bioproducto, tomate, crecimiento, desarrollo, rendimiento.

Abstract

Bioproduct use has gradually increased in the agriculture of countries promoting change towards an insecti-
cide model more in harmony with the environment. The present work was aimed at evaluating the response
of a tomato crop to the application of Gluticid® (a bioproduct obtained from Pseudomona aeruginosa, PSS
strain). The experiments were carried out in experimental areas belonging to the Cuban National Institute of
Agricultural Sciences (INCA); five treatments were studied, four involving Gluticid® application and a test
treatment. The Gluticid® treatments were carried out by submerging the seed with the product (15 and 30
minutes) and then a second foliate application of the bioproduct was carried out. Some growth indicators
were evaluated and agricultural yield was determined. The results confirmed the bioproduct’s effectiveness;

1 Dra.C. Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas (INCA) Carretera de Tapaste km 3 ½. San José de las Lajas. La Habana, Cuba.
E-mail: [email protected].
2 MsC. Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas (INCA) E-mail: [email protected]
3 MsC. Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas (INCA). E-mail: [email protected]

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a single application of Gluticid® involving 15 minutes’ submersion stood out as being the most effective
treatment. This confirmed this bioproduct’s effectiveness in obtaining vigorous plants and obtaining accep-
table yields.
Key words: Bioproduct, tomato, growth, development, yield.

Recibido: febrero 26 de 2010 Aprobado: abril 19 de 2010

Introducción es el hierro, que convertido en sideróforo (mo-


léculas de bajo peso con afinidad a hierro (III)
La agricultura ha de estar siempre en
quelado) por ciertas cepas bacterianas está más
armonía con la naturaleza para mantener un
disponible para la planta, reduciendo el uso de
equilibrio entre la producción de alimentos y
fertilizantes minerales (Hernández et al., 2004).
la conservación de los recursos naturales. En
la naturaleza todo se recicla, y como la materia De este género existen cepas patogénicas
no se destruye —sólo se transforma— la uti- y saprofíticas, debido fundamentalmente a su
lización de productos y residuos biológicos es gran diversidad genética. De aquí la importan-
una gran alternativa para la producción agrícola cia de trabajar con su parte activa, es decir, con
que deberá utilizar procesos o productos que los metabolitos secundarios que al parecer son
no sean dañinos para el medioambiente (Mor- los responsables de los efectos benéficos en
te, 2009). plantas por lo que, al eliminar la célula se evita
Los llamados bioproductos o bioinsumos cualquier problema de índole ecológico.
agrícolas son productos económico y ambien-
En el mundo, el hecho de usar metaboli-
talmente aceptables, ya que además de reducir
tos activos de Pseudomona sp como activadores de
costos, contribuyen a la obtención de produc-
diferentes mecanismos en las plantas no es una
ciones inocuas así como a mejorar la fertilidad
temática ampliamente abordada, algunos auto-
nativa del suelo, de ahí la importancia de poten-
res refieren su efectividad sobre todo desde el
ciar su utilización agrícola.
punto de vista de su utilización como biocontrol
Dentro de los bioproductos desarrollados de enfermedades en los cultivos (Prithiviraj et al.,
con gran perspectiva en la actualidad, se en- 2005). En Cuba, a partir de metabolitos activos
cuentran los denominados biofertilizantes, bio- de Pseudomona aeruginosa se obtuvo el producto
estimuladores y bioplaguicidas. En este sentido, de nombre comercial Gluticid®, del cual se ha
son varios los bioproductos elaborados a par- evaluado su efecto en el crecimiento y desarrollo
tir de la bacteria Pseudomona sp; en los últimos de diferentes cultivos agrícolas.
años, esta especie adquiere vital importancia en
estudios relacionados con la agricultura, debido El presente trabajo tuvo como objetivo
fundamentalmente a la producción de una am- evaluar la efectividad del producto comercial
plia gama de metabolitos activos que influyen Gluticid® en plantas de tomate, según su efec-
positivamente sobre el crecimiento y desarrollo to en el crecimiento, desarrollo y rendimiento
saludable de los cultivos. Actúa en las plantas del cultivo.
de dos formas, directamente por la supresión
de patógenos, e indirectamente a través de la
Materiales y métodos
secreción de fitohormonas y vitaminas, o por el
incremento de la absorción de minerales por la El trabajo experimental fue realizado en-
planta. Uno de los minerales más importantes tre los meses de octubre-diciembre de 2008 y

