Analisis 2 Transi Whort

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UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

Análisis Clínicos II
PRACTICA N ° 5
TEMA: “TRANSAMINASAS – GOT Y GPT”

DOCENTE: Mg. Enrique León Mejía


[email protected]

TURNO: NOCHE CICLO: VII

INTEGRANTES:

FECHA DE LA PRÁCTICA: 03-08-2021


FECHA DE ENTREGA: 10-08-2021

2021-II

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ÍNDICE
Pag

I. INTRODUCCIÓN………………………………………………… 1

II. MARCO TEÓRICO..........................................................................................2


III. PARTE EXPERIMENTAL...............................................................................6
IV. RESULTADOS .............................................................................................14
V. INTERPRETACIÓN.......................................................................................16
VI. CUESTIONARIO...........................................................................................17
VII. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA..............................................................19

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INTRODUCCION
Las transaminasas son enzimas que cumplen una función metabólica en el
interior de las células. Estas enzimas se encuentran presentes en el tejido de
muchos órganos (hígado, corazón, riñones, músculos, etc.). El nivel de
concentración de las transaminasas en la sangre refleja la actividad del hígado
y del corazón.

Las transaminasas más importantes

Las 2 transaminasas más importantes son:

• La Transaminasa Glutamicopirúvica (GPT) o Alanina Aminotransferasa (ALT).


• La Transaminasa Glutámico-oxalacética (GOT) o Aspartato Aminotransferasa
(AST).

El aumento de estas enzimas en la sangre indica la existencia de una lesión


celular en el hígado, el corazón, los riñones o en los músculos.

GPT ó ALT

La enzima ALT (GPT) se encuentra principalmente en el hígado y en los


riñones y, en una pequeña cantidad, en los glóbulos rojos y en los músculos
estriados.

GOT ó AST

La enzima AST (GOT) se encuentra específicamente en los músculos

estriados, en los glóbulos rojos y en el hígado. Valores normales de

transaminasas

Los valores normales de transaminasas pueden variar según el laboratorio


donde se realicen los análisis de sangre. Los valores de transaminasas varían
según el sexo, la edad, la temperatura corporal y el índice de masa corporal.
Los valores normales de transaminasas en el hombre varían entre 10 y 40 UI/L,
aunque en algunos laboratorios varían entre 6 y 60 UI/L. En el caso de la
mujer, el valor normal de transaminasas es menor que en el hombre.

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II. MARCO TEÓRICO
Las transaminasas forman un importante eslabón entre el metabolismo de los
prótidos y el de los glúcidos y se hallan ampliamente distribuidos en todos los
tejidos. La alanina- transaminasa (TGP) y la aspartato- transaminasa existen
normalmente en el plasma, bilis, LCR y saliva, pero no en la orina. El
mecanismo de excreción es desconocido. La aspartato- trasaminasa (TGO) es
más abundante en todos los tejidos humanos que la alanina –trasaminasa, la
TGO del suero están elevadas en las enfermedades hepatobiliares y
cardiovasculares, en las miopatías y en otras afecciones diversas. Los niveles
de TGP se encuentran elevados en suero de enfermos hepáticos. Estas
enzimas canalizan reacciones de transaminación de tipo reversible.

Las Transaminasas son enzimas que se producen en las células de distintas


partes del cuerpo, sobre todo en el hígado, pero también en los músculos, los
riñones, el corazón o el cerebro. Su función es la de intervenir en la producción
de diversos aminoácidos, las pequeñas moléculas de las proteínas que son
necesarias para el desarrollo del organismo. Aunque su trabajo se realiza
dentro de las células también son liberadas a la sangre.

Sus niveles en sangre se pueden descubrir a través de un análisis bioquímico


rutinario. Si están elevadas suele ser indicativo de algún proceso inflamatorio
en el hígado (hepatitis), ya que esta inflamación destruye células hepáticas que
liberan transaminasas en la sangre.

