8

Biotecnología Industrial

https://www.differencebetween.com/difference-between-bioreactor-and-vs-fermentor/

Introducción a los Bioprocesos

2022
Departamento de Ingeniería Química
Universidad Nacional del Sur 1
Productos de Biocatálisis

Biotransformación Bioproceso
Sustrato Células Productos de las células

Biomasa Aditivos alimenticios

Antibióticos
Sustrato modificado
Alcohol
Enzimas
Productos químicos
2
Productos de Biocatálisis

Metabolitos Primarios
✓ Síntesis: fase exponencial de crecimiento (trofofase)

✓ Esenciales

✓ Productos finales del catabolismo anaeróbico

(etanol, ácido láctico, ác. butírico, etc.)

✓ Intermediarios del metabolismo primario

(aminoácidos, nucleótidos, vitaminas, etc.)

✓ Contribuyen a la producción de biomasa y energía

3
Productos de Biocatálisis

Metabolitos Secundarios
✓ Síntesis: fin de la fase exponencial – etapas tempranas de la fase

estacionaria (idiofase)
✓ No esenciales para el crecimiento y la reproducción

✓ No se producen siempre

✓ Compuestos más complejos (antibióticos, toxinas, etc.)

✓ Regulación enzimática independiente

✓ La producción puede perderse fácilmente por mutación espontánea

(conservación cepa) 4
Crecimiento Batch

Metabolito Primario Metabolito Secundario

5
Metabolitos Primarios y Secundarios

Estacionaria

Concentración de Metabolitos
Log Número de Células

Metabolito
Primario
Metabolito
Lag Secundario

Tiempo (Horas)
Esenciales para el crecimiento
6
Esenciales para sobrevivir
Características de Microorganismos de Uso Industrial

✓ Crecimiento rápido
✓ Producción en corto tiempo
✓ Alto rendimiento
✓ Crecimiento en medios económicos
✓ No patógeno
✓ Tamaño grande
✓ Genéticamente estable
✓ Susceptible a manipulación genética

7
Medios de cultivo a escala industrial
Suelen ser complejos
Bajo costo
Residuos o efluentes carbonosos de otras industrias
Disponibles en el mercado local
Biorrefinerías Integradas

- Granos, melazas, celulosas, suero de queso, licor de maceración de maíz, residuos

agroindustriales, glicerol, vinazas de destilerías, torta proteica, etc.
8
 Paso 1
Selección/aislamiento Esquema de un bioproceso a
de la cepa
escala industrial
Paso 2 Preservación de la cepa
Erlenmeyer
Cultivo/crecimiento del
Paso 3 inóculo Cultivo de esporas
en medio sólido
Paso 4 Pre-fermentación del
cultivo Batch
Aeróbico
Paso 5 Biorreactor Continuo
Anaeróbico
Fed-Batch
Cizalla líquida
Remoción
de sólidos Cizalla sólida
Física
Recuperación y Agitación con abrasión
purificación del Aislamiento Congelado-descongelado
Paso 6 producto Disrupción
primario del
producto celular Detergentes
Shock osmótico
Química
Tratamiento alcalino
Tratamiento enzimático

Precipitación
Aislamiento y purificación Filtración
del producto
Centrifugación
Extracción líquido-líquido

Físico Cromatografía

Tratamiento Ultrafiltración
Paso 7 Químico
de efluentes Secado
Biológico 9
Rao, D.G. (2010). Introduction of Biochemical Engineering Cristalización
Biorreactor o Fermentador

10
Biorreactor o Fermentador

Dispositivo donde se cultivan

microorganismos, células animales o
vegetales para la obtención de un
producto o servicio deseado

Ambiente controlado, uniforme y

adecuado para maximizar la producción
con el menor costo posible
https://www.medicalexpo.es/prod/sartorius
-group/product-69922-508790.html

11
Reactores: Clasificación

12
Biorreactor o Fermentador

✓Sistema de Mezclado: minimizar los gradientes de

concentración de nutrientes

✓Sistema de Termostatización Limitantes para el

diseño a escala
✓Sistema de Oxigenación industrial

✓Sistema de Esterilización

✓Sistema de Control y Automatización (pH, O2, To, agitación)