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2009, en el área experimental del Instituto Na- pico (Hernández, 1999). La caracterización de
cional de Ciencias Agrícolas (INCA), ubicado un perfil de este suelo en dos profundidades, se
en San José de las Lajas, provincia La Habana, presenta en la tabla 1.
Cuba, en un suelo ferralítico rojo lixiviado tí-

Tabla 1. Características químicas del suelo

Cationes cambiables
Profundidad PH M.O (cmol/kg-1)
Horizonte
(cm) H2O (%)
Calcio Magnesio Sodio Potasio Suma
A11p 0-12 7,5 1,61 16,0 2,0 0,1 0,5 18,6
B11t 12-22 7,4 1,67 17,5 2,5 0,1 0,5 20,6

El producto comercial Gluticid® fue ob- 5. Testigo sin inocular


tenido en el Instituto Científico de Investiga-
DDS: días después de la siembra
ciones de los Derivados de la Caña de Azúcar
(Icidca) en Cuba, mediante proceso biotecno- Las atenciones culturales (fertilización,
lógico a partir de la bacteria Pseudomona aerugino- riego y labores fitotécnicas) realizadas al culti-
sa cepa PSS, aislada del suelo (Patente Número vo fueron las recomendadas por el Instructivo
2085 Certificado 1079/ 2002) (Icidca, 2007). técnico del mismo (Cuba, MINAG, 1984).
Para el desarrollo del experimento se
utilizó la variedad de tomate Mara, proce- Evaluaciones realizadas
dente del Programa de Mejoramiento Ge-
Análisis químico del suelo: los muestreos
nético del INCA, y generalizada en el país.
de suelos se realizaron al inicio de los experi-
Las plántulas se produjeron en bandejas de
mentos con barrena edafológica. Las evalua-
poliespuma conformadas por una mezcla de
ciones que a continuación se enumeran fueron
suelo, cachaza y litonita (3:2:1) en condicio-
realizadas siguiendo las técnicas descritas en el
nes semicontroladas. La plantación se realizó
Manual de técnicas analíticas para el análisis de
por el método de trasplante de cepellones, a
suelo, foliar, abonos orgánicos y fertilizantes
una distancia de 1,40 x 0,30 m en parcelas de
químicos (INCA, 1999).
35 m2, con un área de cálculo para la cosecha
de 21 m2. • Materia orgánica (%): por el método de
Walkley y Black.
La tecnología de utilización del biopro-
ducto consistió en una suspensión de 108 ufc/ • pH (H2O): por el método potenciomé-
mL-1, a una dosis de 5 g/L-1, dando lugar a los trico.
siguientes tratamientos:
• P2O5 (ppm): mediante extracción con
1. 15 min de imbibición H2SO4 0,1 N y determinación colorimé-
trica.
2. 15 min de imbibición + 1 aplicación
foliar a los 10 DDS • K, Ca, y Mg intercambiables (cmol/
kg-1): mediante extracción con NH4Ac
3. 30 min de imbibición
1 N a pH 7 y determinación de K por
4. 30 min de imbibición + 1 aplicación fotometría de llama y Ca y Mg por com-
foliar a los 10 DDS plexometría.