Entre las pruebas que informan de lesión hepatocelular o citólisis destacan las
transaminasas o aminotransferasas. Éstas representan enzimas del
metabolismo intermedio, que catalizan la transferencia de grupos amino del
ácido aspártico o alanina al ácido acetoglutárico, formando ácido oxalacetato y
ácido pirúvico. En el hígado se producen múltiples reacciones de
transaminación, pero las únicas transaminasas con valor clínico son dos:

• Aspartato-aminotransferasa o transaminasa glutámicooxalacética (AST o


GOT) cuya vida media es de 48 horas.

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• Alaninoaminotransferasa o transaminasa glutámico-pirúvica (ALT o GPT)
con una vida media de 18 horas.
La ALT es más específica de daño hepático que la AST, debido a que la
primera se localiza casi exclusivamente en el citosol del hepatocito, mientras
que la AST, además del citosol y mitocondria, se encuentra en el corazón,
músculo esquelético, riñones, cerebro, páncreas, pulmón, eritrocitos y
leucocitos. La elevación sérica de transaminasas se correlaciona con el vertido
a la sangre del contenido enzimático de los hepatocitos afectados, aunque la
gradación de la elevación enzimática puede no relacionarse con la gravedad
lesional. Así, pues, se puede considerar la enfermedad hepática como la causa
más importante del aumento de la actividad de la ALT y frecuente del aumento
de la actividad de la AST.

Las transaminasas tienen acción eminentemente intracelular por lo que la


actividad sérica en condiciones normales es baja o nula. Un aumento de la
actividad será evidencia de un deterioro de los tejidos en que se encuentran, de
los cuales resultan particularmente importante el corazón y el hígado.

La Transaminasa Oxalacético Glutámico (GOT) es una enzima bilocular, es


decir, se encuentra tanto en el citoplasma como en las mitocondrias. La GOT
cataliza l transferencia del grupo amino del L-Aspartato al ácido α-cetoglutárico
formando el ácido glutámico y oxalacetato. Esta enzima se encuentra en
concentraciones muy elevadas en el corazón y en el hígado y en cantidades
menores en el riñón, músculo esqueleto, páncreas, bazo y pulmón. Su
concentración en los componentes de la sangre es elevada en el corazón y en
el hígado y en cantidades menores en el riñón, músculo esqueleto, páncreas,
bazo y pulmón. Su concentración en los componentes de la sangre es elevada
en el caso de los eritrocitos, plaquetas y leucocitos.

La transaminasa Pirúvico Glutámico (GPT) es una enzima unilocular,


encontrándose fundamenta mentalmente a nivel citosólico en el hepatocito, lo
que explica su mayor especificidad. La actividad sérica en condiciones
normales es baja o nula. Un daño o enfermedad en cualquiera de estos tejidos
conduce a un aumento en los niveles séricos. Ambas están presentes en suero
en concentraciones inferiores a 30-40 UI/l, aunque el valor considerado como
normal varía entre laboratorios, y se debería ajustar según sexo e índice

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corporal, presentando también algunas diferencias étnicas. Son marcadores
sensibles de lesión hepática, pero sólo la GPT es específica.
Los valores normales para la ALT (GPT según la nomenclatura antigua),
oscilan entre 5,0 y 50 U/l y para la AST (GOT) son entre 5 y 40 U/l, con los
matices que introduzca el laboratorio local. En los recién nacidos se observan
valores dobles debido a sus hepatocitos todavía inmaduros.

En los adultos las transaminasas son más altas en el hombre que en la mujer.
Hasta los 15 años la GOT es ligeramente más alta que la GPT y
posteriormente, la GOT tiende a ser más baja hasta aproximadamente los 60
años en que tienden a igualarse. Además, la GPT tiene variación diurna (45%)
siendo más alta en la tarde y más alta en la tarde y más baja en la noche y la
GOT suele elevarse con el ejercicio vigoroso; ambas pueden elevarse con el
incremento de la GPT y una causa común de aumento de la GOT. En la
mayoría de las hepatopatías la GPT es más alta que la GOT siendo la relación
mayor del (Uno) a excepción de la enfermedad avanzada, o con daño
mitocondrial (enfermedad de reye, enfermedad grasa del embarazo, por
ejemplo) o en la hepatopatía alcohólica.