13
Reactores: Forma

Tanque Tubular

Motor Alimentación

Camisa
refrigerante

Deflector

Agitador

Producto
14
Reactores: Aireación

Aeróbicos Anaeróbicos

Motor Alimentación

Camisa
refrigerante

Deflector

Agitador

Producto
15
Transferencia de O2

Ecuación de Diseño para Aireación

Tasa de Captación de O2 Tasa de Transferencia de O2

OUR = OTR

Coeficiente de transferencia
Concentración de de O2 [h-1]
biomasa [g DW L-1]
X qO2 = KLa (C*-CL) [O2] actual en el
Tasa específica de captación medio [mg L-1]
de O2 [mol (g DW h)-1] [O2] de saturación
[mg L-1]

16
Transferencia de O2

17
A tener en cuenta…

Requerimientos particulares de las células/microorganismos

cultivados y del producto target:

-Demanda de O2
-Requerimientos de transferencia de calor
-Sensibilidad al esfuerzo cortante (cizallamiento)
-Sensibilidad a variaciones locales dentro del reactor
-Requerimientos específicos para ingredientes farmacéuticos
altamente potentes
18
Tipos de Biorreactores: Tanque Agitado

Mecanismo de agitación mecánico interno

Ventajas
Motor
Antiespumante
Nutrientes o
inóculo
✓Alta flexibilidad de operación
Ácido-base ✓Pueden proveer altos KLa
✓Usados comercialmente a µ altas (~2000 cp)
Chaqueta
refrigerante
Desventajas
Baffle
✓Mecánicamente complejos
Agitador
✓Volúmenes de hasta 400 m3
✓Alto estrés hidrodinámico
Difusor
✓Difíciles de limpiar
✓> contaminación en operaciones extendidas
Aire
comprimido
Tubo de Aplicaciones
cosecha
✓Producción de antibióticos, vacunas
Vol. de trabajo ≈ 75 % 19
Tipos de Biorreactores: Tanque Agitado

20
Tipos de Biorreactores: Tanque Agitado

Agitador centrado
Un deflector
19 s de mezclado

Agitador centrado
Sin deflector
80 s de mezclado

Agitador descentrado
Sin deflector
45 s de mezclado

21
Tipos de Biorreactores: Columna de Burbujas

✓Estructura sencilla
✓Agitación por inyección de aire
✓Adecuado rendimiento de transferencia
de materia y calor
✓Bajo estrés hidrodinámico
✓Bajo costo
✓No apto para medios viscosos

Aplicaciones
✓Producción de levaduras de
panificación, cerveza, vinagre, etc.
✓Tratamiento de aguas residuales. 22
Tipos de Biorreactores: Air-Lift

✓Estructura sencilla
✓Agitación por inyección de aire
✓Separación física de las corrientes ascendentes y
descendentes
✓Adecuada transferencia de materia y calor
✓Bajo estrés hidrodinámico
✓Células libres o inmovilizadas
✓Fluidos más viscosos que columna de burbujas

Aplicaciones
✓Cultivo de células animales, vegetales, microalgas
✓Producción de proteínas unicelulares, tratamiento de aguas residuales. 23
Tipos de Biorreactores: Air-Lift

Fermentador con agitación más grande del mundo

Proteínas unicelulares
Fuente de C y E = metanol
Volumen de trabajo = 2000 m3
Imperial Chemical Industries (ICI), UK

24
Tipos de Biorreactores: Fotobiorreactores

Desafío en el diseño de FBR

↓ volúmenes oscuros
25
Tipos de Biorreactores: Fotobiorreactores

26
García Prieto (2018)
Tipos de Biorreactores: Fotobiorreactores

27
García Prieto (2018)
Modelado de Fotobiorreactores

𝑑𝑋
= 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝑓 𝑁 𝑓 𝐼 𝑋
𝑑𝑡
𝐶𝑂2 𝑁𝑂3
𝑓 𝑁 = min ,
𝐾𝑆𝐶𝑂2 + 𝐶𝑂2 𝐾𝑆𝑁𝑂3 + 𝑁𝑂3

𝑰𝒐𝒑𝒕
𝐼𝑜 𝐼𝑜
𝑓 𝐼 = exp 1 −
𝐼𝑜𝑝𝑡 𝐼𝑜𝑝𝑡
𝒇 𝑰

𝐼 1 − 𝑒𝑥𝑝 −𝐾𝑒 𝑑 𝑋
𝐼𝑜 =
𝐾𝑒 𝑑 𝑋
𝑰 [Ly día-1]