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Evaluaciones a las plantas Para las evaluaciones en semillero se siguió
un diseño completamente aleatorizado con 15
• Crecimiento y desarrollo: altura de las
repeticiones, los tratamientos llevados al cam-
plántulas (cm), número de hojas por
po se distribuyeron en un diseño de bloques al
planta, diámetro del tallo (cm) y longitud
azar con cinco réplicas por tratamientos. Los
radicular (cm).
resultados experimentales fueron sometidos
• Contenidos de NPK foliar (%). Las a Análisis de Varianza de clasificación simple
muestras fueron tomadas en la fase de (semillero) y doble (campo), y en los casos que
floración-fructificación del cultivo, entre existieron diferencias significativas entre las
el tercero y quinto par de hojas. Se utili- medias de los tratamientos se utilizó como cri-
zó la técnica por digestión húmeda con terio discriminante la Prueba de Rangos Múl-
H2SO4 + Se, según método Kjeldahl y tiples de Duncan al 5%. Se utilizó el programa
determinación colorimétrica con reacti- SPSS (versión 9.0).
vo Nessler y azul de molibdeno para N y
P respectivamente, y fotometría de llama
Resultados y discusión
para el K.
La primera evaluación realizada a los 7
• En la etapa de floración-fructificación días posteriores a la siembra (tabla 2) no mos-
del cultivo se evaluó: número de racimos tró diferencias significativas entre los diferentes
y frutos por planta. tratamientos evaluados para las variables altura
• En la cosecha se evaluó la masa fresca y número de hojas por plantas, no obteniéndo-
promedio de los frutos (g) y rendimien- se un efecto positivo de los diferentes tiempos
to agrícola (t.ha-1). de imbibición sobre estos indicadores.

Tabla 2. Efecto del Gluticid® en el crecimiento de las plantas (Primera evaluación)

Tratamientos Altura (cm) Número de hojas.planta-1

15 min de imbibición 6,25 3,17

15 min de imbibición + 1 aplicación foliar 6,33 2,83

30 min de imbibición 7,00 2,67

30 min de imbibición + 1 aplicación foliar 6,67 3,00

Testigo sin inocular 6,83 2,92

ES x 0,37 n.s 0,24 n.s

En la segunda evaluación, realizada a los del producto en la plántula, observándose ma-


15 días posteriores a la siembra (tabla 3), co- yor vigor con respecto a las plantas testigo.
mienzan a diferenciarse significativamente los
tratamientos, siendo mayor la altura de las plan- Las bacterias pertenecientes al género
tas y la longitud radicular en aquellas donde la Pseudomonas sp poseen la propiedad de producir
semilla fue imbibida durante 30 min, y se reali- diferentes sustancias, cuyas principales ventajas
zó una aplicación foliar a los 10 días posteriores son las de estimular la germinación de las semi-
a la siembra. En la figura 1 se aprecia el efecto llas, acelerar el crecimiento de las plantas espe-

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Figura 1. Efecto del producto Gluticid® en plántulas de tomate.

cialmente en sus primeros estadios, inducir la monal como auxinas, giberelinas y citoquininas,
iniciación radicular e incrementar la formación pero también producen sustancias de otro tipo
de raíces y pelos radiculares, según indicaron como aminoácidos y promotores específicos
Ezziyyani et al. (2005). Las principales sustan- del crecimiento.
cias estimuladoras producidas son de tipo hor-

Tabla 3. Efecto del Gluticid® en el crecimiento de las plantas (segunda evaluación)

Número de hojas. Longitud radicular


Tratamientos Altura (cm)
planta-1 (cm)
15 min de imbibición 9,50c 3,08bc 6,14c
15 min de imbibición + 1 aplicación foliar 13,87b 3,42ab 8,23b
30 min de imbibición 10,21c 2,83bc 8,14b
30 min de imbibición + 1 aplicación foliar 16,58a 3,83a 10,26a
Testigo sin inocular 9,08c 2,50c 5,15d
ES x 0,68*** 0,21*** 0,04***

Medias con letras comunes no difieren significativamente para p<0,001.