VARIACIONES DE LAS TRANSAMINASAS

Puede estar elevada por enfermedades diferentes a la enfermedad hepática.

Por ejemplo, a menudo la AST es alta durante.

Un infarto del miocardio.

 Desórdenes en los músculos


 En muchos casos de inflamación del hígado, las ALT y AST también están
altas.

 En algunas enfermedades, como la hepatitis alcohólica, las concentraciones


de AST pueden ser más altas que las de ALT.

La elevación plasmática de las transaminasas es un indicador sensible de daño


hepatocelular, aunque no específico. Prácticamente cualquier enfermedad
hepática que comporte un daño necroinflamatorio puede ser la causa.

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El aumento de transaminasas en sangre aparece cuando existe daño de la
membrana celular y no siempre requiere la necrosis de los hepatocitos.
Existen variaciones de la normalidad: el límite superior de normalidad es más
alto en personas de raza negra, hispanos y varones; además este límite se
eleva con la edad y el peso corporal. Valores inferiores al doble de la cifra
considerada normal pueden no tener importancia clínica una vez descartados
los procesos apuntados en la siguiente tabla que incluye las causas más
frecuentes.

PRUEBAS PARA EL ESTUDIO DE LAS TRANSAMINASAS ANAMNESIS

 Antecedentes familiares de hepatopatía crónica (enfermedad de Wilson).


 Antecedentes personales: transfusiones, drogas i.v., viajes a áreas
endémicas, contacto con hepatitis, manipulaciones dentales, prácticas
sexuales de riesgo (hepatitis vírica); consumo de alcohol, exposición a
tóxicos, obesidad, hiperlipidemia, diabetes, insuficiencia cardíaca congestiva,
neoplasias o síndrome mieloproliferativo.

 Síntomas y signos: fiebre, anorexia, pérdida de peso, dolor, prurito.

EXPLORACIÓN FÍSICA

Se deben buscar signos como: ictericia, estigmas cutáneos de hepatopatía


crónica, anillos de Kayser-Fleischer, hepatomegalia, esplenomegalia, ascitis y
edemas, xantomas, xantelasmas, soplo en HCD, localidad neurológica,
asterixis, señales de rascado, hematomas. Algunos de ellos son orientadores:

PRUEBAS DE LABORATORIO.

Primer paso: hemograma, bioquímica, estudio de coagulación, proteinograma y


serología hepatitis B y C.

Segundo paso: ceruloplasmina sérica, Anticuerpos antinucleares (ANAs),


Anticuerpos anti-mitocondriales (AMA), alfa1- antitripsina, Anticuerpos
antiendomisio y antigliadinas, ferritina y saturación de transferrina. Estas
pruebas pueden incluirse en el primer paso si la historia clínica es sugestiva de
alguna etiología relacionada.

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TÉCNICAS DE IMAGEN

 Ecografía abdominal: sirve para evaluar el tamaño, morfología y


ecogenicidad del hígado, el calibre y contenido de la vía biliar, los vasos
hepáticos y explorar la existencia de tumores o ascitis.

 TAC, RMN

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III. PARTE EXPERIMENTAL

Materiales

Gradillas Pipetas automáticas

Tubos de ensayo Centrifuga

Espectrofotómetro

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Reactivos
SUSTRATO GOT Una solución de
ácido DL – aspartato y ácido
alfacetoglutárico bufferada a pH 7.4
Contiene estabilizadores y
perseverantes.

SUSTRATOS GPT Una solución de


DL – alanina y
ácido alfa-
cetoglutárico bufferada a pH 7.4.
Contiene estabilizadores y
perseverantes.