28
Tipos de Biorreactores: Lecho Fijo

Productos
y material no
reaccionado para
separación
-Inmovilización química o física

-Mejora significativa la estabilidad enzimática

Enzimas o
células sobre -Mejora procesos de separación
soporte

Aplicaciones
Difusor
producción industrial de productos
químicos, farmaceúticos, alimentos,
Medio de cultivo tratamiento de residuos
29
Tipos de Biorreactores: Lecho Fluidizado

Productos

El flujo de gas hace

que las partículas se
comporten como un
fluido

Plato
difusor

Lecho en Lecho con Sustratos

Partículas catalíticas flujo de gas
reposo del tamaño de granos
de arena

30
Tipos de Biorreactores: Lecho Fluidizado

Biomasa algal
Biorreactor de Lecho empaquetada en
Fluidizado poliuretano

https://ars.els-cdn.com/content/image/1-s2.0-S0196890419301311-ga1_lrg.jpg
31
Biorreactores: Modos de Operación

Fuente: Dochain (2008), Bioprocess Control 32

Modo de Operación: Batch o Discontinuo

V = cte
(F1=F2=0)

✓Composición inicial determina el curso del cultivo

✓ Duración del cultivo depende de las condiciones iniciales

✓ Limitación de [S] fin del batch

✓ Sustancias tóxicas

33
Modo de Operación: Batch o Discontinuo

Desventajas
✓Dificultad para controlar µ

(Δ composición del medio o Δ condiciones del proceso)

✓Altas [S] pueden inhibir µ

(↑ presión osmótica, toxicidad de nutrientes)

✓ Alta demanda de O2 puede generar limitación de µ

(Incapacidad del reactor para transferir más O2)

✓Inconvenientes para remover calor

✓Tiempos muertos entre batch ↓ productividad

34
Modo de Operación: Fed-batch o Semi-continuo

V ≠ cte.
(F1> 0 F2=0)

✓Suministro del nutriente limitante ([S])

✓Controlado por alimentación: cultivo sigue el

curso que le dicta la alimentación

✓Con alimentación controlada: es estado del
cultivo (sensores) controla la alimentación
35
Modo de Operación: Fed-batch o Semi-continuo

✓Objetivo: controlar µ

✓ Elevadas densidades celulares

✓Aumentar el qp (metabolitos secundarios, proteínas

recombinantes) para maximizar el Ysp

✓Evitar efecto osmótico y tóxico de nutrientes

✓ Evita efecto Crabtree

✓Limitar la demanda de O2 del cultivo

36
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

V = cte.
(F1 = F2)

✓Continuo

✓ Cultivo balanceado, crecimiento exponencial

✓ Pérdida de células compensada por crecimiento

✓ Eliminación de sustancias tóxicas

37
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Aplicaciones
✓Sistemas de tratamiento biológico de aguas residuales

✓ Fermentaciones industriales (alcohol, antibióticos,

aminoácidos)
✓ Estudio de los parámetros de crecimiento y las

condiciones de cultivo en la fisiología

38
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Desventajas
✓Inestabilidad genética de la cepa, pérdida de

plásmidos
✓ Contaminación

✓ Imposibilidad de establecer estado estacionario

39
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Balance Global

Entra - Sale = Acumula

𝑑 𝑉𝜌2
𝑭𝟏 𝐹1 𝜌1 − 𝐹2 𝜌2 =
𝑑𝑡
𝜌1 = 𝜌2

𝑭𝟐 𝑑 𝑉𝜌2
=0
𝑑𝑡

𝐹1 = 𝐹2 = 𝐹
40
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Balance de Biomasa
𝑑 𝑋𝑉 𝑑𝑉 𝑑𝑋
𝐹𝑋𝑜 − 𝐹𝑋 + µ𝑋𝑉 − 𝑘𝑑 𝑋𝑉 = =X +V
𝑑𝑡 𝑑𝑡 𝑑𝑡
𝑑𝑉 𝑑𝑋
𝑋𝑜 = 0 =0 =0 𝑘𝑑 ≪ µ
𝑑𝑡 𝑑𝑡

