Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • 20 vistas

    Reporte 3

    Cargado por

    Sophia Vázquez
    Este documento describe un procedimiento de laboratorio para realizar la tinción de Gram. El objetivo es diferenciar bacterias gram positivas de gram negativas mediante la aplicación de colorantes y reactivos. Explica los pasos para teñir muestras de Escherichia coli y Staphylococcus sp. usando cristal violeta, yodo, alcohol-acetona y safranina. La tinción de Gram es una herramienta fundamental en microbiología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    Reporte 3

    Cargado por

    Sophia Vázquez
    20 vistas4 páginas
    Este documento describe un procedimiento de laboratorio para realizar la tinción de Gram. El objetivo es diferenciar bacterias gram positivas de gram negativas mediante la aplicación de colorantes y reactivos. Explica los pasos para teñir muestras de Escherichia coli y Staphylococcus sp. usando cristal violeta, yodo, alcohol-acetona y safranina. La tinción de Gram es una herramienta fundamental en microbiología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

    Descripción original:

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Este documento describe un procedimiento de laboratorio para realizar la tinción de Gram. El objetivo es diferenciar bacterias gram positivas de gram negativas mediante la aplicación de colorantes y reactivos. Explica los pasos para teñir muestras de Escherichia coli y Staphylococcus sp. usando cristal violeta, yodo, alcohol-acetona y safranina. La tinción de Gram es una herramienta fundamental en microbiología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    20 vistas4 páginas

    Reporte 3

    Cargado por

    Sophia Vázquez
    Este documento describe un procedimiento de laboratorio para realizar la tinción de Gram. El objetivo es diferenciar bacterias gram positivas de gram negativas mediante la aplicación de colorantes y reactivos. Explica los pasos para teñir muestras de Escherichia coli y Staphylococcus sp. usando cristal violeta, yodo, alcohol-acetona y safranina. La tinción de Gram es una herramienta fundamental en microbiología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    de 4

    Centro de Ciencias Básicas

    Departamento de Microbiología

    Practicas de Laboratorio de Microbiología

    Carrera Médico Veterinario Zootecnista

    Profesor: L.A.Q.B. Rosa Isela Chávez Gómez

    Apoyo Técnico: D. En C. David Alejandro Hernández Marín

    QUINTO SEMESTRE

    Reporte 3

    TINCIÓN DIFERENICAL DE GRAM

    Sophia Guadalupe Herrada Vázquez

    Paola Ponce López

    Alejandro Lara Jaime


    PRACTICA No 3. TINCIÓN DIFERENICAL DE ZIEHL-NEELSEN
    Objetivos:
    1. Realizar correctamente un frotis y teñirlo por el método de Gram.
    2. Explicar la utilidad e importancia de la tinción de Gram.

    Fundamento:
    La tinción de gran, descubierta hace poco más de 100 años por Hans Christian Gram, es
    una de las tinciones diferenciales de mayor importancia en los laboratorios de
    bacteriología. El cristal violeta (violeta de genciana) sirve como tinción primaria, uniéndose
    a la pared celular bacteriana después del tratamiento con una solución débil de yodo, lo
    cual sirve como mordiente para la unión del colorante. Algunas especies bacteriana, debido
    a la naturaleza química de su pared celular, tienen la capacidad de retener el cristal
    violeta aún después del tratamiento con un decolorante orgánico, como la mezcla de partes
    iguales de alcohol etílico al 95% y acetona. Las bacterias que retienen el colorante de ven
    azul/negro cuando se observan con el microscopio y se denominan grampositivas. Ciertas
    bacterias pierden la tinción primaria con cristal violeta cuando son tratadas con el
    decolorante, quizá debido al alto contenido lipídico de su pared celular. Estas bacterias
    decoloradas captan la contra tinción con safranina y se ven de color rojo cuando se
    observan con el microscopio y se denominan gramnegativas.
    Material y reactivos:
    1. Microscopio.
    2. Portaobjetos.
    3. Aceite de inmersión.
    4. Asa bacteriológica.
    5. Mechero.
    6. Reactivos para la coloración de Gram: Cristal violeta, Yodo de Gram, alcohol
    acetona y safranina.
    7. Cultivos bacterianos (Staphylococcus sp y Escherichia coli).
    Metodología:
    1. Prepare un frotis bacteriano de los cultivos proporcionados de la siguiente manera:
    cerca de uno de los extremos del portaobjeto prepare un pequeño frotis de E. coli,
    en el otro extremo del portaobjetos prepare otro de Staphylococcus sp.
    2. fijar al calor.
    3. Colocar el portaobjetos sobre la bandeja de coloración.
    4. Agregar cristal violeta, dejándolo reaccionar por un minuto.
    5. Descartar el exceso de colorante y lavar con agua brevemente y con suavidad.
    6. Aplicar el Yodo de Gram, dejándolo reaccionar por un minuto.
    7. Descartar el reactivo y lavar con agua.
    8. Agregar con mucho cuidado, gota a gota, la solución decolorante (alcohol-acetona)
    hasta que las gotas de la solución ya no arrastren color. .
    9. Lavar con agua.
    10. Finalmente cubra el portaobjetos con la solución de safranina (colorante de
    contraste) dejándola reaccionar de 30 segundos.
    11. Lavar con agua.
    12. Secar y observar al microscopio con el objetivo de inmersión.
    13. Hacer esquemas de lo observado para cada una de las cepas proporcionadas.
    Resultados