Procedimiento
Agregar 1mL de desarrollar de color.
Mezclar y esperar 20 minutos a temperatura ambiente.
Agregar 10 mL de hidróxido de sodio 0.4N (NaOH 4N diluido con agua 1 en
10).
Mezclar y esperar 15minutos a temperatura ambiente antes de leer.

Leer las transmitancia a 505 nm usando agua destilada como blanco de lectura.
El color es estable durante sólo 30 minutos.

Graficar en papel semilogarítmico los valores de transmitancia en el eje


vertical, y en el eje horizontal las U/mL, GOT o GPT según sea el caso, que se
indica en la tabla superior.

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PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TRANSAMINASA GOT EN SUERO
 Pipetear 0.5 mL de sustrato GOT en un tubo de prueba.

 Incubar a 37ªC durante 5 minutos.

 Agregar 0.1 mL de suero. Comenzar a controlar el tiempo inmediatamente.

 Incubar a 37ºC. Durante 60 minutos, exactamente.

 Al cumplirse los 60 minutos, agregar 0.5 mL de desarrollador de color.


Mezclar y esperar 20 minutos a temperatura ambiente.

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Agregar 5 mL de Hidróxido de Sodio 0.4N (NaOH)4N diluido 1 en 10).
Mezclar y esperar 15 minutos antes de leer.

 Leer la absorbancia a 505 nm usando agua destilada como blanco. Tener


en cuenta que el color es estable durante 30 minutos solamente.

 Obtener el valor de Unidades/mL de GOT a partir de la curva de GOT de


calibración, graficada según instrucciones previas.

Nota: El tiempo de incubación referido en el punto 4 podrá reducirse a 30


minutos, si la cantidad de suero que se agrega (ver punto 3) es de 0.2 Ml.
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TRANSAMINASA GPT EN SUERO.
 Pipetear 0.5 mL de Sustrato GPT en un tubo de prueba.

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ncubar a 37ªC. Durante 5 minutos.

 Agregar 0.1 mL de suero. Comenzar a controlar el tiempo inmediatamente.

Incubar a 37ª C durante 30utos,


min exactamente.

 Al cumplirselos 30 minutos,agregar0.5 mL de desarrollador


de color.
Mezclar y esperar 20 minutos a temperatura ambiente.

 Agregar 5 mL de hidróxido de sodio 0.4 N (NaOH 4N diluido 1 en 10).


Mezclar y esperar 15 minutos a temperatura ambiente.

 Leer la absorbancia a 505 nm usando agua destilada como blanco. Tener


en cuenta que el color es estable durante 30 minutos solamente.

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Obtener el valor de Unidades/mL de GPT a partir de la curva GPT de


calibración, graficada según instrucciones previas.

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IV. RESULTADOS

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Concentración de las transaminasas
Absorbancia

15.65 U/L
GOT: 0.079
24.39 U/L
GPT: 0.080

GOT: 0.111 --------22 GPT: 0.082-----------25

0.079 ------- X 0.080 -X

GPT: 24.39 U/ L
GOT: 15.65 U/L

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V. INTERPRETACIÓN

 El valor obtenido en GOT, 15,65 U/L. Su nombre completo es aspartato


aminotransferasa y en condiciones normales su nivel en sangre es inferior
a 40 UI/l (puede variar según el laboratorio). Por lo tanto, se encuentra
dentro de los valores normales.

 Pero consideremos que su valor en sangre puede aumentar por diversas


causas, como, por ejemplo: suelen estar relacionados con problemas en el
hígado. Desde problemas menores como hígado graso o consumo
excesivo de alcohol hasta otros más graves como cirrosis o hepatitis
(inflamación del hígado). Fármacos tóxicos para el hígado, Pancreatitis.

 En el caso del valor de GPT es 24,39 U/L; y el Valor normal entre 0 y 41


U/L así que también se encuentra dentro de los valores normales.

 Es importante resaltar que, los altos valores de esta enzima no es una


enfermedad, sino un síntoma o indicio de una patología hepática.