−𝐹𝑋 + µ𝑋𝑉 = 0

𝐹𝑋 = µ𝑋𝑉

𝐹
𝐹 = µ𝑉 ⇒ =𝐷=µ
𝑉
Tasa de Dilución (h-1) 41
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

42
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Estado Estacionario

Concentración biomasa
Zona Zona Zona
1 2 3

D (h-1)

Zona 1: µ > D (Acumula X)

Zona 2: µ=D
Zona 3: µ < D (Lavado) 43
Modo de Operación: Continuo o Quimiostato

Ventana de Operación

DC
44
Biorreactores: Modos de Operación

Fuente: Dochain (2008), Bioprocess Control 45

Biorreactores: Modos de Operación

46
Fermentación en Estado Sólido

Algunos Sustratos utilizados en SSF

Bagazo de caña Residuos de té Salvado de trigo

de azúcar

Cáscara de girasol Pulpa de Torta de

manzana aceite de coco 47
Fermentación en Estado Sólido
maíz agar

Pleurotus ostratus 48
(Gírgolas)
Escalado de Bioprocesos

Escala laboratorio
3 a 10 L Escala industrial

10 000 – 500 000 L

0.25 - 0.5 L

Escala piloto

300 - 3 000 L

49
Escalado de Bioprocesos

Tamaño
(Litros) Producto

1 a 20 000 Enzimas para diagnóstico, sustancias para biología

molecular

40 a 80 000 Algunas enzimas, antibióticos

100 a 150 000 Penicilina, anitibióticos aminoglicósidos, proteasas,
amilasas, transformación de esteroides,
aminoácidos, vino, cerveza

200 000 a 500 000 Aminoácidos (ác. glutámico), vino, cerveza

50
Escalado de Bioprocesos

Naturaleza compleja de los fermentadores industriales

Sistemas a escala pequeña Control por cinética de las rxns biológicas

Sistemas a gran escala Control por cinética de mezclado (transporte)

≠ escalas de tiempo

Cte P/V
“Reglas” Cte KLa
Cte velocidad agitación
Cte tiempo de mezclado combinado con Re
Cte [DO]

51
Escalado de Bioprocesos
CFD
Dinámica de Fluidos Computacional

Tanque agitado Airlift

Aireador Aireador
perforado 1 perforado 2 Membrana
Efecto de la velocidad de gas de entrada
Distribución de gas con diferentes aireadores sobre la velocidad del líquido de
circulación

https://doi: 10.1007/s00449-013-1104-2 https://doi.org/10.1515/ijcre-2016-0173

52
Rango de Bioproductos

-Proteínas recombinantes
-Artemisinina
-Vitaminas
Productos -Antioxidantes
Valor del producto

farmacéuticos -Sabores
-Antibióticos
Productos -Enzimas
nutracéuticos -Bloques elementales
-Etanol
Productos -Solventes
química fina -Aminoácidos

Químicos a granel
y biocombustibles

Volumen del producto

Fuente: Hong & Nielsen, Cell. Mol. Life Sci. (2012) 69: 2671–2690 53
Rango de Bioproductos

54
Bioseguridad

Conjunto de medidas preventivas para reducir la exposición del personal y la

comunidad a agentes potencialmente infecciosos o considerados de riesgo biológico

✓Proteger a los operadores, el ambiente y la salud pública

✓Obtener medios estériles para asegurar el proceso
✓Proteger el cultivo stock de la contaminación
✓Evitar la contaminación por microorganismos no deseados
✓Asegurar la calidad del proceso 55
Bioseguridad

Desarrollo de programas de bioseguridad

✓Entrenamiento de personal
✓Uso de EPP
✓Descontaminación de áreas de trabajo
✓Descontaminación de residuos
✓Eliminación segura de residuos
✓Acceso de personal controlado a laboratorios
✓Diseño adecuado del edificio con separación de áreas de trabajo
✓Control de equipos
✓Procesos operativos estandarizados de sanitización
Desarrollo de programas de calidad
56
Bioseguridad

Esterilización: eliminación o muerte de todos los microorganismos que contiene un objeto o

sustancia.
Desinfección: eliminación de microorganismos patógenos.
Germicidas: agentes que destruyen y matan a microorganismos (Bactericida, fungicida).
Bacteriostático: agentes que inhiben el crecimiento de las bacterias.
Desinfectante: agente que elimina la carga microbiana en superficies inanimadas tales como
mesadas de trabajo.
Antiséptico: agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente
patógenos sobre piel y/o mucosas.