Sin embargo, para la variable número de que las bacterias de este grupo tienen la capa-
hojas, igualmente la imbibición durante 30 min, cidad de crecer colonizando los órganos de las
más la aspersión foliar, tuvo mayor efecto, aun- plantas tales como raíces y tubérculos, utilizan
que en este caso no difirió significativamente un gran número de sustratos orgánicos co-
del tratamiento donde se imbibió durante 15 múnmente encontrados en exudados radicales,
min con una aplicación foliar. y producen una gran variedad de metabolitos
secundarios. Walker et al. (2004), han demostra-
El género Pseudomonas sp presenta propie- do que en la colonización radicular, P. aeruginosa
dades que lo ubican dentro de las PGPR (Plant forma biofilmes que confieren resistencia con-
Growth Promoting Rhizobacteria), debido a tra los antibióticos segregados por las raíces.

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Igualmente, otros estudios han demos- rianos que hayan sido reconocidos por la plan-
trado que Pseudomonas aeruginosa cepa IE6, co- ta hospedera.
loniza las raíces de las plantas y promueve su
En la evaluación de alguno de los com-
crecimiento, es supresora de Fusarium solani y
ponentes del rendimiento del cultivo (tabla 4)
Rhizoctonia solani en tomate, a través del secues-
se encontró que, para el número de racimos,
tro de hierro en el suelo, según ha sido demos- con sólo la imbibición durante 15 o 30 min se
trado por Díaz de Villega et al. (2002). Por otra estimula este parámetro del rendimiento, no
parte, la inoculación de P. aeruginosa en el culti- siendo así para el número de frutos por planta,
vo del tomate (van Wess, 1999) demostró que la masa fresca de los frutos y el rendimiento
la cepa 7NSK-562 no produce ácido salicílico agrícola donde, el hecho de imbibir las semillas
ni sideróforos del tipo piochelin, por lo que la durante 30 min, más la aspersión foliar, pro-
respuesta en el cultivo podría estar relacionada voca un efecto positivo en cada una de estas
con la presencia de otros determinantes bacte- variables.

Tabla 4. Efecto del Gluticid® en el rendimiento y algunos de sus componentes

Número de Número de frutos. Masa fresca Rendimiento


Tratamientos
racimos. planta-1 planta-1 promedio. fruto-1 (g) (t/ha-1 )

15 min de imbibición 4,92b 10,33d 78,33d 20,44d

15 min de imbibición
4,75b 13,08c 80,14c 23,05c
+ 1 aplicación foliar

30 min de imbibición 6,83a 15,25b 85,33a 28,02b

30 min de imbibición
7,50a 17,33a 83,67b 30,55a
+ 1 aplicación foliar

Testigo sin inocular 5,25b 15,33b 85,23a 27,66b

ES x 0,55** 1,10*** 34,65*** 0,97***

Medias con letras comunes no difieren significativamente para 0,01 p<0,001

En estudios realizados con diferentes respetuosos con el medioambiente), la cual es


cepas de Peudomonas sp, se ha demostrado que del todo atractiva y supondría, al mismo tiem-
producen sideróforos y ácido salicílico, com- po, una alternativa biológica, ambiental y co-
puestos que podrían estar involucrados en la mercialmente viable (Walker et al., 2004).
respuesta en el estímulo del crecimiento y desa-
rrollo de las plantas así como con la inducción
de resistencia a la presencia de patógenos (Her- Conclusiones
nández et al., 2002). Se demuestra el efecto positivo del pro-
Respecto a la utilización de microorganis- ducto Gluticid®, a base de Pseudomona aeruginosa,
mos benéficos o los metabolitos activos de es- sobre el crecimiento, desarrollo y rendimiento
tos, se plantea la idea de acelerar la respuesta de del cultivo del tomate, siendo favorecido este
las plantas mediante la aplicación de inductores efecto por dos vías diferentes de aplicación:
de resistencia sistémica (bióticos o abióticos, la imbibición de las semillas durante 30 min,

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combinado con la aspersión foliar a los 10 días thianum (Sacc.Y Magnus). Revista Mexicana de Fito-
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