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VI. CUESTIONARIO

1. Considera que las globulinas pueden interferir el dosaje de albúmina


por el Método de verde de bromocresol.

El verde bromocresol posee especificidad para la albumina, y no sufre


interferencias por valores elevados de bilirrubina y hemoglobina, permitiendo
también que los valores elevados de triglicéridos puedan ser corregidos
utilizando el blanco de muestra.

2. ¿Cómo se determinan las globulinas en el laboratorio? A su criterio


cual es el mejor método para determinar globulinas.

Son determinadas mediante los métodos de:

Examen de proteínas totales: Este examen mide dos tipos de proteína:


globulina y albúmina. Si los niveles de proteínas están bajos, usted podría tener
una enfermedad del hígado o de los riñones.

Electroforesis de proteínas en suero: Este análisis de sangre mide las


gammaglobulinas y otras proteínas. Se puede usar para diagnosticar muchas
enfermedades, por ejemplo, trastornos del sistema inmunitario y un tipo de
cáncer llamado mieloma múltiple

La electroforesis en albumina esa opinión el examen más completo; se realiza


si hay sospecha que tiene un trastorno causado por formas anormales de
hemoglobina (hemoglobinopatía). Existen muchos tipos diferentes de
hemoglobina (Hb). Los más comunes son HbA, HbA2, HbE, HbF, HbS, HbC,
HbH y HgbM.

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Algunas personas también pueden tener pequeñas cantidades de HbF. Este es
el tipo principal de hemoglobina en el cuerpo de un recién nacido. Asimismo,
ciertas enfermedades están asociadas con niveles altos de HbF (cuando la
HbF corresponde a más del 2% de la hemoglobina total).

Otras moléculas de Hb anormales y menos comunes causan anemias.

3. ¿Cuál es la importancia clínica de la determinación de las globulinas?

El examen de proteína total mide la cantidad total de dos clases de proteínas


encontradas en la porción líquida de la sangre: albúmina y globulina. Las
proteínas son partes importantes de todas las células y tejidos. La albúmina
ayuda a impedir que se escape líquido fuera de los vasos sanguíneos. Las
globulinas son una parte importante del sistema inmunitario.

4. ¿Cuál es el fundamento para la determinación de Albumina?

Los métodos comúnmente utilizados se basan en la unión de albúmina a


colorantes o indicadores, siendo el más común el que utiliza verde de
bromocresol.

El sistema de medición se basa en la desviación del pico de absortividad


máxima de un colorante complejo (verde de bromocresol) cuando se liga a la
albúmina. El color formado es medido colorimétricamente entre 600 y 640 nm,
siendo proporcional a la cantidad de albúmina en la muestra hasta la
concentración de 6,0 g/dL.

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VII.REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

• ARGÜELLES Guillermo, Fundamentos de Hematología. Editorial Médica


Panamericana, Madrid (España), 3° edición, 2003.

• HENRY John B. El Laboratorio del Diagnóstico Clínico. Vol. I y II. Ed.


Marbán. 2005.
• L. Lesmes Molto. M.R. Albañil Ballesteros. Aumento aislado de
transaminasas aproximación diagnóstica. Form Act Pediatr Aten Prim.
[internet] 2013 [citado el 26 de febrero del 2021] 6(1) 35-42. Disponible
en: https://fapap.es/files/639-898-RUTA/FAPAP1_2013_05.pdf

• V. F. Moreira y A. López San Román. Enfermedad de Wilson. Revista


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febrero del 2021] vol.102. Disponible en:

http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S113001082010
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hep%C3%A 1tica.

• Aiquel F. Manual de análisis clínicos. 6a ed. Buenos Aires: Médica


panamericana; 1999.

• Gónzales De Buitrago JM. Técnicas y métodos de laboratorio clínico. 2a


ed. Barcelona: Masson; 2005.

• Muñoz J. Fundamentos y técnicas de análisis hematológicos y


citológicos. Madrid: Masson; 2005.

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