57
Métodos Físicos
Calor

✓Priones

✓Endósporas bacterianas
+
✓Mycobacteria

✓Virus sin envoltura lipídica

✓Hongos

✓Bacterias

✓Virus con envoltura lipídica

-
Resistencia al calor 58
Métodos Físicos
Calor
PTM (Punto de Muerte Térmica)
T° mínima
Mortalidad total
10´

TMT (Tiempo de Muerte Térmica)

Tiempo mínimo
Mortalidad total
T° dada

TRD (Tiempo de Reducción Decimal)

Tiempo [minutos]
↓90% población bacteriana
T° dada
Medida de la R bacteriana 59
Métodos Físicos

Ebullición Calor Húmedo Autoclave

10 minutos Vapor de H2O bajo presión
Bacterias patógenas, virus, Desnaturalización de 1 atm SP = 120°C
hongos y sus esporas proteínas 1.5 atm SP = 127°C
Destrucción de ácidos 15 minutos
Excepciones nucleicos Todos los organismos y
Virus hepatitis 30´ Medios de cultivo, materiales endósporas
termoestables, reactores pequeños
Endósporas termófilos 20 hs Excepción
Pasteurización Priones
Corta duración, alta T
Intercambiador de calor
Ultrapasteurización
Hasta 140 °C
Para mantener sin refrigeración 60
Métodos Físicos

Calor Seco
Flameado Estufas e Incineradores
Laboratorio microbiología 160-180 °C
Oxidación 2 hs 170 °C asegura
Materiales resistentes al calor esterilización
Sustancias no miscibles en agua
Polvos

61
Métodos Físicos
✓ Temperatura refrigeración (0 a -7°C) ↓ crecimiento
Bajas T° ✓ Psicrótrofos
✓ Bacteriostático

✓ Filtros y membranas
Filtración ✓ Poros ≤ 0.2 µm bacterias; ≤ 0.01 µm virus y algunas proteínas.
✓ Medios de cultivo termolábiles, enzimas, vacunas, entrada de gases reactores

✓ Ionizante:-λ < 1 nm, radicales libres, daño ADN

-rayos gamma (60Co), X y haces de e- de alta energía
Radiación
-esterilización de productos farmacéuticos y médicos, y correspondencia
✓ No Ionizante: -λ > 1 nm, enlaces timinas, daño ADN
-rayos UV
-Cámaras de flujo laminar, quirófanos, etc

62
Métodos Químicos
✓Daño de proteínas y ác. nucleicos
✓Alteración de la permeabilidad de la membrana plasmática

Antisépticos
Alcoholes
Iodo
Colorantes
Órgano-Mercuriales

Desinfectantes y/o Esterilizantes

Cloro y Compuestos clorados
Aldehídos y alcoholes
Oxido de Etileno
Compuestos Fenólicos 63
Conservación de Cepas

✓Mantener el cultivo puro

✓Viabilidad por tiempos prolongados
✓Estabilidad genética
Criotubos de -190 °C con crioperlas
Escherichia coli liofilizada

Métodos
✓Subcultivos refrigerados (-2 a 4 °C)

✓Congelación (-20 °C)

✓Ultracongelación (-70 a -160 °C)

Liofilizador
✓Liofilización Freezer -80°C
64
Esterilización Industrial
Todas las etapas de cultivo libres de contaminación
Fermentador
Medio de cultivo y aditivos
Esterilizados
Gases suministrados
Gases de salida

Fermentador/Biorreactor Medio de cultivo Gases suministrados

Gases de salida
✓Limpiabilidad de las ✓Calor
✓Filtración
superficies del reactor (acero ✓Continuo o discontinuo
inoxidable o vidrio) ✓Antes: fibra de vidrio
✓ Filtración para compuestos
✓Superficies lisas termolábiles (Factores de ✓Ahora: membranas (filtros absolutos)
✓Válvulas, sondas, sellos crecimiento) ✓Reactor 50 m3 : 3000 m3/h
✓Spray balls (vapor de agua) ✓Aire: 5-2 000 MO/m3
✓CIP (Tecnología Clean in 50% esporas de hongos
Place) 40% bacterias gram (-)
✓OGM industriales 65
Buenas Prácticas de Manufactura
BPM