    Discusión:
    Para el Doctor las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan
    en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Desde hace mas de
    un singlo han ayudado a resolver problemas de etiología microbiana, de igual manera,
    para la Doctora Herrera (2014) la tinción de Gram se considera básica en la valoración
    inicial de muestras para análisis bacteriológico.
    Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los
    diferentes infecciosos agentes infecciosos, en los que se incluyen bacterias, parásitos y
    hongos, como futuros médicos es nuestra responsabilidad conocer la importancia de cada
    tinción, las diferencias y en qué situaciones se pueden y deben de usar cada una para
    poder tener los resultados correctos y esperados.

    Conclusión:
    Las tinciones utilizadas en el laboratorio de microbiología permiten el diagnóstico oportuno
    y sugerente de los agentes infecciosos, por lo que juegan un papel importante en la decisión
    del tratamiento inicial de las enfermedades. Se debe practicar la tinción adecuada de
    acuerdo con el agente infeccioso en sospecha y el tipo de muestra clínica. Las tinciones son
    herramientas elementales, vigentes y de uso universal que ayudan al diagnóstico
    microbiológico.

    Cuestionarios:
    1. ¿Qué es una tinción diferencial?
    Tinción que reacciona diferente ante distintos microorganismos, se usa para diferenciar,
    clasificar bacterias.
    2. ¿Qué ventajas tiene esta sobre la tinción simple?
    El colorante utilizado pone de manifiesto diferencias entre células bacterianas o entre
    partes de una misma célula a diferencia de la tinción simple usa el colorante que sirve para
    detonar solo la morfología celular.
    3. ¿Por qué en la tinción de Gram se tiñen unas bacterias de color violeta y otras de
    color rojo?
    Las Gram positivas se tiñen de azul violeta gracias a su resistencia a la decoloración, las
    capas de peptidoglicano y su compuesto CV-I demasiado grande para escapar.
    Las Gram negativas se tiñen de rojo por su membrana soluble, solventes orgánicos,
    lipopolisacáridos, sus capas de peptidoglicanos fina y porque retiene la safranina.
    4. ¿Cuál es el papel del Yodo en la tinción de Gram?
    El Yodo funge el papel de mordiente (fijador de color) e impedirá la salida de cristal
    violeta mediante la formación de un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios
    del péptidoglicano presente en la pared bacteriana.
    5. Señale ¿En qué casos se prefiere utilizar tinción simple y en cuáles tinciones
    diferenciales?
    Las tinciones simples se usan solo pare detonar la morfología celular.
    Las tinciones diferenciales son técnicas en donde se utilizan mas de un colorante o bien,
    ciertos reactivos complementarios para la tinción, por ejemplo, tinción de gran y tinción de
    Ziehl-Neelsen.
    6. ¿Qué función tiene la safranina en la tinción de Gram?
    La safranina es un colorante secundario o de contra tinción el cual se encarga de teñir las
    bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo.

    Bibliografía:
    11_Tinción simple | Media Campus. (s. f.). UNAM. Recuperado 21 de marzo de 2022, de

    https://mediacampus.cuaieed.unam.mx/node/4243

    A. (2020, 17 diciembre). Tinción de Gram. EduLabC. Recuperado 21 de marzo de 2022, de

    https://edulabc.com.mx/tincion-de-gram/

    C. (2021, 22 junio). ¿En qué consiste la tinción de Gram? canal SALUD. Recuperado 21

    de marzo de 2022, de https://www.salud.mapfre.es/pruebas-diagnosticas/otras-

    pruebas-diagnosticas/tincion-de-

    gram/#:%7E:text=La%20tinci%C3%B3n%20de%20Gram%20es%20un%20tipo%2

    0de%20tinci%C3%B3n%20que,t%C3%A9cnica%20se%20denominan%20Gram%

    20negativas.

    También podría gustarte