Conjunto de Prácticas y Procedimientos

requeridos para cumplir con las pautas recomendadas por las

agencias que controlan la autorización y la concesión de licencias para
la fabricación y venta de productos para el consumo humano
(alimentos y bebidas, cosméticos, productos farmacéuticos,
suplementos dietéticos y dispositivos médicos)

66
Mejoramiento de Índices de Producción

Rendimiento [mol P (mol S)-1] Costo del sustrato

Productividad [mol P g DW h-1] Tamaño del reactor

Título o Concentración [gP L-1] Costo procesamiento aguas abajo

Cepa-Industrial

Cepa-Prueba de Concepto

67
Modificado de Hong & Nielsen (2012), Cell. Mol. Life Sci. 69:2671
Mejoramiento de Cepas para Usos Industriales

Incrementar el rendimiento del producto deseado

Optimizar el Optimizar las

medio de condiciones
cultivo de operación

Modificar
genéticamente la
cepa

¡Hasta alcanzar targets de producción! 68

Mejoramiento de Cepas para Usos Industriales

Incrementar el rendimiento del producto deseado

Selección natural
selección de mutantes desregulados

Mutaciones inducidas
Alteran el ADN en forma aleatoria
Mutágenos químicos Mutágenos físicos
ácido nitroso, Radiación ionizante (rayos gamma, X)
N-nitrosoguanidina (NTG) Radiación no ionizante (UV)

Ingeniería Metabólica
Modificación del metabolismo de un organismo por ingeniería
genética introduciendo, eliminando o regulando genes
69
Mejoramiento de Cepas para Usos Industriales

sustrato sustrato

producto
producto
WT OGM 70

70
Tecnología del ADN Recombinante

ADN Gen de la Hormona de

recombinante Crecimiento

Gen de la
Hormona de
Crecimiento
Célula Humana Recombinación
Extremos
del ADN
complementarios Inserción
del ADN
Bacteria
Cromosoma
bacteriano

Bacteria
Plásmido
recombinante 71
Tecnología del ADN Recombinante

Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

ADN original a ser
replicado

ADN cebador
Nucleótidos

1 Desnaturalización a 94-96 oC Thermus aquaticus

Taq Polimerasa
2 Unión del cebador a 68 oC
Temp. óptima 75 - 80 °C
3 Elongación a 72 oC 1000 bp < 10 segundos
72
 Promotor Gen de la Promotor Gen de la
β-galactosidasa β-galactosidasa
Insertar los genes para
1 cada uno de los
Gen de la Gen de la
Insulina
polipéptidos de la insulina
Insulina
Subunidad A Subunidad B al lado de un gen que es
Resistencia a Resistencia a altamente expresado
antibióticos antibióticos

Transformar E. coli con el

2 vector recombinante y
seleccionar las células por su
resistencia a antibióticos

Proteína Proteína
β-galactosidasa/insulina A β-galactosidasa/insulina B

3 Purificación de las
proteínas fusionadas
Producción de Insulina
4 Remoción química Humana Recombinante
de los polipéptidos
de la insulina

Puente Combinación de los dos

disulfuro polipéptidos para
Insulina Activa 5
producir la Insulina
funcional 73
Mejoramiento de Cepas para Usos Industriales

Piruvato descarboxilasa (pdh)

Zymomonas mobilis
Alcohol deshidrogenasa II (adh)

Bajo control del promotor del gen

Radiación solar petE, activado por Cu

O2
O2

Posibilidad de producción eficiente de etanol

CO2

CO2 Conversión de energía solar

En el mismo organismo
Nutrientes
Nutrientes Secuestro de CO2

74
Edición genética: CRISPR-Cas

Bacteriófago
(virus)

Marraffini et al. (2015), Nature 526: 55-61 75

Edición genética: CRISPR-Cas en Bioprocesos

CRISPR Edición genética Resistencia a bacteriófagos

CRISPRa activación Degradación del ADN recombinante

CRISPRi regulación negativa Selección de cepas

Diseño de Cepas Ingeniería de Bioprocesos

76
Pontrelli et al. (2015), Metabolic Engineering 50: 16-46